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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA VIDA DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS GUÍA REPASO SOLEMNE II GLUCONEO - GLICO: GLUCOSA GLICOGE: GLICÓGENO GÉNESIS: SÍNTESIS -> ANABOLISMO LISIS: DEGRADACIÓN -> CATABOLISMO GLICOGENOLISIS -> DEGRADACIÓN DEL GLICÓGENO GLICOGENOGÉNESIS -> SÍNTESIS DEL GLICÓGENO 1. Defina una reacción exergónica y una reacción endergónica. Relacione sus definiciones con la diferencia de energía libre de Gibbs (ΔG). Reacción exergónica: Reacciones que ocurren espontáneamente. Liberan energía. ΔG < 1 Reacción endergónica: Reacciones que no ocurren espontáneamente. Requieren energía para ocurrir. ΔG > 1 ΔG = G productos – G sustratos 2. ¿Cómo se relaciona el ΔG con la Keq de una reacción? Keq: Constante de equilibrio. Razón de productos con los sustratos de una reacción. Keq ΔG Tipo de reacción >1 <0 Exergónica 1 0 Equilibrio <1 >0 Endergónica 3. Defina el concepto de “reacción acoplada” Una reacción acoplada es aquella donde una reacción no puede hacer que ocurra por sí misma, por lo que necesita de otra reacción con una energía mayor, para que la ayude a ocurrir. Es decir, una reacción exergónica tiene la suficiente fuerza como para atraer a las reacciones endergónicas, y ayudar a que estas sucedan. 4. Defina Catabolismo y Anabolismo. Catabolismo: Destrucción (degradación) de compuestos. Por ejemplo, destrucción de un polisacárido para extraer los monosacáridos. Anabolismo: Construcción (síntesis) de compuestos. Por ejemplo, unión de monosacáridos para la construcción de disacáridos o polisacáridos. 5. Complete la siguiente tabla comparativas de las vías catabólicas y anabólicas: Característica Vías catabólicas Vías anabólicas Síntesis o degradación Degradación Síntesis Oxidativa o reductiva Oxidativa Reductiva Endergónica o exergónica Exergónica Endergónica Produce o gasta ATP Produce ATP Gasta ATP Produce o gasta NADPH Produce NADPH Gasta NADPH GLICÓLISIS 1. Respecto a la Glicólisis, explique lo siguiente: a) ¿Es una vía catabólica o anabólica? Fundamente su respuesta. Es una vía catabólica, dado que la glucosa es degradada con el fin de obtener piruvato. Además, al realizar el proceso se genera ATP y NADPH. b) ¿Por qué la glicólisis debe regularse? ¿Cuáles son las reacciones que son reguladas? ¿Cómo se regulan? La glicólisis debe regularse, dado que en caso de no ser así se degradaría toda la glucosa de nuestro organismo, agotando la fuente de energía principal del ser humano. La glicólisis debe ser realizada cuando sea necesario, como todo proceso. Las reacciones reguladas son las 1, 3 y 10 dado que son las que tienen enzimas irreversibles. La regulación se hace mediante una retroalimentación negativa, con el pensamiento de ¿es realmente necesario realizar glicólisis?. Por ejemplo, la hexoquinasa es inhibida por glucosa 6-fosfato, dado que si hay grandes cantidad de glucosa 6-fosfato, ¿para qué voy a producir más? Reacción Enzima Activación Inhibición 1 Hexoquinasa Glucosa 6-fosfato 3 Fosfofructoquinasa AMP Fructuosa 2,6 - bifosfato ATP Citrato 10 Piruvato quinasa ATP Acetil Co-A c) Enumere los productos que se obtienen en la glicólisis, NETO por molécula de glucosa. Cantidad ATP 2 NADH 2 Recordar: En las reacciones 1 y 3 se consume 1 ATP en c/u (en total 2 ATP), mientras que en las reacciones 7 y 10 se producen 2 ATP en c/u (en total 4 ATP). Cuando preguntan por NETO se refieren a lo producido menos lo consumido, por lo tanto, 4 ATP – 2 ATP = 2 ATP NETOS. En la reacción 6 se producen 2 NADH. d) ¿Qué efecto tendrá en la glicólisis un aumento de los niveles celulares de ATP? ¿Por qué? Un aumento de los niveles celulares de ATP va a inhibir el proceso de glicólisis, específicamente a las enzimas de la reacción 3 y 10 (Fosfofructoquinasa y piruvato quinasa, respectivamente), dado que al haber una gran cantidad de energía, no es necesario realizar el proceso de glicólisis. (recordar la pregunta, ¿es realmente