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1 Aline David – ATM 2025/B PATOLOGIA – AULA 12 ❖ Cuidados: - Preservação: fixação em formalina (formol) a 10%; - Acondicionamento; • Frascos apropriados e bem vedados; - Envio e requisição; ❖ Fixação (colocar a amostra no formol): - Impede a desintegração, autólise e putrefação; - Conservação; - Volume pelo menos 4X maior que a peça; - A peça deve ser imediatamente colocada no fixador após a retirada; - Frascos rotulados com identificação correta; - Tempo de fixação: • De acordo com o tipo de material: 6 a 24 horas; • Processamento histológico: 24 horas (a peça passa por alguns banhos); AVALIAÇÃO MACROSCÓPICA DO MATERIAL ❖ Descrição das características macroscópicas: - Cor; • Brancacento, pardo-clara, acastanhada, vinhosa, enegrecida; - Consistência; - Medida; - Localização das lesões; - Para lesões de pele: • Formas: arredondada, irregular, discoide, etc. • Aspecto: verrucoso, friável (quebradiça), vegetante; - Tinta de Nanquin → serve para deixar as células do final pretinhas. Ao enxergar no microscópio aparece uma margem preta que significa que está realmente no final da peça. Fala se conseguiu retirar tudo ou não. PREPARO PARA PROCESSAMENTO ❖ Cortes histológicos: - Realizados de acordo com o material; - Acondicionados em cassetes para fixação e processamento; • Quantidade de acordo com o tipo de material a ser analisado; - Dentro dessas “caixinhas” as amostras podem passar por diferentes banhos com diferentes reagentes. MACROSCOPIA Prostatectomia: ❖ Biópsia de próstata; - Apical, medial e basal esquerdo e direito; - Se coleta dois pontinhos de cada porção da próstata. ❖ Ressecção transuretral de próstata → RTU; 2 Aline David – ATM 2025/B - Ocorre geralmente em casos benignos, em que a hiperplasia prostática obstrui a uretra. Essas células são retiradas e analisadas para verificar a presença de células tumorais ou não. Apêndice: ❖ Biópsia gástrica; - Indicar a composição interior do apêndice (pús, hemorragia, fezes, etc). - Em biópsia gástrica é sempre feito testes para a presença de H. pylori. ❖ Biópsia de pólipos; HISTOTÉCNICO ❖ Enquanto os cassetes são preparados: - Acondicionados em formol 10%; ❖ Processamento: +- 10h - Esse instrumento tem vários reagentes, que vão girando até passar por todos os reagentes. ❖ Desidratação: - Concentrações crescentes de álcool; • 58% • 95% • Absoluto I, II, III (tirar o máximo possível de líquido dentro); ❖ Clarificação: - Xilol • 3 banhos (melhorar a eficiência da clarificação); ❖ Impregnação com parafina (as células ficam como se fossem intactas – novas); INCLUSÃO EM BLOCO DE PARAFINA ❖ Forma/molde: - Adicionar a parafina no molde; - Mergulhar o material e fixa-lo no fundo com sua identificação na lateral; - Secar em TA; MICRÓTOMO ❖ Montagem da lâmina: - Desbastar para retirar camadas de parafina; - Formar fitas com o corte do tecido com 5um; - Abrir em água morna com álcool; - “Pescar” o material com a lâmina; - Identificar a lâmina; - Estufa para deparafinizar; - Coloração HE (hematoxilina-eosina); MONTAGEM DA LÂMINA ❖ Após a coloração: ❖ Cobrir o corte histológico com lamínula; - Utilizar bálsamo/resina; 3 Aline David – ATM 2025/B • Evitar formação de bolhas; AZUL DE ALCIAN ❖ Corante para mucinas ácidas (pH 2,5) em azul claro; ❖ Imagem: - PAS coloração ácido periódico + reativo de Shiff (IHQ) para glicogênio (lilás) contracorado. ❖ Importante para identificar metaplasia intestinal. ❖ Mucinas ácidas → intestino grosso e delgado; - Diagnóstico de metaplasia intestinal em estômago; - Imagem: células caliciformes; - Tumor primário intestinal; ZIEHL-NEELSEN ❖ Bacilos se coram com fucsina e não são descorados pelo álcool acidulado, sendo denominados bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR); - Bacilos vermelhos; - Imagem: hanseníase; - Técnica para bacilo de Koch e outros bacilos auto- ácidos resistentes. MÉTODO DE GROCOTT ❖ A impregnação de prata utilizada para a verificação da morfologia de fungos; - Mostra os parasitas em colorações amarelo- ouro até preto, de acordo com o tempo de impregnação; - É corada apenas a parede celular do fungo, constituída de polissacarídeos; - Imagem: Paracoccidioides brasiliensis 4 Aline David – ATM 2025/B ❖ Roda de leme: brotamento múltiplo. ❖ Combinação com HE: - Permite observar demais estruturas teciduais; - Na imagem, folículos linfoides com centros germinativos isentos de fungos, concentrando- se nos seios linfáticos. ❖ Mucormicose: - Mucor aparece no tecido com hifas tubulares de diâmetro irregular. Geralmente espessas e ramificadas; ❖ Aspergilose: AZUL DA PRÚSSIA-PERLS ❖ Hemossiderina em HE X Azul da Prússia-Perls - Ferro reage com ferrocianeto de potássio resultando em ferrocianeto férrico de coloração azul intenso e insolúvel; RED OIL O ❖ Corante para lipídeos; ❖ Micrótomo de congelação ou criostato; - Material fresco ou fixado em formol; - Sem processamento para inclusão em parafina; • Álcool e xilol retiram os lipídeos; 5 Aline David – ATM 2025/B TRICRÔMIO DE MASSON ❖ Cora colágeno em azul; - Restante em vermelho (vasos, células) Ependimoma mixopapilar; GIEMSA ❖ Combinado com azul de metileno (contracorar); ❖ Especificidade para coloração de H. pilory.
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