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Colheit� � remess� d� materia� par� laboratóri� Recipiente� par� � colet� d� am�stra� Tub�� comerciai� Na requisição de exames é importante identificar a amostra e ficha com dados do paciente, contendo informações sobre raça, sexo, queixa clínica, hora da colheita, suspeita diagnóstica, tratamento, história clinica resumida, nome, assinatura e CRMV do requisitante e do examinador. Tub� d� tamp� vermelh� o� colet� d� sor� Não contém anticoagulante, para que o sangue coagule e possa coletar o soro Exames: Perfil bioquímico. Tub� d� tamp� lilá�/r�x� Contém o anticoagulante ácido etilenodiaminotetracético (EDTA), substância que mais preserva o volume celular e as características morfológicas das hemácias em esfregaços sanguíneos Não é recomendado o uso em pó, devido à dificuldade de homogeneização. Livre de coágulo e lipemia. Exames: Análises hematológicas Tub� d� tamp� verd� o� co� heparin� Presença do anticoagulante heparina lítica, que permite a coleta de soro sem que ocorra a coagulação. Exames: Bioquímicos especiais Podem ocorrer alterações discretas de componentes no soro e plasma. Plasma: a proteína total pode estar levemente aumentada devido a presença do fibrinogênio Soro: o potássio é em média 0,5 mmol/l maior que no plasma, devido as plaquetas o liberarem na coagulação. Exames: Eletroquímicos, gasometria Um erro pré-analítico comum seria a adição manual de heparina às seringas de coleta, gerando uma padronização excessiva da amostra. Uma das alterações mais observadas é a hipocalcemia, devido à ligação dos sais de heparina com os íons de cálcio. É recomendado o uso de seringas com heparina saturada ou balanceada, que contém níveis seguros do anticoagulante. Tubo de tampa azul ou com citrato Contém citrato de sódio Exames: Bioquímicas de coagulação Tubo de separação de soro Tampa vermelha com marmoreado preto Não contém anticoagulante, é utilizado um gel que separa fisicamente a fração do volume globular do soro. Previne a metabolização da substância analisada na interface célula/líquido. Recomendado uso em situações onde requerem a centrifugação imediata da amostra sem a necessidade de utilizar outro tubo. Exames: Perfil bioquímicas Tubo de tampa cinza com fluoreto Contém fluoreto de sódio, substância que inibe a via glicolítica impedindo a metabolização da glicose pelas hemácias. Exames: mensuração glicose Microtubos Tubos de volume de 0,25µl a 1µl. Indicado para coleta de amostra em animais muito pequenos. Preenchimento adequado dos tubos 1. Respeitar a razão entre sangue e volume do anticoagulante, para evitar excesso de EDTA, que encolhe as hemácias, falta gera coágulo. 2. Ordem de preenchimento: inicialmente com tubos com anticoagulante e depois sem coagulantes. 3. Tubos a vácuo devem ser preenchidos com força positiva mínima, para evitar hemólise da amostra, o que ocorre comumente com seringas de calibre pequeno, para isso, recomenda-se o uso agulhas com calibre 18 a 20 G. 4. Punções assépticas não devem conter contaminação tecidual para evitar agregação plaquetária e coagulação. 5. Local da punção venosa facilita a colheita da amostra em volume. Adequado sem que haja o colapso da veia. V. Jugular: cães pequenos, gatos, equinos e bovinos. V. Cefálica ou Jugular: cães de médio a grande porte. Procedimentos gerais de manipulação de amostra Procediment�� hematológic�� Hemogram� complet�: Tubo homogeneizado de maneira suave. A análise deve ser feita em até uma hora após a coleta. Armazenagem (análises acima de uma hora): Esfregaço sanguíneo: A técnica possibilita preservar as características morfológicas das hemácias. As lâminas devem ser guardadas em estojos e nunca refrigeradas, pois a condensação de água sobre elas causam alterações nas hemácias. Preparo do esfregaço e coloração Esfregaço � Preparar duas lâminas novas e desengorduradas, sendo uma com os cantos arredondados � Homogeneizar o sangue no frasco de colheita fechado, por inversão, e colocar com o capilar do micro hematócrito, antes de fechá-lo, uma gota de sangue na lâmina � Colocar a outra lâmina (recortada) à frente da gota de sangue, num ângulo de 45º. Fazer um ligeiro movimento para trás até o sangue espalhar-se pela lâmina � Com um movimento uniforme, para frente, fazer esta lâmina deslizar sobre a outra. O sangue se estenderá por sobre a lâmina, formando o esfregaço (figura 3.3) � Agitar a lâmina até secar o esfregaço completamente e identificá-lo com lápis na borda mais espessa do esfregaço. Figura 1 – Esfregaço sanguíneo Fonte: Lopes, Biondo e Santos. 2007. Refrigeração: o restante do tudo deve ser refrigerado, para evitar o inchaço celular que as altas temperaturas causam, ocasionando aumentos do VCM e hematócrito. Perfi� bioquímic�: Amostra coletada em tubo de tampa vermelha deve ser centrifugada em até 15-30 minutos após a coleta. Após o processamento, o soro é coletado por uma pipeta, sem que haja a contaminação de hemácias, e transferido para outro tubo ou colocado em dispositivos de análises bioquímicas e ser analisado rapidamente. Armazenagem: Refrigeração: de 24-48h após a coleta. Temperaturas de 4ºC preservam bem enzimas com ALT, AST, FA. Congelado: acima de 24h após a coleta, Para amostras com tempo indeterminado de armazenagem, devem ser mantidas em temperatura de - 70ºC. Urinális� A amostra deve ser processada em até 30 minutos após a coleta. O frasco de coleta deve ser estéril, bem vedado, quando transportado deve ser embalado para proteção contra a luz (evitar a degradação da bilirrubina e urobilinogênio). Armazenagem: Refrigeração: de 6-8 após a coleta. Font�: Anotações das aulas de patologia clínica. LOPES, S.T.A.; BIONDO, A.W.; SANTOS, A.P. Manual De Patologia Clínica Veterinária. UFSM - Universidade Federal De Santa Maria, 3. ed., 2007. 107p. STOCKHAM, S.L., SCOTT, M.A. Fundamentos de Patologia Clínica Veterinária. Ed. Guanabara Koogan, 2.ed., 2011. 744p. THRALL. A. M., Hematologia e Bioquímica Clínica Veterinária. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2015.
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