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FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA PROYECTO DE INVESTIGACIÓN DE TESIS COMPARACIÓN DE LA REGENERACIÓN ÓSEA GUIADA UTILIZANDO MEMBRANA DE QUITOSÁN Y MEMBRANA DE COLÁGENA. QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE ESPECIALISTA EN ENDOPERIODONTOLOGÍA P R E S E N T A: C.D. MARÍA ANTONIA MARÍN TALAMANTES TUTOR: Dr. Salvador Arróniz Padilla MÉXICO, D.F. 2016 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. INDICE.- Página RESUMEN 1 INTRODUCCIÓN 2 MARCO TEÓRICO 4 1. Historia Regeneración Ósea Guiada (ROG) 4 1.1. Inicios 4 1.2. Regeneración tisular guiada en periodoncia 4 2. Materiales de barrera 6 2.1. Membranas no absorbibles 6 2.2. Membranas absorbibles 8 2.2.1. Membranas absorbibles naturales 8 2.2.1.1. Membranas colágenas 9 2.2.1.2. Membrana liodura humana liofilizada 10 2.2.2. Membranas absorbibles sintéticas 11 2.2.2.1. Membrana de poliglactin 910 (vicryl) 11 2.2.2.2. Membrana de ácido poliláctico 11 2.2.2.3. Membrana guidor 11 2.2.2.4. Membrana resolut 12 3. Injertos Óseos 13 3.1. Autoinjertos 13 3.1.1. Fragmentos de hueso cortical 13 3.1.2. Coágulo óseo 14 3.1.3. Mezcla ósea 14 3.1.4. Esponjoso-medular intraoral 14 3.1.5. Esponjoso-medular extraoral 14 3.2. Aloinjertos 15 3.2.1. Hueso seco congelado (FDBA: Freeze Dried Bone Allograft) 15 3.2.2. Hueso esponjoso iliaco congelado (FIA: Freeze Iliac Allograft) 15 3.2.3. Hueso desmineralizado seco congelado (DFDBA. Demineralized Freeze Dried Bone Allograft) 15 3.3. Xenoinjerto 16 3.3.1. Hueso de Bovino 16 3.3.2. Carbonato cálcico coralino 16 3.4. Aloplásticos 17 3.4.1. Polímero HTR (Hard Tissue Replace - Reemplazo de Tejido Duro) 17 3.4.2. Biocerámicos 17 3.4.2.1. Fosfato tricálcico 17 3.4.2.2. Hidroxiapatita (HA) 18 3.4.2.2.1. HA densa, no porosa, no absorbible 18 3.4.2.2.2. HA porosa, no reabsorbible 18 3.4.2.2.3. HA absorbible 18 3.4.3. Cristales bioactivos 18 3.4.4. Injerto óseo sintético particulado 19 3.4.5. Injerto óseo sintético absorbible 19 4. Quitosán 19 4.1. Quitina 19 4.2. Descripción del Quitosán 21 4.3. Propiedades y aplicaciones médicas 21 METODOLOGÍA 24 RESULTADOS 32 DISCUSIÓN 37 AGRADECIMIENTOS 38 BIBLIOGRAFÍA 39 ANEXOS 42 RESUMEN.- Introducción: A pesar de que la regeneración ósea guiada es en la actualidad el método que nos ofrece una mayor posibilidad de recuperación del reborde alveolar perdido, esta no es tan ampliamente utilizada debido en gran parte al alto costo que representa su utilización. Objetivo: El objetivo de este estudio es observar el comportamiento de una membrana desarrollada para regeneración ósea guiada de bajo costo que nos permita obtener ganancia ósea y que ofrezca iguales o mejores resultados que la membrana de colágena de bovino, que es en la actualidad la membrana más ampliamente utilizada en México. Materiales y métodos: Se realizaron procedimientos de ROG en 1 paciente con defectos horizontales mandibulares, uno del lado derecho y otro del lado izquierdo, el lado derecho se regeneró con membrana experimental de quitosán y el izquierdo con membrana de colágena, se evaluó a los 8 meses la mejora clínica, tomando como parámetro el volumen medido en 33 cortes tomográficos antes y después de las cirugías. Resultados: La membrana de quitosán mostró ganancia ósea estadísticamente significativa antes y después de la cirugía, sin embargo la membrana de colágena mostró una ganancia ósea mayor que la membrana de quitosán. Conclusiones: La membrana de quitosán demostró ser eficaz para la ganancia de tejido óseo, lo cual nos abre posibilidades hacia una nueva opción en lo que se refiere a materiales para regeneración ósea guiada de bajo costo. Se requieren estudios posteriores donde se incluya una muestra más grande de pacientes para corroborar los resultados de este estudio y mejoras en la composición química de la membrana de quitosán para obtener resultados equiparables a los obtenidos con membrana de colágena. Palabras clave: Regeneración ósea guiada, materiales de bajo costo, membrana de barrera. �1 INTRODUCCIÓN.- Tras el incremento en la evolución de los implantes dentales, se han desarrollado una multitud de técnicas quirúrgicas para mejorar el volumen del hueso alveolar para la colocación de implantes. Estos métodos comprenden técnicas de injerto, distracción osteogénica, expansión de la cresta y regeneración tisular guiada (RTG), se sustenta que tienen el potencial para la corrección de rebordes alveolares deficientes1. Según el glosario de términos periodontales de la Academia Americana de Periodontología, se entiende por regeneración al proceso biológico a través del cual la estructura y función de los tejidos perdidos es completamente restaurada. La regeneración ósea guiada se refiere a la restitución del tejido óseo mediante el uso de barreras2. El protocolo terapéutico de la regeneración ósea guiada comprende la colocación quirúrgica de una membrana sobre la superficie del hueso para la oclusión de células, con el fin de sellar físicamente el sitio óseo que requiere regeneración (Dahlin et al. 1988). Además, la membrana crea y mantiene un espacio aislado, proveyendo un ambiente para las células osteoprogenitoras, lo cual permite el reclutamiento y proliferación de dichas células, diferenciación a través del linaje osteoblástico y expresión de la actividad osteogénica (Lindhe et al. 1993; Karring et al. 1993)3. Se ha documentado que la regeneración ósea guiada (ROG) para el tratamiento de defectos mandibulares es altamente exitosa. Los procedimientos de ROG permiten la regeneración del hueso en enfoques simultáneos o en fases. Con respecto al enfoque en fases un número de estudios clínicos demostraron que los implantes colocados en hueso regenerado tienen excelentes resultados a largo plazo. Desafortunadamente, el colapso parcial o total de las membranas es una complicación clínica frecuente comprometiendo los resultados en el tratamiento de la ROG. Los injertos óseos autólogos han sido más frecuentemente utilizados para soportar las membranas y son considerados como el estándar de oro para la ROG en los procedimientos de colocación en fases. Una de las desventajas principales de usar injertos autólogos es la morbilidad asociada con el procedimiento de obtención. Los procedimientos de obtención intraoral tienen desventajas, como la disponibilidad limitada, complicaciones incluyendo sensación dental alterada, disturbios neurosensoriales, dehiscencias en la herida e infección. Debido a estas complejas desventajas, las investigaciones se han enfocado al uso de biomateriales como �2 sustitutos del hueso alveolar. A pesar de que existen múltiples estudios experimentales, los estudios evalúan los resultados clínicos del aumento horizontal de reborde utilizando hueso autólogo como material de relleno en combinación con membranas no absorbibles. Existepoca información reportando la aplicación de sustitutos óseos en combinación con membranas absorbibles para el aumento de reborde antes de la colocación de implantes. Los datos científicos acerca de la cantidad de hueso ganado utilizando biomateriales son escasos1. Numerosas investigaciones han encontrado que no hay diferencias en las mejoras clínicas entre las membranas absorbibles y no absorbibles, sin embargo, debemos tener en cuenta la ventaja que nos brindan las membranas absorbibles al evitar la necesidad de una segunda cirugía4. A pesar de que la regeneración ósea guiada es en la actualidad uno de los métodos que nos ofrece mayor posibilidad de recuperación de los tejidos perdidos debido a la ausencia dental y uso de prótesis removibles; esta no es tan ampliamente utilizada debido en gran parte a los altos costos que representa su utilización. �3 MARCO TEÓRICO.- 1. HISTORIA REGENERACIÓN ÓSEA GUIADA (ROG). 