relatorio-de-bioquimica-amilase-salivar

Prévia do material em texto

Relatório de Bioquímica -
Amilase Salivar
Bioquímica
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
3 pag.
Document shared on www.docsity.com
Downloaded by: patricia-oliveira-kpq (patricia.lopes1996.oliveira@gmail.com)
https://www.docsity.com/?utm_source=docsity&utm_medium=document&utm_campaign=watermark
 
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA 
“JÚLIO DE MESQUITA FILHO” 
CAMPUS DE ARARAQUARA 
INSTITUTO DE QUÍMICA 
 
 
ISABELA FERNANDES IERICK 
JOSÉ EDUARDO SANTOS JARDIM 
MARCO ROBERTO GUERREIRO JÚNIOR 
RHAYSSA THASSYA BIOTTO 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FUNDAMENTOS DE BIOQUÍMICA – CURSO PRÁTICO 
AMILASE SALIVAR 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Araraquara 
2020 
 
 
Document shared on www.docsity.com
Downloaded by: patricia-oliveira-kpq (patricia.lopes1996.oliveira@gmail.com)
https://www.docsity.com/?utm_source=docsity&utm_medium=document&utm_campaign=watermark
1) Qual significado de ponto acromático no item 1 do roteiro? 
 
O amido é constituído por amilose e amilopectina. A molécula da amilose não apresenta 
ramificações e, no espaço, assume conformação helicoidal (forma de hélice) a partir de suas ligações 
alfa 1-4. A amilopectina possui estrutura ramificada. As moléculas de alto peso molecular, como a 
amilose e a amilopectina, sofrem reações de complexação, com formação de compostos coloridos. 
A complexação da amilose com o iodo resulta em um complexo azul. O complexo de cor azul 
intensa ocorre por conta do aprisionamento do iodo nas cadeias lineares da amilose, enquanto que 
a amilopectina, por não apresentar estrutura helicoidal por conta das ramificações, tem uma interação 
menor com o iodo. O resultado da complexação do amido com o iodo é a formação de um complexo 
de cor azul intensa. 
A presença da amilase salivar (alfa amilase) catalisa a quebra da amilose, assim o complexo 
azul se desfaz. Assim, tem-se como ponto acromático o ponto em que os fragmentos da molécula do 
amido não formam mais o referido complexo com o iodo, pois o amido foi totalmente hidrolisado até 
maltose. 
 
2) Compare os resultados obtidos na presença e ausência de NaCl, explicando o seu efeito na 
atividade da enzima. 
 
A adição de NaCl faz com que ocorra o processo de salting in, no qual a amilase salivar se 
torna mais solúvel. O aumento da solubilidade da enzima aumenta a sua concentração, o que 
também aumenta a atividade enzimática. Portanto, o ponto acromático é alcançado mais 
rapidamente quando há NaCl porque a concentração da amilase salivar é maior. 
 
3) Explique os resultados obtidos referentes ao efeito do pH na atividade da amilase e determine o 
pH ótimo da enzima. 
 
O pH fora do ideal gera ruptura de interações intermoleculares das enzimas, causando perda 
de efetividade. A maioria das enzimas apresenta um valor de pH característico na qual a atividade 
catalítica é máxima; valores acima ou abaixo deste valor resultam em redução da atividade, 
podendo levar a desnaturação. 
A influência do pH na catálise enzimática está correlacionada com o estado de ionização de 
resíduos de aminoácidos da enzima que são essenciais à catálise, no caso da amilase salivar o 
valor ótimo é aproximadamente 7,0. 
Document shared on www.docsity.com
Downloaded by: patricia-oliveira-kpq (patricia.lopes1996.oliveira@gmail.com)
https://www.docsity.com/?utm_source=docsity&utm_medium=document&utm_campaign=watermark
Durante a prática nota-se que no pH próximo ao ideal (6,8) o amido é quebrado, resultando 
em um resultado negativo para o teste com iodo; já em pHs não ideais (4,0 e 10,0) nota-se um 
resultado positivo para teste com iodo, mostrando a falta de ocorrência da quebra do amido. 
 
4) Explique os resultados obtidos referentes ao efeito da temperatura na atividade da amilase, 
determine a temperatura ótima da enzima e explique a coloração obtidas nos tubos 1b e 3b após o 
retorno à temperatura de 37º C. 
 
A velocidade da reação aumenta até um máximo e após determinada temperatura a 
velocidade declina rapidamente, mesmo com o aumento da temperatura. Isso ocorre porque a 
estrutura tridimensional das enzimas se rompe, impossibilitando a formação do complexo enzima-
substrato. Para cada tipo de enzima existe uma temperatura ótima, na qual a velocidade da reação 
é máxima, permitindo uma maior catálise enzimática, sem ocorrer a desnaturação da enzima. 
Na temperatura de 0 ºC há uma baixa atividade catalítica e por isso o teste é positivo com 
iodo, no tubo de 37 ºC nota-se uma maior atividade catalítica, por isso o resultado do teste é 
negativo com iodo. No caso de 90 ºC ocorre a desnaturação na qual a enzima perde a função 
catalítica e o teste para iodo se torna positivo novamente. 
Quando o tubo de 0 ºC tem sua temperatura aumentada para 37 ºC, verifica-se um resultado 
negativo do teste com iodo, indicando atividade enzimática. Em temperaturas próximas a 0 ºC, a 
enzima está inativada temporariamente; o aumento da temperatura faz com que ela tenha a sua 
ativação térmica. 
No caso do tubo de 90 ºC, mesmo sendo resfriado para 37 ºC não há atividade enzimática, 
pois como a temperatura original era bem superior à temperatura ótima, ocorre a inativação 
permanente e desnaturação da enzima, impossibilitando a sua atividade biológica em quaisquer 
outras temperaturas. 
 
 
 
 
 
 
 
Document shared on www.docsity.com
Downloaded by: patricia-oliveira-kpq (patricia.lopes1996.oliveira@gmail.com)
https://www.docsity.com/?utm_source=docsity&utm_medium=document&utm_campaign=watermark