4 MANUAL_QC_2013

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ALBUMINA (ALB) 
Verde de Bromocresol 
MANUAL 
RX MONZA 
 
PARA SU USO 
La determinación cuantitativa in vitro de albúmina en suero y 
plasma. Este producto es adecuado para su utilización de forma 
manual y en el analizador Rx Monza. 
 
Cat. No. 
AB 362 R1. BCG Concentrado 6 x 13.5 ml 
6 x 100 ml CAL Patrón 1 x 5.5 ml 
 
SIGNIFICADO CLINICO (1) 
La albúmina es la proteína sérica más abundante representando 
el 55-65% de las proteinas totales. Se sintetiza en el hígado y 
tiene una vida media de 2 a 3 semanas. 
Las principales funciones biológicas de la albúmina son mantener 
el equilibrio de agua en suero y plasma, transportar y almacenar 
una amplia variedad de ligandos ej: acidos 
grasos,calcio,bilirrubina y hormonas como tiroxina. La albúmina 
también es una fuente endógena de aminoácidos. 
La hipoalbuminemia está asociada con las siguientes condiciones 
:analbuminemia; sintesis deteriorada de albúmina en el higado; 
enfermedades hepaticas; malnutrición o malabsorción; shock 
generalizado; quemaduras o dermatitis; enfermedades renales e 
intestinales .La hiperalbuminemia tiene poca relevancia 
diagnóstica excepto tal vez en deshidratación. 
 
PRINCIPIO(2) 
La medición de albúmina en suero se basa en su unión 
cuantitativa con el indicador 3,3',5,5'-tetrabromo-m cresol 
sulfontaleina (verde de bromocresol BCG). El complejo 
albúmina-verde de bromocresol presenta una absorción máxima 
a 578 nm, siendo la absorbancia directamente proporcional a la 
concentración de albúmina en la muestra. 
 
PREPARACION Y EXTRACCION DE LA MUESTRA 
Suero, plasma heparinizado o plasma con EDTA. Se pueden 
utilizar los procedimientos normales de recogida y 
almacenamiento del suero para las muestras que se vayan a 
analizar con este método. El suero es estable durante 3 días a 
una temperatura de entre 2 y 8 C, o durante 6 meses a -20C. 
 
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentración inicial de las soluciones 
 
R1. Verde de Bromocresol (BCG) concentrado 
 Tampón succinato 75 mmol/l, pH 4.2 
 Verde de bromocresol (BCG) 0.15 mmol/l 
 Brij 35 
 Conservante 
CAL Patrón Especifico para cada lote 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar 
las precauciones normales necesarias, que se requieren al 
manejar reactivos de laboratorio. 
 
Atención: Patrón 
El material de origen humano del que se deriva este producto ha 
sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de 
Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antígeno de 
Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de 
Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO. 
Los métodos utilizadon están aprobados por FDA. 
 
Sin embargo, dado que ningún método puede ofrecer una 
seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este 
material y todas las muestras de pacientes se deberán manejar 
como posibles transmisores de enfermedades infecciosas y 
eliminar apropiadamente. 
 
Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean. 
 
Los reactivos deben utilizarse solamente para su 
propósito por personal de laboratorio cualificado, y bajo 
condiciones de laboratorio apropiadas. 
 
ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO Y 
DEL PATRON 
R1. Concentrado BCG 
Diluya el contenido de una botella con 87 ml de agua 
destilada. Estable durante 3 meses si se conserva entre 
+15 y +25C. 
 
CAL. Estandard 
 Contenido listo para su uso. Etable hasta la fecha de 
caducidad si se conserva entre +15 y +25C. 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Concentrado BCG 
Patron Albumina 
 
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS 
Pipetas para dispensar volumenes 10 l y 3,0 ml. 
Cronómetro y baño de agua o bloque de calentamiento para 
mantener la temperatura entre 20 - 25ºC. 
Espectrófotómetro con una capacidad de longitud de onda de 
600 a 650 nm 
Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y Nivel 
3 (No. Cat. HE 1532) 
Sérum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351). 
 
 
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 MANUAL AB 362 
 
PROCEDIMIENTO(2) 
Utilice H2O de doble destilación para realizar una nueva 
calibración de la ganancia en el modo cubeta. Seleccione ALB en 
la pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a cabo un blanco de 
agua de la forma indicada. 
 
Pipetee en una cubeta: 
 
 Blanco de reactivo S0 Patrón S1 Muestra 
 
H2O de doble destilación 3 μl - - 
Patrón - 3 μl - 
Muestra - - 3 μl 
Reactivo 1000 μl 1000 μl 1000 μl 
 
Mézclelo e incúbelo durante 20 minutos a 20-25 oC o durante 
10 minutos a 37 oC. 
Introdúzcalo en el soporte de la celda de flujo de RX Monza y 
pulse Read (Leer) en un plazo de 60 minutos. 
 
CALIBRACIÓN PARA RX MONZA 
Se recomienda llevar a cabo una calibración diaria mediante el 
patrón CAL que se proporciona en el kit o mediante el suero de 
calibración de nivel 3 de Randox. 
 
PARA USO MANUAL 
 
Longitud de onda: 578 nm o 623 nm 
Espectrofotómetro: 630 nm (600 - 650 nm) 
Cubeta: 1 cm de espesor 
Temperatura de incubación: 20 - 25C 
Medición: Frente al blanco de reactivo 
 
Pipetear en tubos de ensayo: 
 
 Reactivo Patrón Muestra 
 
H2O destilada 0,01 ml --- --- 
Patrón (CAL) --- 0,01 ml --- 
Suero o Plasma --- --- 0,01 ml 
Reactivo de BCG (R1) 3,00 ml 3,00 ml 3,00 ml 
 
 
Mezclar e incubar durante 5 min entre +20 y +25C. Medir la 
absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón 
(Apatrón) frente al blanco de reactivo 
 
CÁLCULO MANUAL 
La concentración de albúmina en la muestra puede 
calcularse utilizando la fórmula siguiente: 
 
Conc. de albúmina (g/l o g/dl) 
 
 Amuestra 
= x Concentración 
 Apatrón del patrón 
 
NORMALIZACIÓN 
El suero de calibración de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en 
el material de referencia DA470 de la albúmina (IFCC). 
CONTROL DE CALIDAD 
Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros 
Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deberá de analizar dos 
niveles de controles al menos una vez al día. Los valores 
obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si 
los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye 
error, se deberán seguir los siguientes pasos: 
1. Comprobar programación del instrumento y el origen de luz. 
2. Comprobar que todo material está limpio. 
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento de 
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 
4. Comprobar la temperatura de reacción 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de 
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 
94422413. 
 
INTERFERENCIA 
Se analizaron los siguientes analitos hasta los siguientes niveles y 
se encontró que no interfieren: 
 
 Bilirrubina 500 mol/l 
 Intralípido® 1,2% 
 Triglicéridos 22,75 mmol/l 
 Hemoglobina 6 g/l 
 
VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO(2) 
Adultos 38 - 44 g/l (3,8 – 4,4 g/dl) 
Recién nacidos 38 - 42 g/l (3.8 - 4.2 g/dl) 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango 
de referencia para considerar las diferencias en edad, sexo, dieta 
y localización geográfica. 
 
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE 
FUNCIONAMIENTO 
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante 
el analizador Rx Monza a una temperatura de 37 oC. 
 
LINEALIDAD 
Este método es lineal hasta 7,55 g/dl. Si la concentración 
sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 1 con una 
solución del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de nuevo. 
Multiplique el resultado por 2. 
 
SENSIBILIDAD 
La concentración mínima detectable de albúmina con un nivelaceptable de precisión se ha determinado en 
0,287 g/dl. 
 
 
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 MANUAL AB 362 
 
PRECISION (Suero) 
Análisis (Intra) 
 Nivel 1 Nivel 2 
Media (g/dl) 2,86 4,36 
DE 0,036 0,031 
CV (%) 1,28 0,71 
n 20 20 
 
Análisis (Inter) 
 Nivel 1 Nivel 2 
Media (g/dl) 2,86 4,36 
DE 0,129 0,174 
CV (%) 4,52 3,99 
n 20 20 
 
CORRELACION 
Se comparó el método Randox (Y) con un método comercial 
disponible (X). Se analizaron 51 muestras con valores 
abarcando un rango de 22 a 46 g/l en un analizador Hitachi 747. 
El análisis de regresión lineal de los datos resultó en la siguiente 
ecuación: 
 
Y = 1,073 X + 0,204 
con un coeficiente de correlación r = 0.9910 
 
Se analizaron 40 muestras con valores de entre 1,66 y 4,51 g/dl. 
 
REFERENCIAS 
1. Grant G.H., et al Amino Acids and Proteins; Fundamentals of 
Clinical Chemistry, Tietz N.W. Editor, Third Edition, WB 
Saunders Company Philadelphia USA, 328-329, 1987 
2. Doumas, B.T., Watson, W.A., Biggs, H.G., Clin. Chim. Acta. 
1971; 31: 87. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Revised 10 Sep 10 bm 
Rev. 001 
 
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FOSFATASA ACIDA 
(ACP) 
Método Colorimétrico 
MANUAL 
RX MONZA 
 
PARA SU USO 
Para el análisis cuantitativo in vitro de Fosfatasa Acida en el suero. 
Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador 
Rx Monza. 
 
No. Cat. 
AC 1011 R1. Tampón 1 x 70 ml 
20 x 3 ml R2. Sustrato 20 x 3 ml 
 R3. Tartrato 10 frascos 
 SAM STAB Estabilizador 1 frasco 
 
METODO COLORIMETRICO 
 
PRINCIPIO(1) 
 fosfatasa ácida 
1-naftil-fosfato + H2O fosfato + 1-naftol 
 
1-naftol+sal de 4-cloro-2-metilfenildiazonio* 
 colorante azo 
 
* = Sal TR Fast Rojo 
 
PREPARACION DE LA MUESTRA 
Suero. La muestra puede ser estabilizado mediante la adición de 
1 gota de ácido acético estabilizador (STAB SAM) a 1 ml de 
suero. Estable durante 3 días a +2 y +8C ó 24 horas a +15 y 
+25C. 
 
