Logo Studenta

GUIAS APE BIOLOGIA MOLECULAR

¡Este material tiene más páginas!

Vista previa del material en texto

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Las Normas de Bioseguridad en los laboratorios de Biología
 II. OBJETIVO: 
 a) Conocer las normas de bioseguridad para realizar un trabajo seguro en los laboratorios de Biología.
b) Aplicar el conocimiento de las normas específicas de la bioseguridad en el desarrollo de las prácticas experimentales.
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 Normas de protección personal:
1. Se usarán en todo momento monos, batas o uniformes especiales para el trabajo en el laboratorio. El material de protección debe cubrir brazos, piernas, torso y pies.
Están prohibidos el uso de sandalias, zapatos sin puntera, pantalones cortos, faldas, camisetas cortas.
2. Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que puedan entrañar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros
materiales potencialmente infecciosos o animales infectados. Una vez utilizados, los guantes se retirarán de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos
3. El personal deberá lavarse las manos después de manipular materiales y animales infecciosos, así como antes de abandonar las zonas de trabajo del laboratorio.
4. Se usarán gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de protección cuando sea necesario proteger los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de
radiación ultravioleta artificial.
5. Estará prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio, por ejemplo en cantinas, cafeterías, oficinas, bibliotecas, salas para el personal y baños.
6. En las zonas de trabajo estará prohibido comer, beber, fumar, aplicar cosméticos o manipular lentes de contacto.
7. Estará prohibido almacenar alimentos o bebidas para consumo humano en las zonas de trabajo del laboratorio.
8. La ropa protectora de laboratorio no se guardará en los mismos armarios o taquillas que la ropa de calle.
Normas de bioseguridad durante los procedimientos:
1. Lea con atención, antes de cada práctica de laboratorio, las indicaciones de la práctica. Siga todas las instrucciones a menos que el profesor realice alguna modificación.
2. Estará estrictamente prohibido pipetear con la boca. No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas. No se debe llevar las manos a la
boca ni a la cara.
3. Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la formación de aerosoles y gotas.
4. Se limitará el uso de jeringuillas y agujas hipodérmicas, que no se utilizarán en lugar de dispositivos de pipeteo, ni con ningún fin distinto de las inyecciones por vía
parenteral o la aspiración de líquidos de los animales de laboratorio.
5. Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se comunicarán inmediatamente al responsable del laboratorio. Se
mantendrá un registro escrito de esos accidentes e incidentes.
6. Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames.
7. Antes de utilizar un compuesto, fijarse en la información que aparece en su rótulo.
8. Si se vierte sobre ti cualquier ácido o producto corrosivo, se debe lavar inmediatamente con mucha agua y avisar al profesor.
9. Nunca devuelva los sobrantes de los productos a los frascos de origen sin consultar con el profesor.
Normas de bioseguridad en las zonas de trabajo del laboratorio:
1. El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.
2. Cada grupo de prácticas es responsable de su zona de trabajo y de su material. Se trabajará con cuidado, destreza, habilidad y de manera organizada. Así mismo se
mantendrá cada mesa de trabajo limpia, seca y ordenada.
3. Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material potencialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo.
4. Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.
5. El embalaje y el transporte de material deberán seguir la reglamentación nacional o internacional aplicable.
6. Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de artrópodos.
Niveles de riesgo Biológico en el laboratorio de Biología Molecular y Celular
De acuerdo con el nivel de riesgo, el tipo de laboratorio, la barrera de contención requerida, los procedimientos y técnicas a usar, se han establecido los siguientes niveles
de Bioseguridad en el laboratorio de Biología Molecular y Celular.
Nivel se bioseguridad 1 (Laboratorio Básico)
Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en un laboratorio básico, por personal adiestrado en los procedimientos que se ejecutan en él. En este nivel se
trabaja con agentes clasificados en el Grupo de riesgo I donde el riesgo individual, poblacional y medio ambiente escaso o nulo. Microorganismos que tienen pocas
probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los animales. En el nivel de Bioseguridad I no se requiere equipo especial ni un diseño específico de las
instalaciones. El personal de estos laboratorios es generalmente supervisado por un científico con entrenamiento en microbiología.
Nivel se bioseguridad 2 (Laboratorio de Cultivo Celular)
Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en un laboratorio básico, por personal adiestrado en el manejo de agentes de riesgo del grupo II. Este nivel
incluye un riesgo individual moderado y el riesgo poblacional bajo. Agentes patógenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero que tienen pocas
Página 1/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la población, el ganado o el medio ambiente. La exposición en el laboratorio puede provocar una
infección grave, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces y el riesgo de propagación es limitado.
Se caracteriza por:
1. El personal de laboratorio tiene entrenamiento específico en el manejo de agentes patógenos.
2. El acceso al laboratorio es restringido cuando se está realizando algún trabajo.
3. Se toman precauciones extremas con instrumentos punzo cortantes contaminados.
4. Ciertos procedimientos en los cuales pueden salpicar los agentes o aerosoles se llevan a cabo en cabinas de trabajo microbiológico.
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 1. Pizarra, tiza líquida, borrador e internet
2. Proyector, computador, parlantes.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: El estudiante deberá leer de la bibliografía sugerida en el sílabo sobre las normas de bioseguridad y la información que se encuentra en información virtual de
libros y artículos de revistas científicas.
Tarea 2: Elaborar un protocolo donde se explique lo aprendido en la revisión bibliográfica y de la práctica, como el análisis de los videos observados durante la práctica.
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
El estudiante debe aplicar la normativa de Bioseguridad vigente que se ha estudiado y que rige en el laboratorio de Biología Celular y Molecular, que se contemplan en el
buen trabajo que se va realizar durante el desarrollo de una práctica en éstos laboratorios de Biología.
