Fungos (Microbiologia Veterinária Básica)

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→ Características
- são excelentes decompositores
- semelhantes às nossas células
- não precisam de luz para crescer, mas
as vezes os ajudam na esporulação.
- são organotrofos, não fazem
fagocitose.
- se desenvolvem com mais facilidade em
ambientes onde a água não está
totalmente disponível
- divididos em 5 filos: chytricliomycetes
(esporos móveis), zygomycetes,
glomeromycets, ascomycetes,
bassidiomycetes (esporos imóveis)
- eucarióticos
- uni ou bicelulares
- sem ou com flagelos
- reprodução sexuada/assexuada
- haplóides ou diplóides
- aeróbios
- heterotróficos
- nutrição absorção
- crescimento de -6 a 62 graus
- crescimento lento
- mais resistente à pressão osmótica
→ Benefícios
- decomposição de materiais orgânicos e
inorgânicos
- produção de alimentos, medicamentos
e proteínas
- disciplinas fundamentais
- micorrizas
- controle de pragas
- produção de alimentos
- produzem drogas como penicilinas,
cefalosporinas, griseofulvina, cortisona,
ciclosporinas,..
→ Prejuízos
- deterioração de alimentos, tecidos,
couro, papel, tintas, combustíveis,..
- intoxicações
- 5000 espécies causam doenças em
plantas
- 150 espécies causam doenças em
animais
→ Produção de toxinas
→ Algumas doenças:
- Aspergilose sistêmica
- Candidíase e Criptococose
- Esporotricose
- Dermatofitose
→ maiores que as bactérias
→ os fungos podem se espalhar embaixo do
solo e formar colônias imensas (tamanho de
um estádio de futebol)
→ Núcleo: cromossomos, plasmídeos, muitos
vírus (não causam danos aos fungos)
→ Mitocôndrias
→ Grânulos de reserva: carbono (glicogênio,
lipídeos, carboidratos -trealose-, açúcares
alcoólicos -eritritol, arabitol, manitol), fosfatos
(polifosfatos)
→ Possuem o lipídeo ergosterol, ou seja, a
composição lipídica é diferente da nossa,
então os antifúngicos são mais tóxicos pros
fungos do que pra nós.
→ Membrana e parede: ricos e proteínas e
glicoproteínas (e as lipídeos). Parede auxilia na
resistência osmótica e aos ataques de
antifúngicos e outros microrganismos.
→ Quitina: na maioria dos fungos
→ Cápsula: importante fator de
patogenicidade
→ Melanina: resistência à fagocitose
→ Lipídeos: auxiliam a não perder umidade
pro ambiente
→ Flagelo: somente esporos dos
chtridiomicotas possuem.
→ Talo = corpo vegetativo
- talo filamentoso ou multicelular: bolor
- talo reduzido ou unicelular: levedura
→ Hifas
- Composto de filamentos chamados de
hifas
- Conjunto de hifas formam o micélio
- Não septadas ou cenocíticas
- Septadas mono ou multinucleadas
- aéreas: morfologia, estrutura
reprodutivas
- vegetativas: absorção, estruturas
características
- presença de pigmento: hialino
(s/pigmento), dematiáceo (pigmentados)
→ Tipos celulares
→ Micélio
- Hifa vegetativa: absorve nutrientes.
- Hifas aéreas: na medida que o fungo
envelhece, ele forma as estruturas
reprodutivas na superfície, que
produzem centenas de esporos.
- Septação das hifas e crescimento
Fungos unicelulares ou leveduras
- Crescimento assimétrico: brotamento
- Crescimento simétrico: fissão
- Coloração a fresco e contraste de fase
- Coloração gram: não é convencional
- Leveduras: brotamento, pseudohifas,
coloração à fresco
- Dimorfismo= leveduras no animal e
forma filamentosa no ambiente e em
plantas forma filamentosa e leveduras
no ambiente.
- Inibidores da replicação e síntese de
proteínas: Flucitosina e Gruseifulvina
→ Flucitosina depende de uma enzima que
fica na membrana citoplasmática do fungo.
Quando ela passa por essa enzima, ela sofre
uma alteração química que forma o
5-fluorouracil, que sofre modificações que
formam metabólitos que são prejudiciais para
o fungo. Tem mais ação em leveduras.
→ Griseofulvina: impede síntese de RNA e DNA.
Muita atividade em fungos dermatófitos e
alguns no formato de levedura (dimórficos).
- Impedem a síntese do ergosterol:
terbenafina e azois. Agem em
momentos diferentes da síntese.
Fragilizam as membranas ao se ligar ao
ergosterol das membranas: Polienos
(anfotericina B - fungos filamentosos e
algumas leveduras, nistatina - leveduras).
