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LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA 1 Instrumentación y principios básicos 2 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Instrumentación y principios básicos d La Habana, 2004 3 Datos CIP-Editorial Ciencias Médicas González Alfaro José Laboratorio de Microbiología: Instrumentación y principios básicos/ José González Alfaro, Boris González González, Rosa T. Barrial González. La Habana: Editorial Ciencias Médicas; 2004 256p. Fig. Incluye índice general. Está dividida en 19 capítulos. Listado de referencias al final de la obra. ISBN 959-212-131-1 1. MICROBIOLOGÍA 2. PERSONAL DE LABORATORIO 3. TÉCNICAS MICROBIOLÓGICAS. LIBRO DE TEXTO I. González González Boris II. Barrial González Rosa T. QW23 Diseño: Ac. Luciano O. Sánchez Núñez Emplane: Maria Pacheco Gola © José González Alfaro, Boris González González y Rosa T. Barrial González, 2004 © Sobre la presente edición Editorial Ciencias Médicas, 2004 Editorial Ciencias Médicas Centro Nacional de Información de Ciencias Médicas Calle I No. 202, esquina Línea, Vedado, Ciudad de La Habana, 10400, Cuba Correo electrónico: ecimed@infomed.sld.cu Teléfonos: 55 3375, 832 5338 4 "Vivid en la serena paz de los laboratorios y preguntaos cada día: -¿Qué puedo hacer para mejorar la calidad del servicio que presto? -¿Cómo puedo ayudar a mi país? -¿Cómo puedo servir a la humanidad? Luis Pasteur 5 AUTORES José González Alfaro Técnico de Microbiología Especializado en Docencia, Profesor Facultad Tec- nológica Dr. Salvador Allende Boris González González Lic. En Microbiología Hospital Salvador Allende, Profesor Facultad Tecnológi- ca Dr. Salvador Allende Rosa T. Barrial González McS en Microbiología Hospital Salvador Allende, Profesora Facultad Tecnoló- gica Dr. Salvador Allende 6 ÍNDICE EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA / 17 INTRODUCCIÒN / 17 LABORATORIO CLÍNICO / 17 LABORATORIO DE MEDICINA TRANSFUSIONAL / 17 LABORATORIO DE RAYOS X / 17 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA. GENERALIDADES / 18 ACTIVIDADES FUNDAMENTALES / 18 RECURSOS HUMANOS / 18 ESTRUCTURA ADMINISTRATIVA / 18 IMPORTANCIA DEL TRABAJO DE LOS PROFESIONALES Y TÉCNICOS DE MICROBIOLOGIA / 19 ESTRATEGIA ORGANIZATIVA DE TRABAJO / 19 DISPOSICIÓN DE LOS MATERIALES DE TRABAJO / 20 CERTEZA DE LOS MEDIOS REACTIVOS O MEDIOS A EMPLEAR / 20 ORDENAMIENTO DE LAS MUESTRAS / 20 PLANIFICACIÓN DEL TRABAJO A REALIZAR. / 20 CONCENTRACIÓN EN EL TRABAJO / 21 CUESTIONARIO / 21 BIOSEGURIDAD / 22 INTRODUCCIÒN / 22 RIESGOS FÍSICOS / 22 RIESGOS QUÍMICOS / 22 RIESGOS BIOLÓGICOS / 22 BIOSEGURIDAD. CONCEPTO / 22 DAÑO INDIVIDUAL Y COMUNITARIO. / 23 PRINCIPALES CAUSAS / 23 NIVELES DE RIESGO BIOLOGICO / 23 PRINCIPIOS BÁSICOS / 24 PARA LA CORRECTA REALIZACIÓN DE LAS TÉCNICAS DE LABORATORIO / 24 EMPLEO SISTEMÁTICO DE EQUIPOS Y MEDIOS DE SEGURIDAD / 25 EL DISEÑO ADECUADO DE LOS LABORATORIOS / 26 MEDIDAS DE PREVENCIÓN / 33 PRECAUCIONES A TENER EN CUENTA PARA LA / 33 DESINFECCIÓN DE JERINGUILLAS Y AGUJAS REUSABLES, ANTES DE SU ESTERI- LIZACIÓN / 33 INDICACIONES EN CASOS DE ACCIDENTE / 34 LAVADO DE MANOS / 35 TIPOS DE LAVADO DE MANOS / 36 LAVADO SOCIAL DE LAS MANOS / 36 7 LAVADO HIGIÉNICO O MÉDICO DE LAS MANOS / 36 LAVADO QUIRÚRGICO DE LAS MANOS / 37 MANEJO DE DESHECHOS PELIGROSOS / 38 CUESTIONARIO / 38 ETICA MEDICA / 40 INTRODUCCION / 40 LA MORAL / 40 ETICA / 41 TEORÍA DE LA MORAL / 41 ÉTICA NORMATIVA / 41 ÉTICA MÉDICA / 41 EN RELACIÓN CON EL PACIENTE Y SUS FAMILIARES / 42 EN RELACIÓN CON EL RESTO DE LOS TRABAJADORES DE LA SALUD / 44 EN LAS RELACIONES ENTRE EL DOCENTE Y LOS EDUCANDOS / 44 COMO PARTE DE LA SOCIEDAD / 44 LAS COMISIONES DE ÉTICA MÉDICA / 45 CUESTIONARIO / 45 EL AGUA / 46 INTRODUCCIÓN / 46 IMPORTANCIA / 46 CALIDAD DEL AGUA / 46 PURIFICACIÓN DEL AGUA / 47 DESTILACIÓN / 47 DESIONIZACIÓN / 48 PH DEL AGUA DESTILADA / 48 CONDUCTIVIDAD DEL AGUA / 48 CUESTIONARIO / 49 CRISTALERÍA DE LABORATORIO / 50 INTRODUCCIÓN / 50 COMPONENTES DEL VIDRIO / 50 SUSTITUTOS MODERNOS DEL VIDRIO / 50 CLASIFICACION / 51 CARACTERIZACIÓN DE LOS DIFERENTES TIPOS / 52 DE CRISTALERÍA / 52 CRISTALERÍA GENERAL DE TRABAJO / 52 CRISTALERÍA DE MEDICIÓN / 59 MATERIALES DE PORCELANA / 63 LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN / 64 PREPARACIÓN PREVIA DE LA CRISTALERÍA / 65 PARA SU ESTERILIZACIÓN / 65 CUESTIONARIO / 67 ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCIÓN / 68 INTRODUCCIÓN / 68 TÉRMINOS EMPLEADOS RELACIONADOS CON LA ESTERILIZACIÓN Y LA DES- INFECCIÓN / 68 8 ESTERILIZACIÓN / 68 EL CALOR / 69 PROTOTIPO STANDARD DEL AUTOCLAVE / 70 MANIPULACIÓN DEL AUTOCLAVE / 71 CALOR HÚMEDO A 1000 C / 72 CALOR HÚMEDO A MENOS DE 1000C / 74 CALOR SECO / 74 USO DEL HORNO / 75 INCINERACIÓN / 76 MECHEROS / 76 LAS RADIACIONES / 79 RADIACIONES IONIZANTES / 79 RADIACIONES NO IONIZANTES / 80 FILTRACIÓN / 81 CARACTERÍSTICAS DE LOS FILTROS / 81 PREPARACIÓN DE LOS FILTROS / 81 DESINFECCIÓN / 83 SELECCIÓN DE LOS DESINFECTANTES / 84 CUESTIONARIO / 85 EQUIPOS CALORIFICOS / 87 INTRODUCCION / 87 INCUBADORA / 87 REQUERIMIENTO DE TEMPERATURAS / 87 CLASIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS DE ACUERDO CON SUS NECESI- DADES DE OXÍGENO / 88 INCUBACIÓN DE BACTERIA ANAEROBIAS / 90 INCUBADORA PARA ANAEROBIOS / 92 BAÑO DE AGUA CALIENTE. (BAÑO DE MARÍA) / 92 CUESTIONARIO / 94 MICROSCOPIO / 95 INTRODUCCIÓN / 95 MICROSCOPIO. CONCEPTO / 96 DIFERENTES TIPOS / 96 MICROSCOPIO ÓPTICO / 96 CLASIFICACIÓN / 97 SISTEMA MECÁNICO / 98 PRINCIPIOS BÁSICOS / 109 INDICACIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO / 111 OTRAS VARIANTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO / 112 MICROSCOPIO ESTEREOSCÓPICO / 117 CUIDADO, LIMPIEZA Y MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO / 119 MICROSCOPIO ELECTRÓNICO / 121 ESTRUCTURA DEL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO / 121 9 FUNCIONAMIENTO / 123 CUESTIONARIO / 124 INSTRUMENTOS MECÁNICOS / 126 INTRODUCCIÓN / 126 PIPETAS MECÁNICAS / 126 PIPETA TIPO MARBURG / 127 EQUIPOS ELECTROMECÁNICOS / 131 LAS CENTRÍFUGAS / 131 PRINCIPIO TÉCNICO / 133 BALANCE DE LOS TUBOS / 133 FUNCIONAMIENTO / 134 EL ROTOR / 135 DISEÑO DEL EQUIPO / 135 FUNCIONAMIENTO / 136 EL AGITADOR / 136 DISEÑO DEL EQUIPO / 137 FUNCIONAMIENTO / 137 POTENCIOMETROS / 138 ESTRUCTURA / 138 ELECTRODOS / 139 TIPOS DE ELECTRODOS / 139 PRINCIPIO FUNCIONAL / 139 MEDICIÓN DEL PH / 140 PROCEDIMIENTO PARA EL MANEJO DEL POTENCIÓMETRO / 140 CUESTIONARIO / 141 BALANZAS / 143 INTRODUCCIÓN / 143 PRINCIPIO / 143 DIFERENTES TIPOS DE BALANZAS / 143 BALANZAS GRANATARIAS / 144 FUNCIONAMIENTO / 145 PROCEDIMIENTOS PARA EFECTUAR LA PESADA / 145 CAJA DE PESAS / 146 PRECAUCIONES / 147 BALANXA DE UN SOLO PLATILLO (TIPO OHAUS) / 147 BALANZA DE PRECISION O ANALÍTICA / 147 BALANZA DE PRECISIÓN MECÁNICA / 148 PROCEDIMIENTO PARA REALIZAR LA PESADA / 150 PRECAUCIONES / 151 BALANZA DE PRECISIÓN ELÉCTRICA / 151 FUNCIONAMIENTO / 153 PESADA / 154 DETERMINACIÓN DEL PESO / 155 BALANZA ANALITICA DIGITAL / 156 CUESTIONARIO / 156 10 INSTRUMENTOS DE MEDICIÓN / 158 11 NO VOLUMÉTRICOS / 158 INTRODUCCIÓN / 158 INSTRUMENTOS. DIFERENTES TIPOS / 158 RELOJES / 158 TERMÓMETROS / 159 DENSÍMETROS / 160 CUESTIONARIO / 161 ACCCESORIOS, INSTRUMENTAL QUIRÚRGICO Y MATERIALES DE CURACIO- NES / 162 INTRODUCCION / 162 ACCESORIOS / 162 GRADILLAS / 162 CESTOS / 163 SOPORTE UNIVERSAL / 163 PINZAS DE SUJECCIÓN / 164 TRÍPODE / 164 MALLA DE AMIANTO / 165 INSTRUMENTAL QUIRÚRGICO / 165 MATERIALES DE CURACIONES / 166 CUESTIONARIO / 167 TOMA DE MUESTRAS / 168 INTRODUCCIÓN / 168 MUESTRA. CONCEPTO / 168 MUESTRA REPRESENTATIVA / 168 MÉTODOS DE CONSERVACIÓN / 169 CALIDAD DE LA MUESTRA / 170 INSTRUCCIONES AL PACIENTE / 172 DIFERENTES TIPOS DE MUESTRAS / 172 EXUDADOS / 172 LÍQUIDOS ORGÁNICOS / 179 SANGRE / 181 LINFA / 182 EXCRECIONES / 183 FANERAS / 185 PRODUCTOS PATOLÓGICOS / 185 CUESTIONARIO / 186 PREPRACIÓN DE MUESTRAS EN LÁMINAS PARA EXÁMENES MICROSCÓPI- COS / 187 INTRODUCCIÓN / 187 DIFERENTES MÉTODOS / 187 PREPARACIÓN DE MUESTRAS EN LÁMINAS PARA EXAMEN MICROSCÓPICO EN FRESCO / 187 MÉTODO DE LA GOTA COLGANTE / 188 PREPARACIÓN EN LÁMINAS DE MUESTRAS COLOREADAS / 189 12 CUESTIONARIO / 191 COLORANTES Y COLORACIONES / 192 INTRODUCCIÓN / 192 CONCEPTO / 192 FUENTES DE OBTENCIÓN DE LOS COLORANTES / 192 COLORANTES NATURALES/ 192 COLORANTES SINTÉTICOS / 193 CLASIFICACIÓN / 193 AFINIDADES TINTORIALES / 194 TOXICIDAD DE LOS COLORANTES. VENTAJAS Y DESVENTAJAS / 194 METODOS DE COLORACIÓN / 195 COLORACIÓN DE GRAM / 195 COLORACIÓN DE "ZIEHL NEELSEN / 199 CCOLORACIÓN DE ZIEHL NEELSEN (MODIFICADA PARA MYCROBACTERIUM LEPRAE) / 202 COLORACIÓN FRAGELAR DE LEIFSON (MODICFICACIÓN DE CLARK) / 203 COLORACIÓN DE CÁPSULAS / 204 COLORACIÓN DE ESPORAS / 205 CUESTIONARIO / 206 MEDIOS DE CULTIVO / 208 INTRODUCCIÓN / 208 OBJETIVOS DE LA NUTRICION MICROBIANA / 208 CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO / 208 CONSISTENCIA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO / 212 COMPUESTOS NUTRITIVOS BASICOS / 213 ELABORACION DE MEDIOS DE CULTIVO / 217 DISTRIBUCIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO / 220 CONSERVACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO COMERCIALES / 222 CONSERVACIÓN DE MEDIOS ELABORADOS / 222 COMPROBACIÓN DE LA ESTERILIDAD DE LOS MEDIOS ELABORADOS / 223 CUESTIONARIO / 223 SIEMBRA E INCUBACIÓN / 225 INTRODUCCIÓN / 225 INSTRUMENTOS DE SIEMBRA / 225 DIFERENTES TIPOS / 226 MÉTODOS DE SIEMBRA / 227 INCUBACIÓN / 232 MANIFESTACIONES DEL CRECIMIENTO BACTERIANO / 233 EN LOS MEDIOS DE CULTIVO / 233 CULTIVO PURO / 233 CULTIVO MIXTO / 233 RESIEMBRA / 233 CUESTIONARIO / 234 PRODUCTOS QUÍMICOS Y BIOLÓGICOS PARA EL DIAGNÓSTICO / 235 INTRODUCCIÓN / 235 13 HIDRATOS DE CARBONO / 235 INDICADORES / 236 SANGRE Y HEMODERIVADOS / 237 COLORANTES / 237 