 IX. CONCLUSIONES: 
 A modo de conclusiones y retroalimentación los estudiantes pueden responder las siguientes preguntas de autoevaluación.
1. Comparar los niveles de bioseguridad 1 y 2 que debe aplicar en el trabajo experimental en laboratorios de Bilogía pedagógicos.
2. Explique las normativas básicas y los hábitos que va a desarrollar durante las prácticas experimentales, con la información proporcionada en esta prácticay la
bibliografía sugerida.
3. Elaborar un protocolo del procedimiento aplicado en la práctica y un informe de la práctica en el formato referido por el docente.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta en el sílabo, además en tutoriales que se refieren en el aula virtual.
Página 2/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 3/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que se analizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 4/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
Fecha de elaboración 
_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 5/5
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Uso y manejo de equipos, materiales y reactivos en los laboratorios de Biología
 II. OBJETIVO: 
 a) Conocer los equipos, materiales y reactivos en los laboratorios de Biología.
b) Manipular correctamente los equipos que se utiliza en estos laboratorios para medir microvolumenes, pesar cantidades inferiores a un gramo y separar micromoléculas o
subpartículas celulares por centrifugación.
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 El laboratorio de biología molecular requiere la manipulación de equipos muy precisos, por lo tanto conocer su correcta manipulación garantiza la exactitud del resultado
final. En la Práctica, cada estudiante:
Manipulará microvolúmenes de líquidos (agua con colorante), para adquirir la habilidad y experticia en el manejo de micropipetas y pequeños recipientes contenedores
(tubos eppendorf) o en papel filtro.
Recibirá instrucción precisa para la operación de diferentes equipos utilizados en la rutina del laboratorio: Centrífugas, Microcentrífuga, Balanza analítica, tremociclador y
vortex. (Ver anexo)
Manejar y manipular correctamente las micropipetas automáticas para obtener resultados confiables y reproducibles, para lo cual deben:
Tarea 1: Técnica del pipeteo:
1. Se presiona el botón superior (pulsador) suavemente hasta el primer tope.
2. Se sumerge la punta, en la solución que se necesita pipetear estando seguros de que la punta este bien colocada y que no haya ningún tipo de residuos entre la punta y
el cuerpo de la pipeta.
3. Mantenga la pipeta verticalmente mientras toma la solución.
4. Para descartar la solución de la punta, presione el botón (pulsador) hasta el segundo tope.
5. Descarte las puntas utilizando el expulsador.
Tarea 2. Medición de distintas cantidades de volúmenes con las micropipetas:
1. Tomar la pipeta de 0,5 ? 10 ul.
2. Colocar la punta desechable.
3. Medir 0,5 ? 1 ? 1,5 ? 2 ? 2,5 ? 3 ? 3,5 y 4 µl de azul de metileno.
4. Transferir los volúmenes de azul de metileno al papel filtro.
5. Medir el diámetro del círculo con la regla.
6. Verificar las mediciones.
Repetir las mismas acciones con la pipeta 20 ? 200 µl
1. Medir 50- 75- 100 y 150 µl
Repetir las mismas acciones con la pipeta 200 - 1000µl
1. Medir 250- 460- 850 y 1000 µl
Tarea 3: Verificar las mediciones según los valores de la tabla y elabore un eje cartesiano con cada una del grupo de mediciones y determine el radio (Ver el anexo)
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 1. Tubos falcón, micropipetas, papel filtro, gradillas, puntas desechables.
2. Azul de metileno.
3. Termociclador, cámara de electroforesis, transiluminador, balanza analítica, centrífugas, microcentrífuga, vortex, termomixer, nanodrop.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: El estudiante deberá leer de la bibliografía sugerida en el silabo sobre los equipos, materiales y reactivos que se utiliza en los laboratorios de Biología.
Tarea 2: Elaborar un resumen donde se explique el manejo y uso de los equipos específicos de que se utiliza en la experimentación en la Biología Molecular, especialmente
en la medición de pequeños volúmenes.
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
1. El estudiante aplica los conocimientos adquiridos en la práctica sobre la manipulación de los equipos y reactivos que utilizarán a los largo de los experimentos que
realizaremos durante el semestre.
2. Identifica y diferencia las partes que le constituyen a las micropipetas y entiende la función de cada una de éstas partes para llegar a manejarlas y utilizarlas
correctamente
3. Elaborar un protocolo del proceso desarrollado durante la práctica y un informe de la práctica.
 IX. CONCLUSIONES: 
Página 1/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 1. Explique brevemente el fundamento que se debe desarrollar al momento de utilizar los equipos y reactivos dentro de la experimentación.
2. Explique, qué mecanismos debe desarrollar para un manejo correcto de los equipos, reactivos y materiales utilizablesen los experimentos que se desarrollan en los
laboratorios de Biología Molecular.
Elaborar un protocolo del procedimiento de la práctica y un informe con el formato referido por el docente.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta en el sílabo. Además observar los vídeos tutoriales que el URL se encuentra en el aula virtual.
Página 2/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 3/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que se analizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 4/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
 Anexo: Practica_ Uso y Manejo .pdf 
Fecha de elaboración 
_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 5/5
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Microscopía: Iluminación de Köhler
 II. OBJETIVO: 
 Identificar las partes del microscopio de campo claro, aprender a realizar la iluminación de Köhler y desarrollar la habilidad del manejo del mismo.
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 Para que los microscopios proporcionen imágenes de buena calidad las lentes deben estar limpias, por lo que debe evitar tocarlas, ya que las huellas digitales alteran la
calidad de la imagen observada. Solo si es imprescindible debe limpiar las lentes, para llevarlo a cabo utilice únicamente papel especial para la limpieza de las lentes (papel
seda), no emplee pañuelos desechables ni cotonetes. En el ambiente hay pequeñas partículas de polvo y si no se utiliza el material adecuado, las lentes se deterioran
dañando la calidad de la imagen.