- Inibidores da síntese da parede:
Equinocandinas e Nicomicina Z.
- Tantos os antifúngicos que impedem a
formação correta da membrana,
alterando a membrana e impedindo a
síntese da parede, eles deixam esse
organismo mais fraco, deixando ele
mais vulnerável à lise.
Cultivo
- crescem em qualquer meio
→ Meios seletivos
→ A quantidade de glicose em meios para
fungo é de 2 a 4x maior que as de meios de
bactérias. Os fungos conseguem crescer em
meios mais hipertônicos, já as bactérias não.
→ Meios para fungos também costumam ser
mais ácidos, no caso das bactérias preferem
crescer em um pH mais neutro.
→ Antimicrobianos tornam o meio ainda mais
específico.
→ Temperatura: 28 graus (ambientais e
dermatófitos) e 37 graus (oportunistas e
infecções profundas).
→ Tempo de cultivo: 5 a 7 dias para
filamentosos e 24/48h a dias para leveduras.
→ Maioria não precisa de luz, quando
necessário será somente para auxiliar na
esporulação.
→ Umidade
→ Aerobiose
→ Leveduras tem metabolismo fermentativo
(meios com bastante carbo)
● Como definir: Todos os microrganismos
que vivem na superfície corporal animal
ao longo de sua vida.
Nascimento do animal e a microbiota:
● Animal quando nasce de parto normal:
tem contato com a microbiota da
vagina. Preparação para a utilização do
leite.
● Animal quando nasce de parto cesárea:
tem contato com a microbiota artificial
do ambiente e da pele. Predisposição à
doenças atópicas e menor capacidade
de digerir corretamente o leite.
Importância de conhecer microbiota:
● Proteger animal, proteger microbiota,
proteger amostras a serem coletadas,
garantir sucesso no diagnóstico e não
contaminar produtos derivados.
Definições:
● Microrganismos residentes: está
presente durante todo o tempo de vida
do animal.
● Microrganismos transitórios:
adquirimos no ambiente mas não
conseguem se instalar na nossa
microbriota.
● Animais reservatórios: pode ter
microrganismos que em momentos de
estresse e baixa imunidade podem se
multiplicar e contaminar outros
animais.
● Animais livres de germes: estéreis. São
retirados por cesariana no ambiente da
mãe e são levados para um ambiente
totalmente estéreis. Nesses animais
observa-se pouco tecido linfoide,
parede intestinal fina, ceco aumentado,
necessitam vitaminas K e B, baixas
quantidades anticorpos, baixa
atividade metabólica, baixa potência
cardíaca e mais ansiosos.
● Animais gnotoxênicos.: primeiro criados
livre de germes e depois é colocado
uma microbiota conhecida. Também
pode-se adicionar patógenos.
- Para cada uma célula eucariota, temos 10
bactérias.
Qual a importância da microbiota
● maturação dos tecidos: multiplicação
celular e irrigação venosa
● ativação da imunidade antes e depois
do nascimento
● barreira à patógenos: competição pelo
nicho e nutrientes com os patógenos,
produzindo substâncias inibidoras e
indução de produção de
antimicrobianos pelo hospedeiros.
● digestão de alimentos: acetato,
butirato, propianato e fitoestrógenos.
● produção de vitaminas: divisão celular
● fonte proteica: coagulação sanguínea,
ossos, susceptibilidade insulínica.
Especificidade com o hospedeiro e
determinadas superfícies corporais
● nem todos os microrganismos
conseguem se fixar na nossa
microbiota. Explica a especificidade de
determinados patógenos com algumas
espécies.
Biofilme:
● Tem-se grupos de organismos que tem
maior ou menor facilidade de se fixar.
Os que tem mais facilidade, são os
colonizadores primários. Ele define os
colonizadores secundários.
Exemplo de biofilme: placas bacterianos nos
dentes (tártaro).
Os microrganismos não vivem isolados em
ambientes naturais, somente no laboratório.
Qualquer superfície exposta ao ambiente tem
uma microbiota.
Efeito da microbiota na atividade
microbiocida
→ Locais que não tem microrganismos
● Órgãos e tecidos internos: baço,
coração, fígado,..
● Órgãos onde há mecanismos de defesa
que eliminam os microrganismos caso
ele tente penetrar: bexiga, pulmão,
glândulas mamária, rins, seios da face,..
Fungos (relembrando)- filamentoso: Ascomicotas,
Basidiomicotas, Critridiomicotas,
Glomeromicotas (único que não teve
formas unicelulares) e Zigomicotas.
- Unicelular: Ascomicotas,
Basidiomicotas, Critridiomicotas,
Zigomicotas (Microsporídeos).
