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1. TÍTULO: Identificação de açucares redutores e não redutores pela reação de Reagente de Benedict 2. RESUMO O teste de Benedict consiste na redução de íons cobre presentes no reagente, o qual é reduzido na presença de açucares redutores, formando um precipitado de cor amarela ou vermelha (Cu2O). O açúcar, por sua vez, é oxidado e polimerizado na solução alcalina. Os carboidratos redutores possuem grupos aldeídos ou cetonas livres ou potencialmente livres, sofrendo oxidação em solução alcalina de íons metálicos como o cobre. Os íons cúpricos (Cu++) são reduzidos pela carbonila dos carboidratos a íons cuprosos (Cu+) formando o oxido cuproso, que tem cor vermelho tijolo. 3. OBJETIVO Caracterizar a presença de açúcares, mais precisamente de açúcares redutores, em material biológico. 4. INTRODUÇÃO TEÓRICA Alguns carboidratos possuem um grupamento -OH (hidroxila) livre no carbono 1 de suas moléculas, enquanto outros não. Observa-se que os açúcares que apresentam a hidroxila livre no C-1 são bons agentes redutores. Por esse motivo a extremidade que contém o -OH passa a ser chamada extremidade redutora e o açúcar, de AÇÚCAR REDUTOR. A capacidade que esses compostos apresentam de reduzir íons metálicos em soluções alcalinas é um bom método de identificação desses compostos. Os hidratos de carbono, glicídios ou açúcares, como também são chamados os carboidratos são compostos que, em geral, apresentam fórmula empírica (CH2O)n. São poliidroxialdeídos ou poliidroxicetonas, ou substâncias que, hidrolisadas, liberam estes compostos. Carboidratos com sabor doce, como sacarose, glicose e frutose, comuns na alimentação humana, são chamados açucares (sakcharon, em grego). Os carboidratos são as biomoléculas mais abundantes do planeta Terra. [...] Certos carboidratos (açúcar comum e amido) são a maior base da dieta na maior parte do mundo e a oxidação dos carboidratos é a principal via metabólica fornecedora de energia na maioria das células não-fotossintética. Polímeros insolúveis de carboidratos funcionam tanto como elementos estruturais quanto de proteção nas paredes celulares bacterianas e vegetais e nos tecidos conjuntivos de animais. Outros polímeros de carboidratos agem como lubrificantes das articulações esqueléticas e participam do reconhecimento e coesão entre as células. (LEHNINGER, 2006) A classificação dos carboidratos é feita de acordo com o tamanho que estes assumem. São então classificados como monossacarídeos, oligossacarídeos ou polissacarídeos. Os carboidratos também podem ser encontrados em associação com outras biomoléculas, sejam elas proteínas ou lipídios, que, de uma forma geral, originam os chamados glicoconjugados. O Reagente de Benedict (também chamado de Solução de Benedict ou Teste de Benedict), é um reagente químico de cor azulada, desenvolvido pelo químico americano Stanley Rossiter Benedict, geralmente usado para detectar a presença de açúcares e açúcares redutores, nos quais se incluem glicose, galactose, lactose, maltose e manose. O Reagente de Benedict consiste, basicamente, de uma solução de sulfato cúprico em meio alcalino (com muitos íons OH-); e pode ser preparado através do carbonato de sódio, citrato de sódio e sulfato cúprico. Este reagente, também chamado de gayder, vendido em farmácias de manipulação, é usado geralmente no lugar da solução de Fehling para detectar excesso de açúcar na urina e dectar uma possível diabetes. 5. PARTE EXPERIMENTAL I. MATERIAIS E REAGENTES - Amostras: • Urina; http://pt.wikipedia.org/w/index.php?title=Farm%C3%A1cia_de_manipula%C3%A7%C3%A3o&action=edit&redlink=1 http://pt.wikipedia.org/wiki/Solu%C3%A7%C3%A3o_de_Fehling http://pt.wikipedia.org/wiki/Monossacar%C3%ADdeos http://pt.wikipedia.org/wiki/Urina http://pt.wikipedia.org/wiki/Diabetes • Glicose; • Sacarose; • Lactose; • Mel. - Materiais: • Tubos de ensaio; • Béquer; • Chama de aquecimento; • Estante para tubos de ensaio. 4 II. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Na decorrida prática laboratorial, foi realizada uma experiência na qual se utilizaram seis tubos de ensaio e seis substâncias diferentes, enumeradas de 1 a 5, onde se adicionou 2mL de cada substância em cada tubo. As substâncias eram urina, glicose, sacarose, lactose e mel. Em seguida adicionou-se 2mL de reagente de Benedict em cada tubo e, por último levou-se ao banho-maria por dez minutos para aquecer todas as soluções a uma temperatura próxima a 100°C. 6. RESULTADOS E DISCUSSÃO Finalizados todos os procedimentos de preparação das amostras e aquecimento em banho-maria observaram-se os seguintes resultados: Tabela 1.0 – Comparação das colorações de cada solução antes e depois da homogeneização em banho- maria. Tubos Amostras (2ml) Após 10 min. em banho-maria 1 Urina Tendência entre verde e azul 2 Glicose Laranja 3 Sacarose Tendência entre verde e azul 4 Lactose Marrom 5 Mel Amarelo No dia-a-dia dos laboratórios, em meio a testes e análises, algumas vezes faz-se necessário a identificação de substâncias desconhecidas pra melhores estudos. Para tanto, existem várias técnicas laboratoriais baseadas em reagentes que são utilizados para a identificação dessas substâncias. Alguns carboidratos possuem um grupamento - OH (hidroxila) livre no carbono 1 de suas moléculas, enquanto outros não. Observa-se que os açúcares que apresentam a hidroxila livre no C-1 são bons agentes redutores. Por esse motivo a extremidade que contém o - OH passa a ser chamada extremidade redutora e o açúcar, de açúcar redutor. A capacidade que esses compostos apresentam de reduzir íons metálicos em soluções alcalinas é um bom método de identificação desses compostos. 