Use aceite de inmersión solo cuando va a utilizar el objetivo de 100X. Evite que los demás objetivos entren en contacto con el aceite. Al finalizar la sesión de laboratorio
siempre limpie el aceite de la lente. (Ver anexo)
1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya debería
estar en esas condiciones.
2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.
3. Comenzar la observación con el objetivo de menor (4x) (ya está en posición) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.
4. Para realizar el enfoque:
a. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se
corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítido la muestra, girar
el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.
5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar
de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3, el objetivo de mayor aumento
(40x) enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances:
? incrustarlo en la preparación si se descuidan las precauciones anteriores,
? mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión.
Procedimiento:
1. Colocamos el recorte de la letra “e” sobre la lámina portaobjeto.
2. Agregamos una gota de agua.
3. Ponemos la laminilla cubreobjetos.
4. Procedemos a la observación al microscopio.
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 1. Microscopio de campo claro.
2. Cubreobjetos.
3. Portaobjetos.
4. Una revista o un periódico.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: Identificar las partes del microscopio de Iluminación de Köhler.
Tarea 2: Realizar una muestra para hacer una observación aplicando los conocimientos previos sobre la microscopia y desarrollar las habilidades en el manejo del
microscopio, con miras a observar muestras de la estructura celular.
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
Conoce los diferentes tipos de microscopios, sus principios de funcionamiento y utilización. Identifica las partes del microscopio óptico compuesto, indicando sus funciones
y manipulación correcta del microscopio.
 IX. CONCLUSIONES: 
 El estudiante debe presentar informes sobre el desarrollo de sus habilidades al momento del manejo del microscopio en la observación de muestras microscópicas.
Elaborar un protocolo del proceso desarrollado durante la práctica y un informe de la práctica.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta enel sílabo. Además observar los vídeos tutoriales que el URL se encuentra en el aula virtual.
Página 1/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 2/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que se analizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 3/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
 Anexo: Practica_ Microscopia_ Iluminacion de Kolher.pdf 
Fecha de elaboración 
_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 4/4
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Enfermedades Moleculares que se relaciona con la estructura de la organización celular.
 II. OBJETIVO: 
 Identificar las enfermedades moleculares que se provocan por una alteración en el metabolismo de la estructura de los organelos celulares.
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 Seguir el acápite descrito en el aula virtual.
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 1. Computadora.
1. Conexión a internet, aula virtual de la UTA.
2. Bibliografía física, bibliografía virtual y digital.
3. Videos didácticos, presentaciones en powtoon.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: Analizar la información sobre las enfermedades moleculares y sus manifestaciones por desórdenes en el metabolismo de los organelos celulares.
Tarea 2: Realizar una exposición de los resultados de la investigación sobre la temática sugerida.
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
El estudiante debe investigar las características de los procesos bioquímicos de las rutas metabólicas que al alterarse ocasionan enfermedades moleculares conocidas
también como errores innatos del metabolismo.
 IX. CONCLUSIONES: 
 El estudiante debe presentar su trabajo investigativo de las enfermedades moleculares con una exposición oral en grupo y en videoconferencia.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta en el sílabo. Además observar los vídeos tutoriales que el URL se encuentra en el aula virtual.
Página 1/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 2/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que seanalizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 3/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
 Anexo: Practica_Enfermedades Moleculares_2020.pdf 
Fecha de elaboración 
_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 4/4
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Diversidad Celular: Observación de células Procariotas
 II. OBJETIVO: 
 a) Preparar una muestra de célula procariota a partir de un cultivo bacteriano y aplicar la tinción de Gram para teñir las estructuras celulares.
b) Determinar la forma de las células teñidas con antelación y observar al microscopio las muestras e identificar el tipo de célula, además observar e identificar en las
células procariotas las estructuras visibles al microscopio óptico.
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula
y el medio que la rodea. El modo más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes. Si se desea simplemente aumentar el contraste de las células para la
microscopía, son suficientes los procedimientos que usan un solo colorante llamado de tinción simple. Sin embargo, a menudo se utilizan métodos que no tiñen de igual
modo todas las células, es el proceso denominado tinción diferencial.
Uno muy usado en Biología es la tinción de Gram. Basándose en su reacción a la tinción Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos: grampositivas y
gramnegativas. Esta tinción tiene gran importancia en taxonomía bacteriana ya que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias.
Pared Gram +: capa densa y uniforme de 200 a 800 Ao, ácidos teicoicos, Polisacáridos, proteínas (pocas veces), glicopéptido (50% del peso seco).
Pared Gram -: capa interna delgada de 20 a 30 Ao, cubierta por capas externas de densidad menor, Lipopolisacáridos, Lipoproteínas, Proteínas, glicopéptido (10% del peso
seco).
El mecanismo de la tinción Gram es el siguiente: (ver anexo)
COLORACIÓN:
a) 1 minuto en cristal violeta (colorante inicial).
b) se lava con agua.
c) 1 minuto en lugol (mordiente).
d) se decolora con alcohol de 95° (decolorante).
e) se lava con agua.
f) 1 minuto en fucsina básica o safranina (colorante de contraste).
g) se lava con agua.
h) se seca suavemente y sin frotar con papel de filtro Una vez que la preparación está totalmente seca, poner una gota muy pequeña de aceite de cedro y observar al
microscopio con el objetivo de inmersión (100X).
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 1. Placas cube y portaobjetos, caja Petri, asa microbiológica, papel filtro, mechero de bunsen.
2. Azul de metileno, lugol, alcohol cetona, safranina o fucsina.
3. Incubadora, microscopio óptico compuesto.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: El estudiante deberá aplicar los métodos estudiados para realizar una muestra a partir de cultivo bacteriano.
