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1. SOBRE O TESTE 1 (DETECÇÃO DA ATIVIDADE), EXPLIQUE COMO A UREASE CATALISA A REAÇÃO DE QUEBRA DA UREIA. E COMENTE SOBRE A VISUALIZAÇÃO DE COR RÓSEA NO FINAL DESTE EXPERIMENTO. A molécula de ureia em meio aquoso será convertida em duas moléculas de amônia e uma molécula de gás carbônico, dessa forma, a amônia que foi gerada em meio aquoso irá se transformar em íon amônio, essa transformação resultara no aumento da concentração de íons hidroxila, que irá resultar na captura de prótons ou íons hidrogênio pata a formação de água, e essa diminuição na concentração dos íons hidrogênio fara com que haja o aumento do ph. A cor rósea é observada no final do experimento no tubo 1, onde foi inserido a urease, que funcionou através da mudança da coloração do meio para róseo, indicando que o ph aumentou, sendo que no tubo 2 que havia a mesma solução inicial (3 ml de ureia tamponada de vermelho fenol), não teve alteração de coloração, pois no lugar da urease, foi adicionado 3 gotas de água destilada. 2. COMENTE SOBRE O RESULTADO DO TUBO 2 (UREASE E TIOUREIA) DO EXPERIMENTO DE ESPECIFICIDADE ENZIMÁTICA. Neste experimento foram utilizados 2 tubos para chegar a um resultado, onde o tubo 1 tinha a presença de ureia e o tubo 2, a presença de tiroureia, sendo que a diferença entre esses dois compostos, é a presença dos átomos de oxigênio(ureia) e enxofre(tiroureia). No tubo 1, assim como na reação exposta na questão anterior, teve mudança na coloração ficando rosa, já no tubo 2, onde foi adicionado solução de tiroureia tamponada com vermelho de fenol, e em seguida 3 gotas de urease, após uma agitação do tubo, foi possível constatar que não houve mudança na coloração. Dessa forma é possível afirmar que a urease é especifica para o substrato ureia, não atuando sobre a molécula de tiroureia. 3. EXPLIQUE O EFEITO DO AQUECIMENTO SOBRE A ATIVIDADE DA UREASE. A substancia colocada em teste nesse experimento é a urease, que é uma proteina, portanto é passível de sofrer desnaturação. Para constatar se houve desnaturação, foi adicionado 3 ml de agua destilada a um tubo de ensaio, em seguida foi adicionado 3 gotas de urease, sendo submetido a 3 minutos de fervura, logo após esse período foi retirada. Em outro tubo de ensaio foi pipetado 2 ml da solução de ureia tamponada com vermelho fenol, depois adicionado 1 ml da urease fervida, e foi submetido a agitação. Após todo esse procedimento foi observado que não houve mudança na coloração, portanto é possível aferir que não houve desnaturação pelo calor. Para obter uma verificação mais certa, foi esperado cerca de 5 minutos e mesmo assim não houve nenhuma mudança na coloração, indicando que esta enzima perdeu sua atividade enzimática. 4. O CLORETO DE MERCÚRIO REPRESENTA QUAL TIPO DE INIBIÇÃO ENZIMÁTICA? EXPLIQUE O EFEITO DESTE INIBIDOR NA ESTRUTURA DA UREASE. O cloreto de mercúrio representa uma inibição do tipo irreversível. Sais de metais como o cloreto de mercúrio tem a capacidade de se combinar com grupos sulfidrila, que estão presentes no sitio ativo da urease. A presença do cloreto de mercúrio fará com que o a enzima urease se precipite, não sendo mais capaz de retornar ao seu estado ativo. Desta forma, afere se que moléculas de urease que sofrerem ação de inibidores irreversíveis como o cloreto de mercúrio não poderão mais ser recuperados.
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