biologia molecular - tradução

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Emilly de Almeida Mello T16 
 
Biomol – tradução – prof Lígia – 21/09/2020 
 
 
 
Tradução: etapa final da expressão gênica. 
 
Traduzir uma linguagem nucleotídica em linguagem aminoacídica. 
 
Nucleotídeo carrega a informação de qual aa deve ser colocado. 
 
Síntese de proteínas direcionada pelos moldes de mRNA. 
 
Ribossomos atuam na tradução. Apresenta duas unidades, a maior e menor, que se encaixam na 
fita de RNAm e atua no sentido 5’ para 3’ – leitura do RNAm. 
 - Vários ribossomos ligados a fita 
 - Cada ribossomo faz uma cópia de proteína à vai sair várias copias de uma proteína de uma 
única fita. 
 
A leitura do RNAm é realizada sempre no sentido 5’ 3’ 
Em uma mesma fita de RNAm há vários ribossomos conectados a ela, cada um sintetiza uma 
cópia da mesma proteína (polissomo). 
 
3 estágios de tradução: 
 
Emilly de Almeida Mello T16 
 
 
Iniciação alongamento terminação 
 
Iniciação da tradução 
 
Checar se a fita de RNAm maduro está correta. 
 
O que é preciso para a tradução? 
 
1. RNAm maduro no citoplasma 
- CAP, adenilação e splicing (retirada dos íntrons) 
Spliceossomo: conjunto de proteínas vinda do DNA. Pode ter mutação ai, tem mutação no 
splicing. 
 
 
 
Exossomo degrada RNAm erroneamente processado 
 
Exossomo é um complexo proteico multienzimáticos que apresenta atividade exonucleotídica, 
capaz de degradar uma variedade de RNA’s que apresentam erros em seu processamento. 
No RNAm, o exossomo pode degradar a partir do terminal 3’. 
 
O exossomo é o mecanismo protetor. Controle de qualidade. 
Caso não tenha cauda poli-A ou o RNA está dobrado, a fita não é adequada para a tradução. 
 
Anatomia do RNAm: 
 
 
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Fita de RNAm é muito delgada, pode dobrar à pode ter o pareamento – lig. de H. 
 
O RNAm pode sofrer dobramento em forma de “grampo” (hair pin) 
 
- Destruição da cauda poli-A enquanto ocorre a tradução por RNAses. 
 
Porções 5’ e 3’ terminais do RNAm são sequencias não codificadoras à UnTranslated Region 
(UTR) 
 
 
Função – diminui ou aumenta a síntese do produto funcional dessa fita de RNAm. Controle 
(regulação) da tradução 
 
Exemplo: 
 
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Aumento de íons ferroso – melhor manter o RNAm que gera a ferritina no citoplasma. 
 
No citoplasma de eucariotos, há proteínas de resposta ao ferro. 
Elas regulam a transcrição de RNAm que forma a ferritina. Mantem a fita de RNAm aberta para a 
tradução. 
 
Aumentos de íons ferroso à proteínas de resposta ao ferro ligam-se a região 3’ UTR à mantem a 
fita molde aberta à ocorre aumento da síntese 
 
Diminuição de íons ferroso à proteínas de resposta ao ferro se ligam a 5’ UTR à impede a 
ligação do ribossomo à diminuição da síntese 
 
 
 
A cauda poli-A fita sujeita a ação das RNAses, mas ok, não destrói tudo de uma vez. A fita é 
mantida no citoplasma. 
 
As regiões 5’ e 3’ UTR são reconhecidas como regulatórias da tradução, ou seja, ativam ou inibem 
a tradução utilizando o mesmo molde de RNAm. 
 
Proteínas ligadas à região 5’ UTR – inibição da tradução 
 
Proteínas ligadas ã região 3’ UTR – ativação da tradução (mantem o RNAm linear -aberto-). 
 
Região codificadora (codificante) do RNAm 
 
Três bases nitrogenadas na região codificadora do RNAm representa um códon. 
- codifica um determinado aa 
 
CAP – 5’ UTR – subunidade menor do ribossomo (conduzida pelo fator de transcrição) 
reconhece essa região para achar o start códon. 
 
A partir do start códon a proteína é produzida. 
 
