Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
Universidade Federal de Goiás Instituto de Ciências Biológicas Curso de Biomedicina Dosagem de Açúcar redutor pelo método de ADNS Discente: Renata Marques De Souza Kran Goiânia 2018 Renata Marques De Souza Kran Dosagem de Açúcar redutor pelo método de ADNS Relatório requerido pela disciplina de Bioquímica Ministrada pelo Professora: Rosália Santos Amorim Jesuino Goiânia 2018 6 Sumário 1 Introdução……………………........………………………………..04 2 Materiais e Métodos.........……………………….........................04 3 Resultados e Discussões…………………………………….......05 4 Conclusão........…………............................................................05 5 Referências bibliográficas…...……….......................................06 1 Introdução Açúcares redutores são todos aqueles que possuem uma hidroxila no carbono anomérico livre, ou seja, sem estar comprometida em uma ligação química, podendo então reduzir outras moléculas com características oxidantes. Esta habilidade pode ser utilizada como instrumento para a quantificação de açúcares. Quantificar açúcares é uma rotina muito importante na rotina de laboratórios ou indústrias comprometidas com os processos fermentativos. A capacidade fermentativa dos microorganismos utilizados nesses processos reflete diretamente na disponibilidade de substratos energéticos para o início das reações que terminarão em um produto desejado. Havendo uma concentração baixa de substrato a probabilidade dos microorganismos encontrarem moléculas para iniciarem a fermentação é mais baixa, o que ocasionaria uma eficiência menor, que é decisiva para o lucro de indústrias que os realizam comercialmente. Em outro extremo, uma quantidade elevada de açúcares pode impedir que a fermentação ocorra nas quantidades desejadas, pois mataria os microorganismos por conta da alta pressão osmótica que um meio hipertônico tem sobre o solvente presente no citoplasmas de suas células. O método DNS utiliza a característica redutora de açúcares para sua quantificação. O princípio vem através de uma molécula chamada Ácido 3,5 – dinitro salicílico (DNS) que quando puro apresenta uma coloração alaranjada, este ácido é facilmente reduzido por açúcares, embora possa apresentar menor eficiência se a solução utilizada possuir outras espécies redutoras fortes. Quando reduzido, o DNS se torna ácido 3-amino – 5 – nitro salicílico, e passa a apresentar-se com uma coloração acastanhada. 2 Materiais e Métodos Materiais · Solução padrão de Glicose (5mol/ml) · Solução problema (glicose 100 mol/ml) · Reativo: ADNS (acido 3,5 – dinitrossalicílico) · Pipetas graduadas de 1 e 10 ml · 7 tubos de ensaio · Espectrofotometro · Banho maria a 100 Cº Metodologia Segui se o protocolo utilizando a solução padrão de glicose ((5mol/ml): Tubos Solução de glucose (ml) Agua destilada (ml) ADNS (ML) B -- 1 1,0 1 0,2 0,8 1,0 2 0,4 0,6 1,0 3 0.6 0,4 1,0 4 0,8 0,2 1,0 5 1 -- 1,0 3 Resultados e Discussões Após a leitura de absorbância através do espectrofotômetro, calculamos a concentração conforme tabela abaixo: Tubos Abs 540 nm Concentração B 0 1 0,044 2,0 2 0,083 4,0 3 0,118 6,0 4 0,439 8,0 5 0,538 10,0 Solução problema 0,994 0,06 4 Conclusão Ao medirmos as absorbâncias foi possível notar que esses valores são diretamente proporcionais às concentrações de glicose obtida em cada tubo. Isto ocorre porque, quanto maior a concentração de glicose, maior será a formação do DNS, que é o responsável pela cor alaranjada das soluções e, consequentemente, pelas medidas de absorbância. Disso tudo se infere que a técnica de dosagem com DNS é de grande importância para determinação de açucares em alimentos e bebidas de diversos tipos. 5 Referências bibliográficas LEHNINGER, D.A.; WEST, D.M; HOLLER, F.J.; CROUCH, S.R. Fundamentos de Química Analítica. 4ª Ed. São Paulo: Savier, 2006. 1202 p. Curva padrão de Glicídios Redutores Série 1 Tubo B Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Solução Poblema 0 4.3999999999999997E-2 8.3000000000000004E-2 0.11799999999999999 0.439 0.53800000000000003 0.99399999999999999 Série 2 Tubo B Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Solução Poblema 1 2 4 6 8 10 15
Compartilhar