Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
12/05 P�O��S���EN�� ��S�O�ÓGI�� Tipos de tecidos Microscópio de luz Por que realizar o processamento histológico ? Para a correta observação de uma região Col��� �o M�t��i�� O que eu quero estudar ? Para que quero estudar ? - Evitar causar qualquer tipo de dano ao material - Mergulhar a peça imediatamente em um fixador Fixador: FORMOL- é o aldeído fórmico, gás; comercializado em solução aquosa a 39,9%; Decompõe Se rapidamente na presença de luz Como é normalmente preparado: Desta maneira, foi preconizado que o formol é utilizado a 10% ( na realidade é usado 4%- já vem diluído) Até o PH de 7,4 (o do sangue) A fixação é empregada para: - Interromper o metabolismo cel - Evitar autólise - Matar bact e fungos - Endurecer o tecido em consequência da ligação cruzada ou da desnaturação das mol de proteína Requisitos para uma boa fixação: - Intervalo entre a coleta do material e fixação - Contato de todas as superf com o fixador - Grande volume do líq fixador - Peças com espessura mínima de 1 mm e máx de 6 mm - Tipo de fixador Acondicionamento das amostras Tempo de fixação Formol: 24-48H Tecidos mineralizados: Descalcificadores: ác fórmico 8 a 10%; EDTA 7 a 10% Substância Tamponado- para adequar o ph e não perder substâncias Processamento histológico ou Microtomia: Cortes no bloquinho de parafina,para melhor observação e análise. Espessura de 4 a 6.10µm Extensão e estiramento dos cortes em banho maria Aprox 40ºC Pesca dos cortes Estufa 60ºC Secagem de 1-2H Melhoramento da adesão dos cortes: adição de albumina Resultado: Coloração com hematoxilina e eosina: Mais antiga coloração combinada e a mais difundida em todos os laboratórios -Hematoxilina (H): corante básico cora as estruturas ácidas (DNA, RNA) - Eosina (E): Corante ácido; cora as estruturas básicas (citoplasma, componentes extracelulares) Juntos: Outros met de coloração Orceína- fibras elásticas Impregnação pela prata- fibras reticulares Tricrômico de masson- fibras musculares Picrosirius Red- fibras colágena Vários comp são perdidos durante o processamento histológico de rotina: Lipídios; glicogênio; Proteoglicanos; - Cortes em congelação no Criostato: monta-se a lâmina em glicerina Lipídios Microscópio Óptico Como analisar Acoplamento de uma câmera ao microscópio que transmite as lâminas no computador
Compartilhar