5 Os carboidratos redutores possuem grupos aldeídos ou cetonas livres ou potencialmente livres, sofrendo oxidação em solução alcalina de íons metálicos como o cobre. Os íons cúpricos (Cu2+) são reduzidos pela carbonila dos carboidratos a íons cuprosos (Cu+) formando o óxido cuproso, que tem cor vermelho tijolo. A glicose, por exemplo, é oxidada a ácido glicurônico, reduzindo íons cúpricos a íons cuprosos. Já a sacarose não sofre oxidação porque possui dois carbonos anoméricos envolvidos na ligação glicosídica. A reação abaixo esquematiza o princípio da prova de Benedict, baseada na redução de íons Cu2+ a Cu+, com formação de um precipitado vermelho ou amarelo: Nessa reação, o aparecimento de um precipitado de coloração vermelho-tijolo indica que os íons Cu2+ do reagente de Benedict foram reduzidos a Cu+, indicando a presença de um açúcar redutor. Dessa forma, em nossas experiências, após colocar as soluções preparadas em banho- maria por 10 minutos, obtiveram-se as seguintes observações nas amostras de glicose, lactose e mel se mostraram positivas para a presença de açucares redutores devido as colorações apresentadas, apenas as amostras de urina e glicose apresentaram o contrário. 6 7. CONCLUSÃO De acordo com o teste do Benedict, verificou-se como uma ferramenta interessante para a identificação de açúcares redutores devido à capacidade destes açúcares de reduzir os íons de cobre advindos do Benedict e formar compostos com cores como vermelho e marrom que são bem distintas do azul claro inicial do reagente. De onde se conclui que a glicose possui poder redutor notável, a sacarose pode conter vestígios de glicose e frutose em sua solução, além destes compostos também poderem ser obtidos a partir da sacarose por hidrólise. 8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS - Teste de Benedict. Disponível em: http://adamogama.blogspot.com.br/2012/07/teste-de- benedict.html . Data de acesso: 17 de setembro de 2016. - Açúcares Redutores no Ensino Superior: Atividades Baseadas na Resolução de Problemas. Disponível em: http://if.ufmt.br/eenci/artigos/Artigo_ID191/v7_n3_a2012.pdf . Data de acesso:17 de setembro de 2016. - MARZZOCO, Anita., TORRES, Bayardo Baptista., Bioquímica Básica, 2ªed., Rio de Janeiro, 1999. http://adamogama.blogspot.com.br/2012/07/teste-de-benedict.html http://adamogama.blogspot.com.br/2012/07/teste-de-benedict.html http://if.ufmt.br/eenci/artigos/Artigo_ID191/v7_n3_a2012.pdf 7 PLANO DE AULA IDENTIFICAÇÃO DE AÇUCARES REDUTORES E NÃO REDUTORES PELA REAÇÃO DE REAGENTE DE BENEDICT Introdução Alguns carboidratos possuem um grupamento -OH (hidroxila) livre no carbono 1 de suas moléculas, enquanto outros não. Observa-se que os açúcares que apresentam a hidroxila livre no C-1 são bons agentes redutores. Por esse motivo a extremidade que contém o -OH passa a ser chamada extremidade redutora e o açúcar, de AÇÚCAR REDUTOR. A capacidade que esses compostos apresentam de reduzir íons metálicos em soluções alcalinas é um bom método de identificação desses compostos. Objetivo: Caracterizar a presença de açúcares, mais precisamente de açúcares redutores, em material biológico. Materiais e Reagentes Amostras: • Urina; • Glicose; • Sacarose; • Lactose; • Mel. - Materiais: • Tubos de ensaio; • Béquer; • Chama de aquecimento; • Estante para tubos de ensaio. 8 Procedimento Técnico - Utilizar seis tubos de ensaio e seis substâncias diferentes, enumeradas de 1 a 5; - Adicionar 2mL de cada substância ( urina, glicose, sacarose, lactose e mel) em cada tubo. - Adicionar 2mL de reagente de Benedict em cada tubo; - Levar ao banho-maria por dez minutos para aquecer todas as soluções a uma temperatura próxima a 100°C. Referência Bibliográfica - Teste de Benedict. Disponível em: http://adamogama.blogspot.com.br/2012/07/teste- de-benedict.html . Data de acesso: 17 de setembro de 2016. - Açúcares Redutores no Ensino Superior: Atividades Baseadas na Resolução de Problemas. Disponível em: http://if.ufmt.br/eenci/artigos/Artigo_ID191/v7_n3_a2012.pdf . Data de acesso: 17 de setembro de 2016. - MARZZOCO, Anita., TORRES, Bayardo Baptista., Bioquímica Básica, 2ªed., Rio de Janeiro, 1999. http://adamogama.blogspot.com.br/2012/07/teste-de-benedict.html http://adamogama.blogspot.com.br/2012/07/teste-de-benedict.html http://if.ufmt.br/eenci/artigos/Artigo_ID191/v7_n3_a2012.pdf
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