PRODUCTOS QUÍMICOS / 238 AMINOÁCIDOS / 238 ANTIBIÓTICOS / 238 SUEROS / 240 ANTÍGENOS / 240 LÁTEX / 241 CUESTIONARIO / 241 GARANTÍA DE LA CALIDAD / 243 INTRODUCCIÓN / 243 OBJETIVOS / 243 DIFERENTES TIPOS DE CONTROL / 244 PRUEBAS ESTADÍSTICAS / 245 PRINCIPALES FUENTES DE ERRORES / 245 MANUAL DE NORMAS Y PROCEDIMIENTOS / 246 REGULACIONES DEL CONTROL DE CALIDAD / 247 EN BACTERIOLOGIA / 247 CONTROL DE EQUIPOS E INSTRUMENTOS / 247 CONTROL DE MEDIOS DE CULTIVO / 248 CONTROL DE COLORANTES Y REACTIVOS / 248 CONTROL DE DISCOS PARA ANTIBIOGRAMA / 249 CONTROL DE ANTÍGENOS Y ANTISUEROS / 249 CONSERVACIÓN DE CEPAS PARA EL CONTROL BIOLÓGICO / 249 DEL LABORATORIO DE REFERENCIA AL LABORATORIO QUE SERÁ EVALUADO / 251 DEL LABORATORIO DE LA UNIDAD AL LABORATORIO DE REFERENCIA / 251 CUESTIONARIO / 253 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS / 254 14 15 PREFACIO Como parte de la política del estado cubano de universalizar la enseñan- za, los cursos de técnicos medios de la salud que durante casi 4 décadas se impartieron, en más de 20 especialidades, en los institutos politécnicos, creados al efecto en todo el país, fueron diseñados como carreras univer- sitarias, a partir del curso 2003-2004, mediante un nuevo modelo peda- gógico que comprende dos niveles de formación intermedia: técnico básico y técnico medio, culminando la formación universitaria como licenciado en tecnología de la salud en diferentes perfiles. Los planes de estudio se han sustentado en la modalidad de estudio-trabajo, lo que permite a los estudiantes desarrollar progresivamente las habilidades en los propios escenarios donde se encuentran los diferentes servicios de salud, bajo la asesoría de profesionales y técnicos de experiencia, con lo que se pretende que adquieran la capacitación adecuada para brindar un servi- cio de excelencia a nuestra población, así como desempeñarse con eficacia y competitividad en cualquier otro país donde se requiera su colaboración. Como apoyo al diseño curricular del perfil de microbiología, hemos edita- do este libro de texto para que sea utilizado como bibliografía básica en el estudio de la asignatura Fundamentos y Principios Básicos del Laborato- rio de Microbiología. Cada tema ha sido abordado con una proyección tecnológica, atendiendo a los contenidos del programa y el perfil de salida de los egresados, para lo cual se tuvo en cuenta precisar la particularidad utilitaria de cada equipo, instrumento, accesorios y otros materiales de trabajo, así como, todo lo concerniente a su descripción estructural estándar y sus varian- tes, la función de cada una de las partes y su interacción con el resto del sistema, el principio de su funcionamiento y el algoritmo de trabajo, ade- más de todo lo concerniente a su cuidado y conservación. En los capítulos correspondientes a los procederes de laboratorio, cada aspecto ha sido explicado pormenorizadamente, de manera que, siguien- do al pie de la letra las instrucciones que se proporcionan, los estudiantes pueden realizar sin contratiempos los procederes en cuestión. 16 Al finalizar cada tema se ha incluido un cuestionario de preguntas, con el objetivo de que sea utilizado como guía de estudio individual o colectivo. Esperamos que este texto te sea de utilidad en el proceso de aprendizaje, no solo para alcanzar buenos resultados docentes, sino más bien, como una herramienta que te proporciona una capacitación perdurable, sobre el que se sustente tu desempeño profesional, que es, en definitiva, el obje- tivo esencial de tu formación. Los autores CAPITULO 1 EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INTRODUCCIÒN Los laboratorios son edificados especialmente diseñados, para la realiza- ción de experimentos, investigaciones científicas o el análisis de diferentes mues- tras, así como, para la producción de medicamentos, reactivos o la obtención de productos biológicos. Como parte del Sistema Nacional de Salud, en Cuba, existen diferentes tipos de laboratorios, por ejemplo: Laboratorio Clínico La actividad básica que se realiza en este tipo de laboratorio es la de recibir las ordenes de análisis del médico de asistencia, tomar y recibir muestras bioló- gicas, tales como: sangre, líquido cefalorraquídeo, jugo gástrico, orina, etc, a las cuales se les realizan análisis bioquímicos, hematológicos, serològicos, etc. Para determinar sus alteraciones en relación con sus valores de referencia. Realiza análisis de urgencia e informa los resultados. Laboratorio de Medicina Transfusional El laboratorio de Medicina Trasnfusional, recibe indicaciones y solicitudes médicas, toma y recibe muestras biológicas, realiza sangrías a donantes, análisis inmunohematológicos y serológicos e informa los resultados. Transfunde san- gre total o sus derivados. Y obtiene y procesa componentes de la sangre para uso terapéutico o de investigaciones. Cumple indicaciones de urgencia e infor- ma los resultados. Laboratorio de Rayos X El Laboratorio de Rayos X, recibe indicaciones médicas, administra con- traste a los pacientes, para las investigaciones que así lo requiera, realiza exá- menes radiológicos convencionales o mediante la utilización de técnicas modernas 17 http://booksmedicos.org de imagenología, para detectar alteraciones anatomofibiológicas en partes blan- das u óseas del organismo asi como la presencia de cuerpos extraños. Cumple indicaciones de urgencia e informa los resultados. LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA. GENERALIDADES Actividades fundamentales El laboratorio de microbiología clínica, recibe indicaciones médicas, toma y recibe muestras biológicas a las que realiza investigaciones microbiológicas mediante exámenes microscópicos directos y por cultivos, con el objetivo de identificar a los agentes causales de las infecciones estudiadas, precisar su cuantía en los casos que así se requiera o demostrar la presencia de anticuerpos evocadores de la presencia del agente etiológico en cuestión. El servicio de microbiología, proporciona al medico de asistencia, informa- ción precisa relacionada con la sensibilidad o resistencia del agente infeccioso a los diferentes antibióticos, con lo cual aporta un dato de inestimable valor para la indicación del tratamiento También brinda apoyo especializado al Comité de Prevención y Control de las Infecciones Nosocomiales (infecciones intra hospitalarias) originadas en el hospital u otro establecimiento de atención de salud. Recursos humanos El personal de los laboratorios de microbiología clínica, esta compuesto por profesionales universitarios; médicos especialistas de 1er o 2do. grado (microbiólogos), Ms.C. o Licenciados en microbiología, así como bioquímicos, biólogos y otros tecnólogos,ademas de técnicos medios, especializados o no, personal de oficina y auxiliares generales entrenados. Estructura administrativa Todos los laboratorios están gerenciados por un jefe de servicio, cargo que ocupa generalmente un médico especialista o en su defecto otro profesional. Las diferentes secciones están dirigidas a su vez por diferentes profesionales. En la mayoría de los laboratorios, un técnico medio experimentado, se des- empeña como jefe técnico, asumiendo determinadas funciones delegadas por el jefe de servicio. 18 http://booksmedicos.org IMPORTANCIA DEL TRABAJO DE LOS PROFESIONALES Y TÉCNICOS DE MICROBIOLOGIA Dado el incremento actual de las enfermedades emergentes y reemergentes, así como el desarrollo cada vez más creciente de cepas resistentes a los antibióticos de uso tradicional, el trabajo de los profesionales y técnicos de mi- crobiología, adquiere cada día mayor protagonismo, al proporcionar datos exac- tos acerca de la identidad de los microorganismos en estudio, diagnósticados por procedimientos habituales o de diagnósticos rápidos, así como mediante técnicas serodiagnósticas de alta sensibilidad y por aportar el patrón de suscep- tibilidad a los antibióticos de los microorganismos en cuestión, todo lo cual am- plia la capacidad del diagnóstico médico a magnitudes que están fuera del alcance de los métodos clínicos, posibilitando la indicación de un tratamiento mas eficaz. El perfeccionamiento del trabajo microbiológico se proyecta en dos direc- ciones: 1. La prestación de este servicio a toda la población del país, a nivel de la atención primaria, en policlínicos, así como en unidades hospitalarias o cen- tros especializados, ya que ha sido y es política de la Revolución que los servicios médicos sean accesibles a todos los ciudadanos. Para ellos, casi todos los hospitales y policlínicos cuentan con servicios de microbiología y en la actualidad se esta concretando un proyecto de estaciones microbiológicas destinadas fundamentalmente al diagnostico mediante exámenes directores, en las investigaciones donde resulte factible, así como la toma y preservación de muestras en medios de transporte para su envió a los laboratorios de referencia. 