2. Proteínas sinalizadoras do início da tradução 
 
Fatores de iniciação da tradução 
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Eucariotos – 10 fatores de iniciação à eIF (eukaryotic Initiation Factor) 
 
Fatores de iniciação ligados à subunidade menor do ribossomo e outros ao terminal 5’ do RNAm 
 
Auxiliam na ligação do Cap na extremidade 5’ e na ligação do RNAt iniciador carregando a 
metionina à subunidade menor do ribossomo. 
 
Reconhecimento da extremidade 5’ 
 
Subunidade menor do ribossomo reconhece o RNAm pela ligação ao CAP na extremidade 5’ 
 
A partir do CAP a subunidade menor do ribossomo procura o códon da metionina AUG (start 
códon) com o auxílio de fatores de iniciação. 
 
 
 
Ribossomos 
 
Complexo proteico associadas ao RNA. Sítios 
 
Duas metades – subunidade menor (40s) e subunidade maior (60s) 
 
 
 
 
Eucariotos: ribossomo 80s 
 
S – unidade de medida de quanto tempo para ocorrer a deposição da molécula na centrífuga. 
 
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Origem do ribossomo: RNA ribossômico é transcrito no nucléolo (fica dentro do núcleo das 
células). Logo, o ribossomo é produzido no nucléolo. 
 
Ribossomo NÃO precisa ser traduzido. Mas as proteínas que formam os ribossomos são 
transcritos e traduzidos para chegar no nucléolo e formar os ribossomos. 
 
Proteínas ribossomais: 
 
Facilita o dobramento adequado do RNAr (ribossômico). 
Intensifica a função ribossomal pelo posicionamento correto dos RNAt (transportadores). 
 
ÚNICO RNA TRADUZIDO É O RNAm. – RNAr e RNAt não são traduzidos. 
Os RNAt (transportadores) 
 
 
70-80 nucleotídeos 
 
Simples fita que sofreu dobramentos. 
 
Similar a uma folha de trevo ou a um L invertido (para se encaixar no ribossomo). 
 
Moléculas adaptadoras: anticódon pareia com o códon do RNAm. 
 
Região 3’ – sítio onde o aa que corresponde ao códon se liga covalentemente ao RNAt – CCA – 
aa liga-se na adenina (A) final. 
 
Enzimas aminoacil-RNAt sintetase: 20 tipos diferentes 
 
Catalisa a ligação de alta energia entre o aa e seu RNAt adequado. Reconhece o aminoácido e o 
liga no RNAt adequado. 
 
Uma enzima para cada aminoácido. 
 
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Códons só são contados a partir do start códon! – encontrou o start, começa a contar de 3 em 3. 
 
Continua a tradução 
 
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Depois da subunidade menor está de baixo do RNAm e o RNAt levou o aminoácido 
correspondente ao códon do RNAm. A subunidade maior do ribossomo liga-se ao RNAm. 
 
Alongamento 
 
Ribossomo à 3 sítios para RNAt 
 
E à saída – exit 
P à peptidil 
A à aminoacil 
 
 
 
Códon de iniciação da tradução: AUG – metionina 
Códons de terminação (parada): UAA ou UAG ou UGA 
 
20 aminiácidos à mais de 1 códon por aa 
64 códons possíveis à 3 códons finalizadores, 61 códons -- aa 
 
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RNAt iniciador, que transporta o aa. Metionina se liga ao sítio P. 
RNAt subsequente se liga ao sítio A 
Ribossomo desliza através da fita de RNAm (com auxílio dos fatores de alongamento – EF-1 e de 
translocação EF-2) 
RNA vazio ocupa o sítio E e deixa o ribossomo. 
 
 
 
Terminação da tradução 
 
8 - Fatores de liberação ou terminação (Release fator) 
 
Proteínas que se ligam aos códons de terminação (UAA, UAG, UGA), quando estes atingem os 
sítios A do ribossomo. 
 
Enzima peptidil-tranferase (subunidade maior do ribossomo) que catalisa as ligações peptídicas 
entre os aminoácidos adiciona uma molécula de água em vez de aminoácido. 
 
Cadeia de proteína finalizada é liberada no citoplasma 
 
Subunidades ribossionais separam-se e há liberação de RNAm. 
 
Polissomo 
 
Um mesmo RNAm pode ser traduzido por vários ribossomos ao mesmo tempo 
 
Ribossomo livra o sítio de iniciação à outro se acopla e inicia a tradução novamente 
 
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