1.1. Inicios La Regeneración Ósea Guiada (ROG) fue introducida como una modalidad terapéutica con el fin de lograr la regeneración ósea por medio del uso de membranas de barrera (Dahlin et al. 1988). El concepto de crear un sitio anatómico aislado con el propósito de promover la cicatrización fue introducido por primera vez hace 50 años, cuando se utilizaron experimentalmente filtros de acetato de celulosa para la regeneración de nervios y tendones (Bassett et al. 1956; Ashley et al. 1959). Murray y cols. (1957) reportaron formación de hueso Nuevo debajo de cajas de plástico adaptadas sobre defectos femorales decorticados en perros. Estudios subsecuentes en animales reportaron mejoría en la cicatrización ósea de defectos en costillas, radios y femorales al aplicar filtros de miliporo y acetato de celulosa. (Hurley et al. 1959; Rüedi & Bassett 1967). En la region craniofacial también se reportaron resultados exitosos tras la colocación de barreras mecánicas sobre defectos óseos mandibulares en conejos (Kahnberg 1979) y sobre defectos craneales en ratas (Melcher 1969). Estos estudios experimentales proveyeron evidencia importante de que la regeneración ósea es significativamente mejorada cuando la invasión de tejido blando dentro de los defectos óseos es mecánicamente impedida. Sin embargo, en estos primeros estudios, la mayoría de los autores atribuyeron el éxito de las barreras a la preservación y protección del coágulo óseo en lugar de a la colonización del espacio aislado creado por poblaciones de células osteogénicas3. 1.2. Regeneración Tisular Guiada en Periodoncia. El concepto de Regeneración Tisular Guiada (RTG) nace de la hipótesis originada por A.H. Melcher quien en 1976 postuló que, cuatro tejidos conectivos diferentes compiten por la superficie radicular durante la cicatrización: (1) la lámina propia de la encía con el epitelio gingival, (2) el LPD, (3) el cemento, (4) el hueso alveolar, sugiriendo que, dependiendo del fenotipo �4 celular que repueble la superficie radicular después de la cirugía periodontal, se determinará el tipo de inserción que se formará; así, si las poblaciones celulares seleccionadas son las residentes en el ligamento periodontal, se podrá producir nuevo cemento, hueso alveolar y ligamento periodontal. Subsecuentemente, numerosos estudios en animales de experimentación han evidenciado que existe diferente respuesta curativa cuando los distintos tejidos periodontales entran en contacto con la superficie radicular. Diversos estudios, en modelos primates no humanos y perros Beagle, del equipo de trabajo conformado por los investigadores T. Karring, S. Nyman y J. Lindhe, evaluaron la formación de una nueva inserción al exponer superficies radiculares tratadas a distintas poblaciones celulares peridentales, células de hueso alveolar, células epiteliales y conectivas, y células procedentes del ligamento periodontal, determinándose que el verdadero potencial regenerativo del aparato de inserción periodontal reside en las células del ligamento periodontal4. La necesidad por una repoblación selectiva del LPD fue confirmado por Karting y colaboradores (1986) usando una combinación de elásticas apretadas y flojas para prevenir o permitir la repoblación celular del LPD. Estos investigadores descubrieron que la regeneración ocurriría sólo cuando las células del LPD tenían acceso para poblar la raíz. T. Karring, S. Nyman y J. Lindhe, en 1982, fueron los primeros en aplicar la técnica regenerativa de RTG en humanos mediante la utilización de un filtro de acetato de celulosa millipore de laboratorio, el cual fue interpuesto entre el colgajo mucoperióstico y la superficie radicular tratada, con el objeto de promover la repoblación selectiva con células del ligamento periodontal, para facilitar el proceso regenerativo. Esta fue la primera evidencia histológica en humanos de regeneración tisular en respuesta a la RTG. Gottlow y colaboradores. (1986) estudiaron histológicamente 5 dientes en pacientes, en quienes se habían usado colgajos mucoperiósticos con membranas de teflón subyacentes. Caffesse y colaboradores (1991), en base a su previa investigación, postularon que la repoblación de la superficie radicular por células procedentes del ligamento periodontal es necesaria para prevenir la reabsorción radicular a la anquilosis dentoalveolar. Este autor y otros (Boyle y col., 1983; Gottlow y col., 1984; Lindhe y col., 1984, Houston y col., 1985) �5 también encontraron que el ácido cítrico (AC) y la tetraciclina hidroclorada (TTC) no aumentaron la efectividad de la membrana. Actualmente la evidencia científica del potencial regenerativo de la ROG en humanos está bien documentada sobre la base de parámetros clínicos e histológicos5, 6. 2. MATERIALES DE BARRERA. Desde los primeros estudios humanos, que usaron filtros millipore como barrera, el material de membrana más comúnmente utilizado es hecho de politetrafluoroetileno expandido (ePTFE), actualmente se dispone de una serie de materiales de membrana, algunos reforzados con un armazón de titanio para facilitar el mantenimiento del espacio, y otros construidos de materiales reabsorbibles mediante procesos fisiológicos tisulares, permitiendo la eliminación del segundo acto quirúrgico necesario para la remoción de las barreras no absorbible de primera generación. La asociación de barreras de membrana y materiales de injerto óseo de diversa naturaleza es la base de la mayoría de las terapias regenerativas usadas hoy en día. 2.1. Membranas no absorbibles. Las membranas no absorbibles (e-PTFE) denominadas comercialmente Gore-Tex (W.L. gore, Flagstaff, Arizona, USA), han sido ampliamente usadas, a pesar, de requerir de una intervención quirúrgica adicional para su remoción. Entre la funciones más importantes que desempeñan estas membranas se mencionan: soporte y aislamiento de los tejidos blandos, creación de un espacio ocupado por el coágulo, exclusión de células no osteogénicas y acumulación de factores locales de crecimiento y de sustancias que favorecen la formación de hueso. Histológicamente no se han encontrado reacciones de cuerpo extraño, poseen una excelente biocompatibilidad, presentan una porosidad que permite la invasión de fibroblastos, delgadas fibras colágenas y pequeños capilares. En estudios realizados en animales de experimentación y humanos se pudo observar, que a nivel de los tejidos que rodean a esta membrana no se encontraron células inflamatorias o epiteliales; por otra parte, se pudo evidenciar la presencia de matriz osteoide altamente calcificada en la �6 propia estructura de la membrana, lo cual explica el éxito en los resultados obtenidos en ROG. La formación de hueso en la parte interna de la membrana puede deberse al hecho de que la misma sea osteoconductiva, o también a factores osteoinductivos provenientes del defecto óseo en vías de cicatrización, así como factores producidosa nivel del periostio capaces de atravesar la membrana. Las membranas no absorbibles e-PTFE al igual que las membranas absorbibles, requieren estar siempre cubiertas por epitelio, esto es posible mediante un cierre primario de los colgajos, el cual se debe mantener en el post-operatorio y durante el tiempo necesario para la neoformación ósea, evitando en la membrana la contaminación bacteriana, migración, degradación prematura y exposición del injerto óseo. Cuando las membranas e-PTFE son expuestas deben ser retiradas; si esto ocurre en las primeras semanas de haberse colocado, la neoformación ósea es muy escasa, con resultados poco satisfactorios; sin embargo, cuando sucede al final del período de neoformación ósea, podrían obtenerse resultados satisfactorios con un elevado porcentaje de hueso nuevo. Para lograr un cierre adecuado de los colgajos en ROG, sin que los mismos sean sometidos a tensiones que puedan provocar exposición prematura de las membranas, se utilizan técnicas quirúrgicas de avance de los colgajos, mediante una incisión horizontal continua del periostio en la base del colgajo, o también la técnica de rotación de mucosa