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Transferência de genes Aumenta significativamente a variabilidade genética dos organismos Bactérias Reprodução através de divisão binária, ou seja, fundamentalmente, não há variabilidade genética Colônias puras em meio de cultura Þ Comunidade de indivíduos semelhantes que descendem de uma célula parental Þ Compartilham características: tamanho, forma, capacidade de fermentar açúcares... Þ Variantes podem aparecer espontaneamente ou como resultado da ação de agentes químicos ou físicos Þ Bactérias podem apresentar variações que conduzem à formação de clones com propriedades distintas do clone “selvagem” original • Pode ocorrer por mutação ou recombinação Mutação Þ Alteração na sequência de bases nitrogenadas do DNA, geralmente resultante de deleção, inserção ou substituição de um ou mais nucleotídeos • Pelas mudanças evolutivas • Produzem diferentes cepas dentro das espécies Þ Sempre ocorre alteração do genótipo, mas essa alteração pode ou não ser expressa no fenótipo: • Mutação neutra (não tem alteração) • Mutação desvantajosa (prejuízo perde caract fe.) • Mutação benéfica (enzima possui ativ nova) Tipos de mutação (alteração no gene) Þ Mutação pontual: afetam uma única base (troca) • Silenciosa (não altera) • Errônea/missense (altera síntese de 1 aminoác.) • Sem sentido/nonsense (aparecimento de um códon de término, impede a síntese) Þ Mutação por deslocamento do quadro (fase) de leitura: existe deleção ou inserção de uma ou mais bases • Alteram todas as sequências de 3 bases posteriores • Inserem códons de terminação ou aminoác. • Normalmente alteram o fenótipo Efeitos fenotípicos das mutações Þ Irão depender do papel da proteína: causar apenas alterações fenotípicas ou levar a morte celular Þ Alterações morfológica e na cor da colônia Þ Alterações nos requerimentos nutricionais: aumentam as necessidades nutricionais pelo prejuízo causado em enzimas Þ Alterações na sensibilidade à temperatura Tipos de mutação (causa) Þ Espontânea: surgem durante a replicação do DNA por erros de pareamento de bases Þ Induzida por agentes mutagênicos (químicos e radiação): aumentam a taxa de mutação acima da taxa de mutação espontânea- alteram nucleotídeos Þ Mutagênicos químicos: agem no nível molecular para alterar a sequência de bases no DNA • Análagos de base e agentes desaminantes pontuais) • Derivados de acridina –deslocamento da fase de leitura por se inserirem na molécula de DNA causando desenrolamento parcial, que permite que uma ou mais bases sejam deletadas ou adicionadas Þ Radiação como mutagênico: raio X, gama e raios UV • Radiação UV: leva a formação de dímeros de pirimidina, que impede o pareamento, formando uma lacuna no DNA replicado (câncer de pele) A transcrição para na lacuna =Baixo poder de penetração • Raio X e raios Gama: possuem maior energia e por isso, quebram facilmente ligações químicas resultando em radicais livres que atingem o DNA VARIABILIDADE GENÉTICA Recombinação Transferência horizontal de genes – célula doadora e célula receptora: CÉLULA RECOMBINANTE Transformação Incorporação de DNA livre, geralmente decorrente da lise celular Quando uma célula sofre lise, liberando o seu DNA, ele tende a se quebrar e alguns desses fragmentos podem ser “absorvidos” e incorporados por outras células • Captura do DNA: somente em determinado estágio do ciclo de vida, provavelmente, antes do término da síntese da parede celular • Proteína – fator de competência: é liberada no meio e facilita a entrada do DNA na célula • Fator de competência pode ser utilizado para tratar uma cultura, tornando-a competente • Necessário que as células apresentem sítios de superfície para a ligação do DNA, que ligam DNA do mesmo gênero e espécie ou gênero e espécies estreitamente relacionados (geralmente rejeitam DNA não relacionado) • O estabelecimento da competência é um fenômeno controlado e depende de várias condições distintas • Utilizada para inserir DNA de uma espécie no DNA de outra = Recombinante Variabilidade Bacteriana Os efeitos no fenótipo serão negligenciados se a nova proteína funcionar como a original • Transdução Transferência de material genético mediada por vírus (bacteriófagos) Bacteriófagos (fagos) temperados ou lisogênicos: podem realizar tanto a transdução especializada quanto a transdução generalizada Transdução especializada Genes bacterianos específicos podem ser transferidos pelo fago Ø Células são induzidas a entrar no ciclo lítico Ø Os genes do fago formam uma alça e são cortados do cromossomo bacteriano Ø O fago controla a síntese e montagem de novas partículas virais e a célula sofre lise Ø O fago contém um ou mais genes bacterianos (adjacentes ao dna do fago), quando infecta outra célula ocorre a transferência do gene bacteriano também Ø Fago transduz (transfere) genes específicos – limita-se a um ou alguns genes que eram adjacentes ao prófago Transdução generalizada Qualquer gene bac. pode ser transferido pelo fago Ø Bác. entram no ciclo lítico, as enzimas do fago clivam o DNA da célula em muitos segmentos pequenos Ø Eventualmente pode haver o empacotamento de fragmentos de DNA das células hospedeira, gerando partículas transdutoras • Conjugação Transferência de DNA de uma bactéria para outra, envolvendo o contato entre as duas células (transfere maiores quantidades de DNA) • Está associada à presença de plasmídeos F, os quais contêm genes que permitem a transferência do DNA plasmidial de uma célula para outra – capacidade conjugativa • Célula F+: apresenta o plasmídeo (doadora) • Célula F-: não apresenta o plasmídeo (receptora) • Maiores quant. de DNA são transferidos nesse processo
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