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Aula 3: Gêneros Brucella e Mycobacterium 1 🧫 Aula 3: Gêneros Brucella e Mycobacterium Histórico Tuberculose como causa de morte em múmias egípcias há 3.000 anos Presença de BAAR (bacilos álcool-ácido resistentes) em múmias no Peru datadas de 700 d.C. Praga branca: principal causa de morte na Europa e EUA, século 19 1873, Gerhad Hansen, agente da hanseníase (Bíblia) 1882, Robert Koch, agente da tuberculose Tuberculose: melhores condições sanitária, alimentação e nutrição 2019: 1,4 milhão de mortes 1906-1920, Instituto Pasteur Albert León Charles Calmette e Jean Marie Camille Guérin M. bovis atenuado - bacilo (do M. bovis atenuado) de Calmette e Guérin (BCG) → tuberculose Introdução - Mycobacterium Ordem Actinomycetales Família Mycobacteriaceae Gênero Mycobacterium Complexo M. tuberculosis M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. canettii, M. caprae, M. microti, M. pinnipedii Complexo M. auvim Aula 3: Gêneros Brucella e Mycobacterium 2 M. avium subsp. avium, M. avium subsp. paratuberculosis, M. avium subsp. hominissuis e M. intracellulare Complexo micobactérias M. leprae, M. chelonae, M. fortuitum, M. kansasii, M. marinum, M. ulcerans, M. scrofulaceum Micobactérias patogênicas Características gerais - Mycobacterium Bastonetes retos e curtos 0,2 - 0,7um de diâmetro e 1,0- 10um de comprimento Imóveis Não formadores de esporos Sem cápsulas Aeróbios Maioria intracelular Gram positivos Alto teor de lipídios e ácidos micólicos na parede celular → por isso não se coram bem em coloração de gram Hidrofobicidade Resistência a ácidos, desinfetantes, anticorpos e dessecação BAAR → coloração alcool- acido resistente → cora em rosinha → as que não são resistente se coram em azul Sensibilidade a luz solar direta, UV e calor Habitat natural Descargas nasais, fezes, leite, urina, sêmen... Solo, vegetações, água Solo úmido: 1 a 4 anos Fezes secas: 150 dias Classificação das micobactérias Classificação de Runyon Tempo de geração (2 a 20h) → as de 2h são as micobactérias de crescimento rápido; Pigmentação/morfologia Relação Agente-Hospedeiro Aula 3: Gêneros Brucella e Mycobacterium 3 Grupos de Runyon Grupo I: Fotocromogênicas Crescimento lento, pigmento amarelo quando incubado à luzz M. marinum, M. kansassi Grupo II: Escotocromogênicas Crescimento lento, pigmento amarelo-alaranjado M. scrofulaceum, M. xenopi Grupo III: Não cromogênicas e não fotocromogênicas Crescimento lento, não produzem pigmento ou pouco Complexo M. avium Grupo IV: Pigmentação variável Crescimento rápido a 25 ou a 37º C M. fortuitum, M. phiel, M. smegmatis Relação Agente-Hospedeiro Parasita intracelular obrigatório M. leprae, M. lepraemurium Parasita intracelular facultativo M. avium, M. bovis, M. tuberculosis, M. fortuitum, M. marinum, M. ulcerans, M. kansasii, M. intracellulare, M. scrofulaceum Saprofítico M. phlei, M. smegmatis, M. butyricum, M. gordonae Velocidade de crescimento Crescimento lento: mais de 7 dias para formar colônias visíveis Crescimento rápido: colônias m até 7 dias Fatores de virulência Micosídeos Resistência a enzimas, antimicrobianos e desinfetantes Ácidos micólicos Aula 3: Gêneros Brucella e Mycobacterium 4 Ácido-resistência Glicolipídeos Indução de resposta granulomatosa Diagnóstico clínico e laboratorial Anamnese e sinais clínicos Necropsia e coloração direta por Ziehl-Neelsen Descargas nasais Lavagens traqueobronquais Biópsia linfonodos Leite Apenas médicos veterinários credenciados e/ou laboratórios oficiais do mapa Tuberculina Isolamento e identificação Cabines de biossegurança Descontaminação seletiva Centrifugação Condições de crescimento Meios Lowenstein-Jensen e Stonebrinks → geralmente são colocados em tubos (na placa de petri, vai ressecar a placa e perder a amostra) Incubação 37ºC/semanas (patogênicas) 37ºC/dias (saprófitas) 37-43ºC/semanas (complexo M. avium) Identificação Coloração ZN Características de colônia, requerimentos para crescimento Produção de pigmentos e resposta à luz Técnicas moleculares ❗ Cuidado na manipulação de materiais clínicos suspeitos, porque são zoonoses!!! Aula 3: Gêneros Brucella e Mycobacterium 5 Brucella sp 1887, David Bruce Necropsia de baço de militares mortos, costa do Mediterrâneo Micrococcus melitensis → Brucella melitensis 1897, Bernard Bang Feto bovino abortado Bacillus abortus → Brucella abortus Zoonose: importância em saúde pública Animais domésticos (doença de Bang, aborto contagioso, aborto infeccioso): abortos, retenções placentárias Homem (febre ondulante, febre de Malta, febre do Mediterrâneo) Características gerais Cocobastonetes ou bastonetes curtos 0,5-0,7 de diâmetro/ 0,6-15um de comprimento Arranjos individuais, pares, cadeias curtas ou pequenos grupos Sem cápsula Intracelulares facultativos Não formadores de esporos Gram negativas ZNM+ Imóveis Aeróbias Habitat usual Órgãos reprodutivos de machos e fêmeas sexualmente maduros Micro-organismos viáveis em ambiente úmido por muitos meses Cada espécie tende a infectar uma espécie animal Aula 3: Gêneros Brucella e Mycobacterium 6 Diagnóstico laboratorial Esfregaço direto/Gram - ZNM → pode fazer o esfregaço, mas não dá uma resposta definitiva Isolamento e identificação Característica colonial, testes bioquímicos, requerimentos culturais específicos B. abortus, B. melitensis e B. suis Colônias lisas, pequenas, brilhantes, azuladas e translúcidas após incubação por três a cinco dias e se tornam opacas com a idade B. ovis e B. canis Colônias rugosas, secas, amareladas, opacas e friáveis Apenas médicos veterinários credenciados e/ou laboratórios oficiais do mapa !!! Testes sorológicos → baseados na reação antígino-anticorpo Testes de triagem Teste do anel do leite → anel azul e coluna de leite branco: positivo; anel branco e coluna de leite azul: negativo AAT (antígeno acidificado tamponado) → formação de gruminhos (grumos): positivo; sem formação de gruminhos: negativo Testes confirmatórios 2-ME (2 Mercaptoetanol) → Fixação do complemento → botãozinho: positivo;
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