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Método de Gram - Bactérias gram-positivas e gram-negativas

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Morfologia Bacteriana – Método de Gram 
Muito utilizada no campo da microbiologia
fácil de ser realizada e tem várias 
funções 
Diferenciar as BACTÉRIAS em 2 grandes grupos:
GRAM POSITIVAS GRAM NEGATIVAS A diferenciação está relacionada com a resposta de determinado
grupo de microrganismo a coloração, que se da pelas diferenças
nas estruturas da parede celular das bactérias, isto é se baseia
especificamente na camada de parede externa da bactéria.
➝ Identifica se cultura está pura ou
contaminada.
➝ Visualiza forma e arranjo
organizacional das células microbianas e
isso é extremamente importante porque
direciona o tratamento ou a estratégia de
infecção.
Camada de peptideoglicano
espessa intercalado com
diferentes moléculas nas quais 2
se destacam: O ácido teicoico e o
lipoteicoico que são responsáveis
por ancora à parede celular na
membrana citoplasmática
A membrana plasmática dos 2 grupos é muito parecida, entretanto 
parede celular é totalmente diferente
Camada de peptideoglicano fina (delgada)
porém tem uma membrana externa de
composição básica (similiar a membrana
plasmática) com moléculas intercaladas,
porém uma se destaca: O lipopolissacarideo
(LPS) que tem função imunogênica
(importante fator de virulênica), pois
estimula a resposta imune o que é muito
importante em processos infecciosos
envolvendo bactérias gram-negativas
Tem membrana externa formada por
lipopolissacarideos (LPS) importante fator
de virulência
+ complexa 
O corante gram não é capaz de atravessar a membrana citoplasmática das células bacterianas, logo 
não cora o citoplasma (como se acreditava até 2015), mas sim a camada peptideoglicano. 
*O tempo necessário de 
cada processo pode ser 
consultado nos roteiros . 
Esfregaço fino com a colônia bacteriana na lâmina
Fixar esfregaço por meio do calor (passar 3x no fogo – bico de bunsen)
Esfregaço é líquido 
biológico, produto 
patológico ou células de 
tecido ou de um órgão 
postas sobre uma lâmina, 
para fins de observação 
microscópica.
Preparação da lâmina
Cristal de violeta
(permeável)
(Células se coram 
de roxo)
Iodo (mordente)
Complexa com o 
cristal de violeta e 
torna 
impermeável
Descoloração
Utilizar um 
solvente orgânico 
como o álcool 
absoluto, 
rapidamente
Contracorante ou 
contracoloração
(Safrina)
Agente contraste 
Esfregaço de colonia bacteriana
tem que ser fino, pois a colonia é
formada por milhões de células e
se fizer um esfregaço muito
grosso as células sobrepõem umas
as outras e não consigo fazer uma
coloração de forma adequada.