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LISTA EXTRA 02 – MONITORIA 1 - Na área alimentícia, os lipídios são usados em diversos produtos, inclusive em muitos industrializados, sendo que para estas aplicações foram vistos dois processos importantes: hidrogenação e interesterificação. Em relação a esses processos marca V para as alternativas verdadeiras ou F para as falsas. (V) A hidrogenação é um processo químico, que utiliza hidrogênio na presença de catalisador níquel ou alumínio, em que são adicionados átomos de hidrogênio às duplas ligações presentes na cadeia carbônica do ácido graxo do óleo vegetal, bem como a mudança da configuração cis para trans. (F) É possível mudar a posição dos radicais de ácidos graxos nos glicerídeos de um lipídeo pelo processo conhecido como hidrogenação. (V) Os ácidos graxos trans são derivados principalmente da hidrogenação. (V) A interesterificação trata-se de um rearranjo nas ligações éster existentes entre o glicerol e os ácidos graxos, formando novas ligações nas moléculas glicerídicas. (F) Tanto a hidrogenação, quanto a interesterificação promovem isomerização de ácidos graxos e afetam o grau de saturação dos mesmos. 2 - Lipídeos são definidos como componentes do alimento que são insolúveis em água e solúveis em solventes orgânicos, tais como éter etílico, éter de petróleo, cetona, clorofórmio, benzeno e álcoois. Esses solventes apolares extraem a fração lipídica neutra que incluem ácidos graxos livres, mono, di e triacilgliceróis e outros como fosfolipídeos, glicolipídeos e esfingolipídeos. Em relação aos métodos de extração, marque: ( S ) Soxhlet ( B ) Bligh – Dyer ( G ) Processo de Gerber (S) O processo de extração é intermitente. (G) Usado como método de rotina para leite e derivados. (S) Utilizado somente para amostras sólidas. (B) A determinação completa pode ser realizada em tubos de ensaio, não necessitando de equipamentos especializados e sofisticados. (S) Utiliza refluxo do solvente. (B) Utiliza três solventes: clorofórmio- metanol-água. (G) A amostra é submetida a hidrólise ácida com ácido sulfúrico para separar proteínas, interferentes, dos lipídeos. (B) Não utiliza aquecimento e os extratos podem ser utilizados para avaliação de deterioração dos lipídeos através dos índices de peróxido e ácidos graxos livres. 3 - Você extraiu os lipídeos de uma amostra utilizando o método de Soxhlet e os resultados encontrados estão mostrados abaixo. Calcule a porcentagem de lipídeos na amostra. Peso do cartucho: 6,2564g Peso do cartucho + amostra: 27,4650g Peso do balão: 100,8433 g Peso do balão + lipídeos: 106,5870g %lip = {[(Pb + Pl) - Pb / [(Pc + Pa) - Pc]} x 100 = 5,7437 / 21,2086 x 100 = 27,08 % de lipídeos 4 - Em relação à degradação de lipídeos, descreva para cada fase o que se observa na imagem abaixo: Na fase de iniciação, o AG ligado ao glicerol está susceptível a ação de fatores de oxidação como oxigênio, luz, calor, peróxido, presença de metais e pigmentos naturais, os quais possibilitam um ataque na dupla ligação. Produto – radical do ácido graxo. Na fase de propagação, o ataque da fase inicial gerou o radical do ácido graxo que vai reagir com outra espécie reativa de oxigênio gerando o radical lipoperoxil. Esse radical lipoperoxil vai reagir com outros ácidos graxos íntegros, gerando o lipoperóxido. (Isso ocorre com várias moléculas de ácidos graxos “íntegros”). Na fase de terminação, 2 radicais de ácidos graxos combinam-se, formando um não radical. Além disso, olipoperóxido vai sofrer reações secundárias formando, por exemplo, o malondialdeído., um marcador de estresse oxidativo. Marcador de estresse oxidativo 5 - Em um experimento, os alunos de Nutrição utilizaram 62,25 mL de solução de tiossulfato 0,1N, f= 0,9967 para determinar o índice de peróxidos de 18,95g de amostra de gordura. Calcule o índice de peróxidos desta amostra. n eq peróxidos = n eq tiossulfato n eq peróxidos = 62,25 x 0,1 x 0,9967 n eq peróxidos = 6,2044575 6,2044575 ----- 18,95 g amostra X ----- 1000 g X = 327,412 meq peróxidos 6 - Se 11,5 g de óleo de soja consumiram 14,3 mL de uma solução 0,1N de KOH para titulação, na presença de fenolftaleína, qual