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1. TÍTULO: Refratometria – Análise de Alimentos (°BRIX) 2. RESUMO Os carboidratos são macromoléculas bastante importantes na nossa dieta e está presente na maioria dos alimentos. Dentre as propriedades dessa classe de biomoléculas a que mais se destaca é a atividade óptica, onde os açúcares conseguem girar um feixe de luz que passa por eles. Esse fenômeno acontece devido a presença de um carbono assimétrico (ou quiral) na sua estrutura, ao qual faz quatro ligações com grupos distintos e por isso possui uma imagem especular, também conhecida como enantiômero. Uma técnica interessante que pode ser utilizada para identificar o teor de açúcar presente em determinada amostra é a refratometria que se baseia em conhecimentos de refração e reflexão da luz através de um prisma. Esse estudo é mostrado mais detalhadamente no decorrer deste relatório, onde seu principal objetivo é identificar a quantidade de açúcar de alguns produtos industrializados. Foram preparadas soluções em diferentes proporções de açúcar refinado da marca guarani para comparar os valores obtidos no refratômetro. Um sachê de ketchup da marca Áurea também foi testado com solução de lugol e feito uma leitura do teor açúcar no aparelho. Os valores foram tabelados e discutidos com base na composição química dos produtos, nas propriedades ópticas das moléculas constituintes e nas reações envolvidas entre os reagentes de lugol e amido, onde houve uma mudança de coloração. Os métodos escolhidos para a análise tanto qualitativa quanto quantitativa nos levam a compreender e interpretar os fenômenos existentes por traz do que vimos macroscopicamente. 3. OBJETIVO Identificar a porcentagem de açúcar existente em amostras de frutos e alimentos industrializados. 4. INTRODUÇÃO TEÓRICA O estudo da luz, entre os séculos XVII e XIX, trouxe evidências de que sua natureza possui característica ondulatória e de partícula. Seu aspecto ondulatório significa que a mesma se propaga no espaço. Uma onda de luz, ao atingir uma superfície lisa, separa dois meios transparentes (exemplo: ar e vidro) e uma parte dela é refletida enquanto a outra parte é refratada, ou seja, transmitida para outro material (SEARS & ZEMANSKY, 2009). A direção da reflexão ou refração de uma onda de luz pode ser descrita de acordo com o ângulo em que os raios de luz formam com o ponto de incidência da onda que tinge uma determinada superfície. Quando existe apenas um ângulo de reflexão em uma superfície lisa, há uma reflexão especular. Quando os raios atingem uma superfície rugosa e refletem em várias direções, temos uma reflexão difusa (SEARS & ZEMANSKY, 2009). Leis da Reflexão e da Refração e Índice de Refração O índice de refração (n) é uma característica de um material que sofre a incidência de uma luz. Ele nos diz o quanto que a velocidade da luz se propaga no material quando ela é refratada. Quanto maior for o índice de refração de um material, menor será a velocidade de propagação da onda no material (SEARS & ZEMANSKY, 2009, p. 5). A lei da reflexão é resultado de duas observações: 1. O raio incidente, o raio refletido, o raio refratado e a normal (ponto atingido por um raio de luz) à superfície estão todos sobre o mesmo plano. 