palatina. Recientemente se han desarrollado membranas e-PTFE reforzadas con delgadas láminas de titanio, lo cual facilita su manipulación, optimiza la capacidad para mantener el espacio, sin reacciones negativas para los tejidos duros y blandos. Dupoirieux y col. en el 2001 en un estudio comparativo de tres diferentes tipos de membranas, e- PTFE (Gore Tex), versus membranas absorbibles de tipo Poliglactin (vicril) y colágena, usadas para ROG en defectos óseos provocados en cráneo de ratas, observaron resultados satisfactorios únicamente con el uso de membranas no absorbibles e-PTFE. Otros autores obtuvieron resultados similares cuando compararon el uso de las membranas e-PTFE con otras membranas, para lograr ROG en defectos óseos abiertos. La literatura hace referencia a membranas no absorbibles de politetrafluoroetileno denso d-PTFE (Cytoplast Regentex GBR-200 or TXT-200; Osteogenics Biomedical, Lubbock, Tx), como alternativa de uso de las membranas e-PTFE. �7 Las membranas d-PTFE poseen poros de 0.2 micras, lo cual evita la contaminación bacteriana cuando son expuesta al medio bucal, protegiendo conjuntamente el material injertado y el implante. Con el uso de estas membranas no es necesario el cierre primario de los colgajos, únicamente se requiere levantar un poco el borde de la mucosa a cada lado del tejido expuesto, a fin de cubrir los bordes de la membrana con la finalidad de estabilizarla, quedando expuesta al medio bucal. Las complicaciones que podrían presentarse con otro tipo de membranas, debido a su gran porosidad, cuando son expuestas, no se presentan con las membranas d-PTFE. Otra característica que resulta ventajosa con relación al uso de membranas e-PTFE radica en que, no es necesaria una intervención quirúrgica adicional para ser retiradas, para su remoción solamente es necesario extraerla con una pinza. Barber y col., 2007 colocaron implantes inmediatos en sitios post-extracción, posicionando membranas d-PTFE conjuntamente con injertos óseos alrededor de los mismos. Estas membranas fueron insertadas, descansando sus bordes por debajo de la mucosa, a cada lado del alvéolo implantado y concretando el cierre mediante sutura (Cytoplast PTFE) con puntos separados, quedando la misma expuesta al medio bucal. El protocolo de esta investigación contempló el retiro de la membrana en un período de 4 a 6 semanas, después de haber colocado los implantes, dejando expuesta la capa de hueso neoformada que, en un período de 4 meses experimentó epitelización por segunda intención, obteniendo resultados satisfactorios. 2.2. Membranas absorbibles. 2.2.1. Membranas absorbibles naturales. En los últimos años, las membranas reabsorbibles han adquirido una gran importancia en el campo de la ROG y RTG. Se ha demostrado que estos materiales pueden promover la regeneración ósea en los defectos perimplantares. En diversos estudios se han presentado controversias en relación al uso de membranas absorbibles y no absorbibles en defectos perimplantares como dehiscencias y fenestraciones, evidenciándose la capacidad regenerativa de las membranas absorbibles unidas a injertos de hueso autólogo Las �8 membranas absorbibles son construidas con materiales biocompatibles que no interfieren con los procesos de cicatrización. En estas membranas se lleva a cabo un proceso de absorción por hidrólisis y los productos de degradación son absorbidos por los tejidos, siendo metabolizadas en agua y anhídrido carbónico, por lo que no requieren una segunda intervención para ser removidas. Sandberg y col., 1993, encontraron que la regeneración ósea con las membranas absorbibles tiene lugar más precozmente que con las membranas e-PTFE, lo que puede deberse a una mayor estimulación de la osteogenesis o a la liberación de factores de crecimiento por parte de las células inflamatorias que se pueden evidenciar alrededor de las membranas absorbibles. Gotfredsen y col., 1994, demostraron que las membranas constituidas de poliésteres hidrolizables dan lugar a una reacción inflamatoria durante el proceso de biodegradación asociada a una reacción de cuerpo extraño. Estos autores también establecen que el proceso de biodegradación es muy rápido, por lo tanto, es posible que resulte dificultosa la remoción de los productos terminales. 2.2.1.1. Membranas colágenas: a) Bio-Gide: compuestas por fibras colágenas porcinas del tipo I y III, con escasa capacidad inmunogénica y sin algún componente orgánico o químico. Presentan una estructura de doble capa, donde una es compacta y la otra porosa. La capa compacta posee una superficie lisa y condensada que protege contra la infiltración de tejido conectivo, mientras que la capa porosa permite la invasión celular. Cuando estas membranas son usadas en ROG las dos capas permiten la migración de células osteogénicas y evitan la infiltración de tejido conectivo. Estudios realizados en animales de experimentación demostraron que las células mesenquimatosas pueden diferenciarse en células osteogénicas bajo circunstancias preferenciales. En ausencia de proteínas óseas específicas, las fibras colágenas en ROG pueden servir como estímulo a células osteogénicas en defectos óseos y también como función de barrera contra la infiltración de tejido conectivo. Las fibras colágenas �9 representan el componente más abundante de la matriz ósea y pueden actuar como reservorio de muchos factores locales en la matriz celular de células osteogénicas. Con este tipo de membrana se han logrado óptimos resultados en el tratamiento de defectos infraóseos, similares a los obtenidos con las membranas e-PTFE, con una reducción en la migración epitelial hasta del 50%. Yaguachi y col., 2005 presentaron resultados de un estudio en ROG, sobre los cambios histológicos y eventos celulares en la osteogénesis con membranas colágenas Bio-Gide. Estos autores demostraron las propiedades osteoconductivas de la misma, afirmando además que las membranas colágenas como biomateriales naturales pueden ser parcialmente incorporadas en la matriz ósea, representando una alternativa de uso más ventajosa que las membranas a base de polímeros sintéticos7. b) BioMend Extend: Es una membrana absorbable de colágena, es una matriz comprimida, no friable fabricada de colágena derivada de tendón de Aquiles de bovino. El tendón de bovino es conocido como una de las fuentes más puras de colágena tipo I que puede ser obtenida y procesada en cantidades comerciales. Siendo semioclusiva permite que los nutrientes esenciales pasen a través de la membrana. Se incorpora al tejido circundante y se absorbe generalmente en 18 semanas8. 2.2.1.2. Membrana liodura humana liofilizada: Extraída de ladura madre y sometida a diversos procedimientos para la eliminación de la antigenicidad. Una vez liofilizada, la estructura reticular de las fibras colágenas viene conservada en el tiempo. Al momento de ser usada debe estar previamente, durante pocos minutos, sumergida en solución fisiológica, a fin de ablandarla y hacerla más manejable. Existe temor al uso de estas membranas debido al riesgo de transmisión de la enfermedad de Jakob-Creutzfeld. La Liodura es esterilizada mediante rayos gamma para evitar la transmisión de enfermedades infecciosas virales como la hepatitis y el SIDA. �10 2.2.2. Membranas absorbibles sintéticas. Las membranas absorbibles sintéticas fueron introducidas al final de la década de los años 80. Compuestas básicamente por ácido poliglicólico (PGA) y ácido poliláctico (PLA), con propiedades hidrofóbicas que favorecen su hidrólisis. Después de la hidrólisis, estos productos son degradados en dióxido de carbono y agua, comúnmente acompañados de una leve reacción inflamatoria. El polímero láctico en adición de polidioxano, permite un retardo de la hidrólisis. Los polímeros de glicoide mejoran las características mecánicas de estas membranas. 