o índice de acidez deste óleo? N x f x v = mKOH / MKOH mKOH = 0,1 x 1 x 14,3 x 56 mKOH = 80,223 mg 80,223 mg KOH ----- 11,5 g óleo X ----- 1,0 g X = 6,97 mg KOH / g de amostra 7-Em uma análise de AGL (ácidos graxos livres), 37,23 mL de solução de NaOH 0,1N, f= 0,9978, foram utilizados para neutralizar 23,85 g de amostra. Calcule a % de AGL, expressa em ácido oléico (PM= 282). N x f x v = mac / Mac mac = 0,1 x 0,9978 x 37,23 x 282 mac = 1047,5762508 mg ácido oleico 23,85 x 103 mg ----- 100% 1047,5762508 ----- x x = 4,39% ácido oleico 8 - As proteínas são os maiores constituintes de toda célula vida e, cada uma delas, de acordo com sua estrutura molecular, tem uma função biológica associada às atividades vitais. Para sua determinação nos alimentos, são utilizadas análises elementares que analisam carbono ou nitrogênio, e análise por grupos que analisam aminoácidos e ligações peptídicas. Em relação aos métodos, marque: ( 1 ) Análise de carbono ( 2 ) Análise de nitrogênio (3 ) Método por Biureto ( 4 ) Método por Fenol ( 5 ) Método por UV ( 6 ) Métodos Turbidimétricos (TCA) ( 7 ) Método Dye-Binding ( 8 ) Métodos Físicos (3) Baseia-se na observação de que substâncias que contêm duas ou mais ligações peptídicas formam um complexo de cor roxa com sais de cobre em soluções alcalina. A intensidade da cor formada é proporcional à quantidade de proteína e a medida é feita num colorímetro. (2) É a determinação mais utilizada e considera que, em média, as proteínas tem 16% de nitrogênio, com um fator de conversão geral 6,25. Nessa análise, destaque-se o método de Kjeldahl que tem como premissa que todo nitrogênio da amostra advém das proteínas apresentando resultados conhecidos como “proteína bruta”. (8) Índice de refração; densidade específica; viscosidade; tensão superficial; condutividade; polarização. (1) Realizada por meio da digestão da amostra, restando apenas a quantidade de carbono, que é convertida em quantidade de proteína por um fator de conversão. (4) Baseia-se na interação das proteínas com o reagente fenol e cobre em condições alcalinas. A reação colorimétrica envolve uma oxidação, catalisada por cobre, de aminoácidos aromáticos, desenvolvendo uma cor azul, que será medida num colorímetro e comparada com uma curva padrão. (7) A amostra é tratada com um excesso de corante (do tipo indicador), o corante e a proteína reagem quantitativamente para formar um complexo insolúvel que pode ser separado por centrifugação ou filtração. O excesso de corante não reagido em solução é medido colorimetricamente e, por diferença, obtém-se indiretamente a quantidade de proteína da amostra. (5) Baseia-se no fato dos aminoácidos tirosina, triptofano e fenilalanina possuírem absorbância a 280nm. (6) Baseia-se na turbidez causada pela proteína precipitada por algum agente precipitante, como ácido tricloroacético, ferricianeto de potássio e ácido sulfossalicílico. 9 - Uma amostra de cereal foi analisada, pelo método de Kjeldahl, para determinação de proteína bruta. Temos os seguintes dados: Peso da amostra: 2,367g Normalidade de HCl usado na titulação: 0,1 f = 1,0199 ml de HCl gastos na titulação: 14,68mL E do Nitrogênio = 14 Calcule o conteúdo de proteína bruta na amostra, assumindo que a proteína possui 14,65% de nitrogênio. n eq N = n eq HCl mn / M = N x v x f mn = 0,1 x 14,68 x 1,0199 x 14 mn = 20,9609848 mg 20,9609848 mg N ----- 14,65% X ----- 100% X = 143,078395 mg proteína143,078395 mg proteína ----- y 2,367 x 103 g ----- 100% Y = 6,045% de proteínas 10 - Uma amostra de alimento foi levada ao laboratório para determinação do conteúdo protéico através do método de Kjeldahl. Foram gastos 47mL de uma solução de HCl 0,1N (f=0,9987) na titulação, e sabendo-se que tratava de 5,274g de uma amostra de um derivado lácteo, cujo fator de conversão de nitrogênio para proteína é de 6,38, calcule o teor de proteína bruta na amostra. n eq N = n eq HCl mn/M = N x v x fc mn = N x V x fc x M mn = 0,1 x 47 x 0,9987 x 14 mn = 65,71446 mg ptn = mn x 6,38 ptn = 419,2582548 mg 5,274 x 103 mg ----- 100% 419,2582548 mg ----- x x = 7,95% de proteínas 11 - Os carboidratos são os componentes mais abundantes e amplamente