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1 Matias Palmero Morfología Normal 2020 Actividad para que realicen los estudiantes para el trabajo práctico Nº 4, correspondiente a los temas: Sangre periférica y médula ósea. Nombre del alumno/a: Matias Palmero Fecha: 19/10 Comisión Nº: 2 Docentes a cargo: Esp. Carolina Aro, Bqca. Noelia Villafañe, Bqco. Leandro Amherdt. Tejido sanguíneo: Introducción: La sangre es un líquido de color rojo brillante a oscuro, según la cantidad de oxígeno que transporte. Es más densa que el agua y su pH oscila entre 7,35 y 7,45. La cantidad de sangre en un individuo (volemia) varía de 5 a 6 litros en el hombre a 4 a 5 litros en la mujer. Se considera que representa un 7 a 8% del peso corporal en el ser humano. Entre sus muchas funciones se pueden mencionar el transporte de sustancias nutritivas, oxígeno, hormonas y otras sustancias regulatorias, el mantenimiento de la homeostasis, y la participación en la coagulación, la termorregulación y la respuesta inmune. Desde el punto de vista histológico, la sangre es tejido conjuntivo especializado constituido por una parte líquida extracelular: el plasma y otra parte representada por los elementos formes. En condiciones fisiológicas, el plasma está constituido en un 90% por agua y cantidades variables de solutos inorgánicos (Na+ , K+ , Ca++, Mg++, Fe++ , Cu++, , HP2O4-, HCO3-) y orgánicos (proteínas, lípidos, hidratos de carbono y metabolitos, como urea, ácido úrico, pigmentos y enzimas, entre otros). Bajo el término elementos formes se engloba a eritrocitos (también llamados glóbulos rojos o hematíes), leucocitos (también llamados glóbulos blancos) y trombocitos (o plaquetas) ya que los eritrocitos y las plaquetas no poseen núcleo, por lo que no son consideradas células. 2 Matias Palmero Morfología Normal 2020 Los eritrocitos, leucocitos, y trombocitos tienen una vida media limitada dentro del organismo, por lo que es necesario que sean generados de manera continua. Este proceso se denomina hematopoyesis y en el ser humano adulto sano, se produce en la médula ósea. Actividades: 1. Observa la siguiente imagen y explica brevemente de qué elemento se trata, características citológicas (como tamaño, aspecto del núcleo, aspecto del citoplasma, afinidad tintorial de las granulaciones, etc.), porcentaje normal en sangre periférica y funciones que cumple. Imagen 1: En esta microfotografía de extendido de sangre podemos se observa la presencia central de un neutrofilo. Se distingue principalmente por su tamaño superior a los eritocitos (miden de 10 a 12 µm de diámetro) y se identifican con facilidad por las múltiples lobulaciones en su núcleo, (pueden ser de 2 a 4, lo que lo hace un leucocito polimorfonuclear. La heterocromatina se ve principalmente en la periferia del núcleo, en contacto con la envoltura nuclear, mientras que la eucromatina se ubica en el centro. 3 Matias Palmero Morfología Normal 2020 Tipos de gránulos: Gránulos azurófilos (gránulos primarios): son más grandes y menos abundantes que los específicos, son lisosomas. Gránulos específicos (gránulos secundarios): son los más pequeños y más abundantes que los gránulos azurófilos. Gránulos terciarios Son los leucocitos más abundantes y tienen una distribución relativa de entre el 40 – 65 % para los neutrofilos y hasta 4% para neutrofilos cayados. La función de estas células está asociada al sistema inmune, particularmente la fagocitosis de microorganismos en un proceso denominado diapédesis. Son móviles y lo realizan de la siguiente manera: En la luz del vaso sanguíneo: marginación, rotación y adhesión al endotelio. Migración a través de la pared del vaso sanguíneo. Migración en el tejido hacia la zona dañada y fagocitosis. 2. Observa la siguiente imagen y explica brevemente de qué elemento se trata, características citológicas (como tamaño, aspecto del núcleo, aspecto del citoplasma, presencia o no de granulaciones, etc.), porcentaje normal en sangre periférica y funciones que cumple. Imagen 2: En esta microfotografía de extendido de sangre podemos se observa la 3.1 4 Matias Palmero Morfología Normal 2020 presencia central de un monocito. Se distingue principalmente por su tamaño superior a los eritocitos (miden 18 µm de diámetro) y se identifican con facilidad debido a que su núcleo posee típicamente una escotadura más pronunciada que la del linfocito y su cromatina es laxa. Aunque se clasifican como agranulocitos, en su citoplasma hay pequeños gránulos azurófilos densos que contienen enzimas lisosómicas típicas similares a las que están en los gránulos azurófilos de los neutrófilos. En sangre periférica tienen poca funcionalidad. Migran hacia los tejidos donde se transforman en macrófagos. Tienen una distribución relativa de entre el 2 - 10 % en sangre periférica. 