2. O ângulo de reflexão θr é igual ao ângulo de incidência θa para todos os comprimentos de onda e para qualquer par de materiais. A lei da refração, também chamada de Lei de Snell, nos diz que dois materiais a e b são atingidos for um feixe de luz. A luz passa do material a para o material b e o índice de refração de b é maior do que a (na > nb), portanto a velocidade de onda da luz é menor em b e o raio incidente desvia aproximando-se da normal. Quando o índice de refração de do material b é menor do que o material a, a velocidade da propagação de onda da luz é maior no material b e o raio incidente se desvia afastando-se da normal. Reflexão Interna Total A reflexão interna total obedece à lei de Snell, quando um raio de luz, proveniente de um material A, incide sobre a interface que o separa de um segundo material B onde seu índice de refração é menor do que o primeiro (SEARS & ZEMANSKY, 2009). O raio incidente forma um ângulo θa com a normal, enquanto a parte do raio que foi refratada forma um ângulo θb, maior do que θa, afastando-se da normal até chegar a 90º. O ângulo de incidência em que o raio refratado emerge tangenciando a superfície denomina-se ângulo crítico - θcrít (SEARS & ZEMANSKY, 2009, p. 10). Refratômetro O refratômetro é um aparelho utilizado para medições rápidas e precisas do conteúdo de açúcar de diversos materiais (INSTRUÇÃO DE USO). Seu principio de funcionamento é baseado no ângulo crítico para reflexão total da luz, que é um ângulo de incidência da luz a partir do qual não há mais refração quando a luz passa de um material mais refringente para outro menos refringente (HINRICHS, 2014, p. 81). O termo refringente quer dizer o quanto o índice de refração de um material é maior do que outro (SÓ FÍSICA). Os principais elementos que fazer parte da composição de um refratômetro são: 1. Prisma 2. Tampa do prisma 3. Parafuso de Calibração 4. Tubo de espelho 5. Ajuste do Foco A base para o funcionamento desse aparelho está no prisma, uma vez que ele possui uma superfície totalmente refletora. Dessa forma, os prismas possuem eficiência de 100%, comparadas a metais que também apresentam superfícies refletoras, na reflexão total da luz e não perdem o brilho com o passar dos anos (SEARS & ZEMANSKY, 2009). O procedimento envolve a colocação de amostra entre ambos os prismas e a sua rotação, até que o raio crítico da luz esteja centrado no X do visor. Se a linha divisória entre os campos claro e escuro estiver colorida, o prisma deve ser girado até que apareça uma linha divisória nítida e sem cores (CECCHI, 2003, p. 106). A linha indica o percentual de açúcar presente na amostra. É importante que o refratômetro seja calibrado com água destilada, pois seu índice de refração, n=1,3330, corresponde a 0ºBRIX a uma temperatura de 20ºC (CECCHI, 2003). 5. PARTE EXPERIMENTAL I. MATERIAIS E REAGENTES ✓ Banana madura; ✓ Banana verde; ✓ Pêra; ✓ Uva; ✓ Maça; ✓ Ameixa; ✓ Mel; ✓ Açúcar mascavo; ✓ Açúcar comum; ✓ Coca-cola; ✓ Xarope; - Materiais: ✓ Refratômetro; ✓ Bastão de vidro; ✓ Béquer de 250 ml; ✓ Água destilada; II. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Para os açucares mascavo e comum preparou-se uma solução a 10% de cada um. Para que pudéssemos retirar a amostra para análise. Os frutos mamão, melancia, goiaba, banana madura, banana verde e maçã, foram cortados em pequenos pedaços para que se pudesse retirar o sumo de cada um. Umedeceu-se um algodão com cada uma das amostras liquidas como o adoçante, o mel a Coca-Cola e a urina para suas respectivas analises no refratômetro. 