distribuídos entre os alimentos. Sob determinadas condições, os açúcares produzem pigmentos marrons. Assim, diferencie Reação de Maillard e Caramelização. Na reação de Maillard, o grupo amino de uma proteína reage com um grupo aldeído de um açúcar, sob condições específicas de calor que promovem a hidrólise formando a glicosilamina que sofre sucessivas reações até ser convertida em hidroximetilfurfural, esse de associa-se a outro grupo amino formando a melanoidina, responsávelpela coloração característica. A caramelização é a degradação do açúcar na ausência de aminoácidos, onde temperaturas maiores que 120°C promove a pirólise do mesmo, gerando, ao final, produtos de degradação de elevado peso molecular e escuros, denominados caramelos. 12 - A Fração Glicídica ou Nifext nem sempre atende à demanda do pesquisador, porque o tipo de carboidrato presente no alimento precisa ser identificado. Assim,são utilizados métodos qualitativos e quantitativos. Em relação aos métodos qualitativos, marque a alternativa incorreta. a) A ação de ácidos minerais fortes (sulfúrico, clorídrico e fosfórico) nos carboidratos leva à formação de produtos de decomposição que podem ser coloridos. b) A Antrona reage, especialmente, com carboidratos, em solução concentrada de ácido sulfúrico, produzindo uma cor característica amarelo-alaranjado. Fornece melhores resultados quando aplicada em soluções puras de hexoses ou seus polímeros. c) O Fenol, na presença de ácido sulfúrico, reage com praticamente todas as classes de açúcares, incluindo derivados de açúcares, oligossacarídeos e polissacarídeos. A cor produzida é amarelo-alaranjado. d) As reações coloridas baseadas nas propriedades redutoras dos açúcares não são específicas e necessitam de remoção dos outros componentes redutores. e) O teste de Fehling identifica açúcares redutores através das propriedades redutoras do grupo carbonila presente na função aldeído do carboidrato. Então, há redução do cobre do óxido cúprico a óxido cuprosoe o aldeído sofre oxidação, resultando em seu ácido carboxílico correspondente, formando coloração vermelho-tijolo. 13 - Em relação aos métodos quantitativos na determinação de açúcares totais e redutores relacione as colunas: ( 1 ) Munson – Walker ( 2 ) Lane – Eynon ( 3 ) Somogyi ( 4 ) Métodos cromatográficos ( 5 ) métodos ópticos (1) Baseia-se na reação de dois reagentes Fehling A (sulfato de cobre) + Fehling B (tartarato suplo de sódio e potássio/ hidróxido de sódio) com açúcares redutores, formando um precipitado de óxido de cobre. Nesse método, o precipitado formado no teste de Fehling vai ser filtrado, seco e pesado. A quantidade de cobre reduzido tem relação com a quantidade de açúcar redutor. (4) Os açúcares são determinados individualmente porque ocorre a separação de todos os tipos de açúcares presente na amostra, como por exemplo, na cromatografia líquida de alta eficiência ou na gasosa. (2) Nesse método, é realizada uma titulação, a solução de açúcar é adicionada em uma bureta e no erlenmeyer vai conter as duas soluções de Fehling + azul de metileno, à medida que ocorre a titulação e o ponto de viragem é vermelho-tijolo. Além disso, a solução deve permanecer em ebulição durante a titulação para que o óxido cuproso não seja oxidado novamente pelo oxigênio do ar. (3) É um método que também se baseia na redução do cobre pelos açúcares redutores, porém serve para determinar pequenas quantidades de açúcares. Considerado um método micro. (5) Nesse método destaque-se a refratometria, que mede o índice de refração da solução de açúcar; a polarimetria, que mede a rotação óptica de uma solução pura de um açúcar; e a densimetria que é a medida da densidade de uma solução açucarada, sendo a medida feita com hidrômetro especial. A leitura é em % de açúcar, a 20°C. 14 - Explique como se dá o processo de hidrólise da sacarose, qual o produto gerado e sua aplicação na indústria. A sacarose na presença de água, meio ácido e enzima invertase é hidrolisada formando glicose + frutose, essa sacarose hidrolisada é o açúcar invertido. O açúcar invertido previne a cristalização do açúcar e é usado na indústria para atribuir melhores características sensoriais, como maciez, coloração e doçura. 