2.2.2.1. Membrana de poliglactin 910 (vicryl): Constituidas por copolímeros del ácido poliglicólico y poliláctico en una relación de 9:1, motivo por el cual son denominadas poliglactin 910, material éste, utilizado durante mucho tiempo para la confección de sutura reabsorbible en neurocirugía. Las membranas poliglactin 910 resultan antigénicamente inertes y se reabsorben en un período de 30 a 90 días. 2.2.2.2. Membrana de ácido poliláctico: El ácido poliláctico, es un polímero sintético bien tolerado, cuya degradación viene acompañada de un aumento del número de capilares, no asociado a procesos inflamatorios. En estas membranas la reabsorción es controlada mediante la agregación de ácido poliglicólico. El período de absorción de estas membranas oscila entre 2 y 3 meses. 2.2.2.3. Membrana guidor: son membranas originalmente diseñadas para RTG y sucesivamente desarrolladas para ROG. Están compuestas por ácido poliláctico (PLA), adicionadas con ésteres de ácido cítrico para aumentar la maleabilidad. Estas membranas son capaces de mantener el efecto carpa por un mínimo de 6 semanas antes de reabsorberse. La completa reabsorción se presenta en el período comprendido entre 6 y 12 meses por hidrólisis con formación de ácido láctico y anhídrido carbónico, que son metabolizados. Viene estructurada en dos estratos: uno interno relacionado con el defecto óseo, provisto de pequeñas perforaciones que obstaculizan y retardan la penetración del tejido conectivo gingival, permitiendo el paso de �11 sustancias nutritivas y otro externo, relacionado con los tejidos blandos, provisto de perforaciones de mayor dimensión para favorecer la penetración de tejido conectivo gingival, evitando su retracción y exposición de la membrana. 2.2.2.4. Membrana resolut: (WL Gore & Associates Inc., Flastaff, AZ, USA) constituida por un estrato externo de Glicoide Sintético (PGA) y Trimetilen Carbonato (TMC) que garantiza la integración tisular, y un estrato interno oclusivo de ácido Poliláctico y Poliglicoide (PLA/PGA), que garantiza el efecto barrera. Estas membranas presentan una respuesta biológica favorable, su reabsorción por hidrólisis se inicia después de 4 a 6 semanas y se completa en un período de aproximadamente 8 meses. El PGA viene eliminado como ácido glicólico con la orina y como anhídrido carbónico mediante el ciclo de Krebs. El TMC viene degradado por la acción enzimática y metabólica, eliminándose por vía urinaria. La elección de un tipo de membrana absorbible o no absorbible, ha sido de gran controversia en la literatura. Resultados negativos con respecto al uso de membranas absorbibles en ROG han sido atribuidos a la degradación temprana de la misma, que acompañada de una reacción inflamatoria temprana conduce a la pérdida de estabilidad del proceso regenerativo. Por el contrario, Sandber y co.l, 1993 afirman que la regeneración ósea con las membranas reabsorbibles ocurre en un tiempo menor en relación con las membranas no reabsorbibles, construidas en politetrafluoroetileno expandido (e- PTFE), debido a la liberación de factores de crecimiento por parte de las células producto de la reacción inflamatoria. Vanden Bogaerde, 2000 estableció que el principal inconveniente con el uso de membranas absorbibles está representado por la poca capacidad de mantener el espacio debajo de la misma, a causa de su escasa rigidez respecto a otros tipos de membranas no absorbibles. Taguchi y col., 2005 recomiendan el uso de membranas colágenas, Bio-Gide, debido a sus propiedades osteoconductivas, por no ser necesaria una intervención quirúrgica adicional para su remoción y en caso de exposición prematura no son susceptibles a contaminación bacteriana. Es importante destacar que estas afirmaciones están �12 basadas en un estudio realizado en defectos óseos, de tipo cerrado, provocados en animales de experimentación. Estudios realizados en defectos óseos abiertos, donde la ausencia de una o más paredes óseas imposibilita la estabilidad del coágulo hemático y de eventuales injertos óseos, recomiendan el uso de membranas no-reabsorbibles e-PTFE, debido a su capacidad de mantener el espacio donde se llevará a cabo el proceso de regeneración ósea, a pesar de ser necesaria una intervención quirúrgica adicional para su remoción y el riesgo de contaminación microbiana en caso de exposición prematura. Investigaciones recientes recomiendan el uso de un tipo nuevo de membrana no absorbible constituidas por politetrafluoroetileno denso (d-PTFE), en lugar de membranas no absorbible e-PTFE, debido a que, su escasa porosidad de 0.2 micras no permite la invasión microbiana cuando son expuestas al medio bucal y además, no requieren de una segunda intervención quirúrgica para su remoción, ya que son extraídas simplemente, retirándolas con una pinza7. 3. INJERTOS ÓSEOS. Los cuatro tipos de injertos óseos que se ocupan más frecuentemente hoy en periodoncia son los autoinjertos, aloinjertos, xenoinjertos y aloplásticos. 3.1 Autoinjertos. Los autoinjertos (autógenos) se toman de una parte del cuerpo del paciente y se transfieren a otra. Una ventaja de este tipo de injertos es que no transfiere enfermedades. Varios son los tipos de autoinjertos que incluyen fragmentos de hueso cortical, coágulos óseos, mezcla ósea, hueso esponjoso-medular intraoral y hueso esponjoso-medular extraoral. 3.1.1. Fragmentos de hueso cortical: Las bases para este procedimiento fueron trazadas por Nabers y O’Leary en 1965. Consiste en obtener virutas de hueso cortical, mediante cinceles de mano, del interior mismo del sitio quirúrgico. Usando este material, ellos reportaron incrementos verticales en la altura del hueso. �13 3.1.2. Coágulo óseo: El coágulo óseo se obtiene usando una fresa redonda de baja velocidad en el hueso intraoral del sitio quirúrgico y mezclando entonces las partículas de hueso con la sangre del paciente. El uso de este material está basado en la racionalización de que la partícula de tamaño pequeño es previsiblemente reabsorbida y reemplazada por el hueso huésped. Se piensa también que los fragmentos mineralizados inducen la formación de hueso. Los procedimientos de coágulo óseo tienen desventajas, las cuales incluyen problemas de aspiración, desconocimiento de la cantidad de fragmentos de hueso colectados y las limitaciones concernientes a la cantidad de hueso que puede ser obtenido. 3.1.3. Mezcla ósea: Su preparación surgió ante la necesidad de mejorar la manipulación del coágulo óseo. La mezcla ósea es hueso intraoral cortical o esponjoso que se obtiene con un trépano, cincel o lima. Se coloca en una cápsula de amalgama y se tritura en partículasdel tamaño en un rango de 100 a 200 mm, y puede ser llevado al defecto en un porta-amalgama estéril. 3.1.4. Esponjoso-medular intraoral: Además de la obtención de hueso del sitio quirúrgico, se ha usado exitosamente hueso de otra fuente en la cavidad oral para los injertos óseos periodontales. Los sitios donantes de este hueso incluyen: lesiones óseas cicatrizadas, sitios de extracción cicatrizados, zonas edéntulas, torus y tuberosidades. 3.1.5. Esponjoso-medular extraoral: El material se obtiene de la cresta iliaca superior, anterior o posterior; ofrece un mayor potencial para la inducción de nuevo hueso en el periodonto. Se reportó el completo relleno de la furcación y de los cráteres interproximales. Se ha descrito reabsorción radicular como una complicación frecuente de los injertos de cresta iliaca. El secado por congelación de este material ha solucionado este inconveniente. Para prepararlo, se mezcla el tejido con un �14 medio esencial y se coloca en el congelador a 4 °C, pudiendo almacenarse hasta diez días. En cuanto al llenado de los defectos, los resultados no muestran diferencias entre el material fresco y el congelado. Los inconvenientes de esta técnica son la posibilidad de infección del sitio donante y la necesidad de una cirugía compleja para la obtención del material. Estos problemas, además de la necesidad de incrementar el hueso donado, condujeron al desarrollo de una fuente alógena de hueso. 