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Cuidados com animais de laboratório: Cuidados com animais de laboratório: Quando foi usado animais no meio científico pela primeira vez: uso de animais na medicina a mais de 2000 A.C. Igreja proíbe o desenvolvimento e o estudo científico. Por volta de 1500, o interesse científico volta ao mundo todo. Todos os grandes avanços históricos dentro da biologia e da medicina fez uso de modelos animais: Primeira medição de pressão foi desenvolvida no início do séc. Xviii; Aperfeiçoamento do estetoscópio em 1816, só foi possível com o uso de animais; Desenvolvimento da vacina antirrábica através da inoculação do vírus por Pasteur na década de 1880; A ciência só evoluiu por causa dos animais O que é um Biotério: lugar especifico para criar animais para experimentos. Sempre com animais específicos em número, idade e sexo adequados Bioterismo: conjunto de técnicas empregadas em um biotério para produzir e manter de forma saudável animais que cumpram as exigências genéticas e sanitárias necessárias para a experimentação Modelo animal: É o animal que melhor responde a um experimento, e possibilita a sua reprodução de maneira que qualquer cientista em qualquer parte do mundo possa obter os mesmos resultados. Fácil manejo; prolificidade (fecundidade); docilidade; pequeno porte. Baixo consumo; alimentar anatomia/fisiologia conhecida; ciclo reprodutivo curto. Ética: ciência que estuda a conduta humana e encontra soluções para seus dilemas através do uso da razão. É a utilização de animais de forma RACIONAL, sempre em busca de um BEM MAIOR, tanto para a humanidade, quanto para o próprio animal, desde que essa utilização não cause sofrimento desnecessário e nem seja cruel com os seres utilizados. Biotérios: Biotérios de criação: instalação onde são mantidas as matrizes reprodutoras. O estado de saúde do animal; sua carga genética; o manuseio do animal; a alimentação; o ambiente; visando Biotérios de manutenção: adaptação do indivíduo ao cativeiro, para animais provenientes da natureza, granjas conhecidas ou mesmo da rua (animais errantes); produção de sangue animal e fornecimento de órgãos. Problemas frequentes: má adaptação; risco de transmissão de zoonoses. Biotério de experimentação: local que possui um controle de odos os fatores que possam interferir nos resultados de uma pesquisa, direta ou indiretamente. Princípio dos 3 Rs: em 1987 (Russel & Burch), definiram o uso humanitário dos animais em experimentação como o princípio dos 3 Rs. São eles: Replacement (substituição) Reduction (redução) Refinement (aprimoramento) Estrutura de um biotério: Sala De Animais: corredor de distribuição (área limpa). Corredor de recolhimento (área suja). Fluxo: sempre unidirecional. (limpa —> suja) Barreiras Sanitárias: são todos os elementos químicos, físicos, de instalações, equipamento e de procedimento utilizados em um biotério. Antissepsia: método no qual se impede a proliferação de microrganismos em tecido vivo com o uso de substância químicas (diminuir a quantidade de microrganismos onde eles existem). Desinfecção ou assepsia: consiste num conjunto de métodos e processos de higienização de determinado ambiente ou superfície, com a finalidade: evitar a contaminação por microrganismos (evitar que microrganismos entrem onde eles não existem). Esterilização: remoção completa, através do uso de meios físicos e químicos, dos microrganismos presentes em uma superfície inanimada. Autoclave: utiliza calor úmido sob pressão para realiza esterilização. Estufa de esterilização: equipamento que utiliza calor seco para realizar esterilização, promovendo a oxidação das proteínas dos microrganismos. Barreiras Sanitárias Químicas: O desinfetante ideal deve ser capaz de destruir odos os microrganismos patogênicos. Requerer tempo limitado de exposição e deve ser eficaz em temperatura ambiente, atóxico para seres humanos e para os animais, não deixar resíduo, e de baixo custo. Macro Ambiente: temperatura; umidade; iluminação; ventilação e filtração de ar; ruídos; gaiolas Micro Ambiente: cama; densidade populacional (animais devem ter postura e movimentação adequada às características da espécie); odores; ração e água. 46% sala de animais e quarentena 14% para circulação 14% depósitos (alimentos, materiais diversos) 11% higienização e esterilização 8% laboratório 7% administração Cobaias: Comportamento: sociais, tímidos, dóceis e raramente mordem ou arranham; assustam-se facilmente; defecam e urinam nos comedouros; derramam alimento na gaiola; gritam de prazer em