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Liliane Gomes 1 1) Como ocorrem a diferenciação e determinação sexual de animais domésticos? Quais estruturas embrionárias darão origem aos aparelhos reprodutivos de fêmeas e machos? A diferenciação e determinação sexual ocorre ainda na formação do embrião no útero, onde as gônadas são determinadas sexualmente em testículos ou ovários, e diferenciadas externamente em vulva (e todas suas estruturas anatômicas) e pênis (e todas suas estruturas anatômicas), nas primeiras semanas de sua vida intrauterina. A diferenciação das genitálias externa e interna no sexo masculino é um processo dependente da produção de hormônios sexuais pelo testículo, enquanto, que no sexo feminino esse processo independe dos hormônios ovarianos. Portanto a diferenciação sexual é gônada-dependente apenas nos homens. Ainda não totalmente estabelecido, mas no macho, mas sabe-se que há envolvimento de alguns genes – SRY (cromossomo Y – TDF) – desenvolvimento testicular, ocorre de forma ativa. E na fêmea ocorre na ausência dessa região. As células germinativas, primordiais mesenquimais e epiteliais são as estruturas embrionárias. Vale ressaltar que o ducto de Miller e Wolf, darão origem às áreas sexuais e estruturas dos aparelhos reprodutivos de machos e fêmeas. 2) Descreva a regulação neuroendócrina da reprodução nos animais domésticos –macho e fêmea (citar hormônios, locais de produção e atuação dos hormônios). Nas Fêmeas= estímulo no SNC, estimula a produção de GnRH (hormônio liberador de gonadotrofinas) no Hipotálamo que estimula a produção e liberação do FSH (hormônio folículo estimulante) que é responsável pelo crescimento e desenvolvimento dos folículos ovarianos para sintetizar o estradiol. O hipotálamo também estimula a produção e liberação de LH (hormônio luteinizante) que atua na maturação dos folículos preparando-os para ovulação e age também na luteinização, quando fecundado virando o corpo lúteo e produzindo a progesterona (para manutenção da gestação, preparação do útero para receber o embrião e inibir o GnRH).Caso não haja fertilização do ovócito, o endométrio do útero irá sintetizar o hormônio Prostaglandina PGF-2α que dará início à regressão/lise do corpo lúteo, diminuição da progesterona e desbloqueio da produção de GnRH – retorno aos eventos. Nos Machos= ocorre estímulo no hipotálamo que faz a liberação do GnRH, que por sua vez estimula produção de FSH e LH na Adenohipófise. O FSH vai atuar nas células de Sertoli para produção da espermatogênese e promovendo o crescimento dos túbulos seminíferos. O LH vai atuar nas células de Leydig para produção de testosterona. A testosterona atua na produção de espermatozoides, diferenciação e maturação dos órgãos, dando as características masculinas. 3) Qual é a natureza dos principais hormônios que participam do controle neuroendócrino da reprodução? Os hormônios são de natureza lipídica/esteroidogenicos (testosterona, E2, P4), proteica (inibina, GnRH), glicoproteicos (FSH, LH), eicosanôides que deriva dos ácidos graxos da membrana plasmática (prostaglandina) 4) Defina os seguintes termos relacionados à Reprodução Animal: ❖ Oogônia; ❖ Ovócito/oócito; ❖ Folículos primordiais; ❖ Folículos primários, secundários e terciários; ❖ Folículos de Graaf; Liliane Gomes 2 ❖ Ovulação; ❖ Corpo hemorrágico, corpo lúteo e corpo albicans; ❖ Ciclo estral; ❖ Proestro (Pré-estro), Estro, Metaestro (Pós-estro), Diestro; ❖ FSH, LH, Estrógeno, Inibina, Progesterona, Prostaglandina; ❖ Oogônias= são células germinativas femininas diploides (2N), que são encontrados no ovário, crescem e são morfologicamente modificadas e dão origem aos oócitos. Ovócito/oócito= passou por divisão celular da oogônia e tem se metade do material genético/cromossomos, para se juntar com a metade do material genético do macho e ocorrer a fecundação. Folículos primordiais= Os folículos primordiais (formados durante a vida fetal) consiste em um oócito primário envolvido por uma única camada de células foliculares achatadas (granulosa), sendo que a maior parte desses folículos se localiza na cortical do ovário, próximo à túnica albugínea. Folículos primários, secundários e terciários= Inicialmente, o ovócito primário está envolvido por uma única camada de células epiteliais achatadas no folículo primordial - depois por uma camada de células cubóides ou colunares no folículo primário com espessamento das células da granulosa (mostrando seu desenvolvimento), a seguir por um epitélio estratificado no folículo secundário (formando 2-3 camadas de celulas da granulosa com a zona pelúcida) e, finalmente, por células que delimitam uma cavidade cheia de líquido (o antro) no folículo terciário ou vesicular e produz estrogênio. Folículos de Graaf= é o folículo maduro (alcançou o máximo de seu desenvolvimento, ou seja, pré-ovulatório), começa a expressar em sua superfície receptores de LH para sofrer ovulação pelo pico de LH. Ovulação= é o processo (após o pico de LH) em que o ovócito é liberado para a tuba uterina, permanecendo ali, para ser fecundado. Corpo hemorrágico, corpo lúteo e corpo albicans= o corpo hemorrágico é uma estrutura temporária formada imediatamente após a ovulação do folículo ovariano, que colapsa e é preenchida com sangue que coagula rapidamente, posteriormente pela luteinização das células que ficaram e da origem ao Corpo lúteo que tem função de liberar progesterona, se houver gestação é transformado em corpo gravídico para manter a gestação, se não houver gestação o útero produz prostaglandina que causa lise no corpo lúteo, perdendo sua função e deixando uma cicatriz branca que é chamada de corpo albicans. Ciclo estral= são várias alterações hormonais e comportamentais que acontecem em um determinado período de tempo, que se repete em torno de 21 dias, variando de 18-24 dias. Acontece recrutamento, seleção, dominância, crescimento e maturação de um ou mais folículos, ovulação e período em que o corpo lúteo estará ativo. A fêmea apresenta, ao longo do ciclo, alterações comportamentais que cursam com aceitação de monta (Fase estrogênica - Estro) e fases de não receptividade ao macho (Fases Progesterônicas - Metaestro e Diestro). Proestro (Pré-estro), Estro, Metaestro (Pós-estro), Diestro= ROESTRO: tem início do crescimento dos folículos, à medida que vão crescendo há aumento gradativo na produção do estrógeno, no qual a fêmea fica mais inquieta, tem vocalização, mais micções, ou seja, preparando-a para fase de estro. ESTRO: é quando todos os sinais do proestro estão exacerbados e a fêmea aceita a monta. Todas as espécies domésticas ovulam durante o estro, com exceção da vaca. METAESTRO: a fêmea não aceita mais a monta, diminuição da produção de estrógeno e aumento da produção de progesterona (pelo corpo lúteo), ou seja, é a fase intermediaria do corpo lúteo em que ele está no início do seu desenvolvimento e no diestro ele estará maduro com maior atividade luteínica. DIESTRO: Inicia quando o corpo lúteo está formado e se mantém em pleno funcionamento. · Caracterizado pelo aumento da concentração de P 4 até o 12° dia do ciclo quando então estabiliza e mantém-se até o 17° dia do ciclo. A partir daí há declínio brusco por ação da PGF 2 alfa. · Com relação ao estrogênio observam-se baixos níveis durante o diestro e isto pode ser justificado pelo fato dos folículos antrais não apresentarem o sistema aromatase ativado. FSH, LH, Estrógeno, Inibina, Progesterona, Prostaglandina= A inibina é uma proteína (hormônio) produzida pelos testículos no homem e pelos folículos ovarianos na mulher, cuja função principal é a inibição da produção de Hormônio folículo-estimulante (FSH) pela hipófise. A progesterona (P4), responsável pela manutenção da gestação, e modula o sistema imune para que o embrião não seja reconhecido como corpo estranho e cause aborto. Já, a prostaglandina é produzida no endométrio e está envolvidacom a regressão do CL. A prostaglandina é um hormônio que faz lise do corpo lúteo e ajuda no parto fazendo feedback positivo e ajuda na contração uterina junto com a ocitocina na hora do parto, é também responsável por contração leves para asserção dos espermatozoides. Liliane Gomes 3 LH= hormônio luteinizante. O estrógeno aumenta a irrigação sanguínea para se houver contaminação na ejaculação na monta natural, chegar mais células de defesa para combater os patógenos. 5) Em termos gerais, quais órgãos compõem o aparelho reprodutivo das fêmeas domésticas? Quais as principais estruturas e funções de cada um? Sistema reprodutor feminino são: ovários, ovidutos, cervix útero, vagina e vulva. Ovários= são estruturas que apresentam uma forma de amêndoa, uva ou feijão e estão sustentados em sua posição por meio de ligamentos. São as gônadas femininas responsável pela formação do ovulo. Atuam também como glândula endócrina, produzindo os hormônios esteróides estradiol e progesterona, após a ovulação produz o corpo hemorrágico, lúteo e albicans. OVIDUTOS= túbulos que se estendem dos ovários aos cornos uterinos, recebe o óvulo por ocasião da ovulação e os espermatozoides, sendo também o local da fecundação com as primeiras divisões celulares do embrião. UTERO= Composto de um corpo e dois cornos uterinos e abriga o embrião ou feto durante a gestação, recebe os espermas e ajuda por contração a expulsão do feto no momento do parto. CERVIX= Previne a passagem de microrganismos da vagina para o útero com a produção de muco, também é um canal do parto e nas espécies de ejaculação intracervical recebe os espermas. VAGINA= É o órgão copulatório feminino, onde o sêmen é depositado e expulsão do feto. VESTIBULO= É a região onde os tratos reprodutivo e urinário se encontram. Ela se estende da vulva até a abertura da uretra, e expulsão do feto. VULVA= abertura externa do aparelho genital feminino, formada pelos lábios maiores que fecham a entrada dos tratos reprodutivo e urinário. CLITÓRIS= órgão altamente excitatório. 6) Em relação a fisiologia das éguas? Os ovários possuem a fossa da ovulação pela cortical ser mais interna e a medular mais externa, e os folículos só ovulam pela fossa da ovulação. A cervix possui pregas longitudinais (permitindo o toque). Vulva tem a comissura dorsal mais aguda, mais arredondada na parte ventral. A puberdade ocorre em torno de 18-24 meses, corresponde a maturação do eixo Hipotalâmico-Hipofisário gonodal. rre por sazonalidade nas épocas mais luminosas devido a diminuição da melatonina que desbloqueia o eixo reprodutivo, tem o aumento de secreção de GnRH pelo hipotálamo, o GnRH induz a liberação de FSH e LH pela hipófise que agem nas gônadas. Quais são as etapas dos ciclos reprodutivos? Estro, diestro e período de transição. Descreva o ciclo estral= Em geral a média dura 21 dias. Estro= duração média de 5-7 dias e tem apenas 1 a 2 folículos dominantes (teve crescimento maior), ocorre a ovulação e aceitação da monta, tem edema de útero (laranjinha), cervix aberta, vulva edemaciada, flácida, hiperêmico, pode ter corrimento, aumento da micção, folículo macio, abre as pernas, arqueia a cauda e a lombar. A égua ovula de 24-48 h antes do fim do cio. Diestro= não aceita monta, na palpação tem corpo lúteo, a útero tem aumento de tonicidade, cervix fechada, sem edema vulvar, pode ter folículos também. Varia de 14-17 dias na estação de monta, tem presença do corpo lúteo dentro do ovário pela ação do LH e pelo rompimento do folículo. O CL produz a progesterona para preparar o útero para o embrião, se não tiver embrião a PGF2a destrói o CL. Período de transição pode ser mais prolongado na época de seca. Em que momento ocorre a ovulação? Ocorre no estro Em que momento seria interessante realizar a monta natural ou a inseminação artificial? No 3º ou 4º dia do estro. Como ocorre o reconhecimento materno da gestação e o que acontece a partir deste evento? Movimentação do embrião no útero Qual é o período de gestação? O período de gestação dura mais ou menos 330 dias Quando e como realizar a sexagem fetal? corre por volta de 59 a 68 dias pelo tubérculo genital. Através da coleta de sangue para identificação do material genético do embrião ou ultrassonografia abdominal para visualizar o tubérculo genital ou as genitálias. Liliane Gomes 4 Quais são os sinais de proximidade do parto? Possui sinais de inquietação, úbere cheio, afasta dos demais animais, nota-se dilatação vulvar, saída do tampão mucoso cervical, preparação do ninho. 7) Em relação a fisiologia das VACAS a) Os ovários das vacas, tem o parênquima que é dividido em região cortical (cresce folículos e corpo lúteo), e região medular. A cervix tem possui anéis (2-5 anéis) fibrosos transversais fazendo com que seja mais fechada, para proteção e é bem rígido, algumas cérvix são tortas parecendo em L e dificulta a inseminação. A vulva tem a comissura caudal mais aguda e a comissura ventral mais arredondada, possui comissura vulvar e fossa clitoriana na vulva. Corpo lúteo é mais difícil identificar em zebuínos. O aparelho reprodutivo se encontra na parte mais hipogástrica, ou seja, anterior/próximo as asas do íleo, o que dificulta a palpação. b) Depende muito da raça, mas pode a média é de 15 meses (Zebuínos 24 meses - Taurinas 8-10 meses). A regulação da reprodução ocorre pela nutrição (animal tem que estar bem nutrido para a energia que sobrar ir para parte reprodutiva), condição corporal (suprir as necessidades da mãe e do feto, quando em bons scores), sanidade (ambiência adequada, livre de doenças e protocolo vacinal), lactação (entra na parte de boa nutrição e bom manejo reprodutivo), estresse térmico (entra no manejo ambiental), e problemas técnicos. c) Proestro= Essa fase é caracterizada por manifestações comportamentais que, normalmente, passam despercebidas ao homem, no entanto, são perceptíveis ao touro ou rufião. Nesse período, a fêmea monta as companheiras, mas não se deixa monta.Estro= O estro, também conhecido por cio ou calores, é o período em que uma fêmea aceita a monta por outro animal, seja ele um touro, rufião ou mesmo uma outra fêmea. A duração do estro varia de 10 a 30 horas, dependendo, entre outros fatores, da raça, idade (novilhas tendem a ter o estro mais curto), condições sanitárias, temperatura ambiente e manejo. Inquietação e nervosismo, com movimentação e mugidos frequentes. Sinais clínicos do estro são cauda erguida e micção freqüente. Redução do apetite e da produção de leite. Vulva edemaciada e brilhante, com liberação de muco vaginal. Agrupamento em torno do rufião ou do touro. Aceita a monta (principal sinal). Esses sinais, exceto a aceitação da monta, estão também presentes no proestro e diminuem à medida que o final do estro se aproxima.Metaestro e Diestro= No metaestro, a fêmea já não aceita a monta, porém, é nesse período que ocorre a ovulação nos bovinos. Após o metaestro, a fêmea entra em inatividade sexual ou diestro, que dura aproximadamente 14 dias. No final dessa fase, caso não haja gestação, o ovário começa a sofrer influência hormonal, ocorrendo a regressão do corpo lúteo, e dando início a um novo ciclo estral. Caso tenha ocorrido fertilização, a fêmea torna-se gestante. d) Se a fêmea ovular a noite o ideal é fazer a inseminação ou monta na manhã do dia seguinte, se ovular de manhã o ideal é fazer o procedimento a noite, 6-12 horas após a ovulação. e) Pode ser diagnosticado pelo frêmulo da artéria jugular e pela sexagem fetal. f) Acontece o mecanismo contracorrente entre as veias e artérias uterinas e ovarianas tem contatos, o embrião produz o interferon tall que é responsável pelo reconhecimento materno da gestação de 12-15 dias. Após isso ocorre a fixação do embrião no útero para seu desenvolvimento. g) A gestação em vacas leva entre 280 e 290 dias, dependendo da raça e do bezerroque será gerado. Quando e como realizar a sexagem fetal? Realizar 50 – 60 dias de gestação. É feito de 3 formas: 1- Colher o sangue da mãe e achar o material genético do embrião pelo PCR (exame caro) 2- Ultrassonografia da barriga da mãe pelo tubérculo genital em torno de 59-68 dias de gestação (fêmeas da origem a vulva e clitóris fica ventral a cauda e no macho ao pênis e prepúcio localizado caudal ao cordão umbilical) 3- Ou pelas gônadas e genitália externa do embrião em torno dos 110 – 150 dias de gestação para visualizar os testículos ou ovários do feto (vantagem= crescimento das gônadas em 3 vezes mais rápidos que a da mãe). Pode ter sobreposição dos membros e dificultar a visualização devido ao tamanho do feto. Quais são os sinais de proximidade do parto? 2-3 semanas pré-parto há aumento do úbere. 2-3 dias antes do parto os tetos ficam bem cheios e há relaxamento dos ligamentos da pelve e cauda. Há liberação de um muco viscoso da cérvix, a vulva fica edemaciada, há produção e liberação de colostro. Estágio 1 o animal fica agitado, inquieto, se afasta, desconforto abdominal (2-6 horas). Estágio 2 há rompimento alantocório e âmnion (lubrificação) e insinuação e expulsão do feto. Estágio 3 vai do nascimento até expulsão dos restos placentários (30 minutos a 12 horas). 8) PORCAS Liliane Gomes 5 Quais são as particularidades do aparelho reprodutivo (ovário, cérvix..)? O vestíbulo da vagina e a cervix são mais alongadas e bastante espiraladas, os cornos uterinos são bastante grandes e pregueados, os ovários possuem formato de cacho de uva e podem ser ovulados vários óvulos de uma vez só o que proporciona vários filhotes diferentes, e a parte cortical é situada na parte mais externa e a medular mais interna, assim como na vaca. Quando ocorre a puberdade? Como ocorre a regulação da reprodução? A puberdade está intimamente ligado ao peso vivo e idade, pode acontecer entre 6-7 meses de idade. Indução da puberdade – apresentar cachaço todos os dias, alojá-lo em local próximo. Fêmea muito nova – ausência de respostas, ↓ leitegada e ↓ habilidade materna; Utilizar um cachaço dócil, com boa libido, não muito pesado; Realizar MN ou IA depois do 2º ou 3º cio. Descreva o ciclo estral. Como a porca se apresenta durante as fases de Proestro, Estro, Metaestro e Diestro (comportamento)? Proestro= Crescimento e maturação dos FOLs (FSH); Início produção E2; - Porca com alterações de comportamento; - Edema e hiperemia de vulva; - Presença de secreção vulvar com consistência de muco aquoso; - Nervosismo, redução de apetite; - Monta em outras porcas, mas não aceita a monta; - Procura proximidade ao macho; - Duração: 2-4 dias. Estro= ↑ E2 - ↑ GnRH - ↑ LH - Manifestações de estro; - Imobilidade e postura típica na presença do macho (membros posteriores afastados, cabeça baixa, movimento das orelhas), aceitação do salto e cópula (reflexo de tolerância ao macho – RTM); - Permanece parada quando o técnico pressiona seu lombo e flancos (reflexo de tolerância ao homem – RTH) – manifesta-se de 10-12 horas após inicio do cio e dura cerca de 24-36 horas. Metaestro= Início da produção de P4 e maturação dos CLs ; - Duração: 2 dias. Declínio de todos os sinais observados anteriormente; - Fêmea recupera o apetite e atitudes normais; - Não tolera mais a monta efetuada pelo técnico ou cachaço; - Duração: 2 dias. Diestro= - É a fase mais longa do ciclo estral: 14 dias; - Plena produção de P4. Fêmea não aceita monta de outras fêmeas, cachaço ou técnico; - CLs maturados e em plena produção de progesterona – gestação. Em que momento ocorre a ovulação? Estro. Em que momento seria interessante realizar a monta natural ou a inseminação artificial? 10-12 horas após o início dos sinais clínicos do estro. Como ocorre o reconhecimento materno da gestação e o que acontece a partir deste evento? O estrógeno produzido pelo feto é responsável pelo reconhecimento materno da gestação. Necessários, no mínimo, 4 embriões para que se estabeleça a gestação. Qual é o período de gestação? Duração média de 114 dias. Quais são os sinais de proximidade do parto? Inquietação, vocalização, diminui o apetite, mamas ficam repletas de leite, sai o tampão cervical etc. Quais as recomendações para as fêmeas gestantes dentro da granja? Liliane Gomes 6 Manejo pré-parto deve ser iniciado de 5 a 7 dias antes, com transferência das fêmeas para o galpão de maternidade (em grupos, sala devidamente desinfectada, com calma), assistência técnica para identificação e resolução de distocias, além de assistência aos leitões nascidos. Colocar os leitões dentro de