Tarea 2: A esta muestra debe colorear aplicando la metodología de la tinción de Gram.
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
El estudiante maneja correctamente el microscopio óptico y realiza tinciones bacterianas para identificar las estructuras de la célula procariota y establecer más tarde la
diferenciación con células más complejas.
 IX. CONCLUSIONES: 
 A modo de conclusiones y retroalimentación los estudiantes pueden responder las siguientes preguntas de autoevaluación.
1. Describa con sus propias palabras el procedimiento de las técnicas realizadas en esta práctica, los materiales y equipos utilizados.
2. ¿Qué forma tienen las bacterias observadas?
3. ¿Las bacterias aparecen aisladas o agrupadas? En caso de que aparezcan agrupadas indicar el tipo de asociación. Indica tipo de Gram.
4. Como son aplicables estos conocimientos en su profesión?
5. Investigue 3 tipos de tinción para bacteriología, exceptuando la de Gram, como se realizan y para que microorganismos son aplicables.
Elaborar un protocolo del proceso desarrollado durante la práctica y un informe de la práctica.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta en el sílabo. Además observar los vídeos tutoriales que el URL se encuentra en el aula virtual.
Página 1/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 2/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que se analizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 3/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
 Anexo: Practica_Diversidad Celular_Procariota.pdf 
Fecha de elaboración_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 4/4
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Diversidad Celular: Observación de células Eucariotas
 II. OBJETIVO: 
 a) Preparar una muestra de células Eucariotas a partir de tejidos vegetales y animales y aplicar la tinción simple para observar las estructuras celulares.
b) Determinar la forma de las células teñidas con antelación y observar al microscopio las muestras e identificar el tipo de célula, además observar e identificar en las
células eucariotas la estructura interna celular, visibles al microscopio óptico.
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 Entre las células eucariotas de organismos pluricelulares podemos diferenciar a las células vegetales que difieren de las células eucariotas animales en que poseen
paredes celulares rígidas, plastidios y vacuolas grandes, las células de la mayor parte de las plantas carecen de centriolos.
Cada célula es virtualmente un microcosmos de vida, ya que es la unidad más pequeña que puede llevar a cabo todas las actividades propias de los seres vivos: Si dispone
de todos los nutrientes necesarios y de un ambiente apropiado algunas células se mantienen vivas y se reproducen en laboratorio, en contraste ninguna parte celular
aislada puede sostenerse con vida.
Preparación de las muestras vegetales:
a) De la hoja de cebolla y de la Elodea, observar que los vegetales estén limpios y listos para proceder con la preparación.
b) Realizar un corte muy fino de la cara interna de la hoja con la cuchilla de afeitar.
c) Colocar el corte fino en el centro del porta objetos.
d) Tinción de las células con azul de metileno.
e) Colocar el cubre objeto.
f) Dejar la muestra colorando por 1 minuto.
g) Limpiar el excedente de colorante con suavidad por el borde del cubreobjetos con un papel secante.
h) Sellar la muestra con esmalte transparente. Pegando el cubre contra el portaobjetos.
Preparación de las muestras animales:
a) De la mucosa bucal de un estudiante.
b) Enjuagado la boca 3 veces con agua potable.
c) Realizar un raspado de la mucosa bucal con un baja lengua.
d) Luego hacer un frotis con la muestra extraída en el centro del portaobjetos.
e) Tinción de las células con azul de metileno.
f) Colocar el cubre objeto.
g) Dejar la muestra colorando por 1 minuto.
h) Limpiar el excedente de colorante con suavidad por el borde del cubreobjetos con un papel secante.
i) Sellar la muestra con esmalte transparente. Pegando el cubre contra el portaobjetos.
Con la muestra del tejido sanguíneo procedemos de la siguiente manera. Obtención de sangre capilar para observar las células sanguíneas.
a) Desinfectar el dedo anular con alcohol y algodón.
b) Con una lanceta estéril punzar el dedo y dejar caer una gota de sangre, sobre el extremo del portaobjetos.
c) Con la ayuda de otro portaobjetos formar un ángulo de 45o y realizar un frotis o extendido, tratando de esparcir homogéneamente la gota de sangre por la superficie de
la lámina portaobjetos.
d) Dejar de secar la muestra a temperatura ambiente.
e) Proceder a colorear la muestra con Giemsa o Wrigth por 1 minuto.
f) Sin eliminar el colorante agregar agua destilada y dejar actuar por diez minutos.
g) Eliminar luego el colorante lavando suavemente con agua de la llave, inclinando suavemente el portaobjetos.
h) Dejar secar a temperatura ambiente.
i) Proceder a observar al microscopio con la lente de 100X, pero antes de observar colocar una gota de aceite de inmersión.
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 a) Placas cubre y portaobjetos, papel filtro, hoja de afeitar, lanceta.
b) Azul de metileno, Giemsa o Wrigth, aceite de inmersión.
c) Microscopio óptico compuesto.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: Preparar muestras de Células Eucariotas Vegetales como: cebolla y elodea.
Tarea 2: Prepara muestras de Células Eucariotas Animales como: tejido de muestra bucal y tejido sanguíneo.
Tarea 3: Observar las preparaciones en el microscopio compuesto con las lentes 4X y 100X
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
El estudiante prepara y observa las estructuras celulares para identificar la organización básica de las células eucariotas y establecer diferencias entre células procariotas y
eucariotas en su organización interna.
Página 1/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 IX. CONCLUSIONES: 
 A modo de conclusiones y retroalimentación los estudiantes pueden responder las siguientes preguntas de autoevaluación.
1. Describa con sus propias palabras el procedimiento de las técnicas realizadas en esta práctica, los materiales y equipos utilizados.
2. ¿Qué forma tienen las células vegetales y animales?
3. ¿Cómo son aplicables estos conocimientos en su profesión?