3.2. Aloinjertos: Los aloinjertos son injertos transferidos entre miembros de la misma especie genéticamente diferentes. Su utilización se basa en que el material puede provenir tanto de un donante directo, como de un banco de hueso. Han sido usados en periodoncia tres tipos de aloinjertos óseos. El que se usa más a menudo es el hueso desmineralizado seco congelado. Se usan con menor frecuencia el hueso no desmineralizado seco congelado y el hueso esponjoso iliaco congelado. 3.2.1. Hueso seco congelado (FDBA: Freeze Dried Bone Allograft): Fue el primero que se utilizó, su comportamiento es más parecido al de los materiales aloplásticos, siendo entonces un osteoconductor. 3.2.2. Hueso esponjoso iliaco congelado (FIA: Freeze Iliac Allograft): Es hueso esponjoso y medula ósea de cresta iliaca, ha mostrado buenos resultados en cuanto a inducción ósea se refiere, pero para su obtención requiere una técnica compleja. 3.2.3. Hueso desmineralizado seco congelado (DFDBA. Demineralized Freeze Dried Bone Allograft): En 1979, Urist demostró que el tratamiento del hueso por desmineralización liberaba proteínas morfogenéticas óseas, que estimulaban al hueso receptor del injerto a producir nuevo hueso (osteoinductor). A partir de estos estudios �15 comenzó a utilizarse el hueso desmineralizado seco congelado, que induce a las células mesenquimáticas del huésped a diferenciarse en osteoblastos. Las partículas de polvo de hueso deben tener un tamaño uniforme, comprendido entre 250 y 800 micrones, que son las de mayor poder inductivo. 3.3. Xenoinjertos: Un xenoinjerto es un injerto entre diferentes especies. Existen dos fuentes disponibles como sustitutos óseos en la práctica: hueso de bovino y carbonato cálcico coralino. 3.3.1. Hueso de bovino: Se procesa el hueso de bovino para producir mineral óseo natural sin el componente orgánico, debido a esto la estructura es físicamente y químicamente comparable a la matriz mineral del hueso humano. Una ventaja es que es natural, es decir, puede proporcionar componentes estructurales similares a los del hueso humano, siendo mejor su capacidad osteoconductora. Actualmente el injerto viene desproteinizado para evitar el rechazo que se presentaba anteriormente. Bio-Oss (Geistlich Pharma AG), es un xenoinjerto derivado de bovino, ha sido introducido como un injerto de reemplazo óseo. Es hueso bovino ya sea cortical o esponjoso producido por la extracción química de todo el material orgánico. Es similar al hueso humano en área de superficie interna, porosidad, tamaño de los cristales y proporción calcio-fósforo. En regeneración periodontal ha mostrado mejorar niveles de inserción y reducir profundidad de bolsa al utilizarse solo o en combinación con membranas absorbibles. 3.3.2. Carbonato cálcico coralino: El carbonato cálcico es obtenido del coral natural, género Porites y se compone principalmente de aragonita (> 98% de carbonato cálcico), elementos tales como fluoruro, estroncio y magnesio están presentes en pequeñas cantidades mayor al 1 % de su concentración total. Es biocompatible y reabsorbible, con un tamaño de 100 a 200 mm, similar a la �16 porosidad del hueso esponjoso. Más del 45% proporciona un área de superficie muy amplia para la reabsorción y sustitución por hueso, en estudios animales ha mostrado progresiva resorción por medios enzimáticos con simultáneo reemplazo de nuevo hueso. Tiene un alto potencial osteoconductor por lo que no se ha observado que se produzca encapsulación fibrosa. La purificación del material es realizada por esterilización de radiación gamma. 3.4 Aloplásticos: Los aloplásticos son materiales inertes. Se describen como materiales de injerto de hueso sintético. 3.4.1. Polímero HTR (Hard Tissue Replace - Reemplazo de Tejido Duro) El polímero polimetilmetacrilato (PMMA) y el líquido polihidroxiletilmetacrilato (PHEMA) usados en el proceso del HTR han sido usados clínicamente en humanos desde los años treinta. Es resistente, no absorbible, microporoso, biocompatible. Está cubierto por hidróxido de calcio y la interferencia con el hueso es con la capa superficial de calcio. Histológicamente, se ha observado nuevo crecimiento de hueso depositado sobre las partículas de HTR, sirve como andamio para la formación de hueso cuando se encuentra en estrecho contacto con el hueso alveolar. Su hidrofilia aumenta la formación de coágulo y la carga negativa de la superficie de las partículas permite que se adhiera al hueso. 3.4.2. Biocerámicos: Los aloplásticos biocerámicos están compuestos principalmente de fosfato cálcico. Las dos formas más ampliamente utilizadas son la hidroxiapatita y el fosfato tricálcico. 3.4.2.1. Fosfato tricálcico: Es una, forma porosa del fosfato cálcico que también se denomina fosfato b-tricálcico. La proporción de calcio y fosfato es similar a la del hueso. Sirve como relleno biológico, que se absorbe parcialmente. El fosfato tricálcico no induce la osteogénesis, las partículas �17 suelen quedar encapsuladas por tejido conectivo fibroso y no estimulan el crecimiento óseo. 3.4.2.2. Hidroxiapatita (HA): Es un componente mineral del hueso, se ha comercializado la HA sintética en una gran variedad de formas, básicamente como material no absorbible, no poroso o denso. También hay disponible una forma de HA absorbible. 3.4.2.1.1. HA densa, no porosa, no absorbible: Se prepara a alta temperatura, tiene un tamaño grande de cristales. Los injertos de HA densa son osteofílicos, osteoconductores y actúan primeramente como un relleno inerte biocompatible. Histológicamente, no se consigue nuevo anclaje. 3.4.2.1.2. HA porosa, no reabsorbible: Se obtiene por conversión hidrotérmica del exoesqueleto del carbonato cálcico coralino, genero Porites, en HA. Tiene un tamaño de partícula de 190 a 200 mm, lo que permite el crecimiento fibrovascular y la formación subsecuente de hueso hacia el interior de los poros y finalmente en el interior de la propia lesión. Se ha considerado un material de relleno biocompatible. 3.4.2.1.3. HA absorbible: Procesado a baja temperatura. La forma de reabsorción es la no sintetizada (no cerámica) con partículas que miden de 300 a 400 mm. Se sugiere que la HA no sintetizada se reabsorbe como un reservorio mineral e induciendo la formación de hueso nuevo por mecanismos osteoconductores. Una ventaja es la tasa lenta de resorción que permite su actuacióncomo reservorio mineral y a la vez como andamio para la sustitución ósea. 3.4.3. Cristales bioactivos: Hay dos formas de cristales bioactivos disponibles actualmente. El injerto óseo sintético particulado y el injerto óseo sintético reabsorbible. Los cristales bioactivos se componen de SiO2, CaO, Na2O, P2O5 y se unen al hueso mediante el desarrollo de una capa superficial de HA carbonatada. Cuando se exponen a los fluidos hísticos in vivo, los cristales bioactivos quedan cubiertos por una doble capa compuesta de gel sílice y otra rica en fosfato cálcico (apatita). La capa rica en fosfato cálcico promueve la adsorción y concentración de proteínas �18 utilizadas por los osteoblastos para formar una matriz extracelular mineralizada. 3.4.4. Injerto óseo sintético particulado: Tiene un tamaño de partícula que varía entre 90 y 710 mm, lo que facilita su manejo, su manipulación en los defectos óseos, presenta propiedades hemostáticas, es osteoconductor y es un material de relleno. 3.4.5. Injerto óseo sintético absorbible: Tiene un tamaño más pequeño de partícula entre 300 - 355 mm, con este tamaño de partícula se forman cavidades de crecimiento de fostato cálcico porque pueden penetrar células fagocíticas en la capa externa del gel de sílice a través de pequeñas fisuras en la capa de calcio y fósforo y absorber parcialmente el gel. Esta absorción conduce a la formación de cavidades protectoras donde las células osteoprogenitoras pueden adherirse, diferenciarse y proliferar. Según el fabricante, las partículas mayores no se absorben de la misma forma, lo que teóricamente retarda el proceso de cicatrización porque la consolidación ósea debe progresar desde las paredes óseas del defecto y las partículas más pequeñas causan inflamación transitoria que retarda la estimulación de las células osteoprogenitoras9. 