situações gratificantes; aglomeram-se na realização do manejo; machos brigam por controle do grupo; susceptíveis a estímulos estressantes (animal pode ficar paralisado e até mesmo vir a óbito) Raças de porquinhos da índia de pelo curto Raças de porquinhos da índia de pelo longo Raças de porquinhos da índia sem pelo Reprodução: fêmeas poliéstricas; duração do estro: menos de 12 horas; ciclo está completo em média 16 dias; Acasalamentos monogâmicos ou poligâmicos permanentes; reprodutores são mantidos na colônia até a idade de 24 a 30 meses. Puberdade: entre 55 e 70 dias, porém com alimentação mais rica, cai para 45 a 60 dias; Acasalamento em Biotério: Escolha dos animais; Fêmeas com aprox. 3 meses e machos com aprox. 4 meses; Primeiro parto deve ocorrer antes dos 6 meses; Tempo de gestação (média): 63 dias Filhotes por ninhada = 2 (variando de 1 a 8); Filhotes: recobertos de pelos, olhos abertos e dentição completa ao nascer Sexagem: Contenção cobaias: segura na região torácica e levanta região pélvico Ratos e Camundongos: Características: Vivem de 2 – 3,5 anos. As fêmeas secretam menos odores que os machos. Resistentes a doenças e possuem períodos de atividade e repouso tanto durante o dia quanto à noite (ratos mais noturnos e camundongos são adaptáveis). Os camundongos e ratos constroem seus ninhos em locais escondidos, perto da comida. Eles comem praticamente de tudo, incluindo sementes, grãos e insetos. Comportamento: Não podem ser criados soltos, pois podem fugir facilmente e morrer sem alimento e água. Raramente mordem – isso pode acontecer apenas quando se sentem ameaçados.Tímidos, apesar de seu comportamento social e territorialista. Anatomia: Cauda (maior que o corpo em alguns casos). Sem glândulas sudoríparas. Olhos salientes, brilhantes, pretos, vermelhos ou transparentes; Orelhas pequenas, largas e abertas Reprodução: ciclo estral: 4 a 5 dias; ciclo pode ser afetado por condições ambientais de alojamento: alojadas em gaiolas superpopuladas; sem machos, entram em anestro; expostas a um macho ou a seus feromônios começam a ciclar em 48h). Rato: médio, orelha pequena, pelo ´´normal´´ Ratazana: grande, orelha pequena, pelo feio eriçado, agressivo Camundongo: pequeno, orelha grande, pelo brilhante, cauda pequena Tempo de gestação = 19 a 22 dias Número de filhotes: 8 a 10 ou 5 para camundongos; 8 para ratos, porém existem registros de ninhadas de até 16 filhotes. Filhotes: olhos e orelhas fechados sem pelo (somente pelos tácteis); recobertos de pelos em 1 semana, relhas se abrem a partir do 3o dia; olhos se abrem no 10o dia; no 15o dia começam a se alimentar de sólidos; Sexagem: machos: apresentam a região do ânus distante do pênis. Fêmeas: apresentam a região do ânus próxima a vagina. Contenção: Tipos de colônias: Colônia de fundação ou produtora de matrizes:monogâmicos permanentes; registros precisos (identificação e criação de perfil único). Da origem as linhagens Colônia de expansão: visa aumentar o número de matrizes Colônia de produção: baixo controle de registros (somente data de acasalamento e dados da ninhada); sem animais destinados a reprodução. Hamsters: Características: (Mesocricetus) 2 – 3 anos; corpo compacto; cauda curta; olhos escuros; pele flácida; dóceis, adoram exercício físico. Muitos não aceitam ser mantidos juntos numa mesma gaiola, se tornam agressivos e brigam. Cuidado com os dentes Alimentação: se alimentar de algumas frutas, verduras e legumes tais como: frutas: - banana; - caqui; - maçã; - morango; verduras: - couve-flor; - brócolis; - pepino; - repolho; legumes: - abóbora; - cenoura; - nabo. Reprodução: Fêmeas após parto amamentam filhotes de outras fêmeas. Puberdade: por volta dos 28 dias, com maturidade sexual por volta dos 42 dias. Acasalamento: monogâmico permanente Machos acasalam por volta de 2 meses com fêmeas um pouco mais jovens. obs: fêmeas agressivas Filhotes: olhos e orelhas fechados; orelhas aderidas a cabeça; sem pelo (somente pelos tácteis); orelhas se abrem a partir do 4o- 5o dia; olhos se abrem no 10o dia; Sexagem: Machos: testículos proeminentes. Ânus e pênis Distantes Fêmeas: Ânus e vagina próximos Contenção hamster: Principais doenças: sistema respiratório; sistema digestório; sistema tegumentar; sistema hematopoiético; sistema nervoso central; sistema gênito urinário. Coelhos: Características: Ordem Lagomorpha: Possui hipersensibilidade, o que o torna ideal para testes relacionados a sensibilidade a fármacos e alérgenos. Fácil acesso a vasos marginais através das orelhas. Raças: Gigante de Flandes; Nova