Suero. La muestra se estabiliza añadiendo una gota de ácido 
acético (estabilizador 4) a 1 ml de suero. Es estable durante 3 
días entre +2 y +8C ó 24 horas entre +15 y +25C. 
 
COMPOSICION DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentraciones en la prueba 
 
R1 Tampón 
 Tampón citrato 75 mmol/l, pH 5,2 
R2. Sustrato 
 1-naftilfosfato 10 mmol/l 
 Sal TR Fast Rojo 2,5 mmol/l 
R3. Tartrato 
 Tartrato sódico 135 mmol/l 
SAM STAB Estabilizador 
 Acido acético 3 mmol/l 
 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar 
las precauciones normales requeridas para el manejo de 
reactivos de laboratorio. 
 
Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean. 
 
Los reactivos deben ser utilizados sólo para los 
propósitos indicados por personal adecuado cualificado 
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de 
laboratorio. 
ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE REACTIVOS 
R1. Bufer 
 Contenios listos para su uso. Estable hasta la fecha de 
caducidad si se conserva entre +2 to +8C. 
 
Para la Fosfatasa ácida total: 
R2. Substrato (R2A) 
 Disuelva el contenido de 1 botella de sustrato R2 en 3 ml 
de tampón R1. Estable durante 5 días si se conserva entre 
+2 y +8C o 24 horas entre +15 to +25C, Conservese 
protegido de la luz. 
 
Para la Fosfatasa ácida no prostática: 
R2. Substrato (R2B) 
 Disuelva el contenido de 1 botella de sustrato R2 en 3 ml 
de tampón R1. A continuación, transfiera el contenido a un 
vial de tartrato R3. Estable durante 5 días si se conserva 
entre +2 to +8C o 24 horas entre +15 y +25C, 
Conservese protegido de la luz. 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Tampón 
Sustrato 
Tartrato 
Estabilizador 
 
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS 
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y 
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) 
Sérum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351). 
 
PRPROCEDIMIENTO 
FOSFATASA ÁCIDA TOTAL 
Seleccione ACP en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a 
cabo un blanco de agua de la forma indicada. 
Pipetee en un tubo de ensayo: 
 
Muestra 0,05 ml 
Reactivo 0,5 ml 
 
Mézclelo, incúbelo durante exactamente 5 minutos a 37 °C o 
durante 10 minutos a 20-25 °C y aspírelo en Rx Monza. 
 
FOSFATASA ÁCIDA NO PROSTÁTICA 
Seleccione NACP en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y 
lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada. 
Pipetee en un tubo de ensayo: 
 
Muestra 0,05 ml 
Reactivo 0,5 ml 
 
Mézclelo, incúbelo durante exactamente 5 minutos a 37 °C o 
durante 10 minutos a 20-25 °C y aspírelo en Rx Monza. 
 
CALIBRACIÓN PARA RX MONZA 
Se recomienda el uso de suero fisiológico y suero de calibración 
de nivel 3 de Randox para la calibración. Es aconsejable cambiar 
el lote del reactivo para la calibración o seguir lo indicado por los 
procedimientos de control de calidad.
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 MANUAL/ RX MONZA AC 1011 
 
FOR MANUAL USE 
 
Longitud de onda: Hg 405 nm 
Cubeta: 1 cm de espesor 
Temperatura: 30/37C 
Medición: frente al aire 
 
Pipetear en tubos de ensayo: 
 
 Macro Semi Micro 
 
Muestra 0,20 ml 0,10 ml 
Solución de reactivo R2 2,00 ml 1,00 ml 
 
Mezclar, verter en la cubeta e incubar durante 5 min a 30/37C. 
Leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar el tiempo 
simultáneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. 
 
CÁLCULO MANUAL 
Para calcular la actividad de la fosfatasa ácida en la muestra 
utilizar las fórmulas siguientes: 
 
 
Fosfatasa ácida total: 
 U/l = 743 x ΔAsol.2a/min 
Fosfatasa prostática: 
 U/l = 743 x (ΔAsol.2a/min - ΔAsol.2b/min) 
 
 
CONTROL DE CALIDAD 
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de 
controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán 
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se 
encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se 
deberán seguir los siguientes pasos: 
1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara 
2. Comprobar que todo material está limpio. 
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento 
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 
4. Comprobar la temperatura de reacción 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los 
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413. 
 
INTERFERENCIA 
Sueros hemolíticos e ictéricos (bilirrubina > 3 mg/dl) interfieren 
en la prueba. 
 
VALORES NORMALES EN SUERO (2) 
 
 30C 37C 
 
Fosfatasa ácida total 
Hombre Hasta 4,2 U/l Hasta 4,7 U/l 
Mujer Hasta 3,0 U/l Hasta 3,7 U/l 
Fosfatasa ácida 
prostática Hasta 1,5 U/l Hasta 1,6 U/l 
 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango 
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad 
geográfica de la población. 
 
CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE 
FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA 
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un 
analizador RX monza. 
 
FOSFATASA ÁCIDA TOTAL 
LINEALIDAD 
El método es lineal hasta una concentración de 159 U/I. 
Si la concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe 
diluir 1 + 4 con una solución del 0,9% de NaCI y debe someterse 
a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5. 
 
SENSIBILIDAD 
La concentración detectable mínima de fosfatasaácida con un 
nivel aceptable de precisión se determinó en 2,53 U/l. 
 
PRECISION 
 
Intraensayo 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 15.9 43.6 
DE 0.717 1.90 
CV(%) 4.51 4.35 
n 20 20 
 
Interensayo 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 15.9 43.6 
DE 1.05 3.04 
CV(%) 6.59 6.98 
N 20 20 
 
CORRELACIÓN 
Se comparó este método (Y) con otro método comercial 
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión 
lineal: 
 
Y = 0.9723 X + 0.5527 
y un coeficiente de correlación de r = 0,9925 
 
se analizaron 42 muestras de pacientes abarcando un rango de 
2,5 a 93,9 U/l. 
 
FOSFATASA ÁCIDA NO PROSTÁTICA 
LINEALIDAD 
El método es lineal hasta una concentración de 80,8 U/I. 
Si la concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe 
diluir 1 + 4 con una solución del 0,9% de NaCI y debe someterse 
a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5. 
 
SENSIBILIDAD 
La concentración detectable mínima de fosfatasa ácida con un 
nivel aceptable de precisión se determinó en 1,76 U/l. 
 
PRECISION 
 
Intraensayo 
 Nivel 1 Nivel 2 
Media (U/l) 6.65 17.8 
DE 0.289 0.765 
CV(%) 4.34 4.30 
n 20 20 
 
Interensayo 
 Nivel 1 Nivel 2 
Media (U/l) 6.65 17.8 
DE 0.295 0.892 
CV(%) 4.43 5.01 
n 20 20 
 
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 MANUAL/ RX MONZA AC 1011 
 
CORRELATION 
Se comparó este método (Y) con otro método comercial 
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión 
lineal: 
 
Y = 0.9653 X + 0.1849 
y un coeficiente de correlación de r = 0,9971. 
 
se analizaron 40 muestras de pacientes abarcando un rango de 
2,1 a 80,2 U/l. 
 
REFERENCIAS 
1. Hillmann, G.J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1971; 9: 273. 
2. Silver, D., et al., J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21: 519. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Revisado 05 Sep 11 bm 
Rev. 002 
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ALDOLASA (ALS) 
Fructosa-1,6-difosfato aldolasa 
 
MANUAL 
RX MONZA 
 
PARA SU USO 
Para el análisis cuantitativo in vitro de Aldolasa en suero y plasma. 
Este producto es adecuado para su utilización de forma Manual y 
en el analizador RX monza. 
 
No. Cat. 
AD 189 R1. Tampón/Sustrato 5 x 20 ml 
5 x 20 ml R2. NADH 2 x 1 ml 
 R3. GDH/TIM/LDH 1 vial 
 
PRINCIPIO 
La aldolasa convierte la fructosa-1,6-difosfato (F-1,6-DP) en 
gliceraldehído-3-fosfato (GAP) y dihidroxiacetona fosfato (DAP). 
La adición de triosafosfato isomerasa (TIM), glicerolfosfato 
deshidrogenada (GDH) y NADH convierte la dihidroxiacetona 
fosfato en glicerol-1-fosfato. El grado de la reacción de la aldolasa 
se mide por la disminución de la absorbancia a 340 nm como 
consecuencia de la conversión de NADH en NAD+. 
 aldolasa 
F-1,6-DP GAP + DAP 
 TIM 
GAP DAP 
 GDH 
2DAP + 2NADH + 2H+ 2Glicerol-1-P + 2 NAD+ 
 
MUESTRA 
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma. 
 
COMPOSICION DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentración en la prueba 
 
R1. Tampón/Sustrato 
 Tampón colidina 51 mmol/l, pH 7,4 
 Monoyodoacetato 0,27 mmol/l 
 F-1,6-DP 2,7 mmol/l 
R2. NADH 0,23 mmol/l 
R3. GDH/TIM/LDH 
 GDH ≥ 326 mU/ml 
 TIM ≥ 4,35 U/ml 
 LDH ≥ 616 mU/ml 
 Ammonium Sulphate > 35% 
 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. 
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren 
al manejar reactivos de laboratorio. 
 
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se 
desean. 
 
Los reactivos deben utilizarse solamente para su 
propósito por personal de laboratorio cualificado, y bajo 
condiciones de laboratorio apropiadas. 
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD 
R1. Tampón/Sustrato 
 Reconstituir un vial de Tampón/Sustrato 1 con 20 ml 
e agua bidestilada. Es estable durante 2 semanas si se 
conserva entre +2 y +8C. 
 