4. Investigue 3 tipos de tinción para éstas células, exceptuando las utilizadas, como se realizan y para que células eucariotas son aplicables.
Elaborar un protocolo del proceso desarrollado durante la práctica y un informe de la práctica.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta en el sílabo. Además observar los vídeos tutoriales que el URL se encuentra en el aula virtual.
Página 2/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 3/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos:FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que se analizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 4/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
 Anexo: Practica_Diversidad Celular_Eucariota.pdf 
Fecha de elaboración 
_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 5/5
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Membrana Celular: Osmosis
 II. OBJETIVO: 
 a) Demostrar objetivamente los fenómenos turgencia, plasmólisis, hemólisis y tensión superficial que ocurre en un organismo.
b) Identificar los diferentes procesos que ocurren dentro de la célula cuando se coloca en distintos medios: hipotónicos, hipertónicos e isotónicos.
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 Generalmente las células se encuentran bañadas por líquidos isotónicos (concentraciones iguales), la membrana celular es la estructura de la célula que permite la entrada
y salida de sustancias líquidas que son controladas por sus mecanismos homeostáticos.
En ciertas circunstancias llegan a rebasarse los límites de control de esos mecanismos y actúan sobre las leyes físicas (La presión externa puede alcanzar en promedio 6 a
7 atmósferas), con lo que la célula pierde su estabilidad interior, que en casos muy severos puede provocar su muerte.
La Turgencia es un mecanismo que consiste en la entrada de agua a la célula provocando que se “hinche”, es decir que aumente su volumen y en consecuencia puede
llegar a estallar esto sucede cuando la célula se encuentra en un medio hipotónico en relación a su citoplasma. La turgencia es la presión ejercida por los fluidos y por el
contenido celular sobre las membranas de la célula, también es la elasticidad normal de la piel causada por la presión hacia afuera de los tejidos y del fluido intersticial.
Este fenómeno está íntimamente relacionado con la ósmosis. (Ver anexo)
La Plasmólisis es un mecanismo en el cual la célula se encuentra en un medio hipertónico en relación a su interior, en este caso la concentración de ambos medios tiende a
igualarse provocando la salida excesiva de agua en la célula lo que causará la destrucción de su citoplasma, es decir la célula se deshidrata. Esto sucede por ejemplo
cuando se consume demasiado alcohol.
La membrana plasmática de las células vegetales y animales es muy permeable al agua, siendo pocas las sustancias que la atraviesan con igual facilidad, esto ocasiona
que cuando exista entrada y salida de ella, la célula también se altere en su forma, ya que ésta, en parte está determinada por el estado de deshidratación de los coloides
celulares.
La tonicidad se puede definir como la habilidad de una solución para cambiar la forma o el tono de una célula al alterar el volumen de agua en su interior y el soluto puede
penetrar la membrana tanto como el agua, ambos se mueven desde y hacia la célula y no producen cambios en su forma.
Las soluciones con concentraciones de solutos no penetrantes iguales a las del interior de la célula (0.9%. salina o 5% de Glucosa son isotónicas), las células expuestas a
tal solución conservan su forma y no sufren ganancia ni perdida de agua. Las soluciones con concentraciones de solutos no penetrantes mayores que el de la célula son
hipertónicas y una célula expuesta a tal solución se encoge al perder agua. En caso contrario, si la concentración de la solución en solutos no penetrantes es menor que la
del interior celular se dice que es hipotónica y rápidamente hace difundir agua al interior de las células inmersas en ella. (ver anexo)
La tensión superficial es una manifestación de las fuerzas intermoleculares en los fluidos. La tensión superficial de un fluido a la cantidad de energía necesaria para
aumentar su superficie por unidad de área, implica que el fluido tiene una resistencia para aumentar su superficie. Este efecto permite a algunos insectos se desplacen por
la superficie del agua sin hundirse.
La hemólisis es el fenómeno de la desintegración de los eritrocitos o glóbulos rojos. El eritrocito carece de núcleo y orgánulos, por lo que no puede repararse y muere
cuando se desgasta. En una solución hipotónica con respecto al eritrocito, éste pasa por un estado de turgencia (se hincha por el exceso del líquido) y luego esta célula
estalla debido a la presión, y cuando el eritrocito se encuentra en una solución hipertónica la célula se deshidrata y sufre plasmólisis.(Ver anexo)
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 a) Cloruro de Sodio en tres concentraciones: 0.6%, 0.9%, 1.2%. Agua Destilada (H2O d). Alcohol al 70%. Aceite de cedro. Esmalte transparente.
b) 1 caja de Porta y cubreobjetos. 3 Vasos de precipitación de 100 ml. 3 Tubos de ensayo. 3 pipetas de cristal de 2 ml. 3 agitadores de vidrio. Una caja de palillos de
dientes. 3 Goteros de 3 ml. 2 gradillas. 10 lancetas desechables. 1 jeringuilla de 10 ml. 1 funda de algodón.
c) Microscopio compuesto. Balanza analítica.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: Preparación de soluciones de NaCl
a) Las soluciones de NaCl que se prepararán para la práctica son:
Preparar una solución al 0.6% de NaCl en 50 ml de H2O destilada: pesar 0.6 gr de NaCl y diluirlo en 50 ml de H2O destilada.
b) De la misma manera procedemos con las otras dos concentraciones. Haciendo los cálculos respectivos para cada disolución que vamos a ocupar en la práctica.
Tarea 2: Preparación de las muestras de sangre
a) Para hacer la toma de las muestras se debe limpiar con alcohol la zona de donde se extraerá la sangre para evitar contaminación.
b) Tomar la muestra de sangre venosa con la técnica de la jeringuilla o extracción al vacío y depositar de manera inmediata la sangre en un tubo de tapa lila para que no se
nos coagule.
c) Tomar la muestra de sangre arterial con la lanceta del dedo índice.
d) Depositar 2 gotas de ésta sangre en el centro del porta objetos para mezclar con la soluciones salinas previamente preparadas.
e) En uno de los portaobjetos colocar 1 gota de sangre para hacer un frotis con ella y poder observar los glóbulos rojos en estado normal.
