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tabela meios de cultura + tec semeadura @drabichinho

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o@drabichinho
material organizado por @drabichinho
distribuição proibida
 
1 Tabela de meios de cultura e técnicas de semeadura |Distribuição proibida | Todos os direitos reservados à Autora Alícia de Souza Silva |@drabichinho 
É uma forma de simular um ambiente apropriado para que haja o crescimento da bactéria. 
Tipos de meios de cultura 
Liquido Fluido Sólido Semi-sólido 
Para culturas puras 
Possui 0,1% de ágar para ter viscosidade e 
possui menor teor de oxigênio 
Possui 1,5-2% de ágar e é usado para 
isolamento e cultivo de bactérias 
Possui 0,75% de ágar 
 
Classificação quanto à composição 
Quimicamente definido ou sintético Complexo ou indefinido Seletivo e diferencial Enriquecimento Enriq. seletivo 
A composição e quantidade desse meio 
é conhecida 
Não se sabe a composição e 
quantidade exata. São utilizados 
extratos obtidos de hidrolise química 
ou enzimática 
Há componentes que inibem o 
crescimento de certos MO 
Há componentes que permitem o 
crescimento de MO específicos 
É um meio rico e 
altamente seletivo 
 
Meios de cultura 
Meios de transporte 
Ágar Coloração do meio Composição Finalidade Princípio de ação Inoculação Interpretação 
Cary Blair 
Branco opalescente 
em meio líquido 
 
 
 
 
 
Formulado a partir do 
meio Stuart com 
adição de umasolução 
salina balanceada de 
tampão fosfato 
inorgânico 
Transporte de 
material fecal e 
conservação de MO 
 
 
 
Carência de fonte de 
nitrogênio impede a 
multiplicação de MO, 
garantindo a 
sobrevivência 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Swab estéril em fezes 
recém coletadas, 
introduzir o swab no 
meio e manter lá 
dentro com o tubo 
fechado e 
temperatura 
ambiente 
Apenas meio de conservação e 
transporte. Não há 
crescimento bacteriano 
Salina 
tamponada 
NaCl, fosfato 
dipotássico anidro, 
glicerina bidestilada e 
água destilada 
Inocular 2g de fezes e 
homogeneizar 
Crescimento indicado se 
houver turbidez no tubo 
Meio Stuart 
Cloreto de Cálcio, 
Beta Glicerolfosfato 
de Sódio, Tioglicolato 
de sódio e Azul de 
metileno 
Transporte e 
conservação de MO 
patogênicos como 
Haemophillus, 
Pneumococus, 
Salmonella, Shigella 
Swab estéril para 
coletar, inocular no 
tubo e fechar 
Apenas meio de conservação e 
transporte. Não há 
crescimento bacteriano 
 
2 Tabela de meios de cultura e técnicas de semeadura |Distribuição proibida | Todos os direitos reservados à Autora Alícia de Souza Silva |@drabichinho 
Meios mais utilizados nos laboratórios 
Ágar Coloração do meio Composição Finalidade Princípio de ação Inoculação Interpretação 
Ágar 
nutriente 
Branco amarelado 
 
 
Extrato de carne, 
extrato de levedura, 
peptona, cloreto de 
sódio, ágar 
Análise de água, 
alimentos, leite, etc 
Meio simples e barato 
amplamente utilizado 
Estriar a superfície 
inclinada do meio e 
incubar 
• Positivo: crescimento na 
superfície do ágar 
• Negativo: ausência de 
crescimento 
Ágar 
MacConkey 
Rosa translúcido 
 
Peptonas de caseína, 
carne e gelatina, sais 
biliares, latose, 
cloreto de sódio, 
vermelho neutro, 
cristal violeta, ágar, 
água destilada 
Meio seletivo para 
enterobactérias 
O diferencial desse 
meio é diferir entre: 
• Organismo que 
fermenta a 
lactose: 
produzem pH 
localizado, 
absorvem o 
vermelho do 
meio e conferem 
coloração 
vermelha ou rosa 
à colônia 
• Organismo que 
não fermenta 
lactose: amarelo 
claro 
 
Inoculação da amostra 
por estrias através do 
esgotamento da alça 
de platina e incubar a 
placa inoculada em 
35°C por 24hr 
• Bactérias que fermentam 
lactose: colônias 
vermelhas ou rosadas 
• Bactérias Gram +: 
crescimento inibido pelos 
sais biliares 
• Bastonetes Gram – 
Pseudomonas ou 
Aeromonas: incolor ou 
verde café 
 
 
 
 
 
 
 
3 Tabela de meios de cultura e técnicas de semeadura |Distribuição proibida | Todos os direitos reservados à Autora Alícia de Souza Silva |@drabichinho 
Ágar Coloração do meio Composição Finalidade Princípio de ação Inoculação Interpretação 
Ágar sangue 
 
Vermelho 
 
Ágar columbia + 5% 
de sangue de carneiro 
desfibrinado 
Isolamento de 
estreptococos beta-
hemolíticos 
Eritrócitos íntegros 
favorece a percepção 
da hemólise 
Utilizar a técnica de 
semeadura e incubar 
em 35°C por 24hr 
• Beta hemólise: presença 
de halo transparente ao 
redor das colônias → lise 
total das hemácias 
• Alfa hemólise: presença 
de halo esverdeado ao 
redor das colônias → 
hemólise parcial das 
hemácias 
• Gama hemólise: sem 
hemólise 
 