Zelândia; Califórnia; holandês Comportamento: 1- 2 anos (natureza); dóceis; territorialistas; fêmeas podem apresentar pseudociese; suscetíveis ao estresse; sensíveis ao calor. Tem que cortar as unhas Anatomia: 5 dígitos em MTs e 4 em MPs. Possuem cauda curta. Alimentação: bolsas guturais Lebres: são maiores, mais rápidas e com orelhas maiores que dos coelhos. Possuem membros pélvicos mais fortes. Lebres tendem a tentar fugir dos predadores, enquanto que os coelhos fogem para as suas tocas quando ameaçados. Cecotrofagia: É a reingestão do bolo alimentar fermentado por mais tempo no ceco do coelho, ou o ato de ingerir os cecotrofos. O material que os coelhos ingerem não são fezes e sim alimento rico em vitaminas do complexo B, vitamina C, vitamina K e aminoácidos. Este material é eliminado pelo ânus na forma de "cachos de uva". Reprodução: fêmea poliéstrica não sazonais; ovulação provocada (fêmea em contato com o macho). Gestação: 30 a 32 dias (14o dia, palpação dos fetos é possível). Filhotes: 6 a 8 láparos (podendo chegar a 15); sem pelos, olhos e orelhas fechados; olhos e orelhas se abrem no 10o dia; alimento sólido 15o dia; Causas de rejeição ou canibalismo: 1o parto, manejo ruim, láparos mortos ou deformados. Sexagem: Contenção: ID e Registros: tatuagens; fichas e livro de registros; Principais doenças: Bacterianas = salmonelose Necrobacilose: ulcerações progressivas Espiroquetose: lesões genitália externa Mastite: firmes, inchadas e de cor azulada. Varíola: perda dos dentes, alterações neurológicas pneumonia causa da morte. Mixomatose: febre, descarga ocular, tumorações nariz, lábio, orelhas e abertura genital, óbito em 2 a 5 dias. Principais doenças fúngicas = Dermatofitose - lesões em pele da cabeça ou orelhas que se estendem pelo corpo; Crostas Primatas não-humanos: Primatas não-humanos: Primatas do velho mundo: algumas espécies possuem cauda, mas ela nunca é preênsil; apesar de escalarem bem árvores, são terrícolas. Primatas do novo mundo: alguns possuem cauda preênsil; porte menor; arborícolas. Nutrição: variam conforme idade. Quando alojados em grupo, observar se indivíduos de menor grau de dominância social está conseguindo se alimentar. Estresse e fatores ambientais afetam necessidades nutricionais. Rações peletizadas. Alimento no mínimo 2 vezes ao dia (parte mais rica em proteínas, gorduras, energia, vitaminas e minerais pela manhã / Frutas, verduras e legumes à tarde). Sex Skin: pele modificada em machos e fêmeas, indicando período para acasalamento (alguns primatas do velho mundo apresentam). Acasalamento sazonal associado a fatores ambientais. Novo mundo: em grupo Velho mundo: criação individual Criação: Seminatural Contenção: nunca subestimar primatas. utilizar sempre luvas, botas e roupas de proteção. a contenção química normalmente se realiza com a utilização de cetamina (anestésico dissociativo de eleição para grandes primatas). Em primatas pequenos, a contenção física com a utilização do puçá pode ser feita para a captura e a imobilização realizada posteriormente. Animais não serão eutanasiados ao final da pesquisa, a menos que procedimento faça parte da pesquisa. Caso eutanásia seja necessária, ser realizada de forma a fazer com que a carcaça possa ser reaproveitada em outros estudos. Cães: Seleção natural, descendente de lobo (canis familiares). Considerações quanto ao local: Boxes individuais ou duplos. Área compatível com tamanho do animal. Altura suficiente para bioterista permanecer em pé. Devem ter área coberta e descoberta. Nutrição: Alimento peletizado, atentando-se para as necessidades de cada animal (faixa etária, características físicas, etc). Alimento preparado no biotério; Raças pequenas primeiro cio por volta dos 6 meses, e em raças grandes pode acontecer por volta de 1 ano. Gestação média de 63 dias Bem-estar em animais de laboratório: CEUA: Comissão de ética no uso de animais. Órgão regulatório de primeira instância, que pode vetar experimentos em desacordo com suas normas e/ou princípios, zelando pela melhoria de vida dos animais utilizados em pesquisas. Importante medidor do nível de bem estar animal são as 5 liberdades: Liberdade de fome e sede ou liberdade nutricional Liberdade de desconforto ou liberdade ambiental Liberdade de dor ou liberdade sanitária Liberdade para expressar comportamento natural ou liberdade comportamental Liberdade de medo e estresse ou liberdade psicológica Enriquecimento ambiental: Pode ser definido com uma alteração no ambiente dos animais em cativeiro, fornecendo-lhes a oportunidade de expressar seus comportamentos