É um procedimento simples, seguro e bastante eficaz para se obter informações sobre células e substâncias das vias aéreas inferiores, envolvidas na imunopatogênese e lesão inflamatória de diversas doenças respiratórias. Empregado como método diagnóstico na hemorragia alveolar de várias etiologias. Realizada por BRONCOFIBROSCOPIA e de responsabilidade do médico. Devem ser colhidas em frasco coletor de vias aéreas com nome, número do registro, data e hora da coleta para as seguintes análises: 1°) Celularidade: Contagem celular, pesquisa de células neoplásicas e diferencial; 3°) Microbiológicas: deve ser estéril. ❖ Coleta: • Anotar volume do LBA, aspecto, coágulo e enviar para a microbiologia (quando houver). ❖ Processamento: ▪ centrifugar a 1500 rpm por 10 minutos; ▪ Remover o sobrenadante; ▪ Número total de células nucleadas e eritrócitos ler em câmara de Neubauer. ❖ Diferencial: ▪ Fazer de quatro a cinco lâminas e corar com May-Grünwald e Giemsa/ Leishmann. ▪ Contar 300 células e determinar as porcentagens de cada tipo celular. ❖ Microbiologia: Executar conforme solicitação médica. Oque é? Qual sua função? COLETA PREPARO/ETAPAS: Visualizar a anotar no mapa a cor e aspecto antes e após centrifugação. ❖ Volume: Anotar antes de iniciar as etapas. ❖ Cor: Incolor, branco leitoso, Amarelo claro, Castanho e Hemorrágico. ❖ Aspecto: Límpido, ligeiramente turvo e turvo. ❖ Coágulo: Anotar presença ou ausência ❑ Realizada em câmara de Neubauer; Tipos de células: • Eritrócitos: contagem realizada no quadrante central da câmara de Neubauer; • Células nucleadas (leucócitos e células cilindricas ciliadas): contagem realizada nos quatro quadrantes externos da câmara; ❑ Realizar a contagem de células nucleadas nos quatro quadrantes da câmara de Neubauer, para obter uma contagem mais precisa e confiável. Se os lados possuírem 10% de diferença entre as contagens, deve ser preparado a câmara novamente. ❑ A diferenciação entre células epiteliais e leucócitos é realizada na contagem diferencial, é preciso diferenciar no laudo. Cálculo: = Número de células contadas / número de quadrados x volume de um quadrado. Exemplo de cálculo: = Número de células contadas / número de quadrados x volume de um quadrado. Número de leucócitos contados= 100 Número de quadrados contados = 4 Volume de um quadrado = 0,1 = 100/4 x 0,1 = 250 leucócitos/uL Contagem global de eritrócitos: EXAME FÍSICO: CONTAGEM GLOBAL DE CÉLULAS: Confecção lâmina: • Colocar 5 ml de líquido, a fresco, no tubo da centrífuga e tampar. • Misturar o espécime agitando suavemente o tubo em movimentos circulares. • Balancear os tubos e centrifugar o material entre 1.500 rpm por dez minutos; • Desprezar o sobrenadante invertendo o tubo coletor em papel toalha ou retirá-lo com uma pipeta, evitando qualquer líquido residual no sedimento. • Aspirar com pipeta o sedimento, colocá- lo sobre lâminas de vidro previamente identificadas e preparar os esfregaços espalhando levemente em movimentos circulares para que o material fique bem distribuído sob a lâmina. Fonte: Ministério da Saúde. Técnico e citopatologia. Caderno de referência 2. Citopatologia não ginecológica. Brasília, 2012. • Deixar a lâmina secar em temperatura ambiente; • Corar com corante panóptico ou May Grunwald Giemsa/Leishmann; • Leitura realizada em microscopia óptica; • Observar nas objetivas de 10 x e 40x para verificar a distribuição dos tipos celulares e procurar agrupamentos de células. Neste aumento podem ser observados elementos maiores como por exemplo leveduras; • A contagem diferencial deve ser realizada em objetiva de imersão e 300 células devem ser diferenciadas; • Macrófagos, que muitas vezes contém uma variedade de materiais fagocitados, são as células mais frequentemente observadas, com números que variam de 56 a 80%. • Os linfócitos, normalmente constituindo 1 a 15% da população celular, estão aumentados em doença pulmonar intersticial, reações a drogas, linfoma pulmonar, infecções não bacterianas e imunodeprimidos. • Neutrófilos são os principais granulócitos vistos, com valor normal inferior a 3%. Elevados em tabagistas, na broncopneumonia, em exposição a toxinas e em dano alveolar difuso. • Os eosinófilos, geralmente em número inferior a 1% a 2% do total de células, elevados em asma, doença pulmonar induzidas por drogas, infecções (parasitárias, micro bacterianas ou fúngicas). INTERPRETAÇÃO DO DIFERENCIAL: