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ESTUDO DIRIGIDO Disciplina: Biofísica Assunto: Centrifugação 1. O que é sedimentação espontânea? É a separação de misturas heterogêneas através da ação da gravidade. As moléculas mais densas sedimentam naturalmente, sem a necessidade do uso de uma centrífuga. 2. Podemos classificar a sedimentação espontânea como um processo lento ou rápido? Depende do tipo de material a ser sedimentado, mas geralmente é um processo lento. 3. Qual é o princípio da centrifugação? Método realizado para separar, através da centrífuga, misturas heterogêneas com a ação da força centrífuga. 4. Por que o rotor deve ser balanceado antes de utilizar a centrífuga? Pois caso o rotor não seja balanceado, ele tenderá para um lado (o mais pesado), o que pode danificar o equipamento, e obviamente, o experimento não dará certo. 5. Explique como deve ser feito o balanceamento do rotor com os tubos de centrifugação. O número de tubos no porta-tubos deve ser sempre em número par. Para cada tubo com material colocado, deve-se ter seu tubo correspondente, com mesmo peso. Eles devem ser colocados em lados opostos na centrífuga. 6. O que é RPM? Rotações por minuto. 7. O que é RCF? Força centrífuga relativa. 8. Descreva a equação que relaciona RPM e RCF. RCF = 11,18 x r x (RPM/1000)² ou RCF = 1,118 x 10 -5 x r x RPM² 9. Calcule a força g aplicada por uma centrífuga que funciona na velocidade de 7000 rpm. Dado: raio do rotor é de 20 cm. 10956,4 xg 10. Qual a força g aplicada durante a centrifugação de uma amostra na velocidade de rotação de 2500 rpm durante 10 minutos? Dado: raio do rotor é de 150 mm. 1048,125 xg 11. Calcule a RPM que deve ser aplicada em uma centrífuga, cujo rotor tem diâmetro de 36 cm, para que esta exerça uma força centrífuga relativa de 900 x g às amostras. 2114,77 RPM 12. Qual a velocidade de rotação que deve ser selecionada em uma centrífuga, cujo rotor tem raio de 85 mm, para que esta exerça uma força g de 900 x g às amostras? 3077,33 RPM 13. Como são classificadas as centrífugas quanto à velocidade? Elas podem ser de baixa, média e alta velocidade. 14. Quais são os tipos de rotores? Explique cada um deles. Os rotores podem possuir ângulo fixo e ângulo variado. No ângulo fixo, os porta-tubos estão dentro do rotor e estão sempre na posição horizontal. Já no ângulo variado, os porta-tubos estão soltos no rotor, e ficam na vertical enquanto está em repouso, e na centrifugação estão na horizontal. 15. Quais os cuidados básicos devemos ter na utilização de centrífugas? Deve-se balancear a centrífuga; sempre utilizá-la com a tampa fechada; desligar após o uso; não deixar, após o fim dos trabalhos, tubos com água e material na centrífuga; observar os padrões de qualidade.
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