4. QUITOSÁN. 4.1. Quitina. Hablar sobre quitina, es hablar acerca de los inicios de la vida en la tierra, ya que esta pudo ser la forma primordial del primer ser viviente. A pesar de ser un elemento tan antiguo en la tierra, no es sino, hasta hace un poco más de 30 años que los japoneses comenzaron a experimentar con la quitina y el quitosán uno de sus derivados más importantes, desde la forma en cómo lo separaban de las estructuras que lo contenían, hasta las más diversas aplicaciones en la amplia gama de industrias que conforman el mundo actual. La quitina es la versión animal de la celulosa y es el segundo polímero más abundante de la naturaleza después de la celulosa. La quitina es encontrada en los exoesqueletos de aproximadamente un millón de especies de �19 artrópodos –insectos, langostas y cangrejos, por ejemplo-, hongos y algas unicelulares. Químicamente se describe como β-(1-4)-2-acetamido-2-desoxi-D- glucosa (Fig. 1). La quitina es un homopolisacárido estructural lineal no ramificado compuesto por residuos de N-acetil-D-glucosamina unidos por un enlace β, [unidad repetitiva (β1!4)GlcNAc]; en C-2 contiene un grupo amino acetilado, por lo que la quitina corresponde a una amida de ácido acético10. Fig. 1. Estructura química de la quitina. La quitina y el quitosán son sustancias renovables con grandes posibilidades de explotación. En Japón se tienen más de 200 industrias dedicadas a este rubro y más de 10,000 médicos la están probando en distintas enfermedades con gran éxito, aparte de todas las demás áreas de aplicación. En algunos países como Canadá y Estados Unidos, se tienen industrias explotadoras de quitina y quitosán que, aunque no se comparan con Japón, se piensa que crecerán en un futuro no muy lejano, ya que muchas Universidades están estudiando el potencial de estos compuestos. La producción de quitina y quitosán actualmente está basada en caparazones de cangrejos y camarones desechados por industrias conserveras en Oregón, Washington, Virginia, Japón y varias flotas pesqueras en la Antártica. Varios países poseen grandes recursos crustáceos sin explotar, como son Noruega, México y Chile. Hablar de quitina y quitosán en México, es hablar de un material poco conocido, pero que pudiera tener una gran capacidad de explotación ya que, México cuenta con reservas de este material en sus tres �20 litorales. La producción de quitosán a través de caparazones de crustáceos obtenidos como desecho de la industria alimentaria es económicamente factible, especialmente si incluye la recuperación de carotenoides utilizados como aditivo en la comida de peces de acuacultura, especialmente salmones. En la actualidad el quitosán y la quitina son producidos comercialmente en la India, Japón, Polonia, Noruega y Australia. El precio mundial del quitosán (al menudeo) es de $7.5 US/10 G (precio de lista de Sigma and Aldrich)11. 4.2. Descripción del Quitosán. El quitosán es un polímero natural de alto peso molecular, derivado de la forma desacetilada de la quitina, siendo un polímero de los más abundantes en la naturaleza. Es un policatión único de gran importancia. El quitosan es un polisacárido que consiste en unidades repetidas de D-glucosamina y N-acetil- D-glucosamina, enlazadas por medio de uniones glucosídicas (1-4). Descrito químicamente como (1-4)-2-amino-2-desoxi-β-D-glucosa (Fig. 2). Es un poliamino lineal cuyo grupo amino se encuentra disponible para reacciones químicas y formación de sales con ácidos10, 12,13. 4.3. Propiedades y aplicaciones médicas. El quitosán es un amino polisacárido altamente versátil, de cuyas propiedades fisicoquímicas -origen del material, peso molecular, grado de deacetilación, viscosidad y cristalinidad- dependerán sus características especiales y su potencial funcional. �21 Fig. 2. Estructura química del quitosán. Los usos y aplicaciones que se le han dado al quitosán dentro de las múltiples industrias son innumerables14-24. El quitosán ha resultado útil para incrementar el rendimiento de los cultivos, para modificar o controlar las propiedades funcionales de los alimentos en la clarificación y purificación de aguas y bebidas, en eliminación de metales pesados de aguas residuales, en la industria cosmética se le ha introducido en cremas, esmalte de uñas, shampoo, polvo de maquillaje, etc. debido a sus propiedades humectantes, su capacidad para formar películas, sus propiedades fungicidas y fungiestáticas25,11, además de ser el único pegamento catiónico natural que se torna viscoso al ser neutralizado con ácido, por lo que es utilizado en cremas y lociones onduladoras permanentes. En las tres últimas décadas se han reportado una amplia variedad de aplicaciones médicas debido a que prácticamente no es tóxico en animales y humanos11,24. Dentro de estas aplicaciones encontramos al quitosán como vehículo de distribución de fármacos ya que es fácilmente mezclado propiciando la formación de glóbulos, películas, tubos, polvos, geles, entre otros. Uno de sus usos actuales más importante es en los sistemas de liberación de fármacos14,15,17. Se ha demostrado que el quitosán es biodegradable debido a la acción de la lisozima, la cual está presente en la mayoría de las heridas. El quitosán ha demostrado un efecto rápido en el proceso de recuperación de las heridas18,24,26. Diversos productos para la cicatrización de heridas a base de quitosán se encuentran en estadios iniciales de investigación. Los compuestos sulfatados de quitosán tienen actividades de liberación de anticoagulantes y lipoproteína lipasa, por lo que estos pueden ser utilizados como heparinoides para diálisis de sangre artificial. Las fibras de quitosán por su actividad trombogénica y hemostática pueden ser utilizadas como material hemostático mientras por el contrario fibras conteniendo N- hexanoil y N-octanoilquitosán pueden ser utilizadas como materiales antitrombogénicos. El quitosán tiene actividad inmunoestimulante, debido a la estimulación de TNF-alfa, IL-1 e IL-6 y producciónde monocitos, los cuales podrían ser muy útiles en el tratamiento de las infecciones y enfermedades virales19. �22 La quitina y el quitosán no han sido tan ampliamente utilizados en el campo de la odontología como lo han sido en el de la medicina. En la actualidad algunos autores comienzan a tomar interés en sus posibles usos dentro de la primera16,20,23. Dentro de las aplicaciones dentales tenemos su incursión en el tratamiento de la periodontitis, en la formulación de dentífricos para la inhibición de placa y limpiadores de dentaduras, debido a su efecto preventivo sobre la caries, su capacidad de controlar el pH, su acción hemostática, bacteriostática27 y candicida. La seguridad del quitosán ha sido demostrada en ratas y humanos. Únicamente en perros se ha encontrado que dosis altas de quitosán (arriba de 50 mg/kg) producen neumonía letal. También se ha sugerido que la activación de macrófagos por el quitosán media su efecto antitumoral in vivo, mientras que sus propiedades inductoras angiogénicas pueden tener efectos nocivos del quitosán, tales como la promoción de crecimiento e invasión tumoral, en pacientes con cierto tipo de tumores previos26. �23 METODOLOGÍA.