2. Mejorar la calidad del servicio, mediante el acceso a las tecnologías más modernas, el perfeccionamiento en la formación de los profesionales del sec- tor y la superación científico-técnica de los graduados a través de diplomados y cursos de post-grado, maestrías y doctorado. ESTRATEGIA ORGANIZATIVA DE TRABAJO Para lograr una buena eficacia en la realización de los procederes de labo- ratorio, resulta indispensable sistematizar una estrategia de trabajo, que permita asegurar la calidad de los resultados, incrementar la productividad de las deter- 19 http://booksmedicos.org minaciones y al mismo tiempo que proporcione una adecuada protección contra posibles accidentes. Para el logro de estos propósitos el laboratorista debe cumplir con las si- guientes indicaciones: Disposición de los materiales de trabajo Seleccione todos los utensilios (escrupulosamente limpios o estériles) que se requieran para el trabajo a realizar (gradillas, tubos, pipetas, etc) y ubíquelos ordenadamente sobre la mesa de trabajo, de manera que queden al alcance de la mano. En este sentido es importante tener la certeza de que no falte ningún material que implique tener que interrumpir el procedimiento para su localiza- ción, ya que además de ocasionar una pérdida de tiempo innecesaria, la discon- tinuidad de la marcha analítica, puede en algunos casos, introducir causas de errores, por alteración del tiempo establecido en algún paso de la técnica y en consecuencia afectarse los resultados. Certeza de los medios reactivos o medios a emplear a) Al seleccionar los reactivos, lea cuidadosamente la etiqueta del frasco para evitar errores, cerciórese del nombre del reactivo, su concentración y que la fecha de vencimiento no haya caducado. b) Verifique mediante un examen visual que no se encuentran alterados (preci- pitados, turbios, etc). c) Cerciórese de que se le haya hecho control de calidad. d) Colóquelos en la mesa de trabajo en el orden en que serán utilizados. e) Al destaparlos coloque cada tapa delante del frasco correspondiente para evitar errores al taparlo que impliquen su contaminación. Ordenamiento de las muestras Coloque las muestras en la mesa de trabajo por orden numérico de izquier- da a derecha. Planificación del trabajo a realizar. Siempre que resulte pertinente conviene planificar el trabajo a realizar en el laboratorio, para aprovechar al máximo el tiempo disponible. Por ejemplo, si se 20 http://booksmedicos.org van a preparar exámenes microscópicos directos de heces fecales, para la bús- queda de protozoos, por los métodos eocina y lugol, es conveniente hacer las dos preparaciones por separados en una misma lamina portaobjetos, lo que facilita la operatoria microscópica sin pérdida de tiempo al no tener que inter- cambiar láminas. Concentración en el trabajo Durante todo el tiempo que dure la ejecución del procedimiento, concentre su atención en cada paso de la técnica, evite interrupciones innecesarias y abs- téngase de mantener conversaciones ajenas a lo que esta haciendo. Trabaje con meticulosidad y esmero y aplique las medidas de asepsia cuando la determi- nación así lo requiera. CUESTIONARIO 1. Especifique El concepto que Ud. tenga de lo que es un laboratorio. 2. Nombre diferentes laboratorios que pertenezcan al Sistema Nacional de Sa- lud. 3. Refiérase a las actividades fundamentales que se realizan en un laboratorio de microbiología clínica. 4. Indique las diferentes categorías ocupacionales del personal que labora en un laboratorio de microbiología. 5. Explique la estructura administrativa de los laboratorios. 6. ¿En que radica la importancia del trabajo de los profesionales y técnicos de microbiología? 7. Explique cada uno de los indicadores establecidos para la estrategia organizativa del puesto de trabajo. 21 http://booksmedicos.org CAPÍTULO 2 BIOSEGURIDAD INTRODUCCIÒN Los profesionales y técnicos de la salud que laboran en unidades hospitala- rias, policlínicos, etc o en centros de investigaciones biomédicas, están expues- tos, por la naturaleza de su trabajo, a diversos riesgos profesionales, que pueden clasificarse según su origen en: Riesgos físicos Ocasionados regularmente por, traumas, exposiciones al calor, la electrici- dad, las radiaciones, etc. Riesgos químicos Originados por el manejo con sustancia inflamables, corrosivas, tóxicas, cancerigenas, etc. Riesgos biológicos Debido a la manipulación frecuente de pacientes infectados, el manejo de productos sépticos y el nivel de contaminación ambiental predominante en el ámbito hospitalario, especialmente en los laboratorios donde se realizan exáme- nes de sangre, líquidos corporales, excreciones y productos patológicos. BIOSEGURIDAD. CONCEPTO Es la disciplina que se ocupa de la prevención y control del riesgo biológico al que están expuestas, directa o indirectamente las personas, los animales y las plantas como consecuencias de accidentes o negligencias, en los laboratorios de microbiología, clínicos, etc. Así como en la industria biotecnológica y el tra- bajo con organismo transgénicos. 22 http://booksmedicos.org DAÑO INDIVIDUAL Y COMUNITARIO. PRINCIPALES CAUSAS Los accidentes imprevistos y el deficiente desempeño del personal ocupacionalmente expuesto, son las principales causas del daño individual que bajo determinadas circunstancia, puede extenderse al entorno hospitalario o a la comunidad, ocasionando diversos grados de afectaciones médicas, veterinarias o fitosanitarias con el consiguiente perjuicio económico o ecológico. NIVELES DE RIESGO BIOLOGICO Cuadro 1: Diferentes niveles de riesgo biológico. Los niveles de riesgo para un laboratorio básico, son los de tipo I y II. R I E S G O CARACTERIZACIÒN DE LOS AGENTES PATÓGENOS INVOLUCRADOS INDIVIDUAL COMUNITARIO I ESCASO ESCASO TIENEN POCAS PROBABILIDADESDE PROVOCAR ENFERMEDADES EN LOS SERES HUMANOS Y EN LOS ANIMALES PUEDEN PROVOCAR ENFERMEDADES EN LOS SERES HUMANOS Y EN LOS ANIMALES. II MODERADO LIMITADO TIENEN POCAS PROBABILIDADES DE ENTRAÑAR RIESGOS GRAVES PARA EL PERSONAL DEL LABORATORIO, LA COMUNIDAD, LOS ANIMALES Y EL MEDIO AMBIENTE. SU EXPOSICIÓN EN EL LABORATORIO PUEDEN PROVOCAR INFECCIONES GRAVES. III ELEVADO ESCASO PUEDEN PROVOCAR ENFERMEDADES GRAVES EN SERES HUMANOS. GENERALMENTE LA INFECCIÓN NO SE PROPAGA DE UN INDIVIDUO A OTRO. IV ELEVADO ELEVADO PUEDEN PROVOCAR ENFERMEDADES GRAVES EN SERES HUMANOS Y EN LOS ANIMALES. PUEDEN PROPAGARSE FÁCILMENTE DE UN INDIVIDUO A OTRO, DIRECTA O INDIRECTAMENTE. 23 http://booksmedicos.org PRINCIPIOS BÁSICOS Los principios básicos, regidos por las normas de bioseguridad para la pre- vención y control del riesgo biológico son los siguientes: 1. La correcta realización de las técnicas de laboratorio. 2. El empleo sistemático de los equipos y medios de seguridad. 3. El diseño adecuado de los laboratorios. Para dar cumplimiento a estos principios se establece en el reglamento un código practico, con las indicaciones y regulaciones a cumplimentar por el personal de laboratorio, que serán expuestas resumidamente a continua- ción. Para la correcta realización de las técnicas de laboratorio a) Regulaciones básicas. - Aplicar rigurosamente las medidas de asepsia y antisepsia en todas las ocasiones en que la acción a realizar así lo requiera. - Los instrumentos de siembra de platino o nicròn, se deben esterilizar a la llama del mechero, antes y después de su uso. A los efectos de evitar salpicaduras del material residual empleado, el instrumento debe introducirse gradualmente en la llama del mechero hasta ponerse al rojo vivo. - Los frotis coloreados, así como los portaobjetos, cubreobjetos y pipetas utilizadas se depositaran en recipientes apropiados que contengan solu- ción desinfectante. - Los procederes técnicos han de realizarse de manera que se evite en lo posible la formación de aerosoles siendo las causas mas frecuentes las siguientes. . Flameos de instrumentos de siembra contaminadas con productos biológicos infecciosos. . Pipeteo energético. . Retirar la aguja de las jeringuillas que contengan material contami- nado. . Apertura de cultivos liofilizados en ámpulas. . Abrir la tapa de la centrífuga antes de que esta se detenga o de inmediato, cuando se ha centrifugado muestras biológicas o material contaminado. 24 http://booksmedicos.org . La caída brusca de las placas o tubos de cultivos, aún cuando no llegaran a romperse. Los tubos de ensayo que contengan cultivos, deben mantenerse siempre en posición vertical en una gradilla. Nunca dejarlos en posición horizontal, ya que el agua de condensación puede arrastrar los gérmenes del cultivo, hume- decer los tapones de algodón y contaminar la mesa de trabajo. Los cultivos en placas deben mantenerse con la tapa hacia abajo en el interior de la incubadora o sobre la mesa de trabajo. b) Higiene del laboratorio y el personal. - Mantener el laboratorio escrupulosamente limpio, retirando del mismo material que no tenga relación con el trabajo. - Las superficies de las mesetas se descontaminaran al menos una vez al día y en caso de derramamiento de sustancia potencialmente peligrosas de inmediato. - Velar por el cumplimiento del programa de lucha contra insectos y roedores. - En las zonas de trabajo del laboratorio, no comer, beber, fumar, guardar alimentos ni aplicar cosméticos, realizando estas actividades solamente en las áreas autorizadas. - No humedecer las etiquetas de los frascos con la lengua. - Lavarse las manos después de haber manipulado pacientes, material con- taminado, o animales y al retirarse del laboratorio (ver mas adelante, procedimiento para el lavado de manos). Empleo sistemático de equipos y medios de seguridad - Utilizar bata sanitaria u otras prendas apropiadas cuando la envergadura del trabajo así lo requiera, como: batones, botas, nasobucos, etc. - Emplear guantes quirúrgicos en todo trabajo que entrañe contacto con sangre, material infecciosos o animales infectados. Los guantes se de- ben retirar asépticamente y ser esterilizados en autoclave. - Utilizar pipetas mecánicas para manipular líquidos infecciosos. Nunca pipetear con la boca esos productos peligrosos. - Siempre que sea necesario, proteger los ojos y la cara de salpicaduras e impactos mediante gafas de seguridad, viseras, pantalla facial u otros dispositivos de protección. - Cuando la naturaleza del trabajo a realizar así lo requiera, recurrir al empleo de campanas químicas, gabinetes, o cabinas de seguridad. 