ESTUDO DIRIGIDO Beatriz Joia Tabai (Respostas em vermelho) 1) A ação dos antimicrobianos nas células bacterianas acontece de maneira distinta para cada classe destes fármacos. Os sítios mais comuns da ação destes fármacos na bactéria são parede celular, membrana, ribossomos e cromossomos. Qual das alternativas a seguir apresenta corretamente duas classes dos antimicrobianos acompanhados dos seus respectivos sítios de ação na bactéria? a) Penicilinas (Parede Celular); Clindamicinas (Cromossomos). b) Quinolonas (Cromossomos), Carbapenens (Ribossomos). c) Cefalosporinas (Parede Celular), Aminoglicosídeos (Parede Celular). d) Monobactâmicos (Parede Celular), Macrolídeos (Ribossomos). e) Aminoglicosídeos (Ribossomos), Macrolídeos (Membrana Celular). Resposta: D. As penicilinas inibem a síntese da parede celular bacteriana. A clindamicinas inibe a síntese proteica, não atuando nos cromossomos. As quinolonas inibem a ação da DNA girase e topoisomerase IV, impedindo a replicação do DNA bacteriano. As carbapenens atuam contra as enzimas que sintetizam a parede bacteriana, não nos ribossomos. As cefalosporinas inativam as proteínas ligadoras de penicilina, inibindo a síntese de parede celular. Os aminoglicosídeos inibem a síntese das proteínas, não atuando na parede celular. Os macrolídeos inibem a síntese proteica, não atuando na membrana celular. Por fim, os monobactâmicos atuam na parede celular bacteriana. 2) Com relação aos testes de sensibilidade aos antimicrobianos, considere as seguintes afirmativas: 1. Para antibiograma pelo método de disco-difusão, o inóculo bacteriano deve ser realizado a partir de uma suspensão bacteriana padronizada, como na escala 1,5 de McFarland. F - 0,5 MacFarland. 2. O antibiograma por métodos de diluição tem como objetivo determinar a concentração do antimicrobiano que inibe visivelmente o crescimento bacteriano. V 3. A concentração inibitória mínima é a menor concentração de um antimicrobiano que elimina totalmente os microrganismos. F - A CIM é a menor concentração de antimicrobiano capaz de inibir o crescimento bacteriano. 4. Antibiograma pelo método da difusão, segundo Kirby-Bauer, tem como objetivo avaliar quantitativamente a concentração bactericida de um antimicrobiano. F - O objetivo é testar se a bactéria em análise é sensível a determinados antibióticos. 5. O método de microdiluição em caldo é o teste recomendado quando se deseja um resultado qualitativo. F - quantitativo. Assinale a alternativa correta; a) Somente a afirmativa 2 é verdadeira. b) Somente as afirmativas 1, 2 e 3 são verdadeiras. c) Somente as afirmativas 1, 4 e 5 são verdadeiras. d) Somente as afirmativas 2, 3, 4 e 5 são verdadeiras. e) Somente as afirmativas 1, 3, 4 e 5 são verdadeiras. 3) Sobre os antifúngicos avalie as afirmativas abaixo: I) A anfotericina B é um antibiótico antifúngico que age se ligando a membrana da célula fúngica, especificamente ao ergosterol, alterando a permeabilidade destas células. V II) A nistatina age da mesma forma que a anfotericina, mas não é utilizada por via injetável devido sua baixa biodisponibilidade. F - É injetável. III) A flucitosina é convertida em 5-fluorouracil na célula fúngica e inibe a enzima timidilato sintetase impedindo a síntese do DNA fúngico. V IV) A flucitosina não pode ser aplicada em conjunto com a anfotericina B, pois esta associação diminui a atividade da flucitosina. F - A flucitosina geralmente é usada em conjunto com a anfotericina B no tratamento de casos graves de infecções por Candida e criptococose. Estão CORRETOS apenas os itens: a) I e III b) I e II c) I e IV. d) II e III. 4) Sobre os antivirais, avalie as afirmativas abaixo: I ) Todos os antivirais, como o Aciclovir, devem sofrer trifosforilação dentro das células pra se tornarem ativos. F - Apenas alguns, como os inibidores nucleosídicos da replicação do material genético, precisam ser convertidos à forma ativa trifosforilada para exercerem atividade antiviral. II) O