Tarea 3: Graficar lo observado en cada una de las actividades realizadas
Página 1/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
a) Ayúdese con estos esquemas para poder clarificar lo observado: (Ver anexo)
Tarea 4: Preparación de la muestra de sangre arterial para observar la turgencia y la plasmólisis de los glóbulos rojos en diferentes medios de concentración. (Ver anexo)
Tarea 5: Preparación de la muestra de sangre venosa para observar la turgencia y la plasmólisis de los glóbulos rojos en diferentes medios de concentración. (Ver anexo)
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
a) Identifica y diferencia los procesos que ocurren dentro de la célula y su relación con el medio circundante, establece la relación entre el medio isotónico quemantiene la
estabilidad osmótica tanto de la célula como el medio que la rodea.
b) Determina la relación de un medio hipotónico e hipertónico con la turgencia y la plasmólisis que sufre la célula, como fenómenos que le llevan a la célula a provocarle la
muerte.
c) Diferencian la estructura de la membrana celular y su relación con la semipermeabilidad como fuente importante en el transporte de iones, moléculas y monómeros.
d) Preparan las muestras de sangre y las soluciones de NaCl que se necesita para observar el equilibrio osmótico de los eritrocitos o su alteración en medios hipo-
hipertónicos.
 IX. CONCLUSIONES: 
 A modo de conclusiones y retroalimentación los estudiantes pueden responder las siguientes preguntas de autoevaluación.
1) ¿Por qué se dice que la membrana tiene permeabilidad selectiva?
2) ¿Por qué se dice que la bicapa de la membrana constituye una barrera natural?
3) ¿Cuáles son los factores que afectan la velocidad de difusión a través de la membrana celular?
4) ¿Cómo está constituida la membrana celular de tal manera que permite la permeabilidad?
5) De acuerdo a las concentraciones del medio LIC y LEC en los que se encuentran los glóbulos rojos que usted espera encontrar luego de realizar la práctica, comente
sobre este aspecto.
Elaborar un protocolo del proceso desarrollado durante la práctica y un informe de la práctica.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta en el sílabo. Además observar los vídeos tutoriales que el URL se encuentra en el aula virtual.
Página 2/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 3/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que se analizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 4/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
 Anexo: Practica_Membrana Celular_Osmosis.pdf 
Fecha de elaboración 
_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 5/5
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Cariotipo. El Cariotipo Humano
 II. OBJETIVO: 
 Reconocer los cromosomas humanos, elaborar un cariotipo a partir de una fotografía y saber determinar las anomalías cromosómicas más frecuentes.
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 También llamado complemento cromosómico, se consigue al microfotografiar una célula en metafase y ordenar posteriormente los cromosomas según criterios
establecidos por el International System for Human Cytogenetics Nomenclatures.
La célula con la que vamos a trabajar se ha obtenido a partir de un cultivo de sangre, después se hizo un tratamiento con tripsina y posteriormente la Tinción con Giensa
para obtener un bandeo G.La microfotografía así obtenida pertenece a una persona que no tiene ninguna anomalía cromosómica.
Recordando que la dotación cromosómica normal de la especie humana es de 46, XX para las mujeres y de 46, XY para los varones. En el cariotipo humano los
cromosomas se ordenan constituyendo 7 grupos por tamaño de mayor a menor, con el brazo corto siempre hacia arriba y por la posición del centrómero. (Ver Gráfico 1)
Los grupos que comprende el cariotipo humano son las siguientes: CROMOSOMAS GRANDES Grupo A (cromosomas 1, 2 y 3) meta y submetacéntricos. Grupo B
(cromosomas 4 y 5) submetacéntricos. CROMOSOMAS MEDIANOS Grupo C (cromosomas 7, 8, 9, 10, 11 y 12 y además los cromosomas X) submetacéntricos. Grupo D
(cromosomas 13, 14 y 15) acrocéntricos. CROMOSOMAS PEQUEÑOS Grupo E (cromosomas 16, 17 y 18) submetacéntricos. Grupo F (cromosomas 19 y 20)
metacéntricos. Grupo G (cromosomas 21 y 22) acrocéntricos. Por acuerdo los cromosomas sexuales X e Y se separan de sus grupos correspondientes y se ponen juntos
aparte al final del cariotipo. (Ver Gráfico 2)
Para el cariotipo generalmente se utilizan linfocitos obtenidos de sangre periférica. Los linfocitos son cultivados e inducidos a proliferar in vitro con un agente mitogénico
como la fitohemaglutinina. Luego se detiene el ciclo celular en metafase con colchicina, para poder observar los cromosomas. Para que los cromosomas no se observen
sobrepuestos entre sí, a las células se les aplicar una solución hipotónica como citrato de sodio al 0.7% (hincha las células y permite la separación). Se adiciona un fijador
de células (metanol:ácido acético 3:1) y finalmente se tiñen con un colorante como la solución de Giemsa. Se elige un campo donde se observen lo mejor posible todos los
cromosomas, se fotografían, se imprimen, se recortan y se acomodan en el orden descrito.
Selecciona las palabras desconocidas y transcribe el significado en el glosario.
1. Recorta c/u de los cromosomas de la lámina 1.
2. Agrúpalos de acuerdo con su tamaño, forma y bandas de tinción.
3. Identifica cada parejade homólogos ayudándote del cariotipo presentado anteriormente.
4. Pega cada pareja en la plantilla de la ficha.
5. En la siguiente tabla aparece información sobre alteraciones cromosómicas frecuentes en la especie humano.
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 1. Preparaciones en laminillas de portaobjetos, copias de cromosomas humanos, copias de formatos para cariotipo.