- Se seleccionó un paciente masculino, de 65 años de edad, aparentemente sano, de la clínica de la Especialización en Endoperiodontología de la FES Iztacala que presentaba pérdida de reborde alveolar mandibular en su dimensión horizontal tanto del lado derecho como del lado izquierdo (Fig. 3), los dientes ausentes corresponden al 36, 37, 46 y 47 (Fig. 4 y 5). Fig. 3. Arcada Inferior. Fig. 4. Zona inferior derecha. Fig. 5. Zona inferior izquierda. Se le realizó historia clínica, serie radiográfica, fotografías intra y extraorales, así como tomografía computarizada cone beam y fase I previo a las intervenciones quirúrgicas. Se le proporcionó el consentimiento informado en el que aceptó entrar al protocolo y se le explicó de manera clara en que consiste su participación en este. La fase I que se le realizó al paciente incluyó instrucciones de técnica de cepillado y uso de hilo dental, cálculo de índice de placa, raspado y alisado radicular y pulido dental (Fig 6.). �24 " Fig. 6. Fase I finalizada. Se programó la primera cirugía en Marzo de 2014 que consistió en asepsia de la zona, anestesia regional mandibular derecha, incisión intrasurcal en el 48, incisión a todo lo largo del reborde alveolar e incisión con preservación de papilas que se extendió hasta el diente 44, se realizó elevación total de un colgajo mucoperióstico (Fig. 7) por vestibular en la porción mandibular posterior derecha correspondiente al sextante 6, eliminación del tejido granulomatoso y cálculo subgingival tanto manual como ultrasónicamente en los O.D. 45 Y 48. El O.D. 48 presentaba enfermedad periodontal, enseguida, se realizó limpieza del reborde alveolar con punta ultrasónica para eliminar cualquier resto de tejido gingival, se realizó cribado del reborde alveolar con una fresa de bola de baja velocidad (Fig. 8), se hizo una plantilla de la membrana y después se procedió a recortar la membrana de quitosán (Fig. 9), se colocaron tachuelas de titanio en la parte vestibular del reborde para asegurar la membrana de quitosán (Fig. 10), se colocó hueso deproteinizado de bovino (Bio-oss) (Fig. 11) y se colocaron tachuelas en la parte lingual de dicho reborde para asegurar la membrana, cubriendo 3mm más allá de los bordes del defecto (Fig. 12), se realizó incisión subperióstica para lograr el cierre del colgajo sin tensión, sin embargo no se logró, se suturó el colgajo con sutura absorbible de ácido poliglicólico de 5-0 y puntos simples (Fig. 13); a los 14 días se retiraron puntos de sutura. �25 . �26 Fig. 7. Desprendimiento del colgajo de espesor total. Fig. 8. Cribado del hueso en el reborde alveolar. Fig. 9. Membrana de quitosán recortada a la medida del reborde alveolar. Fig. 10. Tachuelas de titanio colocadas por vestibular asegurando la membrana de quitosán. A continuación se programó la cirugía de la zona mandibular posterior izquierda correspondiente al sextante 4 en la cual se realizó anestesia regional mandibular izquierda, incisión intrasurcal en el 38, incisión a todo lo largo del reborde alveolar y �27 Fig. 11. Bio-oss colocado sobre el reborde alveolar y la membrana de quitosán fijada por vestibular a punto de cubrirlo. Fig. 12. Membrana de quitosán colocada sobre el bio-oss y el reborde alveolar. Fig. 13. Puntos simples de sutura. técnica de preservación de papila en 34 y 35, se realizó colgajo de espesor total por vestibular y por lingual, se eliminó el tejido granulomatoso y cálculo subgingival tanto manual como ultrasónicamente de los O.D. 35 y 38 (Fig. 14), se realizó limpieza y cribado del reborde alveolar (Fig. 15), se recortó una plantilla y posteriormente se recortó la membrana de colágena, se colocaron tachuelas de titanio en la parte lingual del reborde para asegurar la membrana (Fig. 16), se colocó hueso deproteinizado de bovino (Bio-oss) (Fig. 17) y se colocaron tachuelas en la parte vestibular de dicho reborde para asegurar la membrana de colágena, cubriendo 3mm más allá de los bordes del defecto (Fig. 18), después de haber realizado la incisión subperióstico por vestibular el colgajo no afrontaba sin tensión por lo que se realizó una incisión subperióstica en lingual y se afrontaron los colgajos, se suturó el colgajo con sutura absorbible primero con un suspensorio horizontal y después con puntos simples (Fig. 19). A los 14 días se retiraron suturas. �28 Fig. 14. Colgajo de espesor total y vista del tejido granulomatoso existente por mesial y zona de la furca del 38. Fig. 15. Limpieza del reborde alveolar. Fig. 18. Membrana de colágena en sitio. �29 Fig. 16. Membrana de colágena asegurada por lingual con tachuelas de titanio. Fig. 17. Hueso Bio-oss colocado sobre reborde alveolar. A los 8 meses de la segunda cirugía se llamó al paciente para su cita de revaloración en donde se le tomó la segunda tomografía computarizada. Tanto el reborde alveolar mandibular izquierdo donde se colocó membrana de colágena como el reborde alveolar mandibular derecho donde se colocó membrana de quitosán fueron evaluados y comparados antes de la cirugía y ocho meses después de esta. Las mediciones se realizaron horizontalmente cada milímetro sobre la zona injertada mediante tomografía computarizada y el programa pixelstick. Del lado del quitosán se obtuvieron 30 cortes (21 cortes coronales y 9 cortes transversales) y del lado de la colágena se obtuvieron 33 cortes (21 cortes coronales y 12 transversales). A su vez, cada corte posee de 11 a 13 medidas horizontales, de tales medidas se sacó la media para así obtener una única medida para cada corte. Posteriormente estas mediciones se analizaron utilizando la prueba t con alfa 0.05 para la determinación de la diferencia entre los 2 grupos (antes y después de la cirugía). El hecho de que del lado del quitosán salieron 30 cortes tomográficos y del lado de la colágena 33 es debido a la longitud en mm del reborde alveolar midiendo desde distal del 35 hasta mesial del 38 y distal del 45 a mesial del 48 respectivamente. A continuación se describe como fueron evaluados cada uno de los cortes: �30 Fig. 19. Sutura suspensoria horizontal y puntos simples. Fig. 20. El número en la esquina superior izquierda corresponde al número de corte tomográfico. La imagen superior izquierda corresponde a un corte tomográfico previo a la cirugía, del lado superior derecho se observa el mismo corte pero con 13 líneas horizontales sobre las cuales se tomaron las medidas del antes de la cirugía,se utilizó como referencia el borde inferior de la mandíbula por lo que los números van en aumento de abajo hacia arriba. En la esquina inferior izquierda observamos un corte tomográfico correspondiente a la misma imagen de la esquina superior izquierda 8 meses después de la cirugía, del lado inferior derecho encontramos esta misma imagen (después de la cirugía) con 13 líneas horizontales sobre las cuales se midió la longitud del reborde después de la cirugía. La tabla del lado izquierdo de la imagen corresponde a las medidas antes (pre) y después (pos) de la cirugía. �31 NO. PRE POS UNIDAD 13 2.70 3.15 mm 12 3.15 4.35 mm 11 3.95 5.65 mm 10 5.20 6.60 mm 9 6.15 7.35 mm 8 7.00 8.55 mm 7 7.90 9.65 mm 6 8.20 8.90 mm 5 9.10 11.05 mm 4 9.30 11.30 mm 3 9.25 11.25 mm 2 9.40 11.00 mm 1 9.25 10.85 mm RESULTADOS.