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Biologia molecular Estudo dirigido 01. O quadro abaixo contém informações retiradas do National Center for Biotechnology Information (NCBI) acerca do genoma de organismos procarióticos. Com base nos conhecidos de Biologia Molecular complete o quadro e responda as perguntas a seguir: Organismo Model o RefSeq Tamanho (Mb) GC% Proteína rRNA tRNA Outro RNA Gene Escherichia coli Chr NC_000913.3 4,64 50,8 4.285 22 86 79 4.609 Mycoplasma genitalium Chr NC_000908.2 0.58 31.7 511 3 36 3 563 Halobacterium salinarum Chr NZ_CP03863 1.1 2.18 67.1 2,224 3 48 2 2,323 Thermus aquaticus Chr NZ_CP01082 2.1 2.16 68.1 2,212 6 49 4 2,341 02. Responder os seguintes itens: a) Faça um breve comentário sobre os hábitats em que vivem os organismos pesquisados (você pode encontrar essas informações no site do NCBI, outros sites de internet e/ou livros de Microbiologia). Resposta: Escherichia coli - É encontrada no intestino grosso de vertebrados, principalmente nos seres humanos, mas também podem ser encontradas nos andares de hospitais e estabelecimentos de cuidados de longo prazo. Faz parte da flora intestinal comensal, trazendo benefícios ao homem, pois ajuda na produção de algumas vitaminas, além de participar da digestão de alimentos, indigeríveis sem sua presença. Todavia quando encontrada fora do intestino, ela pode causar diversos problemas de saúde como por exemplo, infecções no trato urinário. Mycoplasma genitalium - Encontrado em regiões urogenitais e retais, além de não habitualmente no trato respiratório. Geralmente se hospedam intracelularmente e já foram visualizados dentro de vacúolos próximos ao núcleo e no citoplasma de células de fígado de macacos (UENO, 2008). Mais comum no trato urogenital de homens, no entanto, já foi observado aderido nas células epiteliais das trompas de falópios de mulheres. Halobacterium salinarum – Pode ser encontrado naturalmente em ambientes com elevadas concentrações de sal aproximadamente 4,5 M, ou seja, 10 vezes mais a concentração de sal do mar, tendo como exemplo salinas e lagos da cor púrpura. Possuem vesículas que possibilitam uma flutuação, favorecendo a sobrevivência desses organismos nesses ambientes. Thermus aquaticus – Pode ser encontrado em fontes termais naturais, como as fontes presentes no Parque Nacional de Yellowstone e na Califórnia, aberturas hidrotermais, além de poderem serem encontrados em fontes térmicas feita pelo homem, como a água quente da torneira e águas climatizadas industrializadas. Prosperam em temperaturas de aproximadamente 80 ºC e já foram encontradas em águas quase no ponto de ebulição. b) Indique os organismos que possuem o maior e o menor genoma. Maior: Escherichia coli com cerca de 4,640.000 pares de bases, ou 4,64 Megabases (Mb) Menor: Mycoplasma genitalium com cerca de 582.000 pares de base, ou 0,58 Megabases (Mb) c) Indique os organismos que possuem o maior e o menor número de genes. Maior: Escherichia coli com 4.609 genes Menor: Mycoplasma genitalium com 563 genes d) Indique os organismos que possuem o maior e o menor número de proteínas. Maior: Escherichia coli com 4.285 proteínas Menor: Mycoplasma genitalium com 511 proteínas e) Baseado nas suas respostas acima, elabore uma hipótese que relacione o tamanho do genoma, o número de genes e proteínas com os modos de vida dos organismos que possuem maior e menor genoma, número de genes e proteínas. Resposta: No caso da E. coli, tais características podem estar relacionada ao habitat, pois apesar de geralmente estarem relacionadas a um hospedeiro, elas também são de vida livre, necessitando assim de um genoma, genes e proteoma mais elaborados que permitam sua sobrevivência fora de um hospedeiro, diferente do mycoplasma genitalium que é um parasita obrigatório que por se aproveitar do seu hospedeiro, não necessita de um proteoma, genes e genomas tão elaborados, fazendo que assim eles tenham somente o mínimo necessário. f) Quais organismos possuem maior porcentagem de GC em seus genomas? Como essa característica pode estar relacionada aos hábitats desses organismos? Explique corretamente. Resposta: Maiores: Thermus aquaticus com %GC- 68.1 e Halobacterium salinarum com 67.1 Em T. aquaticus, podemos interpretar a relação do teor de guanina-citosina e seu habitat como uma resposta da seleção natural, evidenciando um mecanismo de sobrevivência para organismos que vivem em altas temperaturas, pois estas, tendem a desestabilizar as ligações do material genético. As ligações guanina-citosina, diferente das ligações timina-adenina que formam duas pontes de hidrogênio, formam três pontes de hidrogênios, ou seja, formam ligações mais fortes e mais difíceis de desestabilizar. É por este motivo, que mesmo em um ambiente tão adverso, como em altas temperaturas, o alto teor GC desses organismos permite a sobrevivência desses indivíduos, pois eleva relativamente a temperatura de fusão. Falando de Halobacterium salinarum, uma espécie extremamente halófila, segundo o NCBI, estudos sugerem que o alto teor de GC (acima de 60%) é uma característica comum de halófilos extremos, possivelmente para evitar a formação de dímeros de timidina induzida por UV e possível acúmulo de mutações. Referências E. coli TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. Porto Alegre: ARTMED, 2012. 934 p https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK564298/ M. genitalium https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-25112008- 134339/publico/PriscillaMegumiUeno_Doutorado.pdf Mycoplasma genitalium - an up-date (researchgate.net) Halobacterium salinarum UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO (usp.br) Assinatura molecular da adaptação hipersalina: insights do genoma e composição proteomas de procariotes halófilos (nih.gov) Thermus aquaticus https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC249935/ https://www.clentlifescience.co.uk/thermus-aquaticus-some-like-it-hot/ Bom estudo! https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK564298/ https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-25112008-134339/publico/PriscillaMegumiUeno_Doutorado.pdf https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-25112008-134339/publico/PriscillaMegumiUeno_Doutorado.pdf https://www.researchgate.net/profile/David-Taylor-Robinson/publication/11500676_Mycoplasma_genitalium_-_An_up-date/links/57345e6408ae298602de8834/Mycoplasma-genitalium-An-up-date.pdf https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/95/95131/tde-27102016-151254/publico/TeseMarcosAbraaoFinal.pdf https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2643941/ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2643941/ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC249935/ https://www.clentlifescience.co.uk/thermus-aquaticus-some-like-it-hot/
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