Diagnose Genérica e Específica de Sangue

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Resumo
Diagnose Genérica/Prova genérica
● somente informa se o material testado é ou
não sangue.
● é dividido em provas de orientação e de
certeza
Provas de orientação
Kastle-Meyer (fenolftaleína):
● No teste, a amostra coletada em material
absorvente é mergulhada no reagente e em
seguida adicionam-se algumas gotas de
H2O2.
● Se a amostra adquirir tom rosado significa
que o teste forneceu resultado positivo
para a presença de sangue.
● No processo, forma-se fenolftaleína.
● Este teste tem como base o uso de
fenolftaleína, hidróxido de sódio, pó de
zinco metálico e água destilada
Adler-Ascarelli (benzidina):
● É o teste presuntivo de cor que possui
maior sensibilidade, importante qualidade
para um teste de triagem.
● A reação de oxidação da benzidina em
meio ácido resulta na formação de um
● intermediário de coloração azul
● A benzidina apresenta efeito deletério
sobre os testes subseqüentes, degradando
o DNA das manchas de sangue e inibindo
os testes imunológicos.
Van Deen (guaiacol):
● Deita-se sobre a mancha suspeita uma
gota de tintura de Guaiacol e logo de
seguida uma gota de essência velha de
terebentina, vulgarmente designada de
aguarrás.
● A reação será positiva se assumir a
mesma tonalidade azul da Prússia,
podendo, assim, ser sangue
Luminol:
● É um teste com alta sensibilidade e baixa
especificidade, POI PODE gera resultados
falso-positivos com peroxidases de plantas,
metais, produtos à base de cloro e outros
oxidantes;
● É possível a detecção de sangue mesmo
que já tenham passado até seis anos da
ocorrência do crime;
● A oxidação do luminol leva à formação de
um íon aminoftalato em um estado
excitado, que emite luz quando o elétron
retorna ao estado fundamental;
● A reação é muito rápida e necessita que o
local esteja escuro para a observação da
luminescência;
● O luminol é um composto lábil, precisa ser
refrigerado e o preparo da solução deve
ser feito no momento do uso.
Prova de certeza
Cristais de Teichmann:
● são formados quando uma solução de
brometo de potássio, iodeto de potássio e
cloreto de potássio dissolvidos em ácido
acético glacial reage com a hemoglobina
mediante aquecimento.
● a reação converte a hemoglobina em
hemina e, em seguida, os haletos
inorgânicos reagem com a hemina,
formando cristais de hemina
● os cristais possuem morfologia rombóide e
de coloração acastanhada
Cristais de Takayama:
● formado através da reação do sangue com
a piridina, num meio alcalino.
● com a hidrólise do heme promovida pelo
meio alcalino e a ação de um açucar
redutor, é liberado protoporfirina e ferro
● com o calor ocorre a formação de um
complexo com a piridina, chamada de
Ferroprotoporfirina de Piridina que
constituem os chamados cristais de
hemocromogênio
● Esses cristais costumam ser avermelhados
e agrupados em feixes peniformes ou
bastoniformes
Ensaios microscópicos de certeza (microscopia):
● Os baseiam-se no encontro dos elementos
constitutivos do sangue animal.
● Os glóbulos vermelhos (hemácias), em
condições normais, podem ser encontrados
mais ou menos intactos nas manchas
durante várias semanas.
● O exame microscópico deve ser feito
inicialmente na própria mancha,
diretamente, com auxílio de iluminação
lateral (epimicroscopia de kalmus)
● Depois pela microscopia comum, com
lâmina de vidro (diamicroscopia),
restaurando-se a substância a ser
analisada com soluções especiais.
Diagnose específica/Prova específica
● Atesta se o sangue presente na amostra é
humano ou não.
Vacher e Sulton (soro Coombs/ antiglobulina):
● O teste de Vacher-Sutton se caracteriza
pela inibição da antiglobulina humana (soro
Coombs).
● O sangue humano contém globulinas que,
se presentes na amostra, inibirão a
atividade do soro antiglobulina humana,
evitando que hemácias sensibilizadas por
anticorpos Rh se aglutinem.
● Logo, a ausência de aglutinação é avaliada
como resultado positivo para sangue
humano.
Uhlenhuth (albuminorreação)
● inocula-se sangue humano (albumina
humana) em um animal para formar
anticorpos específicos
(albuminorreação).
● Depois é extraído o soro que pode ser
utilizado como teste de sangue
humano.
● ao juntar a amostra de sangue com o
soro, se o material for de procedência
humana, se notará um precipitado
como uma linha branca, entre os
líquidos utilizados
● Método mais seguro porém menos
utilizado devido sua complexidade.