- Al aplicar la prueba t a las mediciones de los grupos antes y después con alfa 0.05 se obtuvo diferencia significativa. El valor de las mediciones del grupo después fue estadísticamente más alto que el de antes tanto para la membrana de colágena como para la de quitosán. Esto quiere decir que se obtuvo una regeneración ósea y una ganancia de tejido óseo en ambos grupos. Ver anexos. MEMBRANA DE QUITOSÁN Tabla 1. Medidas de la media de cada uno de los 30 cortes. En cada corte tomográfico se tomaron aproximadamente 13 medidas, estas 13 medidas se sumaron y se dividieron para sacar la media, mostrada en los números de esta tabla. Fig. 21. A la izquierda el aspecto clínico antes de la cirugía, a la derecha el aspecto clínico 10 meses después de la cirugía, membrana de quitosán. CORTE ANTES DESPUÉS CORTE ANTES DESPUÉS CORTE ANTES DESPUÉS 1 10.14 11.69 11 5.75 8.13 21 7.6 8.9 2 9.67 10.58 12 5.98 8.18 22 8.69 9.7 3 8.64 10.58 13 6.62 8.28 23 8.77 9.67 4 9.91 9.35 14 6.36 8.19 24 8.69 9.98 5 7.99 9.55 15 6.58 8.29 25 8.41 10.09 6 7.16 8.95 16 6.28 7.56 26 8.66 10.76 7 6.96 8.43 17 6.05 8.58 27 8.4 10.12 8 6.7 8.22 18 5.87 8.27 28 8.21 9.52 9 5.55 7.98 19 6.09 8.49 29 7.89 9 10 5.47 8.21 20 6.73 8.65 30 7.39 8.6 �32 Fig. 22. A la izquierda el aspecto del hueso antes de la cirugía, a la derecha el aspecto del hueso 12 meses después de la cirugía, membrana de quitosán. MEMBRANA DE COLÁGENA Tabla 2. Medidas del promedio de cada uno de los 30 cortes. En cada corte tomográfico se tomaron aproximadamente 13 medidas, estas 13 medidas se sumaron y se dividieron para sacar un promedio, el cual se encuentra en los números mostrados en esta tabla. �33 CORTE ANTES DESPUÉS CORTE ANTES DESPUÉS CORTE ANTES DESPUÉS 1 7.5 9.36 12 5.73 9.01 23 8.33 9.12 2 6.41 9.09 13 5.46 8.86 24 8.3 9.62 3 6.06 9.02 14 6.37 8.92 25 8.25 10.08 4 5.75 8.54 15 6.95 9.16 26 8.25 10.14 5 5.74 8.37 16 7.15 9 27 8.53 10.7 6 5.32 8.78 17 7.81 9.22 28 8.39 10.78 7 5.59 9.13 18 8.13 9.25 29 8.14 10.7 8 5.76 9.21 19 8.6 10.16 30 7.94 10.27 9 5.91 9.36 20 9.68 10.46 31 7.57 10.01 10 6.12 9.86 21 10.62 11.87 32 7.36 8.99 11 5.48 9.29 22 8.23 8.7 33 6.81 8.48 Fig. 23. A la izquierda el aspecto clínico antes de la cirugía, a la derecha el aspecto clínico 10 meses después de la cirugía, membrana de colágena. Fig. 24. A la izquierda el aspecto del hueso antes de la cirugía, a la derecha el aspecto del hueso 12 meses después de la cirugía, membrana de colágena. �34 COMPARACIÓN ENTRE MEMBRANA DE QUITOSÁN Y COLÁGENA El valor de las mediciones de colágena fue estadísticamente más alto que el de quitosán. La prueba t aplicada a las diferencias de las mediciones antes y después con colágena y quitosán mostró diferencia significativa con una media mayor en la colágena. ANÁLISIS ESTADÍSTICO Prueba t para medias de dos muestras emparejadas. Antes y después membrana de quitosán. �35 CORTE COLÁGENA QUITOSÁN CORTE COLÁGENA QUITOSÁN CORTE COLÁGENA QUITOSÁN 1 1.86 1.55 12 3.28 2.2 23 0.79 0.9 2 2.68 0.91 13 3.4 1.66 24 1.32 1.29 3 2.96 1.94 14 2.55 1.83 25 1.83 1.68 4 2.79 -0.56 15 2.21 1.71 26 1.89 2.1 5 2.63 1.56 16 1.85 1.28 27 2.17 1.72 6 3.46 1.79 17 1.41 2.53 28 2.39 1.31 7 3.54 1.47 18 1.12 2.4 29 2.56 1.11 8 3.45 1.52 19 1.56 2.4 30 2.33 1.21 9 3.45 2.43 20 0.78 1.92 31 2.44 10 3.74 2.74 21 1.25 1.3 32 1.63 11 3.81 2.38 22 0.47 1.01 33 1.67 Variable 1 Variable 2 Media 7.44033333 9.0833 Varianza 1.83169989 1.0069 Observaciones 30 30 Coeficiente de correlación de Pearson 0.88751791 Diferencia hipotética de las medias 0 Grados de libertad 29 - Estadístico t 13.7555918 P(T<=t) una cola 1.5336E-14 Valor crítico de t (una cola) 1.699127 P(T<=t) dos colas 3.0672E-14 Valor crítico de t (dos colas) 2.04522961 Prueba t para medias de dos muestras emparejadas. Antes y después membrana de colágena. Prueba t para medias de dos muestras emparejadas. Diferencia entre quitosán y colágena después de las cirugías. �36 Variable 1 Variable 2 Media 7.21939394 9.50030303 Varianza 1.80919337 0.63227178 Observaciones 33 33 Coeficiente de correlación de Pearson 0.73934997 Diferencia hipotética de las medias 0 Grados de libertad 32 - Estadístico t 14.1295832 P(T<=t) una cola 1.3196E-15 Valor crítico de t (una cola) 1.6938887 P(T<=t) dos colas 2.6391E-15 Valor crítico de t (dos colas) 2.03693333 Variable 1 Variable 2 Media 2.31766667 1.643 Varianza 0.91915644 0.42799414 Observaciones 30 30 Coeficiente de correlación de Pearson 0.16265275 Diferencia hipotética de las medias 0 Grados de libertad 29 Estadístico t 3.45624756 P(T<=t) una cola 0.00085494 Valor crítico de t (una cola) 1.699127 P(T<=t) dos colas 0.00170987 Valor crítico de t (dos colas) 2.04522961 DISCUSIÓN.- El quitosán demostró ser un material biocompatible que permite la formación de hueso nuevo. Este estudio es un precedente para estudios posteriores ya que los resultados obtenidos nos alientan a pensar que el refinamiento de esta membrana de quitosán podría resultar en una membrana adecuada para su uso en regeneración ósea guiada de bajo costo y posiblemente aún mejor que la membrana de colágena. �37 AGRADECIMIENTOS.- Dra. Patricia Miranda por su incondicional y desinteresada ayuda en todos mis proyectos. Gracias por su enorme colaboración en el desarrollo de la membrana de quitosán utilizada en este estudio. Dr. Salvador Arróniz infinitamente agradecida por su ayuda y dulce guía en este camino hacia mis logros académicos. A mi esposo Jorge por ser un pilar fundamental en este logro, no tengo palabras para agradecerte todo lo que has hecho por mí, mi amor. A mis padres Dora y Mario por todo su amor, guía, apoyo y por siempre inculcarme querer ser mejor. Gracias por educarme, por todas sus noches de preocupación y por hacer de mi la mujer que soy. A mi tia Delia y mi tio Jorge que seguro nos mira desde el cielo. Gracias por hacerme la niña más feliz del mundo (hasta el día de hoy aún me siento así cada que los pienso), gracias por creer en mí y hacerme sentir que soy capaz de lograr cualquier cosa. A la Facultad de Estudios Superiores Iztacala que me abrió sus puertas y el acceso a mis maravillosos maestros, gracias a todos por hacerme una mejor profesionista y por hacer de Endoperiodontología la mejor especialidad del mundo. A Dios mi señor, porque siempre me has tomado de la mano a donde quiera que yo voy. �38 BIBLIOGRAFÍA.- 1. Hämmerle CHF, Jung RE, Yaman D, Lang NP. Ridge augmentation by applying bioresorbable membranes and deproteinized bovine bone mineral: a report of twelve consecutive cases. Clin. Oral Impl. Res. 19, 2008; 19–25. 2. Vernal R. Regeneración Tisular Guiada. Una Visión Actualizada. Revista dental de Chile. 2001; 92 (3): 33-44. 3. Retzepi M, Donos N. 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México: Universidad Nacional Autónoma de México; 1999. �41 ANEXOS.- Mediciones en los cortes tomográficos antes y después en la membrana de quitosán. CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �42 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �43 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN " ! �44 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �45 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �46 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �47 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �48 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �49 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �50 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �51 CORTE CORONAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! �52 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �53 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �54 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �55 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE QUITOSAN ! ! �56 Mediciones en los cortes tomográficos antes y después en la membrana de colágena. CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �57 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �58 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �59 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �60 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �61 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �62 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �63 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �64 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �65 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �66 CORTE CORONAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �67 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �68 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �69 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �70 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �71 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �72 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! ! �73 CORTE TRANSVERSAL MEMBRANA DE COLÁGENA ! 74 Portada Índice Resumen Introducción 1. Marco Teórico 2. Materiales de Barrera 3. Injertos Óseos 4. Quitosán Metodología Resultados Discusión Bibliografía
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