Aula 7 - Carboidratos - Cálculos - TA pptx

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DETERMINAÇÃO DE CARBOIDRATOS 
PRINCIPIO DO MÉTODO LANE-EYNON 
A determinação do teor de glicídios é realizada através do Método de Lane-Eynon, com utilização do Reagente de Fehling. O Método de Lane-Eynon baseia-se na redução de volume conhecido do reagente de cobre alcalino (Fehling) a óxido cuproso. 
O ponto final é indicado pelo azul de metileno, que é reduzido a sua forma leuco por um pequeno excesso de açúcar redutor.
A solução de açúcar é adicionada vagarosamente de uma bureta de Fehling a uma mistura em ebulição das duas soluções de Fehling. Próximo ao ponto de viragem é adicionado 1mL de uma solução aquosa de azul de metileno 2%, que muda a cor da solução de azul para incolor no ponto de viragem. 
PRINCIPIO DO MÉTODO LANE-EYNON 
A solução fica incolor, mas como existe o precipitado cor de tijolo, a cor visível da viragem é de azul para vermelho tijolo. Existem dois fatores importantes a serem seguidos neste método para maior exatidão dos resultados:
A solução deve ficar constantemente em ebulição durante a titulação , porque o CuO formado pode ser novamente oxidado pelo O2 do ar e muda a cor novamente para azul.
A titulação deve levar no máximo 3 minutos porque pode haver decomposição dos açúcares com o aquecimento prolongado.
PADRONIZAÇÃO DO REAGENTE DE FEHLING
Preparar a solução padrão de glicose: pesar 0,500g de glicose pura (seca em estufa a vácuo ou regulada a 70ºC, durante 1h) e diluir a 100mL em balão Volumétrico. 
Colocar numa bureta de Fehling a solução padrão de glicose.
Transferir com pipeta volumétrica 10mL de solução Fehling A e 10mL de solução Fehling B para balão de titulação Fehling ( balão de fundo chato). Adicionar 40mL de água destilada juntamente com algumas pérolas de ebulição. Montar a estrutura e iniciar o aquecimento em bico de Bunsen.
Quando iniciar a fervura, começar a gotejar a solução-padrão até quase o final da titulação.
Quando iniciar o descoramento (perda da coloração azul), adicionar 1 gota de azul de metileno a 1% e completar a titulação até descoramento do indicador.
O tempo de titulação não deve ultrapassar 3 minutos. O ponto final da titulação será em torno de 10mL de glicose. Anotar o volume gasto.
PADRONIZAÇÃO DO REAGENTE DE FEHLING
DETERMINAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES (em glicose)
APLICAÇÃO Aplica-se em produtos enlatados, salsicharia, queijos e outros produtos alimentícios que tenham em sua composição até 5% de açúcares (pesar 25g). E em produtos com alto teor de glicose como mel, geléias, etc (pesar 1g).
PROCEDIMENTO
1. Pesar a amostra homogeneizada em béquer de 250mL (anotar o peso).
2. Adicionar 50mL de água destilada e homogeneizar com bastão de vidro.
3. Transferir para balão volumétrico de 250mL (não completar o volume).
4. Adicionar 2mL de ferrocianeto de potássio a 15% e 2mL de acetato de zinco a 30%. Agitar bem e completar o volume. 5. Aguardar a floculação e sedimentação do material. Filtrar, identificando o frasco que recebe o filtrado.
6. Colocar o filtrado na bureta.
7. Pipetar volumetricamente 5mL de Fehling A e 5mL de Fehling B para o balão de titulação Fehling. Adicionar algumas pérolas de ebulição.
DETERMINAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES (em glicose)
8. Adicionar 40mL de água destilada. Aquecer até ebulição e gotejar a solução da amostra até que inicie o descoramento. Adicionar 1 gota de azul de metileno a 1% e completar a titulação até descoramento do indicador
9. Anotar o volume gasto.
DETERMINAÇÃO DE AÇÚCARES TOTAIS
PRINCÍPIO Como os grupos redutores aldeído e cetona não se encontram livres na sacarose, efetua-se uma hidrólise ácida. O resultado são duas moléculas de açúcares redutores, uma de glicose e outra de frutose, que são determinadas pelo método de Lane-Eynon.