ganciclovir é uma droga classificada com anti-herpética e tem atividade inferior a do aciclovir sobre o citalomegalovírus. F III) Os vírus são parasitas intracelulares obrigatórios e utilizam a maquinaria celular do hospedeiro para se proliferar. V IV) A aciclovir exerce suas ações por inibir enzimas com função de polimerase de ácidos nucléicos. V Estão CORRETOS apenas os itens: a) I e IV b) I e III c) II e III. d) III e IV. 5) Sobre o mecanismo de ação do aciclovir é CORRETO afirmar que: a) Inibe a fusão das membranas virais e celulares mediada por interações entre gp41 e CD4. b) Inibe a neuraminidase viral e, portanto, provoca agregação viral na superfície celular e redução na disseminação do vírus. c) Atua no local de ligação do pirofosfato da DNA-polimerase viral e impede a clivagem do pirofosfato a partir de pirofosfatosnucleosídicos, bloqueando, assim, o prolongamento de um molde de primer adicional. d) Faz com que as enzimas da célula hospedeira adicionem dois fosfatos para formar trifosfato de aciclovir, que é transportado para o núcleo. Depois que a DNA-polimerase do herpes cliva pirofosfato a partir de trifosfato de aciclovir, a DNA-polimerase viral insere mono fosfato de aciclovir, e não mono fosfato de 2 '- desoxiguanosina no DNA viral. 6) Qual a principal estratégia terapêutica farmacológica para tratamento de infecções pelo vírus influenza? Explique o mecanismo de ação molecular envolvido com base na(s) estrutura(s) do(s) fármaco(s). Resposta - Para o tratamento de infecções do vírus Influenza, a principal estratégia terapêutica farmacológica se dá com fármacos que inibem a enzima neuraminidase. Eles imitam o intermediário do estado de transição da reação enzimática, bloqueando a enzima neuraminidase e impedindo a continuação da reação, assim, essa enzima não é mais capaz de degradar o muco e facilitar a dispersão do vírus, algo que diminui o poder de infecção viral. Exemplos deles são o oseltamivir (tamiflu) e o zanamivir (relenza). 7) Qual o principal fármaco usado para tratamento de infecções causadas pelo herpesvírus? Com base na estrutura química deste fármaco, explique seu mecanismo de ação molecular e toxicidade seletiva. Resposta - O Aciclovir é o principal fármaco usado para o tratamento de infecções por herpesvírus. Esse fármaco não apresenta o anel de ribose (açúcar) presente nos nucleosídeos, no entanto, tem uma cadeia acíclica no local que permite as fosforilações necessárias para produção da estrutura ativa. A primeira fosforilação (etapa limitante das reações de fosforilação) é catalizada por uma enzima específica, a quinase viral, codificada pelo Herpes vírus. Esse mecanismo é diferente de outros agentes antivirais, nos quais as três reações de fosforilação são catalisadas por enzimas celulares (do hospedeiro). Dessa forma, o aciclovir só é fosforilado em células infectadas pelo vírus da Herpes, apresentando portanto toxicidade seletiva. 8) Considere a alternativa que apresente um exemplo de Antiviral Citotóxico: a) Abacavir. b) Ribavirina. c) Ganciclovir. d) Nenhuma das alternativas. Resposta - O abacavir inibe a enzima transcriptase reversa do HIV, o que resulta na finalização da cadeia de ácido nucléico e na interrupção do ciclo de replicação viral, algo que não destrói a célula infectada. A Ribavirina interfere na síntese de guanosina trifosfato, inibindo o RNA mensageiro viral e inibindo a polimerase de certos vírus RNA, algo que não destrói a célula infectada. O ganciclovir inibe a síntese do DNA viral por 2 mecanismos: (1) inibição competitiva da incorporação da desoxiguanosina trifosfato (DGTP) ao DNA pela DNA polimerase e (2) a incorporação do trifosfato de ganciclovir ao DNA viral causa um subsequente término ou grande limitação do alongamento do DNA viral. Assim, ele é citotóxico. 9) Medicamento antiviral indicado para tratamento de pacientes diagnosticados com Gripe A H1N1: a) Oseltamivir b) Aciclovir c) Famciclovir d) Efavirenz e) Zidovudina