COLORAÇÃO DE GRAM

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UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO 
 INSTITUTO DE BIOLOGIA ROBERTO ALCANTARA GOMES 
 
 
 
 
 
 COLORAÇÃO DE GRAM 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ALUNA: THAINÁ SOUZA 
 
 
 
 
INTRODUÇÃO 
A coloração de gram é uma técnica de coloração na qual a diferença no 
envoltório celular divide a classificação de bactérias em dois grupos: Gram-
positiva e Gram-negativa. Essa técnica recebeu este nome em homenagem ao 
médico Dinamarquês Hans Cristian Joaquim Gram. Por volta de 1884, Hans 
Gram observou, que após bactérias serem tratadas com diferentes corantes 
elas adquiriram cores diferenciadas. Desta forma, as que ficavam roxas foram 
classificadas como Gram-positiva e as que ficavam avermelhadas/rosadas, 
foram classificadas como Gram negativas. 
 
MATERIAL 
- Bactéria A 
- Bactéria B 
- Duas alças bacteriológica 
- Duas lâminas de microscopia 
- Conjunto para coloração de gram 
- Água destilada 
- Bico de Bunsen 
 
MÉTODO 
Na primeira etapa foi retirado uma colônia de bactérias e feito um esfregaço na 
lâmina de vidro. Após esse procedimento, foi deixado secar e logo em seguida 
a lâmina foi passada cuidadosamente pela face oposta ao esfregaço na chama 
do bico de Bunsen para sua fixação. 
Na etapa de coloração, é iniciada com um corante primário que é o cristal de 
Violeta, foi gotejada a solução e deixou-se corar por 1 minuto. Após esse 
tempo, é a etapa do Mordente, que é o Lugol, foi adicionado e deixado reagir 
durante 1 minuto. Na etapa do descorante é aplicado o Álcool-Acetona na 
lâmina inclinada de forma a lavar o resíduo do corante e logo em seguida foi 
lavada com água destilada. Na última etapa é adicionado o corante secundário, 
a Safranina, e deixado por 30 segundos. Depois de seca, a lâmina já estava 
pronta para ser observada no microscópio. 
 
RESULTADOS 
Após todas essas etapas da prática virtual, podemos observar que a Bactéria 
A ficou com uma coloração rosada, na qual sua classificação significa que ela é 
uma Gram- negativa e a Bactéria B ficou com a coloração roxa, indicando que 
ela é Gram-positiva. 
 
CONCLUSÃO 
A partir desta prática, foi possível identificar a parede celular dos 
microrganismos utilizados, pois as bactérias B, que deram o resultado de 
Gram-positiva são bactérias que possuem um envoltório celular formado por 
membrana citoplasmática e uma espessa camada composta por 
peptidioglicano, ficando assim com uma coloração roxa e mesmo com a adição 
do corante secundário, as bactérias Gram-positiva continuam com a coloração 
roxa. 
Já as bactérias A, que deram o resultado de Gram-negativa são bactérias que 
tem sua parede celular composta por uma delgada camada de peptidioglicano 
e com uma membrana plasmática externa, ficando com uma coloração 
avermelhada/rosada. Pois o álcool- Acetona retira os lipídios da parede celular, 
sendo assim, a perda da primeira coloração (que é a roxa), ficando 
transparente e com a adição do corante secundário essas estruturas ficam 
coradas pela cor rosa/avermelhada. Desta forma é possível observar a 
diferença entre esses dois grupos.