PROCEDIMENTO
1. Pesar a amostra homogeneizada em Erlenmeyer de 250 mL. Anotar o peso da amostra.
2. Adicionar 50mL de água destilada e dissolver a amostra.
3. Adicionar 2mL de ácido clorídrico concentrado (na capela) e levar ao banho-maria (60°C) por 60 min.
4. Esfriar e neutralizar com hidróxido de sódio 50%, usando papel indicador de pH.
5. Seguir os procedimentos 3 a 9 do Método açúcares redutores.
DETERMINAÇÃO DE AÇÚCARES TOTAIS
CÁLCULOS
CÁLCULO DOS GLICÍDIOS NÃO REDUTORES:
DETERMINAÇÃO DE AMIDO
APLICAÇÃO Produtos com amido na sua formulação.
PRINCÍPIO O amido não apresenta reação redutora. Uma hidrólise enérgica em meio fortemente ácido produz exclusivamente glicose, sendo determinada pelo método de Lane-Eynon.
PROCEDIMENTO
	1. Pesar 10 g de amostra homogeneizada em Erlenmeyer de 250 mL. Anotar o peso da amostra.
	2. Adicionar 50mL de água destilada e dissolver a amostra.
	3. Adicionar 10mL de ácido clorídrico concentrado (na capela).
	4. Autoclavar a 120º C durante 30 min.
	5. Esfriar e neutralizar com hidróxido de sódio 40%, usando papel indicador de pH.
	6. Seguir os procedimentos 3 a 9 do Método açúcares redutores, colocando 4 mL de cada interferente.
CÁLCULOS
DETERMINAÇÃO DE FIBRAS
DEFINIÇÃO: são os componentes das paredes celulares vegetais incluídas na dieta humana que resistem à ação das secreções do trato gastrointestinal.
PROCEDIMENTO:
Pese 2 g da amostra, envolva em papel de filtro e amarre com lã. 
Faça extração contínua em aparelho de Soxhlet, usando éter como solvente. 
Aqueça em estufa para eliminar o resto de solvente. 
Transfira o resíduo para um frasco Erlenmeyer de 750 mL, com boca esmerilhada. Adicione 100 mL de solução ácida e 0,5 g de agente de filtração. 
Adapte o frasco Erlenmeyer a um refrigerante de refluxo por 40 minutos a partir do tempo em que a solução ácida foi adicionada, mantendo sob aquecimento. 
Agite, frequentemente, a fim de evitar que gotas sequem na parede do frasco. 
DETERMINAÇÃO DE FIBRAS
Filtre em cadinho de Gooch previamente preparado com areia diatomácea e com auxílio de vácuo. Lave com água fervente até que a água de lavagem não tenha reação ácida. 
Aqueça em estufa a 105°C, por 2 horas. Resfrie em dessecador até a temperatura ambiente. 
Pese e repita as operações de aquecimento e resfriamento até peso constante. Incinere em mufla a 550°C. 
Resfrie em dessecador até a temperatura ambiente. Pese e repita as operações de aquecimento e resfriamento até peso constante. 
A perda de peso será igual à quantidade de fibra bruta.
CÁLCULOS
EXERCÍCIO DE APLICAÇÃO 1
Um técnico de laboratório, ao determinar o teor de açúcares redutores em glicose em uma amostra de biscoito doce através do método de Fehling realizou a análise utilizando triplicatas (Prova 1, Prova 2 e Prova 3). Ele realizou os procedimentos em sequência, conforme se descreve a seguir: Após homogeneizar e pulverizar a amostra, ele pesou a amostra em triplicata utilizando como recipiente de pesagem um béquer de 100 mL. Realizou os procedimentos descritos pelo Instituto Adolfo Lutz e anotou os pesos da amostra e os volumes da solução gastos na titulação. (Considerar que a solução de Fehling foi padronizada com fator de correção igual a 0,045).
	PROVA	MASSA (g)	VOLUME TITULAÇÃO (mL)
	1	2,56	38,1
	2	4,84	22,9
	3	3,55	29,1
EXERCÍCIO DE APLICAÇÃO 2
Um técnico em laboratório necessita determinar o teor de fibra bruta em uma amostra de barra de cereal. A determinação será conduzida utilizando triplicatas (Prova 1, Prova 2 e Prova 3). Ele realizou os procedimentos descritos pelo Instituto Adolfo Lutz e anotou os resultados na tabela.
	PROVA	PESO SECO (g)	PESO APÓS INCINERAR (g)
	1	0,32	0,03
	2	0,35	0,05
	3	0,29	0,02