necesario?) e) Indique en presencia de qué hormona (insulina o glucagón) se activa la glicólisis y en presencia de qué hormona se inhibe. Activación Inhibición Insulina Glucagón Hormona hipoglicemiante Hormona hiperglucemiante FERMENTACIÓN 2. Defina: a) Fermentación láctica y alcohólica Fermentación láctica: Producción de lactato desde el piruvato producido en la glicólisis. Es un proceso anaeróbico. Ocurre en seres humanos. Fermentación alcohólica: Producción de etanol desde el piruvato producido en la glicólisis. Es un proceso anaeróbico. Ocurre en levaduras. b) ¿Cuál de las anteriores ocurre en el ser humano? ¿En qué condiciones fisiológicas ocurre? ¿Cuál es su importancia? La fermentación láctica ocurre en seres humanos cuando el suministro de oxígeno está disminuido (paciente hipóxico). Su importancia radica en ser una vía extra para la obtención de energía. 3. Explique cuáles son los posibles destinos del piruvato formado en la glicólisis si la célula está en condiciones aeróbicas o anaeróbicas Aeróbico Anaeróbico Producción de Acetil CoA Ciclo de Krebs Fermentación láctica Fermentación alcohólica RESPIRACIÓN CELULAR 4. Defina “Respiración Celular”. ¿Qué procesos metabólicos involucra? Proceso de degradación de moléculas para la obtención de energía. Puede ser con o sin suministro de oxígeno. Involucra: - Glicólisis - Complejo piruvato deshidrogenasa - Ciclo de Krebs - Fosforilación oxidativa (Cadena transportadora de electrones) 5. Basándose en la figura explique cómo se obtiene a partir de los nutrientes una gran cantidad de energía (ATP) en el proceso de respiración celular. ¿Dónde ocurre este proceso en células eucariontes? A partir de los nutrientes se prouce una gran cantidad de energía (ATP) en el proceso de respiración celular dado que se produce Acetil CoA y el consiguiente ciclo del Krebs, en el cual se generan reacciones que liberan ATP, pero principalmente reacciones que liberan NADH y FADH2, compuestos que realizan fosforilación oxidativa en la cadena transportadora de electrones, desde donde se obtiene la mayor cantidad de ATP. Este proceso ocurre en la mitocondria de las células eucariontes. COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA 6. ¿Qué rol cumple el Complejo enzimático Piruvato Deshidrogenasa? ¿Cómo funciona y se regula? El complejo piruvato deshidrogenasa cumple el rol de transformar el piruvato en Acetil Coa utilizando 3 enzimas, la cual cada una tiene sus coenzimas que ayudan al proceso. E1(piruvato deshidrogenasa): Esta enzima descarboxila el piruvato, es decir, libera su CO2. Para ello utiliza la coenzima TPP (pirofosfato de tiamina) que ayuda a sostener al piruvato mientras se realiza la reacción. E2 (dihidrolipiol transacetilasa): La enzima cataliza la unión de la coenzima A con el grupo acetilo, formando el enlace tioéster. Para ello utiliza la coenzima lipoato, a la cual se le rompe su puente disulfuro de tal manera de que pueda sostener el grupo acetilo del piruvato descarboxilado con uno de sus azufres, mientras que el otro azufre es hidrogenado quedando como SH. Una vez formado el enlace tioéster el hidrógeno liberado es recibido por el otro azufre del lipoato, quedando ambos azufres hidrogenados (lipoato reducido). E3 (dihidrolipoil deshidrogenasa): Aunque ya se haya producido Acetil CoA con las dos enzimas anteriores, se debe volver al estado inicial de tal manera de volver a producir aquel compuesto. La E3 deshidrogena el lipoato, y para ello utiliza la coenzima FAD que acepta aquellos hidrógenos quedando como FADH2. Sin embargo, este compuesto debe estar deshidrogenado para volver a realizar el proceso, para ello se utiliza la coenzima NAD+, la cual recibe los hidrógenos quedando como NADH+ + H+, estos electrones serán utilizados en la cadena transportadora de electrones. Una vez que el NAD+ se encuentra hidrogenado, es posible realizar el proceso nuevamente. Inhibición Activación ATP Acetil CoA NADH Fosforilación de E1 Ácidos grasos Desfosforilación de E1 AMP NAD+ CICLO DE KREBS 7. Nombre los productos que se obtienen por vuelta del ciclo de Krebs. Cantidad en 1 VUELTA ReaccionesATP 1 5 NADH 3 3, 4, 8 FADH2 1 6 8. ¿El Ciclo de Krebs es una vía catabólica o anabólica? Fundamente su respuesta Es una vía catabólica dado que se genera la producción de ATP, y anabólica dado que se genera la producción de oxalacetato. Se degrada y se produce. 