3. Busca imágenes en Internet de los leucocitos que no aparecen en las microfotgorafías anteriores y explica brevemente de qué elemento se trata, características citológicas (como tamaño, aspecto del núcleo, aspecto del citoplasma, presencia o no de granulaciones, etc.), porcentaje normal en sangre periférica y funciones que cumple. Eosinófilo Poseen más o menos el mismo tamaño, o quizás apenas más grandes, que los neutrófilos. Su núcleo presenta dos lobulaciones (bilobulado). Al igual que los neutrófilos la heterocromatina está en la periferia del núcleo, mientras que la eucromatina se encuentra en el centro. El citoplasma de los eosinófilos contiene dos tipos de gránulos: Gránulos azurófilos (primarios): son lisosomas y contienen variedad de hidrolasas acidas y otras enzimas hidrolíticas. 4.1 4.2 5 Matias Palmero Morfología Normal 2020 Gránulos específicos, secundarios: presentan varias proteínas, algunas son proteína básica mayor (que le imparte la acidofilia intensa al granulo), proteína catiónica de eosinófilo (ECP). Los eosinófilos pueden regular la respuesta alérgica y las reacciones de hipersensibilidad mediante la neutralización de la histamina. Juegan un papel de defensa del huésped frente a microorganismos no fagocitables, poseen una función citotóxica. Tienen una distribución relativa de entre el 1 - 5 % en sangre periférica. Basófilo Tienen más o menos le mismo tamaño, o quizás apenas más pequeños que los neutrófilos, y se denominan así debido a que los abundantes gránulos grandes que hay en su citoplasma se tiñen con colorantes básicos. Son los menos abundantes de todos los leucocitos. Presentan un núcleo lobulado, que suele estar oculto tras los gránulos, la heterocromatina es periférica, mientras que la eucromatina está ubicada en el centro del núcleo. El citoplasma del basófilo contiene un pequeño aparato de Golgi, algunas 5.1 6 Matias Palmero Morfología Normal 2020 mitocondrias y dos tipos de gránulos: Gránulos inespecíficos o azurófilos: son los lisosomas de los basófilos y contienen varias de las hidrolasas acidas habituales similares a las de otros leucocitos. Gránulos específicos Tienen una distribución relativa de entre el 0 - 1 % en sangre periférica. Linfocito La función principal de los linfocitos es la regulación de la respuesta inmunitaria específica, reaccionando frente a materiales extraños (microorganismos, células tumorales o antígenos en general). Para ello se diferencian desde el punto de vista estructural como: Linfocitos T: se desarrollan en el timo y participan en la respuesta inmunitaria celular. Linfocitos B: se desarrollan en la médula ósea y luego migran a diferentes tejidos linfáticos, son los encargados de la respuesta inmunitaria humoral, transformándose en 6.1 7 Matias Palmero Morfología Normal 2020 plasmocitos queproducen anticuerpos. Natural killers (NK): destruyen células infectadas. Los linfocitos T y B presentan receptores específicos, las NK no. Además se pueden identificar tres tipos de linfocitos de acuerdo con su tamaño: Linfocitos pequeños: el citoplasma aparece como un reborde muy fino azul pálido alrededor del núcleo. En general no se ven gránulos citoplasmáticos. Los componentes primarios del citoplasma son ribosomas libres y unas pocas mitocondrias y un aparato de Golgi pequeño. Linfocito mediano: el citoplasma es más abundante, el núcleo es más grande y el aparato de Golgi está un poco más desarrollado. En estas células también hay una cantidad mayor de mitocondrias y ribosomas (causa de la leve basofilia). Linfocitos grandes: 8 Matias Palmero Morfología Normal 2020 son linfocitos activados o linfocitos NK. Tienen una distribución relativa de entre el 30 - 50 % en sangre periférica. 4. ¿Qué son las plaquetas? ¿Qué funciones cumplen? ¿Cómo se observan al microscopio óptico? Las plaquetas o trombocitos son pequeños fragmentos citoplasmáticos limitados por membrana y anucleados que derivan de los megacariocitos. Las plaquetas actúan en la formación del coágulo de sangre y la reparación del tejido lesionado. Al abandonar la médula ósea las plaquetas circulan en los vasos como estructuras discoides de unos 2 a 3 µm de diámetro. 5. ¿Qué coloración de rutina se usa para la tinción de un extendido de sangre? ¿En qué aumento se observan los elementos formes? Para la tinción de rutina de extendidos de sangre se usa May Grünwald- Giemsa. Los elementos formes se observan en detalle en 100x con aceite de inmercion. Aún así, la primera evaluación de un extendido debe ser de forma panorámica utilizando los objetivos de 10X y 40X. 8.1 9 Matias Palmero Morfología Normal 2020 Luego se debe colocar una gota de aceite de inmersión y utilizar el objetivo de 100X, que permite observar morfología eritrocitaria, leucocitaria y plaquetaria y realizar la fórmula leucocitaria. 