25 http://booksmedicos.org - Utilizar incineradas de asas microbiológicas. El diseño adecuado de los laboratorios Debido a los diversos riesgos implícitos en las investigaciones microbiológicas, la construcción o adaptación de un laboratorio de microbiología clínica, requiere de condiciones especiales que propicien el establecimiento de una organización de tra- bajo, que permita al personal del laboratorio, el cumplimiento estricto de las normas de asepsia y antisepsia establecidas para la manipulación de los pacientes, el manejo y control de los microorganismos presentes en las diferentes muestras y cultivos durante el proceso de la investigación, así como, el de los gérmenes ambientales o contaminantes que por diversas vías pueden tener acceso a las áreas de trabajo. Dentro de los requerimientos esenciales del diseño constructivo se encuen- tran los siguientes. 1. Como medida de seguridad, la construcción de un laboratorio de microbiolo- gía se hará en un área separada de locales destinados a otros fines. 2. Las paredes, en especial la parte inferior, el piso y el techo, deben ser lisos, sin grietas o ralladuras donde se pueda acumular la suciedad y el polvo que dificulten su limpieza y desinfección. 3. Casi todas las salas o cubículos del laboratorio dispondrán de mesetas, generalmente empotradas en las paredes o instaladas en el centro del local. Las mesetas deben ser construidas con acero inoxidable u otro material simi- Fig. 1 : Equipos y medios de seguridad: a) Incinerador de asas, b) Guantes de polietileno, Lentes de seguridad, d) Nasobuco. 26 http://booksmedicos.org lar que propicie un terminado de su superficie liso y sin poros y que sea al mismo tiempo muy resistente a la acción de los ácidos, álcalis y sustancias corrosivas, de manera que puedan ser desinfectadas o esterilizadas por métodos físicos o quími- cos sin que se deterioren. La superficie de estas mesetas no deben reflejar exce- sivamente la luz para que no interfiera la lectura de algunos exámenes ni afecte con el tiempo la vista del laboratorista.Las que sean destinadas para trabajar senta- do, tendrán una altura de 75 a 80 cm de altura por 60 cm de ancho, no debiendo existir ninguna construcción debajo que dificulte la colocación de las piernas y solo de ser necesario podrá disponer de una gaveta. Las destinadas para trabajar de pie tendrán una altura de 85 a 90 cm de alto y el mismo ancho que la anterior. Estas mesetas generalmente están provistas de gavetas y estantes con anaque- les, destinados a la colocación de la cristalería, los frascos con reactivos coloran- tes, medios de cultivos, así como otros materiales e instrumentos. 4. Las ventanas deben estar situadas a unos 30 cm, mínimo, por encima de la altura de las mesetas para evitar la exposición directa del aire y el polvo procedente del exterior. 5. El laboratorio dispondrá de instalaciones de : agua, electricidad, aire y gas. El grado de iluminación y ventilación se debe adecuar a las normas establecidas para locales cerrados o abiertos, atendiendo a la cantidad de personas pre- vistas, que estarán presentes en un turno de trabajo. Caracteres estructurales La estructura de un laboratorio de microbiología, dependerá esencialmente de la disponibilidad de espacio. En aquellos laboratorios que cuenten con sufi- Fig. 2 : Disposición de las mesetas en el laboratorio. 27 http://booksmedicos.orgcientes salas y cubículos, las actividades suelen ser compartimentadas en las siguientes áreas o secciones de trabajo: - Sala de recepción y archivo. - Cubículo para las tomas de muestras. - Sala principal de trabajo. - Cuarto de siembra. - Cubículo para la preparación de medios de cultivo, reactivos y colorantes. - Cubículo para la esterilización y preparación de materiales. La sala de recepción y archivo, debe estar a la entrada de la edificación y el resto de las secciones de trabajo, se ubicará estratégicamente en el interior del laboratorio, de menor a mayor nivel de contaminación. (áreas bio limpias o bio sucias) con esta estrategia, los pacientes, familiares y visitantes no tendrán acceso a las áreas de riesgo, siendo limitado para el resto del personal del laboratorio y otros visitantes, no relacionados con la actividad que se realiza en esas secciones de trabajo, todo lo cual está encaminado a reducir la probabili- dad de posibles propagaciones de agentes patógenos por todo el laboratorio y la comunidad. Sala de recepción y archivo En esta sección, un personal de oficina entrenado, recepciona las órdenes de análisis entregadas por los propios pacientes o enviadas desde las salas de la unidad hospitalaria, en caso de pacientes encamados, o procedentes de otras unidades de salud vinculadas al centro, donde se procederá a asentar en el libro de registro de entrada, el numero, que consecutivamente le corresponde a esa solicitud, la fecha de registro, los datos del paciente (nombre y dos apellidos y número de historia clínica), la procedencia (consulta externa, sala donde se encuentra hospitalizado o unidad de salud que hace la solicitud), y el tipo de investigación que se indica. Fig. 3 : Libro de registro. 28 http://booksmedicos.org En un pequeño cuadrante que se encuentra impreso en el ángulo superior derecho de la orden de análisis se notara el número asignado en el registro de entrada. Cuando la orden se entrega conjuntamente con la muestra (orina, heces, esputo, etc) en los frascos se anota con lápiz cristalográfico, el mismo número de registro. Como medida de seguridad, los frascos que contienen muestras no deben estar en contacto con las órdenes de análisis, dada la posibilidad de que se haya producido algún derramamiento durante su recolección en cuyo caso, la manipulación ulterior de las ordenes pueden propiciar una vía de contagio. Si se tratara de un tipo de muestra que deba ser tomada en el laboratorio (exudados, lesiones infecciosas en la piel, etc) después de registrada, la orden le será devuelta al paciente, quien la entregara al técnico que le vaya a tomar la muestra. Concluida la investigación, los resultados serán debidamente informados en la orden de análisis, por el técnico que realizó el examen, quien la firmará y anotara la fecha de realización, debiendo reintegrarla a la sección de recepción y archivo, donde se anotará los datos en el libro de registro de resultados, lo que permitirá en caso de extravío de la orden, emitir un duplicado. Las ordenes con los resultados serán enviadas al Dpto. de archivo de la unidad hospitalaria para que sean archivados en las historias clínicas o en el laboratorio cuando deban ser recogidas por los interesados. Si el examen no se puede realizar y se solicite su repetición, en la orden de análisis se especificaran las causas (muestras escasa, muestra contaminadas, suero hemolizado, etc). Además de estos datos primarios que se registran diariamente, la sección de archivo tiene la función de procesar un resumen bioestadístico mensual con los resul- Fig. 4 : Orden de análisis. 29 http://booksmedicos.org tados de cada tipo de investigación y adicionalmente llevar un control estadístico establecido por los programas de enfermedades de transmisión sexual y tuberculosis. Cubículos para las tomas de muestras En este local, el laboratorista dispondrá de los recursos necesarios (guan- tes, hisopos estériles, instrumentos de siembra, mechero, etc, etc) para la toma de las diferentes muestras (exudado faringeo, óptico, conjuntival, etc) debiendo contar con la privacidad requerida y las condiciones necesarias, para la toma del exudado vaginal, uretral, etc tales como parabanes, camillas ginecológicas, etc). Sala principal de trabajo Esta sala puede contar de uno o varios cubículos, constituyendo cada uno de ellos, una sección de trabajo independiente, en la que se realizan determinadas in- vestigaciones, por ejemplo: Urocultivo, coprocultivo, misceláneas, tuberculosis, parasitología, serología, etc. En algunas unidades, particularmente, centros munici- pales o provinciales, pueden existir otras secciones especializadas para la investiga- ción de lepra, leptospirosis, etc. Cada sección contará con los recursos necesarios para la realización de esas investigaciones especificas, tales como: preparación y cultivo de las muestras, tinciones, observaciones microscópicas, pruebas de iden- tificación, etc. Estas secciones de trabajo deben estar climatizadas. Cuarto de siembra Generalmente los laboratorios pequeños que disponen de una sala principal en un único local tienen anexado un pequeño cubículo que es donde radica el cuarto de siembra. Este cuarto esta provisto de mesetas y de todos los materiales e instrumentos para la realización de siembras, resiembras y de aquellas activida- des que requieran de una estricta asepsia, así como de una lámpara de luz ultravioleta para la esterilización del medio ambiente, o la superficie del inmueble y el mobilia- rio. Al igual que la sala principal de trabajo, debe estar climatizado. Cubículo para la preparación de medios de cultivos, reactivos y colo- rantes Este local estará equipado con balanzas, baño de María, potenciómetro, refrigerador, etc., así como de la cristalería y otros accesorios para estos fines. En sus estantes y anaqueles se almacenará el stok de productos químicos, medios de cultivos y otros reactivos y colorantes, debiendo contar con una colec- ción de cepas microbianas certificadas para la realización del control de calidad. 