casinhas com luminosidade para esquentar e fazer um protocolo de suplemento e desgaste de dente para mamar sem machucar a mãe. 9) Cabras e Ovelhas: a) Duas tubas uterinas, ovários, dois cornos do útero, vagina, corpo do útero, cérvix, vestíbulo, vulva e clitóris; tubas uterinas tem de 10 a 16cm, os cornos uterinos de 12 a 15 cm, o corpo do útero de 2 a 3 cm, carúnculas mais de cem dispostas em quatro fileiras,cérvix tema de 3 a 4 anéis, o ultimo projeta na vagina;Elas apresentam Ovários, duas tubas uterinas, dois cornos do útero, corpo do útero, cérvix, vagina, vestíbulo, vulva e clitóris; As tubas uterinas medem de 10 a 16cm, os cornos uterinos de 12 a 15 cm, o corpo do útero de 2 a 3 cm, carúnculas mais de cem dispostas em quatro fileiras, a cérvix apresenta de 3 a 4 anéis, onde o ultimo se projeta na vagina; b) Caprinos entre 6 e 8 meses de idade e ovinos de 7 a 10 meses de idade; c) Anestro sazonal maior seu período fotoperíodo, tem menos produção de melatonina, uma menor liberação de GnRH, os níveis basais de LH e FS. d) Ciclo estral ele varia de acordo com a raça do animal, sua idade e a estação, os ciclos são mais curtos no início da estação de monta, eles são mais longos no fim da estação de monta, onde também estão associados à morte embrionária e persistência do CL, 2-5 ondas foliculares, com uma média de 4 ondas, como também de 1-4 ovulações por ciclo; e) f) Estro nas ovelhas estro o cio é pouco evidenciado, apresenta vulva edemaciada e hiperêmica, elas abanam a cauda, procuram o macho e toca seus testículos com a cabeça, aceitam a monta; Já nas cabras. Estro ficam inquietas, não aceitam a monta de outras fêmeas, ficam abanando constantemente a cauda, apresentam diminuição do apetite, queda na produção de leite, corrimento mucoso na vulva, e por fim aceitação de monta; diestro é o as cabras quanto para as ovelhas, não aceitam a monta do macho mais; ovulação ocorre de 20 a 40 horas após o início do estro, nas ovelhas, e nas cabras horas depois do início do estro; g) É recomendada a monta tanto nas cabras quanto nas ovelhas de 10 a 12 horas após a fêmea for observada na fase do estro, e repetir respeitando de intervalo, já a IA ela deve ser feita entre 12 a 18 horas após a fêmea estar no estro; h) Ovinos a gestação dura cerca de 152 dias, caprinos a gestação dura em média de 150 dias; i) Ofegantes e estressados, cauda e vulva úmidas se movimentam menos dentre outros. 10) Explique de maneira geral, o significado e as aplicações das seguintes biotecnias reprodutivas: 1. Inseminação artificial reprodução assistida onde o sêmen é depositado diretamente na cavidade uterina durante o período fértil. 2.Produção in vitro de embriões É uma técnica de reprodução assistida que consiste na preparação e co-cultivo de gametas em ambiente laboratorial para geração do zigoto, e seu cultivo até o estádio de desenvolvimento embrionário desejado, uma série de procedimentos integrados, que vão desde o manejo reprodutivo das doadoras e receptoras, punção folicular guiada por ultrassom, procedimentos no laboratório até a transferência dos embriões. 3.Transferencia de embriões Processo de remover um ou mais embriões do trato reprodutivo de uma fêmea doadora e transferi-los para uma ou maisfêmeas receptoras 4. Congelação de embriões são preservados a temperaturas abaixo do ponto de congelação da água, tendo como premissa a preservação da composição e da viabilidade das células por tempo indefinido 5. Transferência intrafalopiana de gametas consiste na coleta de óvulos do ovário, que serão transferidos imediatamente à trompa junto com o esperma. 6. Injeção intracitoplasmática introduzir um único espermatozoide o qual este foi selecionado dentro do óvulo e, assim realizar a fecundação, por meio do tratamento de fertilização in vitro 7.Clonagem Está a produção de indivíduos geneticamente iguais. 8. Transgenia organismo o qual recebeu um gene de outro organismo doador, onde esta alteração no seu DNA apresenta características as quais não tinha antes.
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