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Genética Médica Prática 
 
Carollayne Mendonça Rocha – TXXXIX 
Dia: 18/08/2020 
Técnicas básicas de biologia molecular: Extração do DNA pelo método caseiro 
➢ Introdução 
A extração de DNA inclui basicamente dois procedimentos principais: a lise das células presentes na 
amostra e a purificação do DNA. Após a lise das células, o DNA deve ser separado dos restos celulares e 
das proteínas, precipitado e suspenso em volume adequado de água ultra-pura ou soluções-tampão 
adequadas. As amostras de DNA podem também ser submetidas a processos de concentração e de 
purificação, com a finalidade de se obter melhores resultados nas amplificações. Para cada tipo de amostra, 
vários protocolos podem ser testados, adaptados e otimizados, de maneira a se conseguir DNA de boa 
qualidade. 
➢ Objetivo 
Extrair DNA pelo método “caseiro” 
➢ Material 
• Uma fruta (Ex: tomate, banana ou morango) 
• Água (equivalente à um copo) 
• Recipiente para colocar gelo (pode ser pote, bacia...) 
• 3 copos (vidro ou plástico) 
• 1 copo de vidro ou qualquer outro recipiente que seja transparente. 
• Sal (4 g equivalente a 4 colheres de café) 
• Detergente comercial (6 mL, equivalente à 1 colher de sopa) 
• Etanol 96% ou 92% (álcool etílico comercial), preferencialmente. Se não encontrar ou não tiver, 
pode ser o 70% (Liquído) 
• Faca 
• Colher 
• Filtro de café 
• Suporte para filtro de café 
• Gelo (4 a 5 bandejas) (Ou poderá usar o freezer) 
• Mixer ou liquidificador 
• Água quente (Esquente água em uma panela, esta panela deverá caber um copo dentro) 
➢ Procedimentos 
ATENÇÃO: Para o experimento dar certo, o álcool precisa estar gelado, portanto, coloque o álcool 
no Freezer com antecedência (Você pode colocar um pouquinho em um outro recipiente e colocar 
no freezer). 
 
1. Picar a fruta (ex: o tomate) com uma faca e depois triturá-lo, utilizando o liquidificador (adicionar 
um pouco de água para facilitar a trituração). Colocar a mistura em um copo. 
Observação: bater no liquidificador – quebra a parede celular, já que é um vegetal. 
2. Em um copo, preparar a solução de lise: detergente + sal, completando o volume com um pouquinho 
de água. 
Observação: o detergente rompe a membrana fosfolipídica. O detergente quebra gordura, que é a 
composição da membrana. 
Observação: sal tem carga +1 e o DNA carga negativa, assim, acontece uma reação de neutralização entre o 
sal e o DNA, é como se o sal puxasse o DNA, separando-o dos restos celulares. 
3. Adicionar a solução de lise ao copo contendo o tomate triturado. 
4. Homogeneizar a solução de lise com a polpa de tomate e colocar na panela com água quente por 
10min. Cuidando para que a solução não entre em fervura. 
Observação: o banho maria otimiza o processo, funcionando como um catalisador. 
5. Preparar um banho de gelo em uma bandeja (você pode usar o freezer ou congelador). 
6. Após os 10min de banho-maria, transferir o béquer para o banho de gelo por um período de 5min. 
Observação: colocar no freezer causa um choque térmico para estabilizar e interromper o processo de 
catalisação. 
7. Utilizar o suporte e filtro de café para filtrar a mistura. 
Observação: o filtro é utilizado para retirar os restos celulares. 
8. Adicionar aos poucos o álcool gelado na mistura, com cuidado e delicadamente. 
Observação: o álcool tenta puxar o DNA, tem densidade diferente (o DNA tem densidade menor, por isso 
fica na superfície). Auxilia na separação do DNA restante da solução, por isso a importância do álcool, uma 
vez que o DNA é pouco solúvel nele e sofre um processo de desidratação, deixando as moléculas mais 
desidratadas. 
9. Durante a adição do etanol, observar atentamente o que ocorre no tubo. 
No final é possível ver 3 camadas: 
1. Mais fundo: restos celulares 
2. Camada transparente: álcool 
3. Camada entre as duas: DNA, parece uma nuvem 
➢ Perguntas 
1. O processo de extração de DNA envolve, a princípio, dois procedimentos básicos. Quais são eles? 
Descreva detalhadamente cada um deles. 
2. Em relação à extração de DNA “caseiro”, por que o tomate ou a cebola devem ser picados? 
3. Porque é necessário incubar as amostras em banho Maria? 
4. Porque utilizar o álcool na extração de DNA? 
5. Qual é a função do detergente para extrair DNA? 
6. Pesquise um método de extração de DNA de sangue e descreva suas etapas. Explique o porquê de 
realizar cada etapa. 
7. Quais as formas de avaliar se o DNA foi extraído? 
➢ Referências: 
OLIVEIRA, M. C. S.; REGITANO, L. C. A.; ROESE, A. D. et al. Fundamentos teórico-práticos e 
protocolos de extração e de amplificação de DNA por meio de reação em cadeia da polimerase. São Carlos: 
Embrapa Pecuária Sudeste, 2007. 43 p. 
SILVA, L.E; SILVA, D.B.S; CRISPIM, B.A; VAINI, J. O; GRISOLIA, A.B; SENO, L.O. Variação de 
concentração de proteinase k em protocolos de extração de DNA de bovino. Archives of Veterinary Science, 
v.18, n.2, 2013. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Segundo bimestre