30 http://booksmedicos.org Cubículo para la esterilización y preparación de materiales Este local se destina para la realización de diversas actividades, entre las que se encuentran las siguientes. . Limpieza y desinfección de la cristalería y otros materiales, incluyendo su secado. . Empaquetamiento y preparación de la cristalería y otros materiales para su esterilización. . Esterilización. . Destilación de agua. Limpieza y desinfección de la cristalería y otros materiales, incluyendo su secado En este local se instala una meseta con tres fregaderos colindantes; en el primero se friega la cristalería con detergentes especiales y agua abundante empleando hisopo de tamaño apropiado. En el segundo de enjuaga, con agua cruda y en el tercero con agua destilada. Las pilas de estos fregaderos deben estar lo suficientemente altas como para permitir el enjuague de las pipetas en posición vertical. En un área de este local se situara un recipiente grande con solución desin- fectante o sulfocromica con el objetivo de sumergir la cristalería que asi lo requiera. Empaquetamiento y preparación de la cristalería y otros materiales para su esterilización La cristalería de trabajo y otros materiales que vayan a ser sometidos a un proceso de esterilización, en horno o autoclave, deben ser previamente taponados Fig. 5 : Hisopo para la limpieza de la cristalería. 31 http://booksmedicos.org con algodón y/o empaquetados con papel de estraza, para evitar su posterior contaminación una vez estériles, por las manipulaciones ulteriores y los microorganismos presentes en el medio ambiente. Esterilización El local debe estar dividido en dos áreas; una para esterilizar el material limpio y la otra para esterilizar el material sucio. Como se comprenderá se requieren de dos autoclaves. El área para el tratamiento del material limpio contará al menos con un horno que además de ser utilizado para la esterilización se puede emplear para el secado. Destilaciónde agua Generalmente, los laboratorios que disponen de destiladores metálicos, los instalan en este lugar (Área limpia) procediendo a la destilación y recolección del agua destilada en botellones con tapón de goma. El flujo de trabajo en esta sección es el siguiente: entrada del material sucio, esterilización, fregado, preparación y esterilización del material limpio. Fig. 6 : Destilador metálico de agua. 32 http://booksmedicos.org MEDIDAS DE PREVENCIÓN 1. El personal del laboratorio recibirá, a través de su director una minuciosa información acerca de: a) Las medidas de seguridad establecidas. b) La existencia y localización de un manual de seguridad y de operaciones en el que se identifiquen los riesgos actuales y potenciales y se indiquen los procedimientos para su reducción. c) Los riesgos mas probables que pueden ocurrir debido al tipo de investi- gaciones que se realizan en ese laboratorio. 2. A todos los miembros del personal del laboratorio y demás personas expues- tas se les tomara muestras de sangre periódicamente y con el suero se reali- zaran determinaciones que servirán de referencia en función de los agentes infecciosos manipulados. 3. Durante el horario de trabajo las puertas del laboratorio permanecerán cerra- das y solo tendrán acceso el personal del laboratorio y las personas autoriza- das que hayan sido debidamente informadas sobre los posibles riegos y satis- fagan cualquier requisito que se exija para tener acceso, como por ejemplo la inmunización actualizada. No se permitirá la presencia de niños en las zonas de trabajo del laboratorio. 4. No se permitirá tampoco la entrada en el laboratorio de animales que no tengan relación con el trabajo que se esté realizando. PRECAUCIONES A TENER EN CUENTA PARA LA DESINFECCIÓN DE JERINGUILLAS Y AGUJAS REUSABLES, ANTES DE SU ESTERILIZACIÓN 1. La manipulación se hará siempre con guantes quirúrgicos estériles observan- do un cuidado extremo para evitar pinchazos o cortaduras. 2. Dejar las agujas colocadas en la jeringuillas. 3. Sumergir la jeringuilla con la aguja ensamblada, en posición horizontal, en el interior de una bandeja que contenga solución desinfectante y exponerla a su acción por un espacio de tiempo no menor de 20 minutos. 4. Descargar la solución desinfectante contenida en la jeringuilla a través de la aguja. 5. Enjuagar la jeringuilla y la aguja con agua (llenar y vaciar). Observar que no queden restos de sangre ni manchas. 6. Examinar la aguja y la jeringuilla cerciorándose de que el ajuste de la boquilla de la aguja a la jeringuilla es adecuado y que las marcas volumétricas se mantienen legibles. 33 http://booksmedicos.org 7. Secar y proceder a empaquetar las agujas y las jeringuillas por separado con doble envoltura para su esterilización en autoclave. INDICACIONES EN CASOS DE ACCIDENTE En caso de derrame de muestras biológicas o material contaminado a) Colocarse guantes quirúrgicos. b) Cubrir la sustancia derramada con material absorbente (algodón, papel de filtro, etc). c) Aplicar solución desinfectante de hipoclorito de calcio o sodio al 1% alrede- dor del derrame y sobre el material absorbente esperar de 10 a 20 minutos. d) Remover el material absorbente y colocarlo en un contenedor destinado para materiales contaminados. e) Limpiar nuevamente el área contaminada con el desinfectante y posterior- mente con detergente y agua abundante. Fig. 7 : Desinfección de muestras biológicas o material infeccioso derramado accidental- mente: a)Cubrir el área con un material adsorbente, b)Aplicar solución desinfectante, c)Remover el material infeccioso, d)Aplicación nuevamente de desinfectante, e) y f) Limpieza con agua y detergente. 34 http://booksmedicos.org En caso de lesiones o contacto no protegido con material contami- nado o muestras biológicas a) Lavar de inmediato la lesión con agua y jabón. b) Estimular el sangramiento, para arrastrar mecánicamente a los agentes in- fecciosos. c) Aplicar una solución desinfectante débil de hipoclorito de sodio o calcio. Cu- rar y cubrir la lesión. d) Para continuar el trabajo colóquese un débil o guante. e) En caso de salpicaduras de sangre en los ojos o la boca, debe irrigarse de inmediato con cantidades de agua abundantes o solución salina fisiológica. f) Los derrames accidentales, punturas, lesiones o exposiciones con muestras o material contaminado, deben ser comunicados lo antes posible al jefe del labo- ratorio, quien registrará el hecho en el libro de control que existe al efecto. g) El jefe de Dpto. verificara la procedencia de la muestra y si comprueba que el instrumental estaba contaminado con sangre o liquido corporal de un en- fermo o portador de VIH, lo notificara al Dpto. de Epidemiología y orientará al trabajador que reporte cualquier síntoma febril agudo, sobre todo si es acompañado de rash, diarreas o adenopatías que ocurra dentro de las 12 semanas con posterioridad a la exposición. El personal accidentado debe ser puesto en observación epidemiológica que incluya pruebas para detectar anticuerpos contra el VIH que serán realizadas 6 semanas después de la exposición. Si la prueba es negativa, se repite a los 3 meses y con esa perio- dicidad durante un año. Si al cabo de ese tiempo continua negativa se da, el alta epidemiológica. LAVADO DE MANOS Objetivo: Eliminar la micro biota transitoria y disminuir la residente o normal de las manos y los antebrazos. Justificación: La medida básica mas importante, relacionada con la higiene personal lo constituye sin lugar a dudas el lavado de manos. La manipulación de los pacientes o materiales, trae como consecuencia la contaminación de las manos y las muñecas pudiendo extenderse a los antebrazos, por lo que de no debe aplicarse con sistematisidad estas medidas higiénicas al personal de la salud puede propagar la infección de un paciente a otro y contribuir de esta manera al incremento de las infecciones nosocomiales. En el lavado de manos intervienen elementos mecánicos y químicos. El agua arrastra mecánicamente una parte de los microorganismo presentes en las 35 http://booksmedicos.org manos, mientras que el jabón emulsiona las materias extrañas y reduce la ten- sión superficial de los gérmenes presentes lo que facilita su lisis, conjuntamente con la eliminación de los ácidos grasos y la suciedad. TIpos de lavado de manos . Lavado social. . Lavado higiénico. . Lavado quirúrgico. Lavado social de las manos Concepto: Es la limpieza mecánica de las manos con agua y jabón conven- cional, que elimina todo tipo de suciedad visible. Empleo: Siempre que se perciban las manos sucias, al realizar actividades fisiológicas, personales o sociales que lo requiera y antes y después del contacto con pacientes en procederes no invasivos y sin riesgo. Procedimiento 1. Retire las prendas de las manos y las muñecas. 2. Abra la llave del agua y tome el jabón. Remoje las manos hasta las muñecas y haga una abundante espuma. 3. Con la punta de los dedos, enjuague el jabón y colóquelos en la jabonera. 4. Cierre la llave con una de las manos y enjabónelas. 5. Frote rigurosamente las manos con movimiento rotativo y haga que la espu- ma se extienda hasta las muñecas. 6. Abra la llave hasta que salga un chorro abundante de agua y enjuague las manos y manténgalas en un plano horizontal. 7. Junte las manos en forma de recipiente, llénelas de agua y enjuague la llave. 8. Cierre la llave y séquese las manos con servilletas, papel o paño para cada una, sin frotárselas. Lavado higiénico o médico de las manos Concepto: Es la limpieza mecánica de las manos con agua y jabón conven- cional, las que se frotan de forma enérgica se enjuagan abundantemente duran- te un minuto y después del secado se aplica solución antiséptica.. Empleo: Se utiliza ante las maniobras semicriticas, con el objetivo de arrastrar suciedades, evitar infecciones cruzadas y proteger al personal de salud. 36 http://booksmedicos.org Procedimiento 1. Realice el lavado social de las manos hasta el paso en que se enjuaga la llave conlas manos juntas en forma de recipiente. 2. Moje las manos y antebrazos (5 cm por encima de las muñecas) enjabónelas con jabón convencional o bacteriostático y haga una abundante espuma. 