2. Tijeras, pegamento.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: Distinguir las principales características de los cromosomas.
Tarea 2: Observar los cromosomas, tratar de identificar los cromosomas homólogos. Identificar si son metacéntricos, submetacéntricos o acrocéntricos.
Tarea 3: Identificar los cromosomas humanos.
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
El estudiante identifica y reporta el número de cromosomas, su fórmula cromosómica y el sexo de la persona que se extrajo la muestra y se identifica si el cariotipo
analizado es normal o presenta alguna alteración.
 IX. CONCLUSIONES: 
 A modo de conclusiones y retroalimentación los estudiantes pueden responder las siguientes preguntas de autoevaluación.
1. ¿Por qué hay regiones que se tiñen y otras que no se tiñen con el colorante Giemsa?
2. ¿Qué otras metodologías existen para hacer cariotipos?
3. Explique su fundamento. ¿En qué fase del ciclo celular se realiza el cariotipo?
4. ¿Cómo actúa la colchicina?
5. ¿Qué tipo de mutaciones se pueden identificar con el cariotipo (puntuales, cromosómicas, deleciones, inversiones, translocaciones, etc.)?
6. Justifique su respuesta. ¿Qué utilidad tiene realizar un cariotipo?
Elaborar un protocolo del procedimiento de la práctica y un informe co el formato referido por el docente.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta en el sílabo. Además observar los vídeos tutoriales que el URL se encuentra en el aula virtual.
Página 1/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 2/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que se analizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 3/4
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
 Anexo: Practica_ Cariotipo Humano.pdf 
Fecha de elaboración 
_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 4/4
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Extracción y Purificación de ADN genómico
 II. OBJETIVO: 
 Extraer y purificar ADN Genómico de Sangre Periférica en seres humanos
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 Hay diferentes técnicas que permiten obtener ácidos nucleicos con alto grado de pureza. El grado de pureza de los ácidos nucleicos determina la elección de un método u
otro. El gradiente de Cloruro de Cesio es un método ampliamente utilizado. Sin embargo, en la actualidad, existe una gran cantidad de kit comerciales que se basa en una
cromatografía de intercambio iónico.
El método para desintegrar el tejido estará en función del material de partida (sangre total, tejidos blandos, tejido muscular, hueso o diente). En el caso de bacterias, hongos
y levaduras se utilizan otros métodos. Durante la homogenización de la muestra, las moléculas de ácidos nucleicos de gran tamaño (ej. ADN genómico) es fragmentado
mecánicamente. El grado de fragmentación dependerá de los métodos utilizados para la homogeneización y purificación. Los métodos más vigorosos permiten mayores
rendimientos, pero implican una mayor fragmentación del ADN.
Los ácidos nucleicos por su carácter hidrofílico son solubles en agua. En una extracción con fenol y el cloroformo, estos solventes son capaces de extraer/precipitar las
proteínas y lípidos, las cuales se mantendrán en fase orgánica.
Mientras que los ácidos nucleicos permanecen en la fase acuosa. A partir de esta fase acuosa es posible realizar la purificación de los ácidos nucleicos a través de su
precipitación. El método se basa en la neutralización de las cargas negativas (mediante la adición de sales), y deshidratación de la molécula (mediada la adición de
alcoholes). La precipitación, al ser un proceso reversible es posible volver a resuspender los ácidos nucleicos.
Aislamiento de ADN genómico total utilizando el método de Salting out:
1. Calentar el baño de maría o termobloque a 55ºC.
2. Colectar de 3 a 5 ml de sangre completa en tubos vacutainer conteniendo 100ul de EDTA 15%.
3. Transferir de 3 a 5 ml de sangre a un tubo de centrifuga de 15 ml y agregar el mismo volumen de la solución TKM1 y homogenizar la mezcla.
4. Para lisar las células agregar 125 µl (1000 µl) de NONIDET P-40 (Sigma) y mezclar por inversión varias veces.
5. Centrifugar a 2200 rpm por 10 min a Tº ambiente y eliminar el sobrenadante.
6. Adicionar al pellet nuclear de 3-5 ml de TKM1, homogenizar y centrifugarcomo antes, eliminar el sobrenadante. Lavar las células con el mismo volumen de TKM1
cuantas veces sea necesario, hasta que el pellet sea blanco.
7. Resuspender el pellet en 800 µl de TKM2 delicadamente y pasarlo a un eppendorf de 1.5ml.
8. Agregar 50 µl de SDS 10% y mezclar la solución por pipeteo e incubarlo a 55ºC por 10 min.
9. Agregar 300 µl de NaCl 6M al tubo y mezclar bien.
10. Centrifugar a 12.200 rpm por 5 min.
11. Transferir el sobrenadante, conteniendo al ADN a un tubo nuevo, descartar el pellet proteico.
12. Agregar 2 volúmenes de Etanol 100% a RT, agitar por inversión hasta que se precipite el ADN.
13. Sacar las hebras de ADN y pasarlas a un tubo de 1.5ml, conteniendo 1 ml de etanol al 70% frío.
14. Si no se obtienen hebras visibles, centrifugar por 5 min a 12.200 rpm a 4ºC, eliminar el sobrenadante y secar el pellet.
15. Resuspender el ADN 200 a 500 µl de TE 1X o agua bidestilada.
Esta técnica nos permite la extracción de DNA mediante una técnica rápida, no enzimática, en muestras de sangre periférica, sin la necesidad de reactivos tóxicos o
solventes orgánicos
 VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS: 
 1. Tubos Eppendorf, Tubos de vidrio 10 ml, Tubos falcon 15 ml, Pipetas, Micropipetas de volumen variable (20, 200 y 1000 µl), Puntas desechables para micropipeta,
Gradilla para tubos Eppendorf y tubos falcon, Piseta con agua destilada, Papel higiénico.