6. ¿Qué determinaciones incluye un hemograma? ¿En qué consiste cada una de ellas? Determinaciónes de un Hemograma Hematocrito: porcentaje de eritrocitos en el volumen total de sangre. Concentración total de hemoglobina. Recuentos totales de leucocitos y eritrocitos. Índices hematimétricos: volumen corpuscular medio (VCM), hemoglobina corpuscular media (HCM), concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM) y amplitud de distribución eritrocitaria (ADE), por señalar los que aportan los contadores hematológicos más elementales. Recuentos diferenciales de leucocitos: absoluto y relativo. Evaluación de la morfología de los elementos sanguíneos. Médula ósea: Introducción: La médula ósea es el órgano hematopoyético del ser humano adulto, en condiciones fisiológicas. La toma de muestra y la realización de los extendidos de médula ósea es un procedimiento médico que se realiza ante trastornos que alteren el número y/o la proporción de las células sanguíneas. Para evaluar la morfología de los precursores sanguíneos, los extendidos de médula ósea son coloreados con la misma técnica que para sangre periférica (May Grünwald-Giemsa) y para el diagnóstico específico de las distintas de hemopatías, además de May Grünwald-Giemsa se pueden realizar coloraciones citoquímicas e inmunocitoquímicas. 10 Matias Palmero Morfología Normal 2020 En este trabajo práctico se diferenciarán los precursores de las células sanguíneas pertenecientes a las series mieloide, eritroide y megacariocítica en extendidos coloreados con May Grünwald-Giemsa. Asimismo, se analizarán coloraciones citoquímicas con la finalidad de reconocer, en extendidos de sangre y médula ósea, distintos grados de positividad de los precursores o de las células maduras. Actividades: 1. Los precursores de los glóbulos rojos presentan características morfológicas diferentes. Mediante el proceso de maduración dichos precursores sufren cambios morfológicos hasta llegar a los glóbulos rojos que observamos en un extendido de sangre periférica de un paciente sano. ¿Qué cambios ocurren durante el proceso madurativo? Describe brevemente los cambios que ocurren en los distintos estadios de maduración de la serie eritroide. El proceso madurativo de los precursores en términos generales involucra: Disminución del tamaño celular Modificaciones tintoriales en el citoplasma Aumento en la condensación de la cromatina Desaparición de nucléolos. Desaparición del núcleo. A continuación se enumeran los precursores y los cambios que sufren: 1. Proeritroblasto: Tiene un tamaño comprendido entre 20 y 30 μm. Su citoplasma es agranular, muy basófilo, con arcoplasma (zona decolorada del citoplasma en la que se encuentra el aparato de Golgi). El núcleo, por lo general es subcuadrangular, grande, con cromatina laxa y nucléolos. 2. Eritroblasto basófilo: que mide entre 15 y 18 μm. Como su antecesor, el citoplasma es agranular, intensamente basófilo, con halo perinuclear claro. El núcleo es grande, pero menor que el del proeritroblasto, con cromatina reticulada, que va condensándose en cúmulos con las repetidas mitosis. No posee nucléolos. 3. Eritroblastos policromatófilos: La basofilia citoplasmática de estas células (mayor en el eritroblasto basófilo) se debe a la gran cantidad de 11 Matias Palmero Morfología Normal 2020 ribosomas libres, para la síntesis de la hemoglobina. La acumulación de esta molécula acidófila en el citoplasma hace que se modifique paulatinamente la afinidad tintorial, de azul (basófilo) a lila. El núcleo sigue disminuyendo de tamaño y la cromatina se condensa en grumos siguiendo un patrón semejante al tablero de damas. Estas células son las últimas con capacidad de dividirse. 4. Eritroblastos ortocromáticos: La cromatina se continúa condensando, el núcleo se achica y la cantidad de hemoglobina sigue aumentando, lo que determina que el núcleo se torne picnótico y el citoplasma, acidófilo. 5. Reticulocitos: estadio que va desde que el eritroblasto ortocromático hasta el eritrocito maduro. Cuando el eritroblasto ortocromático pierde el núcleo pueden quedar polirribosomas en el cuerpo el eritrocito, que le confieren cierto grado de basofilia. Para poder ver el retículo que forman esos polirribosomas es necesario hacer coloraciones supravitales, como el azul brillante de cresilo. 2. Interpretación de microfotografías: Describe el elemento observado señala a qué serie madurativa pertenece e identifica de qué estadio de maduración se trata. 