3. Frote las manos de la siguiente forma: a) Palma con palma. b) Palma derecha sobre dorso de la mano izquierda o viceversa. c) Palma con palma intercalando los dedos. d) Dorso de los dedos flexionados para cada mano. e) Pulgar derecho con la mano izquierda y viceversa. f) Frotación de las yemas de los dedos sobre las palmas. g) Frote en forma circular la superficie de los antebrazos 5 cm por encima de las muñecas. h) Realice un enjuague abundante y deje que el agua corra hacia los codos. i) Seque las manos y antebrazos con paños, servilletas o papel estéril (uno para cada mano) apriete suavemente la piel sin restregar, comience por las manos y finalice en los codos nunca regrese a las manos. j) Aplicar solución antiséptica y déjela actuar sobre las manos por un tiem- po no menor de 2 minutos antes de la maniobra semicritica. Lavado quirúrgico de las manos Concepto: Es la limpieza mecánica de las manos con agua, jabón y cepillo, con utilización de solución antiséptica después del secado. Empleo: Antes de cualquier maniobra critica. Procedimiento 1. Realice el lavado social de las manos hasta enjuagar la llave con las manos juntas. 2. Moje las manos y antebrazos hasta 2 pulgadas arriba del codo, enjabónelos con jabón convencional en forma circular y haga una abundante espuma. 3. Frote las manos igual que para lavado higiénico incluyendo los antebrazos. 4. Tomar un cepillo estéril para cada mano, aplíquele jabón y cepille bien las uñas, lechos ungueales y la yema de los dedos. 5. Enjuague bien sin dejar ningún residuo de jabón, mantenga las manos siempre levantadas para que el agua corra hacia los codos. 37 http://booksmedicos.org MANEJO DE DESHECHOS PELIGROSOS Se debe establecer un sistema de identificación y separación de los mate- riales contaminados (y de sus recipientes). a) Deshechos no contaminados que pueden eliminarse con la basura. b) Objetos aguzados y cortantes (agujas, jeringuillas, etc). c) Material contaminado para tratamiento en autoclave y reutilización. d) Material contaminado para su eliminación. Objetos aguzados y cortantes: Las agujas hipodérmicas deben ser coloca- das en recipientes con paredes que no puedan traspasarse fácilmente. Cuando estos estén llenos se colocaran dentro de otros recipientes para desechos con- taminados y se incineran, incluso cuando las normas de laboratorio consistan en esterilizarlos primero en autoclave. Material contaminado para tratamiento en autoclave y reutilización: Este material se coloca en recipientes impermeables poco profundos que contenga una cantidad desinfectante suficiente para cubrir el contenido y se llevan al autoclave. No se efectúa ninguna acción previa; cualquier limpieza o repara- ción que se considere se hará después de esterilizados. Material contaminado para eliminación: Todos los cultivos y materiales con- taminados suelen esterilizarse en autoclave, previamente introducidos en reci- pientes impermiables,antes de proceder a su eliminación. Después del tratamiento en autoclave puede colocarse el material en recipientes apropiados para el trans- porte al incinerador o a otro lugar de evacuación. Lo mejor es poner los deshechos en un saco plástico que se introduce en una caja de cartón, con lo que se puede incinerar el contenido y el continente. Si se utiliza recipientes especiales concebidos para el transporte, habrá que limpiarlos y desinfectarlos después de descargar transporte, habrá que lim- piarlos y desinfectarlos después de descargar el contenido y antes de devol- verlos al laboratorio. Estos recipientes deben ser impermeables y estar provistos de tapa herméticas. CUESTIONARIO 1. Nombre los diferentes tipos de riesgo a los que están expuestos los pro- fesionales y técnicos de microbiología en el ejercicio de su trabajo. 2. Enuncie el concepto de Bioseguridad. 38 http://booksmedicos.org 3. ¿Cuáles son las principales causas del daño individual? 4. Especifique que elemento biológico resultan vulnerables de ser afectados en la comunidad por negligencias o accidentes en un laboratorio que tra- baja con agentes biológicos peligrosos. 5. Caracterice los diferentes niveles de riesgo, en cuanto a la afectación individual y comunitaria. 6. Mencione los principios básicos establecidos para la prevención y control del riesgo biológico. 7. Refiérase a las medidas establecida para evitar la formación de aerosoles. 8. Mencione las prohibiciones establecidas en el código practico o regla- mento de estricto cumplimiento para el personal que labora en el labora- torio, que están encaminadas a evitar la ocurrencia de contagio infeccio- sos. 9. Describa como debe ser el diseño constructivo de un laboratorio de mi- crobiología. 10. ¿Qué instalaciones debe tener el laboratorio para su buen funcionamiento? 11. Nombre las diferentes salas o cubículos con que se estructura un laboratorio de microbiología. 12. Especifique las característica constructivas que debe tener cada una de las salas o cubículo, y su equipamiento. 13. Indique cuales don las actividades que se realizan en cada sala o cubículo del laboratorio. 14. Precise las medidas de prevención que debe conocer el personal que labora en los laboratorios. 15. ¿Qué indicaciones se establecen en caso de accidente?. 16. ¿Cuáles son las indicaciones a seguir en el caso de que se produzcan derra- mes de muestras biológicas o material contaminado? 17. Describa pormenorizadamente las normas establecidas para efectuar las diferentes técnicas de lavado de manos. 18. ¿Cómo se clasifican los objetos peligrosos antes de ser deshechos? 19. Explique como usted procede con cada tipo de material u objeto contamina- do, teniendo en cuenta su reutilización o eliminación. 39 http://booksmedicos.org CAPITULO 3 ETICA MEDICA INTRODUCCION La sociedad está formada pro un conjunto de seres humanos que conviven dentro un mismo ámbito cultural, relacionándose de un modo u otro, para obte- ner los medios de subsistencia necesarios (alimentos, vestidos, vivienda, instru- mentos de producción, etc.). En todo sistema social impera un modo de producción que determina la base económica de esa sociedad, cuya estructura responde a los intereses de la clase dominante, mediante el establecimiento de relaciones de producción basa- da en la propiedad sobre los medios de producción que va a delimitar el grado de accesibilidad a los bienes materiales y culturales de cada clase y/o capa social existente, lo que dependerá del lugar que ocupen en la escala social y el carác- ter privado o social de las fuerzas productivas. Como una necesidad de las sociedades divididas en clases, surge el Estado; una organización política de la clase dominante que tiene como finalidad mante- ner el orden establecido y aplastar la resistencia de las clases antagónicas, para lo cual crea organizaciones represivas o políticas e instituciones productivas y de servicio que responden a sus intereses económicos o tienen el encargo de influir ideológicamente con iguales propósitos sobre la conciencia común (esta- do de opinión, juicios, criterios etc.) de la población, mediante la inculcación de ideas, concepciones políticas, jurídicas, morales, estéticas,, religiosas, filosófi- cas, que en su conjunto forman la conciencia social. A diferencia de las relaciones de producción que se forman independiente- mente de la voluntad del hombre, las concepciones ideológicas pasan primero por la conciencia, antes de constituirse en patrones del comportamiento. LA MORAL La moral puede definirse, como el conjunto de convicciones, fundadas o dogmáticas, que cada individuo incorpora a su escala de valores, debido a in- fluencias socioculturales y que se expresa mediante opiniones, representacio- nes, normas y evaluaciones sobre la regulación de la conducta de los individuos, constituyendo obligaciones con respecto a otros individuos,la familia, su clase social, la patria y el Estado, evaluando estas relaciones de buenas o malas, de justas o injustas, de honestas o deshonestas etc. Y fijándolas en su conciencia como principios o normas morales. La moral está condicionada por la base 40 http://booksmedicos.org económica el régimen social, pero a la vez como otras formas de la conciencia social incide y actúa sobre ella. Al cumplir esta función, la moral no se apoya en leyes formales, sino en la fuerza de la persuasión y el ejemplo, en la autoridad moral de algunas personas o en la opinión publica de determinadas colectividades. Como quiera que en la sociedad dividida en clases los intereses son contra- dictorios, existen en aquellas morales diferentes. ETICA La ética es la ciencia de la moral y de la moralidad. A diferencia de la moral, que surge y se desarrolla como resultado de las relaciones de producción, estableciéndose como hábito o costumbre en la con- ciencia, la ética investiga científicamente las concepciones morales en su senti- do mas amplio y establece las regulaciones para su aplicación. Para su estudio la ética se divide en. Teoría de la Moral y Ética Normativa. Teoría de la moral Investiga la esencia de la moral, su origen y desarrollo, las leyes a que obedece, sus normas y carácter histórico. Ética normativa Investiga el problema del bien y del mal, establece el código moral de la conducta, señala que aspiraciones son dignas, que conducta es buena y cual es el sentido de la vida. En los últimos tiempos se ha incorporado una nueva modalidad denominada Metaética, que investiga los enunciados éticos y su relación con la verdad. ÉTICA MÉDICA La ética médica es una manifestación de la ética general y se refiere específicamente, a los principios y normas que rigen la conducta de los profe- sionales y técnicos de la salud, así como de los trabajadores administrativos y de servicio que laboran en instituciones biomédicas. Cuando los actos del personal médico o paramédico dan lugar, de manera irreversible, a afectaciones somáticas, psíquicas o morales en el paciente, sus familiares o a la comunidad, se incurre en violaciones de la BIOETICA, con 41 http://booksmedicos.org independencia de que la acción se haya producido de manera intencional o inconscientemente. El comportamiento bioético, está regulado básicamente pro 4 principios: la no maleficencia, la justicia, la beneficencia y la autonomía. En el primero se establece, no causar daño al paciente de manera intencional, por negligencia u omisión. El principio de beneficencia preconiza que todas las acciones y esfuer- zos deben estar encaminados a beneficiar al enfermo. En cuanto al principio de justicia, establece la equidad, es decir, todos los pacientes tienen las mismas oportunidades de beneficiarse por igual, de los recursos y atención que presta la institución y por último, la autonomía, donde se respeta la decisión del paciente de someterse a acciones médicas o experimentales que puedan afectar su inte- gridad físico, psíquica o moral. El carácter socialista del Sistema Nacional de salud de nuestro país, consti- tuye la base material sobre la que se sustenta la moral y la ética de los trabaja- dores de la salud, basados en los siguientes principios: a) La voluntad política del estado cubano de crear una infraestructura que ha permitido llevar los servicios médicos a todo el país, aún en las zonas más apartadas y recónditas. b) El carácter gratuito de la atención médica, tanto preventiva como curati- va en las instituciones de salud, con independencia del elevado costo que pueda tener para el Estado. c) La disposición los profesionales y técnicos de la salud de participar en misiones internacionalistas. Para brindar su colaboración en cualquier lugar del mundo. Es por ello que en el ejército de nuestra función social debemos observar principios éticos - morales de profundo contenido humano, ideológico y patrióti- co, tales como; dedicar todos nuestros esfuerzos y conocimientos científicos y técnicos al mejoramiento de la salud del hombre; trabajar consecuentemente allí donde la sociedad lo requiera; estar siempre dispuesto a brindar la atención necesaria, con el elevado espíritu internacionalista. Nuestra conducta en relación con el paciente y sus familiares, con el resto de los trabajadores y estudiantes del sector y con la sociedad, debe estar basada en la estricta observancia de los siguientes principios éticos: En relación con el paciente y sus familiares - Dedicar nuestros esfuerzos a la prevención, recuperación, rehabilitación y promoción de la salud humana. - Evitar que se produzcan daños a personas sanas o enfermas en los trabajos de investigación que realicemos. 42 http://booksmedicos.org - Respetar el decoro, el pudor y la dignidad de las personas bajo nuestra atención. - Propiciar una adecuada relación personal con el paciente que le inspire un buen estado de ánimo y seguridad. - Escuchar las preocupaciones y dificultades del paciente y sus familiares, darles la atención requerida y esforzarnos por viabilizar las soluciones posi- bles. - Utilizar en todo momento de nuestras relaciones con los pacientes y fami- liares, un lenguaje claro, sencillo y comprensible, sin alardes de tecnicismos y erradicando cualquier expresión de mal gusto. - Conservar el secreto profesional, teniendo en cuenta los intereses del pa- ciente siempre que ello no ocasione un perjuicio social ni ponga en peligro la salud de otras personas. - No divulgar aspectos de la enfermedad que puedan estar relacionados con la vida intima del paciente o sus familiares. - Mantener en los casos de enfermedades de curso fatal absoluta o relativa reserva sobre el diagnóstico y pronóstico en relación con el paciente. - Abstenerse de realizar trabajos investigativos con los pacientes sin su con- sentimiento. - Atender, de forma solícita, a toda persona que recabe nuestros servicios, sin mostrar prisa o indiferencia hacia sus padecimientos, ni hacer comenta- rios indiscretos en su presencia. - Evitar que lleguen a manos de los pacientes o de sus familiares las historias clínicas, informes de laboratorio o cualquier otro documento que pueda dar- le indebida o perjudicial información. - Exigir, de aquellos trabajadores que nos están subordinados, la conducta adecuada ante el paciente y sus familiares y en el mismo sentido actuar sobre aquellos que, aunque no estén subordinados, intervienen de una for- ma u otra en el trato con los pacientes. - Cuidar de no incurrir en el error técnico que resulta de una equivocación, aunque no exista mala fe, ni elementos de negligencia, despreocupación e ignorancia, evitando a toda costa que nuestro trabajo se afecte por el apresuramiento, la superficialidad o la rutina. - Los errores técnicos deben ser conocidos y analizados críticamente en re- uniones del departamento con la libertad y profundidad necesaria que per- mitan derivar de ellas la experiencia que impidan su repetición. - Los profesionales y técnicos de la salud deben poseer la honestidad nece- saria para reconocer sus errores y eliminarlos. 43 http://booksmedicos.org En relación con el resto de los trabajadores de la salud - Mantener, para con nosotros mismos y con los demás profesionales y técni- cos de la salud, una actitud crítica y autocrítica sobre los asuntos referidos a la relación con los pacientes, cuidar que las opiniones y criterios se basen en el mas profundo análisis científico posible. - Evitar indiscreciones que menoscaben el prestigio de otros compañeros o instituciones del sistema de salud. - Poner en conocimiento de las autoridades correspondientes cualquier viola- ción que nos conste, tanto de estos principios éticos como de los reglamentos establecidos en las Unidades de Salud Pública. En las relaciones entre el docente y los educandos - El docente debe promover en sus alumnos los principios éticos, a través de la palabra y su ejemplo. - Propiciará que las relaciones entre el y sus educandos se enmarquen en la debida autoridady respeto que se requieren en la actividad docente. - Prestar especial atención a su superación individual, teórica y práctica, como aspecto esencial para el cumplimiento de sus responsabilidades docentes. - Inducir en los alumnos la disposición de recibir entrenamiento especializado en aquellas disciplinas que lo demanden, a fin de satisfacer las necesidades de nuestro pueblo y las tareas internacionalistas que se requieran. Como parte de la sociedad - Ejercer con altruismo las actividades propias de su esfera de trabajo, subor- dinando el interés personal al social. - Comportarse en todo momento con sencillez, modestia honestidad y dentro de las reglas de una elevada educación formal y política. - Estar siempre en disposición de cumplir las obligaciones que le correspondan como ciudadano, así como aquellas que, por razón del carácter excepcional de nuestro trabajo, exija el mayor esfuerzo, dedicación y sacrificio. - Actualizar y perfeccionar los conocimientos de forma continua, para lograr la optima calidad de los servicios que prestamos a la sociedad. - Procurar que la información que se ofrezca con propósitos de divulgación científica y educativa sea correcta y adecuada, absteniéndose de emitir con- ceptos u opiniones que pueden alarmar innecesariamente a la ciudadanía. - Mantener en todo momento un buen porte y aspecto personal, utilizando el vestuario adecuado en las diferentes áreas de trabajo. 44 http://booksmedicos.org LAS COMISIONES DE ÉTICA MÉDICA En todas las unidades del Sistema Nacional de Salud se crean las comisio- nes de Etica Medica, que de común acuerdo entre la administración y el sindi- cato, es elegida para un mandato de 2 años quedando integrado por 5 miembros, 3 en activo y dos suplentes, que serán seleccionados entre los compañeros de más prestigio laboral científico, moral y político del centro. Esta comisión es la encargada de conocer toda denuncia o quejas sobre violaciones de la ética, realizando las investigaciones pertinentes en el plazo de 20 días. En el caso de arribar al criterio de que se incurrió en violación de la ética, trasladará su criterio a la dirección y al sindicato, los que a partir de ese momento actuarán de acuerdo con la legislación laboral vigente. CUESTIONARIO 1. En su opinión ¿Qué cosa es la ética? 2. ¿Cuáles son los aspectos generales de la ética médica? 3. ¿Qué usted entiende por violaciones de la Bioética? 4. ¿Cúales son los principios que regulan el comportamiento bioético? 5. ¿Cúales son los principios éticos que regulan las relaciones entre el per- sonal de la Salud con los pacientes y familiares? 6. Refiérase a los principios éticos que se ponen de manifiesto en las rela- ciones con otros trabajadores del sector y con los estudiantes. 7. ¿Cómo se materializa el comportamiento ético cuando el profesional o técnico se siente parte de la sociedad. 8. ¿Qué son y cómo se crean las comisiones de ética médica? 9. ¿Cuál es la competencia y el desempeño de los integrantes de las comi- siones de ética médica en los centros de Salud? 