9. Mencione 2 metabolitos que regulen (activen e inhiban, respectivamente) el Ciclo de Krebs. Explique por qué, cómo y dónde regulan. Por qué Cómo Dónde ATP Para realizar un control de la producción de ATP. Retroalimentación negativa. Si existe mucho, no es necesario realizar el proceso. Reacción 1, 3 NADH Reacción 4 10. Mencione cuál es el destino del NADH y FADH2 producidos en el Ciclo de Krebs. El destino del NADH y FADH2 producidos en el ciclo de Krebs es la cadena transportadora de electrones. FOSFORILACIÓN OXIDATIVA 11. Explique ¿cómo ocurre el transporte de electrones en la cadena transportadora de electrones. ¿Qué compuesto actúa como aceptor final de los electrones? Y ¿Cómo permite la síntesis de ATP mediante la fosforilación oxidativa? Complejo I: NADH deshidrogenasa. NADH es oxidado a NAD+, se transfieren electrones a FMN, quedando como FMNH2. Se transfiere un electrón a Fe-S y lo transfiere a coenzima Q (ubiquinona pasa a semiubiquinona). Coenzima Q recibe el otro electrón (semiubiquinona a ubiquinol). Durante este proceso 4 protones se translocan a través de la membrana mitocondrial. Complejo II: FADH2 formado en el ciclo de Krebs (succinato a fumarato – reacción 6). Electrones son transferidos por una serie de Fe-S a la coenzima Q. Glicerol 3-fosfato y acetil CoA también transfieren electrones a coenzima Q mediante otras vías. Transferencia de 2 electrones. Complejo III: Obtiene electrones desde la coenzima Q y los transfiere al citocromo C (transportador de electrones hidrosoluble ubicado en el espacio intermembrana). Durante este proceso 4 protones se translocan a través de la membrana mitocondrial. Complejo IV: Capta cuatro electrones de las cuatro moléculas de citocromo C y se transfieren al O2 para producir 2 moléculas de agua. Durante este proceso 2 protones se translocan a través de la membrana mitocondrial. El último aceptor final de electrones es el Oxígeno (respiración celular aeróbica). La producción de ATP se produce debido a que el transporte de electrones junto con la translocación de protones genera un gradiente electroquímico donde un lado de la membrana es positivo (protones) y el otro lado es negativo (electrones). La enzima que realiza el trabajo es la ATP sintasa. La ATP sintasa está compuesta por dos subunidades: • Subunidad Fo: Es un canal que permite la entrada de protones (cuatro), lo que le da la fuerza a la enzima para comenzar a girar. Esta subunidad se encuentra anclada a la membrana interna. • Subunidad F1: Aquel movimiento que se produce al girar, permite la adhesión del grupo fosfato al ADP produciendo ATP. Esta subunidad se encuentra en la matriz. Por cada cuatro protones se genera un ATP: Siguiendo esa lógica, si llega un NADH este se va al complejo I donde se liberan cuatro protones, a los que se les suma los del complejo III y IV haciendo un total de 10 protones, entonces se producirían 2,5 ATP’s, lo que se aproxima a 3. De esta misma forma, si llega un FADH2 éste se va al complejo II el cual no libera ningún protón, por lo que sólo están los de complejo III y IV haciendo un total de 6 protones, entonces se producirán 1,5 ATP’s, lo que se aproxima a 2. 