GENÉTICA FORENSE7

Prévia do material em texto

PERÍCIA FORENSE - GENÉTICA FORENSE
7a aula
		
	 
	Lupa
	 
	 
	 
	Sobre a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), fazemos as seguintes declarações:
I - Possibilita a multiplicação (amplificação) de pedaços (fragmentos) específicos DNA, usando uma enzima específica denominada DNA polimerase;
II - A enzima específica denominada DNA polimerase participa da duplicação do material genético (DNA) nas células;
III - Revolucionou a Biologia Molecular ao permitir que o DNA (ácido desoxirribonucleico), presente em pequenas quantidades nas amostras biológicas encontradas em locais de crime, fosse multiplicado (amplificado) em milhares de cópias, com a finalidade de realizar análises mais detalhadas nesse material.
Podemos afirmar que:
		
	 
	Todas as assertivas estão corretas.
	
	Somente as assertivas II e III estão corretas.
	
	Somente as assertivas I e III estão corretas.
	
	Somente as assertivas I e II estão corretas.
	
	Todas as assertivas estão erradas.
	
	Só é possível amplificar o DNA em laboratório pela obtenção de uma enzima específica e pela utilização de oligonucleotídeos iniciadores sintéticos. Como é chamada a enzima e os iniciadores?
		
	
	RNA polimerase e primers 
	 
	DNA polimerase e primers
	
	Helicase e primers
	
	DNA polimerase e sonda
	
	Não há uma opção correta.
	
	Durante o preparo do tampão MIX para a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é fundamental que seja incorporado Cloreto de Magnésio (MgCl2), pois nesse caso a presença de Magnésio a possui função de: 
		
	
	transportar os nucleotideos correspondentes até a fita de DNA molde.
	 
	cofator da enzima Taq polimerase
	
	impedir que a Taq polimerase seja ativada antes da temperatura ideal
	
	aumentar a velocidade de reação da enzima Taq polimerase
	
	interromper a função enzimática quando o numero mínimo de cópias for alcançado
	
	Para que a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) possa ocorrer normalmente, é necessária a preparação correta do tampão MIX, que deve conter, obrigatoriamente, os componentes representados na opção a seguir:
		
	
	Taq polimerase + MgCl2 + DNA + tampão
	 
	Taq polimerase + Iniciadores + MgCl2 + DNA + tampão + dNTPs
	
	Taq polimerase + dNTPs + DNA + MgCl2 + tampão
	
	Taq polimerase + Iniciadores + DNA + tampão
	
	Taq polimerase + dNTP + DNA
	
	Apesar de revolucionar o conceito de identificação de amostras de DNA, baseado na replicação in vitro, o início da técnica PCR na década de 80 apresentava um fator limitante, e muitas vezes trabalhoso, para a sua execução, pois tratava-se da:
		
	
	um unico par de iniciadores (primers) por ciclo de reação
	 
	necessidade de reposição da enzima DNA polimerase a cada ciclo de reação
	
	uma reação relativamente longa promovendo a desnaturação dos componentes
	
	não dissociação das proteínas histonas ao DNA 
	
	presença de oligonucleotideos iniciadores (primers) inespecíficos
	
	Uma variação da técnica PCR (Polymerase Chain Reaction) é a PCR Nested, mais sensível que a PCR convencional, pois a sua principal característica consiste em realizar:
		
	 
	dois ciclos de amplificação, sendo o ultimo ciclo contendo dois pares de primers (iniciadores) internos
	
	um ciclo de amplificação contendo quatro pares de primers (iniciadores)
	
	um ciclo de amplificação contendo dois primers internos
	
	um ciclo de amplificação contendo dois pares de primers (iniciadores) externos
	
	dois ciclos de amplificação, sendo o ultimo ciclo com dois pares de primers (iniciadores) externos