15 - Explique a gelatinização e retrogradação do amido e porque a indústria lança mão desse método. Na presença de calor há rompimento das ligações entre amilose e amilopectina, permitindo a incorporação de água nos grânulos (a água passa a fazer ligações de hidrogênio com as moléculas do amido), formando uma estrutura gelatinosa. A partir do momento que o fornecimento de calor cessa, água é expulsa das ligações intermoleculares e retorna-se às ligações originais amilose + amilopectina. Esse processo gera o amido modificado que é utilizado pela indústria pois ele é insolúvel em água, resistente a ataques enzimáticos e pode ser uma fonte a mais de fibra no alimento. 16 - Os materiais da parede celular de plantas, principalmente a celulose, outros polissacarídeos não amiláceos e a lignina, são componentes da fibra dietética. A única característica em comum desses polímeros é que eles não são digestíveis, o que é o principal critério para que sejam classificados como componentes da fibra dietética. Em relação à determinação de fibra, marque V para as verdadeiras e F para as falsas: (V) Os métodos gravimétricos podem ser divididos em métodos detergentes e métodos enzimáticos. (V) A fibra por detergente ácido utiliza ácido sulfúrico e determina celulose + lignina, sendo muito utilizado em ração animal. (F) A fibra por detergente neutro é utilizada como método oficial para determinação de fibra dietética em grãos de cereais. Utiliza NaOH e determina apenas celulose. (V) A fibra por detergente neutro utiliza tampão laurilsulfato de sódio e determina celulose e hemicelulose. (V) A fibra pelo método enzímico-gravimétrico simula a digestão gastrointestinal utilizando enzimas como alfa-amilase, protease e amiloglicosidade . 17 - Descreva o método enzímico- gravimétrico para determinação de fibra total, fibra insolúvel e fibra solúvel. 1ª Parte: A amostra será tratada com solução tampão dando condições ideais para as enzimas agirem (alfa-amilase, protease e amiloglicosidase). Assim, será separado aquilo que não interessa. Depois, a fibra é precipitada em etanol a 95% 60°C em repouso, em seguida o resíduo é lavado com acetonapara remoção de possível resíduo de gordura. OBS1: se a amostra for muito úmida precisa secar previamente, se é rica em cinzas precisa incinerar, se rica em gordura desengordurar. O resíduo vai para a estufa e seca overnight, no dia seguinte esfria no dessecador e pesa o cadinho. OBS2: É necessário determinar proteínas e cinzas para encontrar de fato o que é fibra total. FT = resíduo – (PTN + cinzas). 2ª Parte: Com as fibras totais determinadas, a parte 2 é determinar as que são solúveis e insolúveis em água. Para isso será feito uma filtração com água e a fração insolúvel é a queficou retida no papel. 3ª Parte: A fração insolúvel será lavadacom etanol, seca em estufa overnight, esfriada e pesada no cadinho. Corresponde a celulose, hemicelulose e lignina. A fração de fibra solúvel será precipitada com etanol, filtrada, lavada com etanol eacetona, secaem estufa overnight e pesada. Correspondem a pectinas, gomas e mucilagens. 18 – Em relação as alterações em alimentos, marque V para as verdadeiras e F para as falsas: (V) As polifenoloxidases (PPOS) oxidam compostos fenólicos naturalmente presente nos alimentos dando origem às quinonas. (F) O escurecimento não enzimático só ocorre quando há rompimento da célula do tecido vegetal, expondo o fruto e colocando-o em contato com oxigênio. (F) A ortoquinona forma pigmentos escuros conhecidos como melanoidinas. (V) É possível evitar o escurecimento enzimático através da utilização de agentes antioxidantes.. (V) A Reação de Maillard e a Oxidação do ácido ascórbico possuem produtos finais em comum, como o furfural, que sofre sucessivas reações formando as melanoidinas. (F) As reações não enzimáticas precisam, necessariamente, de oxigênio para ocorrer. (V) É possível evitar a oxidação do ácido ascórbico utilizando agente antioxidante como os sulfitos e congelamento, o qual pode reduzir ou mesmo inibir a atividade de enzimas.
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