2. a. Imagen 1: 12 Matias Palmero Morfología Normal 2020 Imagen 1: En esta microfotografía se puede observar la presencia central de un Eritroblasto basófilo. Se distingue principalmente por su tamaño superior a los eritocitos (miden entre 15 y 18 µm de diámetro) y se identifican con facilidad debido a que el citoplasma es agranular, intensamente basófilo, con halo perinuclear claro. El núcleo es grande, pero menor que el del proeritroblasto, con cromatina reticulada, que va condensándose en cúmulos con las repetidas mitosis. Además de esto, no se observan nucleolos, como es de esperarse. Describe el elemento observado, señala a qué serie madurativa pertenece e identifica de qué estadio de maduración se trata. 2. b. Imagen 2: 12.1 13 Matias Palmero Morfología Normal 2020 Imagen 2: En esta microfotografía se puede observar la presencia central de un Mielocito neutrófilo. Se distingue principalmente por su tamaño superior a los eritocitos (miden entre 12 y 15 µm de diámetro) y se identifican con facilidad debido a su núcleo excentrico, levemente arriñonado, donde la cromatina se empieza a condensar,las granulaciones inespecíficas van desapareciendo y aparecen las específicas (de coloración pardo alilada o rojizo caracteristicas de los neutrófilos). 3. ¿Qué cambios ocurren durante el proceso madurativo de la serie mieloide? Describe brevemente los cambios que ocurren en los distintos estadios de maduración de la dicha serie. A continuación se enumeran los precursores y los cambios que sufren: 1. Mieloblasto: Tiene un tamaño entre 15 y 20 μm. Su citoplasma agranular, levemente basófilo, sin arcoplasma. El núcleo, por lo general es subcuadrangular, grande, con cromatina laxa y nucléolos. 2. Promielocito: célula que no cumple con la regla de ser de menor tamaño que su antecesor ya que mide entre 25 y 35 μm. El citoplasma es basófilo, con arcoplasma y granulaciones azurófilas, inespecíficas. El núcleo es grande y posee cromatina laxa y nucléolos. 13.1 14 Matias Palmero Morfología Normal 2020 3. Mielocitos: Con las divisiones sucesivas y la maduración de las células, el tamaño celular disminuye, la cromatina se empieza a condensar, las granulaciones inespecíficas van desapareciendo y aparecen las específicas. Este último hecho determina que podamos diferenciar mielocitos neutrófilos, eosinófilos y basófilos. 4. Metamielocitos: La granulaciones específicas son cada vez más numerosas y el núcleo se torna más heterocromático y aparece una escotadura, dándole la forma de poroto o arriñonado. 5. El proceso madurativo continúa y los cambios morfológicos que se observan están relacionados fundamentalmente al núcleo, que se va elongando (núcleo en banda), para luego dar lugar a los núcleos lobulados de las células maduras. Estos cambios se observan fundamentalmente en los neutrófilos. 4. Describe brevemente los cambios que ocurren en los distintos estadios de maduración de la serie megacariocítica. A continuación se enumeran los precursores y los cambios que sufren: 1. Megacarioblasto: una célula grande de 15 a 20 μm, con citoplasma basófilo, rara vez con gránulos. Su núcleo puede ser redondo, oval, arriñonado, rara vez multinucleado, con cromatina fina, con nucléolos. 2. Promegacariocito o Megacariocito basófilo: núcleo multilobulado de cromatina densa, sin nucleolos visibles. El citoplasma es intensamente basófilo, con granulaciones azurofilas insipientes. 3. Megacariocito granuloso: núcleo de cromatina muy ocndensada, con varios núcleos unidos entre sí. El citoplasma presenta abundante granulación. 4. Megacariocito maduro formador de plaquetas: difiere del anterior por presentar zonas citoplasmáticas con una granulación que se agrupa y queda rodeada por una zona más amorfa. Estas áreas se desprenden para formar las plaquetas en forma de proplaquetas. Actividad planteada por los docentes: Bqca. Lilián Bertona y Bqco. Sebastián Claussen. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org) Índice de comentarios 3.1 ¿Qué afinidad tintorial presenta su citoplasma? 4.1 ¿Qué afinidad tintorial presenta su citoplasma? 4.2 ¿Qué características histológicas tiene su citoplasma? 5.1 ¿Qué características histológicas tiene su citoplasma? 6.1 Se pueden diferenciar en un extendido un linfocito T de un B? Haría un resumen en función de las características histológicas en relación a su tamaño. 8.1 Como se observan al MO? 12.1 Teniendo en cuenta la descripción que hiciste en relación a la maduración de los elementos de la serie roja y mirando el estado y distribución de la cromatina. ¿ Seguirías considerando tu respuesta?. 13.1 Teniendo en cuenta la basofília que presentan la célula de la microfotografía y las descripciones en el punto 3 relacionadas a la maduración de los elementos de la serie mieloide, seguirías considerando la misma respuesta? 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