 
Ágar 
chocolate 
Castanho escuro 
 
 
Possui sangue de 
cavalo, carneiro ou 
coelho 
Crescimento de 
Haemophilus, 
Neisseria, 
Branhamella 
catarrhalis e 
Moraxella 
 
 
O sangue é utilizado 
em alta temperatura, 
fazendo com que as 
hemácias lisem e 
liberem hemina e 
hematina. Esses 
compostos auxiliam o 
crescimento de MO 
exigentes 
Utilizar a técnica de 
semeadura e incubar 
em 35°C por 24hr 
• Colônias em pigmento 
amarelo: sugestivo para 
Neisseria, Branhamella ou 
Moraxella 
• Colônias em coloração 
creme: sugestivo para 
Haemophilus 
 
• 
 
 
 
4 Tabela de meios de cultura e técnicas de semeadura |Distribuição proibida | Todos os direitos reservados à Autora Alícia de Souza Silva |@drabichinho 
Ágar Coloração do meio Composição Finalidade Princípio de ação Inoculação Interpretação 
Ágar 
salmonella-
shigella 
Vermelho alaranjado 
 
 
Sais biliares, verde 
brilhante e citrato de 
sódio 
Selecionar e isolar 
espécies de 
Salmonella e Shigella 
em amostras de fezes, 
alimentos e água 
 
Inibição de 
microrganismos Gram 
positivas 
Inocular e incubar por 
18 a 24hr 
• Colônias com centro negro 
ou incolores: sugestivo 
para Salmonella 
• Colônias incolores: 
sugestivo para Shigella 
• Colônias rosadas ou 
avermelhadas: sugestivo 
de Escherichia ou Klebsiella 
• Bactérias que fermentam 
lactose: coloração rosada 
• Bactérias que não 
fermentam lactose: 
incolores 
 
 
Caldo 
BHI/Brain 
heart 
infusion 
Amarelo claro límpido 
 
 
Derivado de 
nutrientes de cérebro 
e coração, peptona e 
dextrose 
Cultivo de 
estreptococos, 
pneumococos, 
meningococos, 
enterobactérias não 
fermentadoras, 
leveduras e fungos 
A peptona e a infusão 
são fontes de 
nitrogênio, carbono, 
enxofre e vitaminas. 
Enquanto que a 
dextrose é um 
carboidrato útil para a 
fermentação 
Inoculação com alça 
de platina e incubar a 
35°C de 18 a 24hr 
• Positivo: presença de 
turvação = crescimento 
bacteriano 
• Negativo: ausência de 
turvação 
 
 
 
 
 
5 Tabela de meios de cultura e técnicas de semeadura |Distribuição proibida | Todos os direitos reservados à Autora Alícia de Souza Silva |@drabichinho 
São métodos em que transferimos bactérias de um meio de cultura ou material a ser 
analisado para outro meio de cultura utilizando técnicas assépticas, a fim de evitar 
contaminação dos materiais, dos meios e das culturas. 
 
Semeadura em estrias 
Objetivo: obter crescimento do MO no meio para estocar a bactéria, 
estudar seu metabolismo em bioquímicos e avaliar a capacidade de 
crescimento. 
• Procedimento: 
1. Uso do ágar nutriente inclinado em tubo de ensaio 
2. Utilizar alça de platina para fazer estrias na superfície 
 
Semeadura em picada 
• Objetivo: verificar a motilidade do MO em 
ágar semissólido 
• Procedimento: 
1. Semear o MO com uma agulha de 
níquel cromo com uma picada no meio 
do ágar no tubo até metade da altura 
a. Bactéria móvel: crescimento 
em todo meio 
b. Bactéria imóvel: crescimento somente no local da picada 
Semeadura em esgotamento 
• Objetivo: obter colônias isoladas, a fim de 
distinguir os MO através da morfologia da colônia 
• Procedimento: 
1. Semear a cultura com uma alça de níquel 
cromo fazendo estrias na superfície da placa 
de Petri 
2. Fazer sequência de estrias para obter o 
esgotamento e permitir que os MO se isolem 
ao longo da placa 
3. Deve-se flambar a alça a cada estria e resfriar 
a alça no canto da placapara não “queimar” 
as colônias 
 
 
Estrias simples 
• Objetivo: utilizada para visualizar propriedades metabólicas 
como a produção de enzimas hidrolíticas 
e produção de pigmentos 
• Procedimento: 
1. Estriar com a alça de platina sobre o 
meio em zig-zag ou uma única linha 
reta 
 
Estrias múltiplas 
• Objetivo: obter colônias isoladas 
• Procedimento: 
1. Estriar o meio sólido, 
2. Não pode cruzar as estriar (difere do esgotamento!) 
 
 
Pour-plate ou técnica de disseminação por profundidade 
• Objetivo: contagem 
bacteriana, análise de 
MO anaeróbios 
adicionando mais uma 
camada na placa. 
• Procedimento: 
1. Transferir 1ml da 
cultura para a placa 
de Petri vazia 
2. Colocar 10-20ml do 
meio resfriado 
sobre a cultura 
3. Homogeneizar em 
movimentos 
circulares na mesa 
 
Spread-plate 
• Objetivo: obter crescimento confluente ou para contagem de 
bactérias 
• Procedimento: 
1. Transferir 0,1ml da cultura para o meio sólido na placa 
2. Espalhar de forma uniforme com a alça de Drigalsky

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