naturais. Alimentar: oportunidade de procura e caça de alimentos Sensorial: oferece recursos e situações que atice os cinco sentidos Físico: por meio de objetos simula-se o habitat mais natural e adequado Cognitivo: estimula a capacidade intelectual Social: consiste em interagir com animais da mesma ou de outras espécies Podemos dividir o estresse em: Agudo (algo tem que acontecer); Crônico (sempre estressado) O indivíduo pode reagir: Forma Ativa (revidar); Forma Passiva (guardar) Estresse: Estado. Estressor: Causa Medidores do estresse: Alterações de comportamento: higiene pessoal, apetite, atividades, agressividade, expressão facial, vocalização, aparência, postura, resposta ao manejo Parâmetros fisiológico: temperatura, pulso, respiração, peso - bom indicador de estresse crônico, ritmo cardíaco/pressão arterial, fluxo sanguíneo, estrutura das células sanguíneas Indicadores bioquímicos: corticosteróides, adrenalina e noradrenalina, tiroxina, prolactina, endorfina,glucagon e glicose, insulina, hepáticas Lesões patológicas: ulcerações gástricas, lesões cardiovasculares, alterações músculoesqueléticas etc Sinais clínicos: alteração na pelagem, postura corporal anormal, secreção nos olhos e nariz, aparência da cauda, das orelhas e dos membros, etc Eutanásia: Termo que significa morte sem dor ou sofrimento. Logo, seus principais requisitos são: Serem humanitária (sem dor ou terror); não impressionar ou sensibilizar quem assiste; ter tempo para a perda de consciência; ser fácil, ação rápida e de baixo custo; ser higiênica; não oferecer perigo ao profissional É recomendado: Ser realizada afastada das salas dos animais e por profissional capacitado; necessária avaliação quanto a perda de consciência prévia. Necessário conhecimento prévio do comportamento do animal para avaliar todas as alterações passíveis de ocorrer É realizada: em animais doentes; fora do padrão genético; mutilados após brigas; com defeitos físicos; em fase final de vida reprodutiva; idosos; quando proliferam em excesso Químicos: inalantes: éter, clorofórmio. Agentes farmacológicos não-inalantes: quetamina Descarte de carcaças: ação que necessita de grande senso de responsabilidade, pois, segundo a legislação vigente, toda e qualquer carcaça, contaminada ou não, é considerada resíduo sólido classificada como grupo A. Todos os resíduos assim classificados (“A”) são aqueles que apresentam por definição risco potencial à saúde pública e ao meio ambiente devido a presença de agentes biológicos. Regras gerais para o descarte: toda carcaça deve ser armazenada em sacos plásticos com resistência e capacidade compatíveis ao peso da mesma. Todo saco deve ser identificado de acordo com simbologia internacional Carcaças em sacos devem ser mantidas em câmara fria por no máximo 24h ou em freezers a -18oC; Uso de equipamentos adequados para manuseio (uniformes, luvas, máscaras, calçados, etc) Os sacos devem ser hermeticamente fechados ou transportados em caixas hermeticamente fechadas para evitar o vazamento de resíduos Consciência do risco potencial de contaminação Principais formas de descarte: aterro sanitário; autoclavação; incineração - o melhor método (menos ecológico). Alternativas para o uso de animais em laboratório: No entanto, o uso de métodos alternativos nas etapas preliminares diminui significativamente o uso de seres vivos nas etapas seguintes. Substituição total: é aquela em que a informação necessária pode ser obtida sem o uso de animais de experimentação. Ex - produtos veganos. Substituição direta: é aquela que se utiliza um sistema visando fornecer respostas o mais próximo possível daquele quando usado um modelo anima. exemplo: programas de computador que usam dados já divulgados. Substituição indireta: nela se utiliza um sistema que fornece um resultado, não por ação no mesmo substrato (modelo animal), mas, sim, por dosagem ou reação de algum mediador que produz a resposta no sistema in vivo. Ex – Saliva + Dosagem de cortisol + In vitro = Medidor de estresse. Substituição parcial: É aquela em que se substitui, parcialmente, a utilização de animais. Por exemplo: técnicas que utilizam cultura de células, órgãos isolados ou uso de preparações subcelulares (receptores isolados). Sistemas in vitro: Substituição do uso de animais baseada na cultura de células. Animais não convencionais roedores silvestres: desafios e dificuldade; obtenção das matrizes; quarentena. Sistemas computacionais expert systems: são sistemas técnicos para predição de toxicidade.
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