2. TKM1, TKM 2, TE, SDS, NaCl, Ethanol al 100%, Ethanol al 70%, Agua Bidestilada.
1. Centrífuga, Microcentrífuga, Agitador Vortex, Termomixer.
 VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR: 
Tarea 1: Recolección de tejidos para la extracción de ADN:
La colección y preservación adecuada de las muestras es vital en los estudios moleculares, pues la calidad y cantidad del ADN depende de la condición del tejido. A
continuación algunas recomendaciones para la recolección y almacenamiento de las muestras.
Tarea 2: Extracción de ADN Genómico total a partir de muestras sanguíneas:
La mayoría de métodos para la extracción de ADN total abarca 3 pasos fundamentales: El primer paso de purificación consiste en lisar las células y los núcleos. En el
segundo paso las proteínas son desnaturalizadas con un detergente aniónico y removidas por medio de una precipitación con sales y finalmente el ADN es concentrado y
desalinizado empleando isopropanol o etanol como precipitante. (Ver Tabla I)
Página 1/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 VIII. RESULTADOS OBTENIDOS: 
El estudiante extrae y purifica el ADN genómico de sangre periférica, cumpliendo con el desarrollo de la metodología sugerida para este fin, lo hacen con cuidado y
siguiendo todas las normas de bioseguridad y manejo de micropipetas para obtener resultados favorables.
 IX. CONCLUSIONES: 
 A modo de conclusiones y retroalimentación los estudiantes pueden responder las siguientes preguntas de autoevaluación.
1. ¿Qué procedimientos se requieren en la extracción de ADN en células procariotas?
2. ¿En qué consiste el efecto caotrópico del isotiocianato de guanidina?
3. Consulte otras técnicas o kit de extracción de ADN y explique el fundamento de tres de estas, especificando el uso de los reactivos claves
4. ¿Qué conclusiones saca al comparar las diferentes técnicas o kit de extracción de ADN?
Elaborar un protocolo del procedimiento de la práctica y un informe co el formato referido por el docente.
 X. RECOMENDACIONES: 
Apoyarse en la bibliografía básica y complementaria propuesta en el sílabo. Además observar los vídeos tutoriales que el URL se encuentra en el aula virtual.
Página 2/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
 BIBLIOGRAFÍA
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Peinado, María
Peragón, Juan
2019 Biología Molecular y Celular. Volumen II:
Biomedicina
1 Editorial UJA
Universidad de
Jaén
España/Jaén 1 256 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: Esta obra contemporánea contiene temas de interés molecular para la consulta de los estudiantes en el área de las enfermedade4s moleculares
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/124960
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Cruz, C.
Pinilla Bermudez, G.
2019 Biología Molecular. ADN Recombinante y
Aplicaciones
1 Manual
Moderno
México/México DF. 1 233 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/ereader/uta/128367?page=1
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Orengo, Ferriz; Dorcas J. 2013 Fundamentos de Biología Molecular 1 Editorial UOC España/Barcelona 1 245 Virtual
 Código/Ubicación base de datos:
 Comentario: El libro analiza la temática que se propone en el contenido programático de la asignatura de Biología Molecular haciendo un análisis desde el origen de la célula hasta los
procesos moleculares que intervienen en el funcionamiento del ciclo vital.
 URL: https://elibro.net/es/lc/uta/titulos/56750
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía 2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
Página 3/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN DE LOS
APRENDIZAJES
de matemáticas para el laboratorio
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Es una obra contemporánea para tratar la temática que se va a desarrollar en el laboratorio.
 URL:
 Autores Año Título Nro Edición Editorial Pais/Ciudad Nro
Ejemplares
 Nro Páginas Tipo
Stephenson ;Frank H 2012 Biología molecular y biotecnología. Guía
de matemáticas para el laboratorio
2a edición Elsevier /Barcelona 1 458 páginas FÃsico
 Código/Ubicación base de datos: FCS1914
 Comentario: Obra contemporánea que analiza la temática que trata sobre los temas que se analizarán en el laboratorio de Biología Molecular.
 URL:
Página 4/5
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
VALIDACIÓN DE LAS GUÍAS DE PRÁCTICAS
 Anexo: Practica_Extraccion_ADN.pdf 
Fecha de elaboración 
_______________________
DOCENTE PLANIFICADOR UTA 
Blga M.Sc. CARMEN VARIÑA BARBA GUZMAN
_______________________
Coordinador Unidad de Organización Curricular
 Lic. GABRIELA FERNANDA ECHEVERRIA VALENCIA
_______________________
Coordinador de Carrera
Dr. RICARDO JAVIER RECALDE NAVARRETE
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
Página 5/5
http://www.tcpdf.org
 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
 FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y
EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA: Medicina
 NIVEL: TERCERO UOC: BASICA ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
 CICLO ACADÉMICO: ABRIL 2022 - SEPTIEMBRE 2022
 I. TEMA: 
Cuantificación de ADN Genómico
 II. OBJETIVO: 
 Cuantificar el ADN purificado por espectrofotometría (Nanodrop)
 III. MODALIDAD: 
 No Presencial
Presencial
 IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 
 Presenciales: 2
 No Presenciales: 1
 V. INSTRUCCIONES: 
 En la mayoría de los casos trabajar con ADN implica la necesidad de conocer concentraciones exactas. Inespecíficamente la cuantificación del ADN se puede llevar a cabo
por estimación de la intensidad de una banda en geles de agarosa. La cuantificación específicamente implica técnicas de espectrofotometría.
Los dobles enlaces conjugados de las bases nitrogenadas hacen que el espectro de absorción característico de ADN presente un máximo a 260 nm. A partir de reglas
empíricas se estima que

Continuar navegando