R2. NADH 
Reconstituir un vial de NADH 2 con 1 ml de agua 
bidestilada. Es estable durante 4 semanas entre +2 y +8C. 
 
R3. GDH/TIM/LDH 
 Componentes listos para su uso. Es estable hasta la 
fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8C. 
 
ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DEL REACTIVO EN 
FUNCIONAMIENTO PARA RX MONZA 
Prepare el reactivo en funcionamiento como se indica en la tabla 
siguiente:- 
 
 Tampón/Sustrato NADH GDH/TIM/LDH 
 R1 R2 R3 
 
 2.5ml 0.05ml 0.01ml 
 5.0ml 0.1ml 0.02ml 
 10.0ml 0.2ml 0.04ml 
 
Estable durante 8 horas entre +2 y +8ºC. 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Tampón/Sustrato 
NADH 
GDH/TIM/LDH 
 
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS 
Calibrador de aldolasa de Randox (No. Cat. AD 5000) 
Control de Aldolasa Randox Nivel 2 (Cat. No. AD 5001) y Nivel 
3 (Cat. No. AD 5002) 
0.9% Solución NaCl. 
 
PROCEDIMIENTO 
Seleccione ALS en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a 
cabo un blanco de agua de la forma indicada. 
 
Pipetee en un tubo de ensayo: 
 
 SO* Patrón Muestra 
 S1 
 
H2O de doble destilación 35µl --- --- 
ALS CAL --- 35 µl --- 
Muestra --- --- 35 µl 
Reactivo en funcionamiento 450 µl 450 µl 450 µl 
 
Mézclelo, incúbelo durante 5 minutos a 37ºC o 10 minutos a 20-
25ºC y aspírelo en RX monza. 
 
*blanco de reactivo 
 
CALIBRACIÓN PARA RX MONZA 
El uso de solución salina y Randox Aldolasa sérica de calibración 
se recomienda para la calibración. LA calibración se recomienda 
a los cambios en el lote del reactivo como se indica en los 
procedimientos de control de calidad. 
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 MANUAL/ RX MONZA AD 189 
 
PARA USO MANUAL 
 
Longitud de onda: 340 nm (Hg 365 nm o Hg 334 nm) 
Cubeta: 1 cm de espesor 
Temperatura: 37C 
Medición: frente a muestra blanco 
 
Pipetear en tubos de ensayo: 
 
 Muestra Blanco Calibrador Muestra 
 
Muestra 0,2 ml 0,2 ml 0,2 ml 
Tampón/Sustrato (R1 - 2,50 ml 2,50 ml 
Solución NaCl 0,9% 2,50 ml - - 
NADH (R2) - 0,05 ml 0,05 ml 
GDH/TIM/LDH (R3) - 0.01 ml 0,01 ml 
 
 
Mezclar la muestra, R1, R2 y R3 y se incuba durante 5 minutos a 
37C y leer la absorbancia A1 contra el blanco de muestra. 
Dejar reposar a 37C durante exactamente 20 minutos. después 
de la primera lectura y entonces medir la absorbancia A2 frente 
al blanco. 
* Si A1 es < 0,95 diluir 1+1 con NaCl al 0,9% y repetir el test. 
Multiplicar el resultado por 2. 
 
MANUAL DE CÁLCULO 
Para calcular la actividad aldolase utilizar la siguiente fórmula: 
 
(A1 - A2) Muestra 
 x Conc. de calibrador 
(A1 - A2) Calibrador 
 
 
CONTROL DE CALIDAD 
Los controles de Aldolasa Randox Niveles 2 y 3 se recomiendand 
para el control de calidad diario. Se deberían procesar 2 niveles de 
control al menos una vez por día. Los valores que se obtengan 
deberían entrar dentro de un rango específico. Si los valores no 
estan dentro de este rango, y la repetición excluye el error, se 
deberían lleva a cabo los siguientes pasos: 
1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara. 
2. Comprobar que todo material está limpio. 
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento bacteriano 
puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 
4. Comprobar la temperatura de reacción 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los 
Laboratorios Randox, Irlandadel Norte +44 (0) 28 9442 2413. 
 
INTERFERENCIA 
La hemólisis interfiere en la prueba. 
 
VALORES DE REFERENCIA(1) 
Suero: Hasta 7,6 U/l (37C) 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango 
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad 
geográfica de la población. 
 
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO ESPECÍFICAS 
Se obtuvieron las siguientes características de rendimiento 
mediante un analizador RX monza y un modo de célula de flujo 
a 37ºC. 
LINEALIDAD 
El método es lineal hasta una concentración de 106 U/l. Si la 
concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 
1+4 con una solución de NaCl del 0,9% y debe someterse a 
ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5. 
 
SENSIBILIDAD 
La concentración detectable mínima de Aldolasa con un nivel 
aceptable de precisión se determinó en 1,73 U/l. 
 
PRECISION 
 
Precisión intraensayo 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 6.36 19.1 
DE 0.295 0.854 
CV(%) 4.64 4.47 
n 20 20 
 
Precisión interensayo 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 6.36 19.1 
DE 0.402 1.35 
CV(%) 6.32 7.09 
n 20 20 
 
CORRELACIÓN 
El método de Randox (Y) se comparó con otro método 
comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de 
regresión lineal: 
 
Y = 0,9815 X + 0,183 
y un coeficiente de correlación r = 0,9917. 
 
Se analizaron 42 muestras con valores de entre 2,46 y 89,86 U/l. 
 
REFERENCIA 
1. Feissli, S., et al., (1966). Klin. Wschr. 44: 390. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Revisado el 15 de Sep 2010 bm 
 Rev. 001 
GA
AM
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ALT 
Alanina Aminotransferasa 
IFCC 
MANUAL 
RX MONZA 
 
PARA SU USO 
Para el análisis cuantitativo in vitro de Alanina 
Aminotransferasa en el suero y plasma. Este producto es 
adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza. 
 
No. Cat. 
AL 1200 R1a. Tampón/Substrato 1 x 70 ml 
20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 
 -oxoglutarato 20 x 2 ml 
 
AL 1205 R1a. Tampón/Substrato 1 x105 ml 
10 x 10 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 
 -oxoglutarato 10 x 10 ml 
 
AL 1268 R1a. Tampón/Substrato 1 x 105 ml 
5 x 20 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 
 -oxoglutarato 5 x 20 ml 
 
AL 2360 R1a. Tampón/Substrato 5 x 100 ml 
5 x 100 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 
 -oxoglutarato 5 x 100 ml 
 
METODO UV 
Este es un método estandard optimizado de acuerdo con las 
concentraciones recomendadas por la IFCC. 
 
PRINCIPIO 
 ALT 
-oxoglutarato + L-alanina L-glutamato + piruvato 
 LD 
piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+ 
 
MUESTRA 
Suero, plasma heparinizada o plasma EDTA. 
 
COMPOSICION DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentración en la Prueba 
 
R1a. Tampón/Substrato 
 Tampón Tris 100 mmol/l, pH 7,5 
 L-alanina 0,6 mol/l 
R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 
 -oxoglutarato 15 mmol/l 
 LD ≥1,2 U/ml 
 NADH 0,18 mmol/l 
 
 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. 
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo 
de reactivos de laboratorio. 
 
La solución R1a contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el 
contacto con la piel o las membranes mucosas. En caso de 
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante 
agua. En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar 
atención médica inmediatamente. 
 
La Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las 
cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando 
se desechen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes 
de agua para evitar la formación de ácidos. Las superficies 
metálicas expuestas, deberán limpiarse con hidróxido de sodio 
al 10%. 
Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles 
 
Los reactivos deben utilizarse solamente para su 
propósito por personal de laboratorio cualificado, y 
bajo condiciones de laboratorio apropiadas. 
 
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y 
ESTABILIDAD 
R1a. Tampón/Substrato 
 Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad 
cuando se conserva entre +2 y+8C 
 
R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 
 Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/ 
-oxoglutarato R1b con el volumen apropiado de 
Tampón/Substrato R1a: 
 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AL 1200) 
 10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AL 1205) 
 20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AL 1268) 
 Estable durante 14 días entre +2 y+8C e ó 24 horas 
entre+15 y +25C. 
 
 Cat. No. AL 2360 5 x 100 ml 
 Reconstituir un vial of Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 
R1b con una parte de Tampón/Substrato R1a y después 
transferir todo el contenido a la botella R1a, enjuagando la 
botella R1b varias veces. Estable durante 14 días entre +2 
y+8C e ó 24 horas entre+15 y +25C. 
 
R1 = Bufer/Substrato/Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 
R2 = Ninguno 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Tampón/Substrato 
Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 
 
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS 
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y 
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) 
Sueros de Calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351) 
Salino RX series (Cat. No. SA 3854) 
 
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MANUAL AL 1200 
PROCEDIMIENTO 
Aspire H2O de doble destilación y realice una nueva 
calibración de la ganancia en el modo de célula de flujo. 
Seleccione ALT en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y 
lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada. 
 
Pipetee en un tubo de ensayo: 
 
Muestra 0,05 ml 
Reactivo 0,5 ml 
 
Mézclelo y aspírelo en Rx Monza. 
 
CALIBRACIÓN PARA RX MONZA 
Se recomienda el uso de suero fisiológico y suero de 
calibración de nivel 3 de Randox para la calibración. Es 
aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibración o 
seguir lo indicado por los procedimientos de control de 
calidad. 
 
PARA USO MANUAL 
 
Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm o Hg 365 nm) 
Cubeta: 1 cm de espesor 
Temperatura: 30/37C 
Medición: frente al aire 
 
Pipetear en la Cubeta: 
 
 Macro Micro 
 
Muestra 0,2 ml 0,1 ml 
R1. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2,0 ml 1,0 ml 
 
Mezclar. Leer la absorbancia inicial después de 1 minuto. 
Leer de nuevo tras 1, 2 y 3 minutos. Observar si el cambio de 
absorbancia por minuto está entre 
 0,11 y 0,16 a 340 nm/Hg 334 nm 
 0,06 y 0,08 a Hg 365 nm 
usar sólo los valores para los 2 primeros minutos del cálculo. 
 
CÁLCULO MANUAL 
Para calcular la actividad de la ALT utilizar la siguiente fórmula: 
 
U/l = 1746 x A 340 nm/min 
U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min 
U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min 
 
 
NORMALIZACIÓN 
El suero de calibración de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en 
el material de referencia JSCC TS01 de ALT. 
 
CONTROL DE CALIDAD 
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y 
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles 
distintos de controles al menos una vez al día. Los valores 
obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si 
los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye 
error, se deberán seguir los siguientes pasos: 
1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara. 
2. Comprobar que todo material está limpio. 
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento 
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los 
resultados. 
4. Comprobar la temperatura de reacción 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de 
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 
94422413. 
 
INTERFERENCIA 
Evitar la hemólisis ya que interfiere con el análisis. 
 
VALORES DE NORMALIDAD EN SUERO(1) 
 
 25C 30C 37C 
 
Hombres hasta 22 U/l hasta 29 U/l hasta 40 U/l 
Mujeres hasta 17 U/l hasta 22 U/l hasta 31 U/l 
 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio 
rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad 
geográfica de la población.CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE 
FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA 
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante 
un analizador Rx Monza en funcionamiento a 37 ºC. 
 
SENSIBILIDAD 
La concentración detectable mínima de ALT con un nivel 
aceptable de precisión se determinó en 7,99 U/l. 
 
LINEALIDAD 
Este método es lineal hasta 500 U/l. Si la concentración 
sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + x con una 
solución del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de 
nuevo. Multiplique el resultado por x + 1. 
 
PRECISION 
 
Análisis (Intra) 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 38.9 134 
DE 1.79 1.59 
CV(%) 4.61 1.19 
n 20 20 
 
Análisis (Inter) 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 38.9 134 
DE 1.78 5.22 
CV(%) 4.58 3.90 
n 20 20 
 
CORRELACIÓN 
Este método (Y) se comparó con otro método comercial 
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión 
lineal: 
 
Y = 0,99 X + 17,2 
y un coeficiente de correlación r = 0,9935 
 
Se analizaron 47 muestras de pacientes con valores de entre 
18 y 522 U/l. 
 
REFERENCIAS 
1. International Federation of Clinical Chemistry, Scientific 
Committee. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1980; 18: 
521-534. 
 
 
 
 
Revisado el 04 Apr 11, bm 
Rev. 004 
GA
AM
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AMONIACO (NH3) 
Método Enzimático - UV 
MANUAL 
 
PARA SU USO 
Para la determinación cuantitativa in vitro de Amoníaco en plasma. 
Este producto es adecuado para su utilización en Manual. 
 
No. Cat. 
AM 1054 R1a. Reactivo 20 x 3 ml 
20 x 3 ml R1b. Tampón 70 ml 
 R2. GLDH 1,0 ml 
 CAL. Patrón 5,5 ml 
 
RELEVANCIA CLÍNICA 
La mayor fuente de amoniaco en circulación es el tracto 
gastrointestinal. En condiciones normales, el amoniaco se 
metaboliza a la urea por las enzimas hepáticas. Muchas 
enfermedades, tanto heredadas como adquiridas, causan un 
incremento en los niveles de amoniaco (hiperamonemia). Las 
deficiencias heredadas de las enzimas del ciclo de la urea son la 
mayor causa de hiperamonemia en niños. La hiperamonemia 
adquirida está provocadas por una enfermedad hepática, 
insuficiencia renal o el síndrome de Reye. Un nivel de amoniaco 
elevado resulta tóxico para el sistema nervioso central. 
 
PRINCIPIO(1) 
 GLDH 
-oxoglutarato + NH3 + NADH glutamato + NAD+ 
 
El amoníaco se combina con -oxoglutarato y NADH en 
presencia de glutamato deshidrogenasa (GLDH) para 
formar glutamato y NAD
+
. La correspondiente disminución 
de la absorbancia a 340 nm es proporcional a la 
concentración de amoníaco en plasma.
(1)
 
 
MUESTRA(2) 
Plasma heparinizado o EDTA plasma. 
Se obtiene sangre venosa sin estancar y se conserva en un baño 
de hielo. El plasma se separa dentro de 30 min. El ensayo de 
amoníaco debería llevarse a cabo inmediatamente. El plasma 
puede conservarse durante 2 horas a +4C. 
 
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentración inicial de las soluciones 
 
R1a. Reactivo 
 NADH 0,16 mmol/l 
 -oxoglutarato 2 mmol/l 
R1b. Tampón 
 Trietanolamina 0,15 mol/l, pH 8,6 
R2. GLDH 1200 U/ml 
CAL. Patrón See lot specific insert 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. 
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren 
al manejar reactivos de laboratorio. 
 
Las soluciones R1b, R2 y CAL contienen azida sódica. Evitar su 
ingestión o contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto 
con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con agua 
abundante. En caso de ingestión o contacto con los ojos llamar 
inmediatamente a un médico. 
 
La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las tuberías, 
lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se desheche 
este reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la 
formación de estas azidas. Las superficies metálicas que hayan 
sido puestas en contacto con la azida sódica deben ser lavadas 
con hidróxido sódico al 10%. 
 
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se 
desean. 
 
Por favor, desechar todos los materials Biológicos y Químicos de 
acuerdo a las pautas locales. 
 
Los reactivos deben ser utilizados solo para los 
propósitos indicados por personal adecuado cualificado 
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de 
laboratorio 
 
ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS 
R1a. Reactivo 
 Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo R1a con 
 3 ml de Tampón R1b. Es estable 24 horas entre +15 y 
+25C ó 2 días entre +2 y +8C. 
 
R1b. Tampón 
 Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad 
especificada cuando se conserva entre +2 y +8C. 
 
R2. GLDH 
 Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad 
especificada cuando se conserva entre +2 y +8C. 
 
CAL. Patrón 
 Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad 
especificada cuando se conserva entre +2 y +8C. 
 
R1 = Reactivo/Tampón 
R2 = GLDH 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Reactivo 
Tampón 
GLDH 
Patrón 
 
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO 
PROPORCIONADOS 
Controles Randox de Amonio Etanol: 
NIvel 1 (Cat. No. EA 1366) 
Nivel 2 (Cat. No. EA 1367) 
Nivel 3 (Cat. No. EA 1368) 
 
GA
AM
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MANUAL - AMONIACO - AM 1054 PAGINA 2 DE 2 
 
 
PROCEDIMIENTO 
 
Longitud de onda: 340 nm 
Cubeta: 1 cm de espesor 
Temperatura: 25/30/37C 
Medición: Frente al aire 
 
Procedimiento Macro 
 
Pipetear en la cubeta: 
 
 Blanco de Patrón Muestra 
 Reactivo 
 
Muestra --- --- 0,2 ml 
Agua destilada 0,2 ml --- --- 
Patrón --- 0,2 ml --- 
Reactivo (R1) 3,0 ml 3,0 ml 3,0 ml 
 
Mezclar, dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial 
de la muestra y del blanco (A1). 
 
GLDH (R2) 0,02 ml 0,02 ml 0,02 ml 
 
Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la 
muestra y del blanco (A2). 
 
Procedimiento Semi Micro 
 
Pipetear en la cubeta: 
 
 Blanco de Patrón Muestra 
 Reactivo 
 
Muestra --- --- 0,1 ml 
Agua destilada 0,1 ml --- --- 
Patrón --- 0,1 ml --- 
Reactivo (R1) 1,5 ml 1,5 ml 1,5 ml 
 
Mezclar, y dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial 
de la muestra y del blanco (A1). 
 
GLDH (R2) 0,01 ml 0,01 ml 0,01 ml 
 
Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la 
muestra y del blanco (A2). 
 
CONTROL DE CALIDAD 
Los controles Randox de Amonio Etanol Nivel 1, Nivel 2 y 
Nivel 3 se recomiendan para el control diario de calidad Deberían 
utilizarse como mínimo dos niveles de controles una vez al día. Los 
valores obtenidos deberían entrar dentro de un rango determinado. 
Si estos valores se salen de ese rango aun habiéndolo repetido, se 
deben seguir los siguientes pasos: 
1. Comprobar los ajustes del instrumento y el foco de luz. 
2. Comprobar la limpieza de todo el equipo. 
3. Comprobar el agua y la presencia del algún posible agente 
contaminante que pueda interferir en los resultados. 
4. Comprobar la temperatura de reacción. 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y los componentes del 
mismo. 
6. Contactar con el Servicio Técnico de Laboratorios Randox. 
 Irlanda del Norte (028) 94422413. 
 
CÁLCULOS 
Ablanco = Blanco A1 - Blanco A2 
 
Amuestra = Muestra A1 - Muestra A2 
 
Utilizando un patrón: 
 
 Amuestra - Ablanco 
Conc. de x Patrón de conc. 
Amoníaco = Apatrón - Ablanco 
 
INTERFERENCIA 
La hemólisis interfiere con el análisis. 
 
En muestras normales se observa un pequeño cambio de 
absorbancia. Esto puede ser aumentado añadiendo 0,3 ml de 
muestra en vez de 0,2 ml. para el procedimiento macro y 0,15 ml 
de muestra en vez de 0,1 ml para el procedimiento semi micro. 
 
Para utilizar un método completamente automatizado de 
amoníaco recomendamos No. Cat. AM 1015. 
 
VALORES NORMALES (2) 
Amoníaco en plasma: 10 - 47 mol/l 
 0,17 -0,80 g/ml 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango 
que refleje la edad, sexo, dieta y localidadgeográfica de la 
población. 
 
LINEALIDAD 
El método es lineal hasta 1180 µmol/l (20 µg/ml). 
 
REFERENCIAS 
1. Dewan J.G., Biochem J., 1938; 32: 1378. 
2. Mondzac A., Ehrlich G.E., Seegmiller J.E., J Lab Clin. Med., 
1965; 66: 526. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Revisado el 26 Abril 2010 bm 
 
Rev. 001 
 
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ANTITROMBINA III 
(AT III) 
SEMIAUTOMÁTICO 
 
INDICACIONES 
Determinación cuantitativa in vitro de la antitrombina III (AT 
III) en plasma humano mediante el método cromogénico. El 
producto es adecuado para uso con métodos manuales o 
semiautomáticos. 
 
Núm. cat. 
ANT 2754 R1a. Reactivo de trombina 4 x 2 ml 
26 ml R1b. Tampón 1 x 10 ml 
 R2. Sustrato 4 x 2 ml 
 
RELEVANCIA CLÍNICA 
La antitrombina III es un inhibidor de las proteasas 
plasmáticas del tipo serina. Una función importante de la 
antitrombina III es inhibir la actividad de la trombina. Por lo 
general, la velocidad de inhibición de la trombina causada por 
la antitrombina III es lenta (actividad antitrombina 
progresiva). Sin embargo, dicha velocidad puede aumentar 
miles de veces en presencia de heparina (actividad cofactor 
de la heparina). 
Tolefsen y Blank(1) han descubierto otro inhibidor rápido de 
la trombina que depende de la heparina, el cofactor II de la 
heparina, en el plasma humano. Esta proteína puede interferir 
en las mediciones de antitrombina III, especialmente a 
concentraciones de heparina elevadas (2 unidades/ml USP). 
 
PRINCIPIO 
En este método de dos fases(2) se añade trombina a la 
solución diluida de plasma que contiene antitrombina III en 
presencia de exceso de heparina. Tras un período de 
incubación inicial (fase 1) la actividad residual de la trombina 
se determina con un sustrato cromogénico específico de la 
trombina (fase 2). La actividad residual de la trombina es 
inversamente proporcional a la concentración de 
antitrombina III. 
Con el fin de conferir especificidad para la antitrombina III, 
este sistema de ensayo utiliza un concentración final de 
heparina más baja, en la cual la inactivación de la trombina 
aumentada por heparina, debida al cofactor II de la heparina, 
es desdeñable. Además, el cofactor II de la heparina humana 
reacciona más fácilmente con la trombina humana que con la 
bovina(3). Así, este sistema de ensayo presenta mayor 
especificidad para la antitrombina III al utilizar trombina 
bovina. 
 
MUESTRA 
Plasma citrado. 
Plasma diluido 1+40 en NaCl al 0,9%. 
RECOGIDA DE MUESTRAS Y PREPARACIÓN (4) 
Mezcle nueve partes de sangre recién extraída con una parte 
de citrato trisódico al 3,2% (0,109 mol/l). Evite la hemólisis y 
la contaminación de la muestra sanguínea con fluidos 
corporales. Se deben rechazar las muestras que contengan 
menos del 90% del volumen previsto de llenado. Centrifugue 
la sangre durante 15 minutos a 1500 g. Realice el análisis en 
un lapso de 4 horas, si las muestras se conservan entre 20 y 
25°C. Si la prueba no se realiza antes de las 4 horas, el 
plasma puede mantenerse congelado a -20°C hasta 2 
semanas, o a -70°C durante un máximo de 6 meses. Para 
obtener más detalles sobre la recogida de muestras consulte 
el documento NCCLS H21-A3. 
 No postergue el mezclado de la sangre con el 
anticoagulante. 
 Evite la formación de espuma en la muestra. 
 Utilice exclusivamente recipientes de plástico o de vidrio 
siliconado. 
 Las muestras turbias, ictéricas, lipémicas y hemolizadas 
pueden generar resultados erróneos. 
 La congelación y consiguiente descongelación de 
muestras de plasma que contengan células residuales 
podría generar membranas celulares dañadas que pueden 
afectar a los resultados. 
 El las muestras de plasma con un hematocrito fuera del 
intervalo del 20 al 55% puede que la concentración de 
anticoagulante errónea, por lo que debe ajustarse el 
anticoagulante según proceda. 
 
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO 
 
Contenido Concentración inicial 
 de las soluciones 
R1a. Reactivo de trombina 
 Trombina bovina liofilizada 8 UI/ml 
R1b. Tampón 
 Tampón tris 90 mmol/l, pH 8,2 
R2. Sustrato 
 Tosyl-Gly-Pro-Arg-4-nitranilida 
 acetato 2,5 mmol/l 
 
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DE 
SEGURIDAD 
Solo para uso diagnóstico in vitro. No pipetee con la boca. 
Aplique las precauciones habituales necesarias para la 
manipulación de reactivos de laboratorio. 
 
El reactivo tampón de la antitrombina III (R1b) contiene acida 
sódica. Evite la ingestión o el contacto con la piel o las 
mucosas. En caso de contacto con la piel, lave el área 
afectada con abundante agua. En caso de contacto con los 
ojos o ingestión, busque atención médica de inmediato. 
 
La acida sódica reacciona con las tuberías de plomo y cobre, 
con el consiguiente riesgo de generación de acidas explosivas. 
Al eliminar estos reactivos, hágalo con gran cantidad de agua 
para evitar la acumulación de acidas. Las superficies 
expuestas de metal deben limpiase con hidróxido sódico al 
10%. 
 
Están disponibles, previa petición, las fichas técnicas de salud 
y seguridad. 
 
Los reactivos deben utilizarse solo para la finalidad 
prevista y por personal de laboratorio 
adecuadamente cualificado, en unas condiciones de 
laboratorio apropiadas. 
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 MANUAL ANT 2754 
ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS 
REACTIVOS 
R1a. Reactivo de trombina 
Reconstituya un vial de reactivo de trombina (R1a) con 
2 ml de tampón (R1b). 
 Estable durante 2 días entre +15 y +25°C; 14 días 
entre +2 y +8°C; 30 días a -20°C. 
 
R1b. Tampón 
Contenido listo para su uso. Estable hasta la fecha de 
caducidad cuando se almacena a una temperatura entre 
+2 y +8°C. 
 
R2. Sustrato 
Reconstituya un vial de sustrato (R2) con 2 ml 
de agua desionizada. 
 Estable durante 8 días entre +15 y +25°C; 14 días 
entre +2 y +8°C; 90 días a -20°C. 
 
Precaliente las partes alícuotas de reactivo de 
trombina (R1a) y sustrato (R2) a +37°C antes de 
utilizarlas. 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Reactivo de trombina 
Tampón 
Sustrato 
 
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS 
Calibrador de coagulación Randox (N.º cat. CG5037) 
Controles de coagulación Randox de nivel 1, 2 y 3 (N.º cat. 
CG5021, CG5022 y CG 5023) 
Micropipetas 
Micropuntas 
Analizador de coagulación foto-óptico 
Temporizador 
 
PROCEDIMIENTO 
 
Pipetear en una cubeta 
 
Muestra diluida/control/calibrador 100 µl 
Reactivo de trombina (R1) 100 µl 
 
Mezclar bien e incubar a +37°C durante 3 minutos, añadir 
 
sustrato (R2) 100 µl 
 
Mezclar bien y tras 5 segundos leer la absorbancia inicial a 
405 nm. Volver a leer la absorbancia transcurridos 30 
segundos. 
Determinar la velocidad de cambio de absorbancia 
(∆Abs/min) 
 
Siga las instrucciones del fabricante del instrumento 
para realizar la prueba. 
 
CALIBRACIÓN 
Para la calibración se recomienda el calibrador de coagulación 
Randox (valor específico de lote). Use salino como calibrador 
del 0%, con el calibrador de coagulación Randox como 50% y 
100%. Se recomienda calibrar cambiando el lote de reactivo o 
tal como indican los procedimientos de control de calidad. 
CÁLCULO DE LOS RESULTADOS 
Trace el gráfico de la ∆Abs/min obtenida con cada calibrador 
de antitrombina III frente al % de antitrombina III 
correspondiente en papel de escala lineal. 
La antitrombina III en las muestras de plasma del paciente se 
puede determinar mediante la interpolación de la curva de 
calibración. 
 
CONTROL DE CALIDAD 
Se recomiendan los controles de coagulación Randox de nivel 
1, 2 y 3 para el control de calidad diario. Deben analizarse 
tres niveles de controles al menos una vez al día. Los valores 
obtenidos deben situarse dentro de un intervalodeterminado. Si estos valores están fuera del intervalo y la 
repetición excluye un posible error, debe procederse como 
sigue: 
1. Comprobar los parámetros del instrumento. 
2. Comprobar que todo el equipo utilizado esté limpio. 
3. Comprobar los contaminantes, como un crecimiento 
bacteriano, que pueden contribuir a la obtención de 
resultados imprecisos. 
4. Comprobar la temperatura de la reacción. 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y su contenido. 
6. Póngase en contacto con el servicio técnico de atención 
al cliente de Randox Laboratories, llamando al teléfono 
+44 (0) 28 9442 2413 (Irlanda del Norte). 
 
VALORES PREVISTOS 
Los valores normales con el reactivo Randox AT III están 
comprendidos dentro del 75 y 125%. 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio 
rango de referencia, ya que pueden existir diferencias entre 
instrumentos, laboratorios y poblaciones locales. 
 
INTERFERENCIA 
Evite utilizar muestras fuertemente hemolizadas y lipémicas, 
ya que pueden interferir con el ensayo. 
Se comprobaron los siguientes analitos, hasta los niveles que 
se indican, sin encontrar interferencias: 
 
Bilirrubina conjugada 12 mg/dl 
Bilirrubina libre 12 mg/dl 
Intralípidos 300 mg/dl 
Triglicéridos 320 mg/dl 
Hemoglobina 140 mg/dl 
 
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO 
Se han obtenido los siguientes datos de rendimiento 
mediante un coagulómetro semiautomático a +37ºC. 
 
SENSIBILIDAD 
La actividad mínima detectable de la antitrombina III se 
determina como 30,0%. 
 
LINEALIDAD 
Este método es lineal hasta un 130% de actividad de la 
antitrombina III. Si la muestra excede este valor, diluya las 
muestras previamente diluidas (1+40) de plasma aún más 1+1 
con salino al 0,9% y repita el análisis. Multiplique el resultado 
por 2. 
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 MANUAL ANT 2754 
PRECISIÓN 
 
Intraensayo 
 Normal Patológica 
Media (%) 102 65,5 
DE 1.89 2,35 
CV (%) 1.86 3,59 
n 20 20 
 
Interensayo 
 Normal Patológica 
Media (%) 85.0 59.4 
DE 1.86 2.24 
CV (%) 2.19 3.77 
n 20 20 
 
CORRELACIÓN 
Este método (Y) se ha comparado con otro método 
disponible en el mercado (X) y se ha obtenido la siguiente 
ecuación de regresión lineal: 
 
Y = 1,00X + 0,22 
y un coeficiente de correlación de 1,00 
 
Se analizaron 40 muestras de pacientes que abarcaron un 
rango del 38,3 al 113,7% 
 
REFERENCIAS 
1. Tolefsen DM and Blank MK, J. Clin. Invest. 68: 589-596, 
1981. 
2. Odegard OR, Lie M and Abildgaard U: Thromb Res. 6: 
287-294, 1975. 
3. Friberger P, Egberg N, Holmer E, Hellgren M and 
Blomback M, Thromb. Res. 25: 433-436, 1982. 
4. Rosemary Biggs, Human blood Coagulation, 
Haemostasis and Thrombosis, Blackwell Scientific 
Publications, Oxford, England, 1972. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Revisado 25 may 12 rw 
Rev. 002 
 
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ALP 
Fosfatasa Alcalina 
MANUAL 
RX MONZA 
 
PARA SU USO 
Para el análisis cuantitativo in vitro de la Fosfatasa Alcalina 
(ALP) en suero yl plasma. Este producto es adecuado para un 
uso manual o en el analizador Rx Monza. 
 
No. Cat. 
AP 542 R1a. Tampón 1 x 70 ml 
20 x 3 ml R1b. Substrato 20 x 3 ml 
 
AP 307 R1a. Tampón 1 x 105 ml 
10 x 10 ml R1b. Substrato 10 x 10 ml 
 
METODO COLORIMETRICO (1) 
Este es una método estándar optimizado de acuerdo a las 
recomendaciones del Deutsche Gesellschaft für Klinische 
Chemie. 
 
PRINCIPIO 
 ALP 
p-nitrofenilfosfato + H2O fosfato + p-nitrofenol 
 
MUESTRA(2) 
Suero o plasma heparinizado. 
Las muestras son estables durante 5 días cuando se conservan 
entre +2 y +8C. 
 
COMPOSICION DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentraciones en la Prueba 
 
R1a. Tampón 
 Tampón Dietanolamina 1 mol/l, pH 9,8 
 MgCl2 0,5 mmol/l 
R1b. Substrato 
 p-nitrofenilfosfato 10 mmol/l 
 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. 
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo 
de reactivos de laboratorio. 
 
La solución R1a contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el 
contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de 
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante 
agua. En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar 
atención médica inmediatamente. 
 
La Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las 
cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando 
se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes 
de agua para evitar la formación de ácidos. Las superficies 
metálicas expuestas, deberán limpiarse con hidróxido de sodio 
al 10%. 
 
La Solución R1a contiene dietanolamina que puede dañar 
seriamente los ojos y que es dañino si se traga. Evitar la 
ingestión y llevar protección adecuada para los ojos. 
 
Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean. 
 
Los reactivos deben utilizarse solamente para su 
propósito por personal de laboratorio cualificado, y 
bajo condiciones de laboratorio apropiadas. 
ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS 
REACTIVOS 
R1a. Tampón 
 Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad 
cuando se conserva entre +2 y +8C. 
 
R1b. Substrato 
 Reconstituir un frasco de Substrato R1b con el 
volumen apropiado de Tampón R1a:- 
 3 ml para el kit de 20 x 3 ml (AP 542) 
 10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AP 307) 
 Estable durante 30 días entre +2 y +8C ó 3 días entre 
+15 y +25C. 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Tampón 
Substrato 
 
MATERIALES NECESARIOS PERO NO 
SUMINISTRADOS 
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y 
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) 
Sérum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351). 
Salino  (Cat. No. SA 3854) 
 
PROCEDIMIENTO 
Aspire H2O de doble destilación y realice una nueva 
calibración de la ganancia en el modo de célula de flujo. 
Seleccione ALP en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y 
lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada. 
 
Pipetee en un tubo de ensayo: 
 
Muestra 0,01 ml 
Reactivo 0,5 ml 
 
Mézclelo y aspírelo en Rx Monza. 
 
CALIBRACIÓN PARA RX MONZA 
Se recomienda el uso de suero fisiológico y suero de 
calibración de nivel 3 de Randox para la calibración. Es 
aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibración o 
seguir lo indicado por los procedimientos de control de 
calidad. 
 
PARA USO MANUAL 
 
Longitud de onda: Hg 405 nm 
Cubeta: 1 cm de espesor 
Temperatura: 25C, 30C, 37C 
Medición: frente al aire 
 
Pipetear en la cubeta: Macro Semi- Micro 
 Micro 
 
Muestra 0,05 ml 0,02 ml 0,01 ml 
Reactivo (25C, 30C, 37C) 3,00 ml 1,00 ml 0,50 ml 
 
Mezclar, leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar 
simultáneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 minutos. 
 
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MANUAL / RX MONZA - ALP - FOSFATASA ALCALINA - AP542 / AP 307 PAGINA 2 OF 2 
 
 
MANUAL CALCULO 
Utilizar la siguiente formula para calcular la actividad 
de ALP: 
 
U/l = 3300 x A 405 nm/min MACRO 
U/l = 2760 x A 405 nm/min SEMI-MICRO 
U/l = 2760 x A 405 nm/min MICRO 
 
 
CONTROL DE CALIDAD 
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y 
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles 
distintos de controles al menos una vez al día. Los valores 
obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si 
los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye 
error, se deberán seguir los siguientes pasos: 
1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara 
2.Comprobar que todo material está limpio. 
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento 
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los 
resultados. 
4. Comprobar la temperatura de reacción 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de 
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte (028) 94422413. 
 
INTERFERENCIA 
Evitar la hemólisis ya que interfiere con el análisis. Los 
siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y 
se encontró que no interfieren: 
 
 Bilirrubina 300 mol/l (17 mg/dl) 
 Intralípidos® 2% 
 Triglicéridos 22,75 mmol/l (2010 mg/dl) 
 Hemoglobina 1 g/l (100 mg/dl) 
 
VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO 
 
 25C 30C 37C 
 
Hombres/Mujeres 60-170 U/l 73-207 U/l 98-279 U/l 
 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio 
rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad 
geográfica de la población. 
 
CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE 
FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA 
Los siguientes datos de rendimiento se obtuvieron mediante el 
analizador Rx Monza a una temperatura de 37 oC. 
 
SENSIBILIDAD 
La concentración mínima detectable de ALP con un nivel 
aceptable de precisión se ha determinado en 49,9 U/l 
 
LINEALIDAD 
El método es lineal hasta 1609 U/l. Si la concentración 
sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 9 con una 
solución del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de 
nuevo. Multiplicar el resultado por 10. 
 
PRECISION 
 
Análisis Intra 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 262 486 
DE 8.11 9.49 
CV(%) 3.10 1.95 
n 20 20 
 
Análisis Inter 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 262 486 
DE 11.59 17.01 
CV(%) 4.43 3.50 
n 20 20 
 
CORRELATION 
Este método (Y) se comparó con otro método disponible en 
el mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión 
lineal: 
 
Y = 1.076X - 14.5 
y un coeficiente de correlación de r = 0.9975 
 
se hicieron análisis a 43 pacientes abarcando un rango 
de 52 a 965 U/l. 
 
REFERENCIAS 
1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1972; 
10: 182. 
2. Englehardt A., et al, Aerztl Labor 1970 16 42. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Revisado el 10 Sep 2010 bm 
 
Rev. 001 
 
 
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AST 
Aspartato Aminotransferasa 
IFCC 
MANUAL 
 
PARA SU USO 
Para el análisis cuantitativo in vitro de aspartato aminotransferasa 
(AST) en suero y plasma. Este producto es adecuado para su 
utilización de forma manual y en el analizador Rx Monza. 
 
Cat. No. 
AS 1202 R1a. Tampón/Sustrato 1 x 70 ml 
20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 20 x 2 ml 
 -oxoglutarato 
 
AS 1204 R1a Tampón/Sustrato 1 x 105 ml 
10 x 10 ml R1b Enzima/Coenzima/ 10 x 10 ml 
 -oxoglutarato 
 
AS 1267 R1a Tampón/Sustrato 1 x 105 ml 
5 x 20 ml R1b Enzima/Coenzima/ 5 x 20 ml 
 -oxoglutarato 
 
AS 2359 R1a Tampón/Sustrato 5 x 100 ml 
5 x 100 ml R1b Enzima/Coenzima/ 5 x 100 ml 
 -oxoglutarato 
 
METODO UV 
Este es un método estándar optimizado según las 
concentraciones recomendadas por la IFCC. 
 
SIGNIFICADO CLINICO(1,2,3,4) 
Las aminotransferasas son un grupo de enzimas que catalizan las 
inter conversiones de aminoácidos y -oxoácidos por medio de la 
transferencia de grupos amino. La GOT (aspartato 
aminotransferasa o transaminasa de oxaloacetato glutamato) se ha 
encontrado en el citoplasma y mitocondrias de las células 
estudiadas. En caso de un ligero daño del tejido como por ej. el 
hígado, la forma predominante de la GOT en suero es la del 
citoplasma, con una cantidad más pequeña proviniente de las 
mitocondrias. Un daño más severo del tejido dará como resultado 
una mayor liberación de enzima mitocondrial. Los niveles elevados 
de AST pueden ser una señal de infarto de miocardio, enfermedad 
hepática, distrofia muscular y daño de órganos. 
Los músculos del corazón son los que muestran más actividad de 
ésta enzima, sin embargo también se ha encontrado en el cerebro, 
hígado, mucosa gástrica, tejido adiposo y riñones humanos. 
La IFCC recomienda actualmente (1980) procedimientos 
estandarizados para los análisis de GOT incluyendo:- 
1. optimización de las concentraciones de substrato. 
2. Empleo de tampones Tris (en lugar de fosfato, el cual se ha 
demostrado que inhibe la recombinación de la apoenzima con 
el fosfato piridoxal). 
3. Preincubación de suero y tampón combinado para permitir que 
tengan lugar posibles reacciones con NADH. 
4. Substrato de inicio (-oxoglutarato) 
5. Activación de fosfato piridoxal opcional. 
 Este es un método estándar optimizado de acuerdo a las 
recomendaciones de la IFCC. 
 
PRINCIPIO 
El -oxoglutarato reacciona con la L-aspartato en presencia de 
GOT para formar L-glutamato mas oxaloacetato. La reacción 
indicadora utiliza el oxaloacetato para la determinación cinética 
del consumo de NADH. 
 AST 
-oxoglutarato + L-aspartato L-glutamato + oxaloacetato 
 
 MDH 
oxaloacetato + NADH + H+ L-malato + NAD+ 
 
EXTRACCION Y PREPARACION DE MUESTRAS (5) 
Suero:- Use serum free from hemolysis. 
Plasma:- Se puede utilizar EDTA o heparina como anticoagulante. 
El plasma se degerá separar de las células durante la 
hora siguiente a su extracción. Las muestras se deberán 
refrigerar si no se utilizan inmediatamente:- 
Las muestras que se almacenen durante más de 3 días se 
deberán congelar a -20C. 
 
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentraciones en la prueba 
 
R1a. Tampón/Sustrato 
 Tampón Tris 80 mmol/l, pH 7,5 
 L-aspartato 240 mmol/l 
R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 
 -oxoglutarato 12 mmol/l 
 MDH ≥ 420 U/l 
 LD ≥ 600 U/l 
 NADH 0,18 mmol/l 
 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. 
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren 
al manejar reactivos de laboratorio. 
 
La solución R1a contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o 
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, 
lavar inmediatamente el área afectada con agua abundante. En 
caso de ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente 
a un médico. 
 
La Azida Sódica reacciona con el cobre y el plomo de las 
tuberías, lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se 
deseche este reactivo enjuagar abundantemente con agua para 
evitar la formación de estas azidas explosivas. Las superficies 
metálicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sódica 
deben ser lavadas con hidróxido sódico al 10%. 
 
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si 
se desean. 
 
Los reactivos deben ser utilizados solo para los 
propósitos indicados por personal adecuado cualificado 
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de 
laboratorio. 
 
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MANUAL/RX MONZA - AST - AS 1202/ AS 1204/ AS 1267/ AS 2359 PAGE 2 OF 3 
 
ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS 
R1a. Tampón/Sustrato 
 Listo para su uso. Estables hasta la fecha de caducidad 
cuando se conservan entre +2 y +8C. 
 
R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 
 Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2 
con el volumen adecuado de Tampón/Sustrato 1: 
 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AS1202) 
 10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AS1204) 
 20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AS1267) 
 Es estable durante 14 días conservado entre +2 y +8C ó 
24 horas entre +15 y +25C 
 Cat. No. AS 2359 5 x 100 ml 
 Disolver el contenido de una botella de Enzima/ 
Coenzima/-oxoglutarato 2 con un pequeño volumen de 
Tampón/Sustrato 1 y luego transferir el contenido a la 
botella 1, enjuagando varias veces la botella 2. Es estable 
durante 14 días cuando se conserva entre +2 y +8oC ó 24 
horas entre +15 y +25oC. 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Tampón/Sustrato 
Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 
 
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOSMultisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y 
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) 
Sueros de Calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351) 
Salino  (Cat. No. SA 3854) 
 
PROCEDIMIENTO 
Aspire H2O de doble destilación y realice una nueva calibración 
de la ganancia en el modo de célula de flujo. Seleccione AST en la 
pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a cabo un blanco de 
agua de la forma indicada. 
 
Pipetee en un tubo de ensayo: 
 
Muestra 0.05 ml 
Reactivo 0.5 ml 
 
Mix and aspirate into the Rx Monza. 
 
CALIBRACIÓN PARA RX MONZA 
Se recomienda el uso de suero fisiológico y suero de calibración 
de nivel 3 de Randox para la calibración. Es aconsejable cambiar 
el lote del reactivo para la calibración o seguir lo indicado por los 
procedimientos de control de calidad. 
 
PARA USO MANUAL 
 
Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm ó Hg 365 nm) 
Cubeta: 1 cm de espesor 
Temperatura: 25/30/37C 
Medición: Frente al aire 
 
Pipetear en cubeta: Macro Micro 
 
Muestra 0,2 ml 0,1 ml 
Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2 2,0 ml 1,0 ml 
 
Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 1 min. Leer de 
nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. Observar si la variación de la 
absorbancia por minuto se sitúa entre 
 0,11 y 0,16 a 340/Hg 334 nm 
 0,06 y 0,08 a Hg 365 nm 
para el cálculo usar sólo los valores obtenidos durante los 2 
primeros minutos. 
 
 
MANUAL CALCULOS 
Para calcular la actividad de la GOT utilizar las fórmulas 
siguientes: 
 
U/l = 1746 x A 340 nm/min 
U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min 
U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min 
 
 
NORMALIZACIÓN 
El suero de calibración de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en 
el material de referencia JSCC TS01 de AST. 
 
CONTROL DE CALIDAD 
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de 
controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán 
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se 
encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se 
deberán seguir los siguientes pasos: 
1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara. 
2. Comprobar que todo material está limpio. 
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento bacteriano 
puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 
4. Comprobar la temperatura de reacción 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los 
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413. 
 
ESPECIFICIDAD/INTERFERENCIA(6,7) 
La hemólisis bruta producirá falsos resultados elevados. 
Se deberá tomar en consideración los efectos de varios fármacos 
en la actividad de La GOT en los casos de pacientes que estén 
recibiendo grandes dosis de fármacos. 
 
Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y 
se encontró que no interfieren: 
 
 Hemoglobina 250 mg/dl 
 Bilirrubina libre 25 mg/dl) 
 Bilirrubina conjugada 25 mg/dl) 
 Triglicéridos 1000 mg/dl) 
 Intralipid® 200 mg/dl 
 
Young et cols y Friedman et cols dan una lista de sustancias y 
condiciones que se conoce que afectan a la actividad in vivo de La 
GOT . La integridad de esta lista y la exactitud de la información 
que en ella se suministra no representa necesariamente la 
opinión de Randox Laboratories, Ltd. 
 
VALORES NORMALES EN SUERO(8,9) 
 
 25C 30C 37C 
 
Hombre: Hasta 18 U/l Hasta 25 U/l Hasta 37 U/l 
Mujer : Hasta 15 U/l Hasta 21 U/l Hasta 31 U/l 
 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango 
que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de la 
población. 
 
CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE 
FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA 
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante 
el analizador Rx Monza a una temperatura de 37oC. 
 
 
 
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MANUAL/RX MONZA - AST - AS 1202/ AS 1204/ AS 1267/ AS 2359 PAGE 3 OF 3 
 
 
LINEALIDAD 
Este método es lineal hasta una concentración de 562 U/l. Si la 
concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 
9 con una solución de NaCl del 0,9% y debe someterse a ensayo 
de nuevo. Multiplicar el resultado por 10. 
 
SENSIBILIDAD 
La concentración detectable mínima de AST con un nivel 
aceptable de precisión se determinó en 9,3 U/l. 
 
PRECISION 
 
Análisis (Intra) 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 35.6 153 
DE 1.66 1.47 
CV(%) 4.65 4.63 
n 20 20 
 
Análisis (Inter) 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 35.6 153 
DE 1.77 7.10 
CV(%) 4.86 4.63 
n 20 20 
 
CORRELATION 
Este método (Y) se comparó con otro método disponible en el 
mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión 
lineal: 
 
Y = 1.07X + 4.9 
y un coeficiente de correlación de r = 0.9975 
 
se hicieron análisis a 43 pacientes abarcando un rango de 28 a 
559 U/l. 
 
REFERENCIAS 
1. Wroblewski F, La Due J.S: Ann Intern Med. 1956; 45: 801. 
2. Wroblewski F, La Due J.S: Proc Soc Exp Biol Med 1956; 
91: 569. 
3. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: Clin Chem 1977; 23: 
887. 
4. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: J.Clin Chem Clin 
Biochem 1980; 18: 521-534. 
5. Tietz N W: Fundamentals of Clinical Chemistry ed 3. 
Philadelphia, WB Saunders Co. 1987, pg 372. 
6. Young D S, et al: Clin Chem 1975, 21; No5. 
7. Friedman RB, et al: Clin Chem 1980, 26; No4. 
8. Wallnofer H, Schmidt.E, Schmidt FW, eds: Synopsis der 
Leberkrankheiten Stuttgart, Georg Thieme Verlag, 1974. 
9. Thefeld W, et al: Dtsch Med Wschr 1974; 99: 343. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Revisado 10 Sep 10 bm 
Rev. 001 
 
 
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AMILASA (AMY) 
Etilideno Bloqueado-pNPG7 
MANUAL 
RX MONZA 
 
PARA SU USO 
Para la determinación cuantitativa in vitro de la Amilasa en el 
suero y orina. Este producto es adecuado para su utilización 
de forma manual y en el analizador Rx Monza. 
 
