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COLORAÇÃO DE GRAM CLASSIFICAÇÃO ESSE MÉTODO É BASEADO NA CAPACIDADE DAS PAREDES CELULARES DE BACTÉRIAS GRAM-POSITIVAS DE RETEREM O CORANTE CRISTAL VIOLETA ABAIXO DA GRANDE CAMADA DE PEPTIDEOGLICANOS DURANTE UM TRATAMENTO COM ÁLCOOL-ACETONA, ENQUANTO AS PAREDES CELULARES DAS GRAM-NEGATIVAS NÃO O FAZEM. AS GRAM NEGATIVAS SE CORAM COM FUCSINA APRESENTANDO A COR ROSA AS BACTÉRIAS GRAM POSITIVAS SE CORAM COM CRISTAL VIOLETA APRESENTANDO A COR ROXA PROCEDIMENTO EM 10 PASSOS 1. PREPARAR UM ESFREGAÇO DO MATERIAL A SER EXAMINADO E DEIXÁ-LO SECAR AO AR. CONCEITO CLASSIFICA AS BACTÉRIAS EM GRAM-POSITIVAS E GRAM-NEGATIVAS, DE ACORDO COM AS DIFERENÇAS NA COMPOSIÇÃO E ESTRUTURA DA PAREDE CELULAR EVIDENCIA CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS É UM DOS MAIS IMPORTANTES MÉTODOS DE COLORAÇÃO UTILIZADOS EM LABORATÓRIOS DE MICROBIOLOGIA E DE ANÁLISES CLÍNICAS FUCSINA OU SAFRANINA - CORANTE ÁLCOOL-ACETONA OU ÁLCOOL ABSOLUTO - CONTRA CORANTE LUGOL - SOLUÇÃO FIXADORA MORDENTE CRISTAL VIOLETA / VIOLETA GENCIANA OU VIOLETA DE METILA - CORANTE 10. EXAMINAR O ESFREGAÇO UTILIZANDO ÓLEO DE IMERSÃO, COM A OBJETIVA DE 100X. 2. FIXAR O MATERIAL À LÂMINA, PASSANDO A MESMA 3 OU 4 VEZES PELA CHAMA DA LAMPARINA. 3. COLOCAR A LÂMINA SOBRE UM SUPORTE PARA COLORAÇÃO E COBRIR O ESFREGAÇO COM SOLUÇÃO DE CRISTAL VIOLETA, VIOLETA GENCIANA OU VIOLETA DE METILA POR 30 SEGUNDOS A 1 MINUTO. ESCORRER O EXCESSO DE CORANTE. 4. SEM LAVAR COM ÁGUA, VERTER SOBRE A LÂMINA A SOLUÇÃO DE LUGOL, DEIXAR AGIR DURANTE 1 MINUTO E ESCORRER O EXCESSO DE SOLUÇÃO. 5. AINDA SEM LAVAR A PREPARAÇÃO, RECOBRIR A LÂMINA COM A SOLUÇÃO DE ÁLCOOL- ACETONA OU ÁLCOOL ABSOLUTO E LAVAR A LÂMINA COM ESTA SOLUÇÃO ATÉ QUE A COR ROXA PARE DE ESCORRER. 6. APÓS 1 MINUTO, LAVAR O ESFREGAÇO COM ÁGUA DESTILADA E ESCORRER. 7. COBRIR O ESFREGAÇO COM SOLUÇÃO DE FUCSINA OU SAFRANINA. 8. APÓS 30 SEGUNDOS, LAVAR O ESFREGAÇO COM ÁGUA DESTILADA E ESCORRER. 9. DEIXAR SECAR A LÂMINA AO AR, OU USANDO PAPEL DE FILTRO. REAGENTES UTILIZADOS
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