6. RESULTADOS E DISCUSSÃO Na tabela a seguir estão os resultados obtidos na identificação de açúcar nas amostras utilizadas: Amostra °BRIX Mamão 9 Melancia 6 Goiaba 6 6 Adoçante 23 Banana madura 12 Banana verde 0 Maçã 15 Mel 71 Açúcar mascavo 9 Açúcar comum 10 Coca-Cola 10,5 Suco de caixinha 10 Urina 3 Uma das principais características dos açúcares é a quiralidade em seus átomos de carbono. Uma molécula é quiral quando não é sobreponível a sua imagem especular, chamada de enantiômero. Essa característica fornece aos açúcares uma importante propriedade, a atividade óptica. Quando um feixe de luz plano polarizada atravessa um enantiômero, a molécula é capaz de desviar a luz para uma determinada direção, ou seja, ela sofre uma rotação (SOLOMONS & FRYHLE, 2013). Os enantiômeros ocorrem em pares e desviam a luz plano polarizada com o mesmo valor, porém em direções opostas. Se uma molécula desvia a luz no sentido horário ela é chamada de dextrogira e pode ser identificadapela letra D ou pelo sinal positivo (+), mas se a luz é desviada no sentido anti-horário, a molécula é chamada de levogira, representada pela letra L ou pelo sinal negativo (-) (SOLOMONS & FRYHLE, 2013). A maioria dos açúcares encontrados na natureza são dextrogiros, ou seja, desvia a luz no sentido horário, como a D-Glicose e a D–Frutose. Esses monossacarídeos se unem por meio de uma ligação glicosídica para formar o dissacarídeo (+)-sacarose, conhecido popularmente como açúcar de mesa. A imagem da sacarose é apresentada a seguir. 7 Ao colocar as amostras de solução de açúcar refinado entres os prismas do refratômetro e posiciona-lo em frente de uma fonte de luz, as moléculas de sacarose dissolvidas giram a luz até que o seu raio crítico esteja centrado no X do visor e seja possível visualizar a escala BRIX. Essa escala indica o quanto de açúcar existe em determinada amostra, como pôde ser observado na tabela acima. Dentre os produtos industrializados, o que apresentou um maior valor foi o adoçante. Com relação as frutas, a que possui um maior teor de açúcar é a banana madura, o que se torna contraditório quando analisamos o fruto verde que não apresentou valor algum no refratômetro. O sabor da fruta é a combinação de várias substâncias, como açúcares, ácidos e substâncias voláteis (responsáveis pelo aroma). O fruto só acumula essas substâncias enquanto está preso à planta-mãe. A relação entre os açúcares e a acidez, conhecida como “ratio”, é utilizada como referência de sabor para muitas frutas. Os açúcares traduzem bem a percepção do sabor da fruta pelo consumidor e são fáceis de medir. Por isso, são usados como referência de ponto de colheita e consumo para a maioria das frutas. Na prática, mede-se o conteúdo de sólidos solúveis, que são os compostos dissolvidos no suco da fruta. Como a maior parte dos sólidos solúveis são açúcares, sua medida é referência para o teor de açúcar. A unidade de medida do conteúdo de sólidos solúveis é o grau Brix (º Brix). 1º Brix equivale aproximadamente a 01 grama de sólidos dissolvidos em 100 gramas do produto. Por exemplo: a maçã com 15º Brix possui 15 gramas de sólidos solúveis dissolvidos em 100 gramas do seu suco, ou seja, 15% de concentração de sólidos. Sabendo o teor de sólidos solúveis nas frutas, é possível determinar o tempo exato da colheita, evitando que a colheita seja realizada antes ou depois da maturação do fruto. 8 O teor de sólidos solúveis nas frutas é de grande importância também para o processamento industrial, visto que elevados teores desses constituintes na matéria-prima implicam menor adição de açúcares, menor tempo de evaporação da água, menor gasto de energia e maior rendimento do produto, resultando em maior economia no processamento. 9 7. CONCLUSÃO Os açúcares estão presentes em uma grande variedade de alimentos uma vez que eles são os constituintes básicos das macromoléculas de carboidratos. Sua estereoquímica lhes confere uma importante propriedade, que é a atividade óptica, onde as moléculas de açúcares que possuem um carbono assimétrico conseguem girar a luz. Graças a essa propriedade, é possível identificar o teor de açúcar de amostras em laboratório utilizando como método quantitativo a refratômetro. O refratômetro é o instrumento utilizado para realizar esse tipo de análise e consiste na reflexão total da luz que incide sobre o prisma e a rotação da luz que permite a leitura da quantidade de açúcar em escala BRIX. O método de detecção por refratômetro nessa prática se mostrou eficaz, tornando os resultados ainda mais consistentes em relação à composição dos produtos estudados. 