→ Hifas
- Septadas: Ascomicotas, Basidiomicotas
e Fungos mitospóricos
- Não septadas: Critridiomicotas,
Glomeromicotas e Zigomicotas
→ Esporos
- imóveis: Ascomicotas, Basidiomicotas,
Glomeromicota, Zigomicotas e Fungos
mitospóricos (Deuteromicota)
- móveis: critridiomicota
→ Reprodução
- Sexuada = forma teleomórfica:
Ascomicota, Basidiomicota,
Critridiomicota e Zigomicota.
- Assexuada = anamórfica:
Glomeromicotas e Fungos mitospóricos
→ Ciclo de vida das leveduras
→ Ciclo de vida ascomicota
→ Esporo sexual
- Ascósporo: formato de um saco
- União de gametas forma ascocarpos.
→ Ciclo basidiomicota
→ Ciclo zigomicota
- Usa-se a fase assexuada para
identificar fungos filamentosos
→ Esporos assexuados ou conídios
- Conídios
- Artroconídios
- Conídios Septados
- Clamidósporos
- Esporangiósporos
- Conidiósporos
- Blastóporos
→ Identificação de fungos filamentosos
Pode ser feita por:
- Morfologia Colonial
- Morfologia Celular
- Testes bioquímicos
- Testes moleculares
● Morfologia colonial
– Forma da colônia
– Tempo de crescimento – diâmetro – meio de
cultivo
– Coloração verso e reverso
– Pigmento difusível ou não
– Aspecto colônia: algodonosa, pulverulenta,
coriácea, aveludada, etc
– Topologia da colônia: sulcos, elevações no
verso e reverso
● Exemplos
•Meio Sabouraud, 5 dias de cultivo
•Circular
•Avelulado
•Cinza esverdeado no centro e Bordos
brancos no verso
•Amarelo claro no reverso
•Sulcos no centro da colônia no verso e
reverso
•Sem pigmento difusível
•Bordos lisos
•Meio Sabouraud, 5 dias de cultivo
•Circular
•Coriáceo
•Amarelo no centro e laranja nas bordas, no
verso
•Sulcos no centro e bordos da colônia •Produz
pigmento difusível
•Bordos ondulados
● Morfologia celular
– Presença ou não de septos
– Pigmentação das hifas e conídios
– Morfologia de estruturas reprodutivas
assexuadas
- Forma da estrutura: ramificações,
esporângio, globosa com ou sem
columela, forma columela
- Forma e arranjos de conídios ou
esporos
- Presença ou não de septos nos
conídios
- Presença de clamidósporos
– Estruturas reprodutivas sexuada
Testes Bioquímicos
– Assimilação e fermentação de carboidratos –
Kits comerciais (Vitek 2-YST, API ID32C,
Auxacolor)
Testes moleculares
- Sequenciamento regiões D1/D2 e ITS1
(internal transcribed spacer region 1)
→ Identificação de leveduras
- Morfologia colonial
- Morfologia celular
- Testes bioquímicos
- Testes moleculares
● Morfologia colonial
● Morfologia celular
– Forma de Reprodução: fissão ou brotamento
– Número de brotos
– Presença de cápsula
– Presença de clamidósporos
– Reprodução Sexuada
Tipo de reprodução
- fissão
- brotamento
Presença da cápsula
Teste de fermentação
Não precisa de indicador de pH pois não
produz ácido
Teste de Assimilação
● Testes bioquímicos
– Assimilação e fermentação de carboidratos –
Kits comerciais (Vitek 2-YST, API ID32C,
Auxacolor)
● Testes moleculares
- Sequenciamento regiões D1/D2 e ITS1
(internal transcribed spacer region 1)
Algas
Importância
• Produzem oxigênio (70%).
• Àgar-ágar
• Fonte de alimentos e bebidas homem.
• Fonte de alimento para animais marinhos.
• Grande quantidade de iodo (tratamento do
bócio)
• Dilatação vaginal (Laminaria japonica).
• Dentifrícios, polidores, detergentes,
removedores de tinta, produção de tintas
fosforescentes (placas de trânsito), filtros,
inseticida
• Adesão e firmeza de cores ao papel.
• Fertilizantes (grande quantidade N e K)
Prejuízos
• Modificam o odor e o sabor da água
• Intoxicações nos animais (peixe, homem).
•Saxitoxina, ciguatera, brevetoxina, ácido
domoico
• Mamites em bovinos (Prototheca zopfii),
dermatites em caninos, diarreias em caninos
• Infecções sistêmicas e subcutâneas no
homem e animais (prototecose, P. wickerhamii,
P. moriformis, Chlorella sp.), eczemas e bursites
• Linfoadenopatias, diarreias (Chlorella sp.)