45 http://booksmedicos.org CAPÍTULO 4 EL AGUA INTRODUCCIÓN El agua es un líquido transparente, incoloro, inodoro e insípido. Se congela a 00c, pasando al estado sólido y hierve a 1000c, pasando al estado de vapor de agua. Químicamente está compuesta por 2 átomos de hidrógeno unidos a un áto- mo de oxígeno, formando la molécula una configuración especial no lineal, sino angular, por lo que se clasifica el enlace como polar, lo cual propicia que sobre el átomo de oxígeno exista una cierta densidad de cargas negativas y sobre el hidrógeno una densidad de cargas positivas, lo que determina sus propiedades disolventes. IMPORTANCIA El agua es indispensable para la vida, por constituir el elemento esencial de todos los tejidos y líquidos orgánicos, siendo considerada como el solvente uni- versal para la disolución de una gran cantidad de solutos y otros compuestos en estado líquido. En el laboratorio, el agua es el reactivo más empleado, desempe- ñando un protagonismo esencial en las reacciones químicas, debido a que al ionizarse se une a muchos óxidos, formando ácidos y bases con otros compues- tos para formar hidratos. CALIDAD DEL AGUA El agua tal y como se encuentra en la naturaleza no es pura. Durante las precipitaciones, el agua de lluvia se une a diversos elementos gaseosos presen- tes en el aire, como el nitrógeno, dióxido de carbono, helio, metano, etc. Al caer se disemina o se filtra en el suelo, contaminándose con los diversos compuestos orgánicos e inorgánicos que estén presentes. Posteriormente en los afluentes, ríos, represas o acueductos donde va a parar, continua el proceso de contamina- ción, que variará, dependiendo de los compuestos presentes en cada lugar, lo que unido al tratamiento con cloro a que es sometida en los acueductos para su potabilización, hacen que en conjunto pierda su pureza, pasando a ser un líquido que contiene múltiples sustancias en disolución. 46 http://booksmedicos.org PURIFICACIÓN DEL AGUA Para las determinaciones de laboratorio, resulta indispensable que el agua sea lo más pura posible, ya que de lo contrario algunos componentes, provoca- rían efectos indeseables distorsionando la fiabilidad de los resultados. Por ejem- plo: el cloro libre, posee un gran poder de oxidación por lo que puede alterar la composición química de uno o varios compuestos del sustrato empleado. Por su parte el fluor y el cobre inactivan a las enzimas, mientras que las sales de mercurio las activan. Para lograr la purificación del agua se emplean dos méto- dos: la destilación y la desionización. DESTILACIÓN La destilación consiste, en someter al agua a temperatura de ebullición en el interior de un destilador metálico o de vidrio, diseñado para que los vapores que se desprendan en este proceso, pasen por un sistema de enfriamiento que los condensan, haciendo que pasen nuevamente al estado líquido con una mejor calidad, ya que los contaminantes al no tener la capacidad de evaporarse, que- dan retenidos en el destilador. Fig. 8 : Destilador de vidrio. 47 http://booksmedicos.org El agua destilada, obtenida por el procedimiento explicado no es totalmente pura, ya que el vapor de agua que se forma puede arrastrar mecánicamente partículas de agua que no estén en estado de vapor. No obstante, el agua destilada puede emplearse en el trabajo diario sin que introduzca errores apreciables. Si se quiere, para algunas determinaciones, una mayor calidad de pureza, el agua destilada, debe ser sometida nuevamente al proceso de destilación con lo que se obtiene el agua bidestilada. Si se sometiera a una tercera esterilización obtendríamos el agua tridestilada. DESIONIZACIÓN La desionización consiste en hacer pasar el agua corriente por una columna de resinas, las cuales captan los aniones y cationes que la contaminan, con lo cual adquiere un buen estado de pureza, incluso, mejor que la del agua bidestilada, aunque tiene la desventaja, que como el proceso no lleva implícito su esteriliza- ción, debe ser renovada diariamente. Para el trabajo del laboratorio de microbiología, el procedimiento común- mente empleado es la destilación. PH DEL AGUA DESTILADA El ph del agua destilada oscila entre 4 a 5, debido a la presencia de dióxido de carbono atmosférico disuelto. Si se desea neutralizar ese pH ácido para que no interfiera en algunos procederes, como por ejemplo en la preparación de medios de cultivo, que requieren generalmente, un pH neutro o ligeramente alcalino, el agua destilada debe ser sometida a un proceso de descarboxilación, lo cual se realiza de la siguiente manera: 1. Se vierte el agua en un erlenmeyer y se somete a temperatura de ebulli- ción por espacio de 3 a 5 minutos. 2. Antes de apagar la fuente de calor, tapar el erlenmeyer con un tapón perforado de caucho, provisto de un tubo trampa con perlas de hidróxido de sodio. 3. Después que el agua se ha enfriado, se verterá en recipientes apropiados, donde se conservará hasta su empleo. CONDUCTIVIDAD DEL AGUAMediante la conductividad eléctrica se puede determinar el grado de pureza del agua, como se ilustra en la siguiente tabla: 48 http://booksmedicos.org Cuadro 2 : Grado de pureza de los distintos tipos de agua en correspon- dencia con su conductividad. TIPO DE AGUA CONDUCTIVIDAD ( ohms -1 cm -1 ) Corriente 300 Destilada 5 Bidestilada 1 Desionizada 0,2 CUESTIONARIO 1. ¿Cuál Es la importancia del agua para los laboratorios? 2. ¿Cómo es la calidad del agua, tal como se encuentra en la naturaleza? 3. ¿Explique por qué causa el agua empleada en el laboratorio debe ser lo más pura posible? 4. ¿Cómo se denomina el método más empleado en los laboratorios para purificar el agua? 5. ¿En que consiste la destilación? 6. ¿Cuál es la diferencia entre el agua destilada y la bidestilada? 7. ¿Por qué se hace necesario bidestilar o tridestilar el agua? 8. Explique el proceso de desionización del agua. 9. ¿Cuál es la ventaja y la desventaja de la desionización sobre la esteriliza- ción del agua? 10. ¿Cuál es el pH del agua destilada? 11. ¿Mediante que procedimiento se puede determinar el grado de pureza del agua? 49 http://booksmedicos.org CAPÍTULO 5 CRISTALERÍA DE LABORATORIO INTRODUCCIÓN Se denomina cristalería de laboratorio, al conjunto de objetos utilizados en la realización de diferentes procedimientos técnicos, que independientemente de su forma y tamaño están constituidos solamente por vidrio. COMPONENTES DEL VIDRIO El vidrio se fabrica mediante la fusión de arena sílice con sales de sosa o potasa a una temperatura de 1, 0000c. El producto fundido, en ese estado líqui- do, se vierte en diversos moldes de acuerdo a los objetos que se requieran producir, debido a la propiedad de no cristalizarse cuando se enfría. Quedando como un cuerpo sólido, generalmente transparente. De esta manera se obtiene el cristal empleado para cubrir puertas o ventanas, así como para la fabricación de vasos, copas y otros objetos. Como se sabe, este tipo de cristal es muy vulnerable a los impactos mecá- nicos, exposiciones a elevadas temperaturas,. Etc., lo que no resulta apropiado para la fabricación de la cristalería de laboratorio la cual requiere del empleo de otros componentes como el borosilicato de sodio y el aluminio, cuya aleación le confiere una alta resistencia mecánica, térmica y química. La cristalería fabri- cada con estos componentes, se identifica por estar rotulada con el nombre de "Pyrex" (Pairex). SUSTITUTOS MODERNOS DEL VIDRIO En la actualidad, los diversos objetos de vidrio que integran la cristalería de laboratorio, también se fabrican de material plástico, especialmente con teflón (tetrafluoruroetileno) un polímero de bajo costo, caracterizado por su dureza, lo que le confiere una alta resistencia contra impactos, además tiene la propiedad de permanecer inerte durante las reacciones químicas, lo que lo valida como un sustituto eficaz del vidrio, con la ventaja de que dado su bajo costo, algunos objetos, como por ejemplo: las jeringuillas utilizadas, pueden ser desechadas sin grandes afectaciones económicas para la institución. 50 http://booksmedicos.org CLASIFICACION La cristalería de laboratorio de clasifica de la siguiente manera: Cuadro 3: Clasificación de la cristalería de laboratorio. CLASIFICACION SUB-CLASIFI CARACTERIZACIÓN DIFERENTES TIPOS CACIÓN - Alta resistencia química Todos los frascos o reciopientes DE ALMACE destinados a contener o almace- NAJE - Cierre hermético. nar, productos químicos - Fotorresistencia (materias primas) o soluciones G y reactivos elaborados E ________________________________________________________ N - Utilización para la Frascos erlenmeyer E realización de diver- Frascos Kitasatos R sos procedimientos Frascos para reactivos A técnicos. Frascos de fondo plano L DE - La mayoría se fabri- Frascos goteros TRABAJO can de diferentes Vaso de Koplin tamaños y capaci- Tubos de ensayo dades. Vidrio reloj Placas de Petry Embudos Condensadores Láminas de portaobjetos Láminas cubre objetos Láminas excavadas TC (Para contener) - No revelan magni- Pipetas de : Shali, tudes volumétricas. Thoma o Westergreen DE (No utilizadas en el laboratorio de microbiología) MEDICION _______________________________________________________ VOLUMETRICA TD (Para dis- - Expresan magnitu- Pipeta tribuir) des volumétricas. Probetas - Pueden tener o no Beaker (Vaso de precipitado) rotulada una escala Matraces de graduación Copa cónica - Se fabrican de dife- Buretas rentes tamaños. Jeringuillas - Están calibradas para trabajar a 200c. 51 http://booksmedicos.org CARACTERIZACIÓN DE LOS DIFERENTES TIPOS DE CRISTALERÍA CRISTALERÍA GENERAL DE TRABAJO Erlenmeyer Los erlenmeyer son recipientes de forma cónica y fondo plano, que se caracteriza por tener un diámetro 3 ó 5 veces mayor en su porción inferior con respecto a su porción superior. Si lo colocamos sobre la mesa de trabajo y lo observamos de arriba hacia abajo podemos percatarnos que en el extremo superior presenta una abertura circular con rebordes, que corresponde a la boca, seguida de una porción cilín- drica de algunos cm a manera de cuello. Al concluir este espacio se va ensan- chando progresivamente de forma oblicua adquiriendo la forma cónica que lo caracteriza. Aunque los erlenmeyer pueden emplearse para la preparación de diferen- tes reactivos, esta cristalería está diseñada específicamente para la preparación de compuestos que requieran ser sometidos a la acción del calor, como por ejemplo, la preparación de medios de cultivo, debido a que su forma cónica, hace que los vapores se condensen en el cuello, lo que propicia que no afecte significativamente el volumen de la preparación. Los erlenmeyer se fabrican
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