10 8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS - SEARS & ZEMANSKY. Física IV: Ótica e Física Moderna. 12ª ed. São Paulo: Addison Wesley, 2009. - SOLOMONS, T. W. Graham; FRYHLE, Craig B. Química Orgânica 1, 10ª ed. Rio de Janeiro: LTC, 2013. - SOLOMONS, T. W. Graham; FRYHLE, Craig B. Química Orgânica 2, 10ª ed. Rio de Janeiro: LTC, 2013. - LEHNINGER, Albert Lester. Princípios de Bioquímica 3ª ed. São Paulo: SAVIER, 2003. - HINRICHS, Ruth. Técnicas Instrumentais não Destrutivas Aplicadas a Gemas do Rio Grande do Sul. Porto Alegre: IGEO/UFRGS, 2014. - CECCHI, Heloisa Máscia. Fundamentos Teóricos e Práticos em Análises de Alimentos. Campinas, SP: Editora da UNICAMP, 2003. - SANTOS, Adinete Batista dos.; MOURA, Claudia Lúcia de.; CAMARA, Lilian Barbosa. Determinação de Autenticidade dos Méis Vendidos nas Feiras Livres e Comércios Populares. Brazilian Educational Technology: research and learning, v. 2, n.3, p. 135-147 Set/Dez 2011. - REFRATÔMETRO DE MÃO, INSTRUÇÕES DE USO. QUIMIS, Aparelhos Ciêntíficos LTDA. 11 PLANO DE AULA Título: Utilização do Refratométrico para determinar para determinar o índice de glicose em adoçantes e em algumas frutas. Objetivo: Nesta experiência serão observado o índice glicose em certos adoçantes e algumas frutas. Introdução; Brix é uma escala numérica de indíce de refração ( o quanto a luz é desvia em relação ao desvio provocado por água destilada) de uma solução, comumente utilizada para determinar, de forma indireta, a quantidade de compotos solúveis num solução de sacarose, utilizada geralmente para suco de fruta. A quuantidade de compostos solúveis corresponde ao total de todos os compostos dissolvidos em água, començando com açucar, sal, proteínas,ácidos e etc.; em valores de leituras média é a soma de todos eles. Um grau de Brix (1° Bx) é igual a 1g de açúcar por 100g de solução, ou 1% de açúcar. Uma soluição de 25° Bx tem 25g de açúcar de sacarose por 100g de líguido. O instrumento utilizado é o refratômetro, um instrumento óptico utilizado para medir o índice de refração de uma substância translúcida. (wikipedia). 1- Método: Refratométrico. 2- Princípio: Fundamenta-se na leitura dos graus Brix das amostras. 3- Materiais e vidrarias: a) Refratométrico b) Algodão; c) Erlenmeyer ou Bequer de 250 mL; d) Conta gotas; e) Espátulas. 4- Procedimento básico para utiliação do refratômetro. I – Coloque o líquido sob investigação no prisma do refratômetro; II - Olhe pela ocular do refratômetro e observe a escala que aparece no campo visual; 12 III - Observe a fronteira claro-escuro; IV - Anote a leitura da escala que corresponde à posição da fronteira. 5 - Experimento: Determinar o teor de açúcar nos adoçantes e em algumas frutas. a) Misturar o adoçante em água destilada e em seguida determinar o índice de refração desta solução. Utilizando a tabela de Brix, determine a concentração (%) de açucar a partir do valor do índice de refração medido; b) Repita o mesmo procedimento do item anterior agora com as frutas; c) Discuta os resultados encontrados. 5- Referência Bibliográfica Grau brix https://pt.wikipedia.org/wiki/Brix#/media/File:Refractometer.jpg https://pt.wikipedia.org/wiki/Brix#/media/File:Refractometer.jpg
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