No. Cat. 
AY 2751 R1a. Tampón 1 x 50 ml 
20 x 2 ml R1b. Substrato 20 x 2 ml 
 
AY 1580 R1a. Tampón 1 x 105 ml 
20 x 5 ml R1b. Substrato 20 x 5 ml 
 
AY 1582 R1a. Tampón 2 x 105 ml 
9 x 20 ml R1b. Substrato 9 x 20 ml 
 
METODO COLORIMETRICO(1,2) 
El método utiliza etilideno bloqueado 
p-nitrofenil-maltoeptaosida como substrato. También se utiliza 
en este método el indicador enzima glucosidasa, utilizado para 
liberar el p-nitrofenol. La glucosa terminal del sustrato se 
bloquea químicamente, previniendo la división por el enzima 
indicador. 
 -amilasa 
 etilideno-G7 pNP etilideno -Gx + Gx-pNP 
 
 -glucosidase 
Gx-pNP glucosa + pNP-glucosido 
 
 - glucosidasa 
pNP-glucosido glucosa + pNP 
 
G = glucosa 
pNP = paranitrofenol 
x = 2 to 5 
 
MUESTRA 
Suero, plasma heparinizado u orina. 
Diluir la orina 1+2 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el resultado 
por 3. 
 
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentración Inicial de los Reactivos 
 
R1a. Tampón 
 Tampón Pipes 50 mmol/l, pH 7.0 
 Cloruro de Calcio 5.0 mmol/l 
 Cloruro Sódico 50 mmol/l 
R1b. Substrato 
 Tampón Pipes 12.5 mmol/l, pH 7.0 
 etilideno-G7 pNP 1.0 mmol/l 
 -glucosidasa ≥12 U/ml 
 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. 
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo 
de reactivos de laboratorio. 
 
La Solución R1a contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el 
contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de 
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante 
agua. En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar 
atención médica inmediatamente. 
 
La Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las 
cañerías, formando ácidos potencialmenteexplosivos. Cuando 
se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes 
de agua para evitar la formación de ácidos. Las superficies 
metálicas expuestas, deberán limpiarse con hidróxido de sodio 
al 10%. 
 
Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles. 
 
Los reactivos deben utilizarse solamente para su 
propósito por personal de laboratorio cualificado, y 
bajo condiciones de laboratorio apropiadas. 
 
ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO 
Reconstituir el contenido de un frasco de Substrato R1b con 
el volumen apropiado de Tampón R1a:- 
 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AY 2751) 
 5 ml para el kit de 20 x 5 ml (AY 1580) 
 20 ml para el kit de 9 x 20 ml (AY 1582) 
Estable durante 21 días entre +2 y + 8oC. 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Tampón 
Substrato 
 
MATERIALES NECESARIOS PERO NO 
SUMINISTRADOS 
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y 
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) 
Suero de Calibración Randox Nivel 3 (No. Cat. CAL 2351). 
 
NOTA 
Evitar la hemólisis ya que puede disminuir los resultados. 
Evitar la contaminación del reactivo, muestras y material de 
cristal por medio de la saliva o sudor, dado que poseen altos 
contenidos de amilasa. No pipetear con la boca. 
 
PROCEDIMIENTO 
Seleccione AMY en la pantalla de prueba de funcionamiento y 
lleve a cabo un blanco de agua según las instrucciones. 
 
Pipetee en un tubo de ensayo: 
 
Muestra 0.01 ml 
Reactivo 0.5 ml 
 
Mezclar y aspirar en el Monza RX 
 
CALIBRACIÓN PARA RX MONZA 
Se recomienda el uso de Calibración Randox nivel 3 para la 
calibración. Se recomienda calibrar cada cambio de lote del 
reactivo o como se indica en los procedimientos de control 
de calidad. 
 
 
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 MANUAL/ RX MONZA AY 2751 
 
PARA USO MANUAL 
 
Longitud de onda: 405 nm (400-420 nm) 
Cubeta: 1 cm de espesor 
Temperatura: 37C 
Medición: frente al aire 
 
Pipetee en una cubeta: 
 
Muestra 0.02 ml 
Reactivo 1.0 ml 
 
Mezclar, leer la absorbancia inicial después de 60 segundos y al 
mismo tiempo iniciar el temporizador. Leer de nuevo pasados 
1, 2 y 3 minutos. 
 
CÁLCULO MANUAL 
Para calcular la actividad de la amilasa utilizar la siguiente 
fórmula: 
U/l = 4712 x A 405 nm/min 
 
NORMALIZACIÓN 
El suero de Calibración Randox nivel 3 es trazable a los 
materiales de referencia amilasa IFCC456 y BCR476. 
 
CONTROL DE CALIDAD 
Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros 
Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deberá de analizar 
dos niveles de controles al menos una vez al día. Los valores 
obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si 
los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye 
error, se deberán seguir los siguientes pasos: 
1. Comprobar programación del instrumento y el origen de luz. 
2. Comprobar que todo material está limpio. 
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento de 
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 
4. Comprobar la temperatura de reacción 
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus 
componentes. 
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de 
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 
94422413. 
 
VALORES NORMALES 
Suero: hasta 95 U / l (37°C) 
Orina: Aleatorias hasta 490 U / l (37°C) 
 24 horas de orina hasta 450 U/24 horas (37°C) 
 
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio 
rango de referencia para considerar las diferencias en edad, 
sexo, dieta y localización geográfica. 
 
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE 
FUNCIONAMIENTO 
Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de Rx 
Monza en el modo de flujo de células a 37C. 
 
LINEARIDAD 
El método es lineal hasta una concentración de 880 U / l. 
Diluir las muestras con mayor concentración en 1 + 9 con 
0,9% de Solución NaCl y repetir el test. Multiplique el 
resultado por 10. 
 
SENSIBILIDAD 
La concentración mínima detectable de la amilasa con un nivel 
aceptable de precisión ha sido determinada en 17.9 U/l. 
 
PRECISION 
 
Intraensayo 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 72.1 251 
DE 3.17 7.35 
CV (%) 4.39 2.93 
n 20 20 
 
Interensayo 
 Nivel 2 Nivel 3 
Media (U/l) 72.1 251 
DE 3.97 8.81 
CV (%) 5.50 3.51 
n 20 20 
 
CORRELACION 
Se comparó este método (Y) con otro método comercial 
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión 
lineal: 
 
Y = 1.077 X - 8.548 
con un coeficiente de correlación r = 0.9963 
 
se analizaron 49 muestras de pacientes abarcando un rango de 
28 - 838 U/l. 
 
REFERENCIAS 
1. Ranscher, E. et al (1986) Fresenius Z. Analyt. Chem. 324: 
304. 
2. Kruse - Jarres, J.D. et al (1989). J. Clin. Chem. Clin. 
Biochem. 27: 103. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Revised 14 Sep 10 bm 
Rev. 001 
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CALCIO (Ca) 
Método Colorimétrico 
MANUAL 
RX MONZA 
 
PARA SU USO 
Para el análisis cuantitativo in vitro de Calcio en el suero, plasma y 
orina. Este producto es adecuado para un uso manual o en el 
analizador RX monza. 
 
No. Cat. 
CA 590 CAL. Patrón 5.5 ml 
200 ml R1. Tampón 1 x 100 ml 
 R2. Cromógeno 1 x 100 ml 
 R3. EDTA 10 ml 
 
METODO COLORIMETRICO(1) 
O-cresolftaleína complexona sin desproteinización. 
 
PRINCIPIO 
Los iones calcio forman un complejo violeta con la 
o-cresolftaleína complexona en medio alcalino. 
 
MUESTRA 
Suero, plasma heparinizado u orina. Diluir la orina 
1 + 1 en NaCl 0,9%. Multiplicar el resultado por 2. 
 
COMPOSICION DEL REACTIVO 
 
Componentes Concentraciones iniciales 
 de las soluciones 
 
CAL. Patrón 
 Calcio Vedi inserto lotto-specifico 
R1. Tampón 
 2-amino-2-metil- 
 propan-1-ol 3.5 mol/l, pH 10,7 
R2. Cromógeno 
 o-Cresolftaleína 0,16 mmol/l 
 complexona 
 8-hidroxiquinolina 6,89 mmol/l 
 Acido clorhídrico 60 mmol/l 
R3. EDTA 150 mmol/l 
 
 
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 
Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. 
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren 
al manejar reactivos de laboratorio. 
 
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se 
desean. 
 
Los reactivos deben ser utilizados solo para los 
propósitos indicados por personal adecuado cualificado 
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de 
laboratorio. 
 
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD 
Todas las soluciones están listas para su uso. Mantener las 
botellas cerradas después de utilizarlas. Estables hasta la fecha de 
caducidad cuando se conservan entre +15 y +25°C. 
 
 
 
PREPARACION DE LOS REACTIVOS DE TRABAJO Y 
ESTABILIDAD 
Mezclar volúmenes iguales de las soluciones R1 y R2 en cantidad 
suficiente para el número de muestras que se vayan a ensayar. 
Estable durante 7 días cuando se conserve entre +2 y +8°C ó 3 
días entre +15 y +25°C. 
 
MATERIALES SUMINISTRADOS 
Patrón 
Tampón 
Cromógeno 
EDTA 
 
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS 
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y 
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) 
Sérum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351) 
 
PROCEDIMIENTO DE NOTA 
Si la muestra tiene un color fuerte intrínseca (hemoglobina: > 
200 mg/dl, bilirrubina> 20 mg/dl, o lipemia marcada), un blanco 
de muestra se debe ejecutar. (Ver abajo) 
 
Esta prueba es muy sensible, por lo tanto el uso de material 
desechable es aconsejable. Recipientes de vidrio deberán lavarse 
con ácido clorhídrico diluido y luego enjuagar con agua destilada 
antes de su uso. 
 
PROCEDIMIENTO 
Seleccione Calcio CPC en la pantalla de Ejecución de prueba y 
llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones. 
 
Pipetear en la cubeta: 
 
 Blanco de reactivo S0 Patrón S1 Muestra