1 NADH = 3 ATP 1 FADH2 = 2 ATP 12. ¿Por qué el monóxido de carbono y el cianuro son moléculas muy tóxicas para el ser humano? (fundamente desde el punto de vista metabólico). Tanto el monóxido de carbono (CO) y el cianuro inhiben el complejo IV de la cadena transportadora de electrones, por lo tanto se inhibe el proceso de fosforilación oxidativa. Finalmente, lo que sucede es que no se puede generar la producción de ATP, entonces aquellos procesos biológicos que requieren de energía no pueden ser realizados (contracción muscular, transporte activo, transmisión de señales, síntesis de DNA y RNA, etc). METABOLISMO DEL GLICÓGENO 13. Respecto a la síntesis (anabolismo) de glicógeno en el ser humano, responda lo siguiente: - ¿Dónde ocurre mayoritariamente? (tejido/órgano) Ocurre mayoritariamente en el hígado. - ¿Para qué sirve el glicógeno sintetizado? El glicógeno es una fuente de almacenamiento de la glucosa, con el fin de guardarla para ser utilizada en caso de ser necesario (por ejemplo, en casos de ayuno). - ¿Qué hormona activa este proceso? La hormona que activa este proceso es la insulina, dado que es una hormona hipoglicemiante que buscar reducir el número de glucosa circulante por la sangre, es por ello por lo que activa su almacenamiento. La insulina activa la enzima UDP-glucosa pirofosforilasa que une la Glucosa 1-Fosfato con el UTP generando UDP-glucosa, precursor de la glicogenogénesis. - ¿Qué enzimas participan? Las enzimas que participan son: ● UDP glucosa: Precursor de la glicogenogénesis. ● Glicogenina: Inicia la síntesis de glicógeno uniéndose a la glucosa del UDP. ● Glicógeno sintasa: Cataliza la transferencia de unidades de glucosa (como UDP-glucosa) al grupo hidroxilo del carbono 4 del residuo terminal de una cadena de glicógeno para formar un enlace glicosídico α(1->4). ● Enzima ramificante: Coloca las glucosas formando un enlace glucosídico α(1->6) (vertical). - Mencione una situación fisiológica en la cual se sintetizará glicógeno Cuando una persona se alimenta con una torta alta en azúcares, y es necesario almacenar la glucosa de ésta con el fin de que no se acumule en la sangre. 14. Respecto a la degradación (catabolismo) de glicógeno en el ser humano, responda lo siguiente: - Indique con qué objetivo y en presencia de qué hormona se degrada el glicógeno en el hígado y en el músculo. Mencione una situación fisiológica en la cual se degradará glicógeno Se degrada el glicógeno con el objetivo de aumentar la cantidad de glucosa. Esto ocurre en presencia de glucagón, dado que esta hormona es hiperglucemiante, secretada cuando los niveles de glucosa sanguíneos son leves. El glicógeno es degradado, por ejemplo, en estados de ayuna prolongada. - ¿Qué enzimas participan? Las enzimas que participan son: ● Glicógeno fosforilasa: Degrada los enlaces α(1->4) liberando Glucosa 1-Fosfato. ● Enzima desramificante: 1. Transferasa: Transfiere tres glucosas a la cadena principal del polisacárido 2. Glicosidasa: Rompe enlaces α(1->6) liberando Glucosa. ● Fosfoglucomatasa: Enzima que convierte la Glucosa 1-Fosfato en Glucosa 6-Fosfato y viceversa. Dependiendo de dónde se esté realizando la acción, si en el hígado o en el músculo, es lo que se realiza con cada producto. MÚSCULO (EJERCICIO INTENSO) HÍGADO Glucosa 1-Fosfato (Glicógeno fosforilasa) Glucosa (Enzima desramificante) Glucosa 1-Fosfato Glucosa Se transforma a Glucosa 6-P para realizar glicólisis y fermentación. 3 ATP NETOS 2 NADH Se realiza glicólisis y fermentación. 2 ATP NETOS 2 NADH Se transforma a glucosa 6-P y posteriormente a Glucosa para ser transportada a los tejidos. Es transportada a los tejidos. - ¿Cómo se regula este proceso desde el punto de vista enzimático? (activación/inhibición). Activación: El glucagón activa a una enzima quinasa la cual fosforila a la fosforilasa activándola y permitiendo la degradación de glicógeno para poder aumentar la concentración de glucosa en sangre. Inhibición: Se inactiva de manera alostérica cuando ya se han liberado muchas glucosas que se unen a la enzima y además se saca el grupo fosfato por una fosfatasa, la cual fue activada por la insulina cuando ya hay altas concentraciones de glucosa en sangre. VÍA DE LAS PENTOSAS 15. Respecto a la Vía de las Pentosas en el ser humano, responda lo siguiente: - ¿Para qué sirve? Enfoque su respuesta en la utilidad de los productos que esta vía genera Sirve para la producción de dos compuestos: 1. Ribosa 5 fosfato: Utilizada para la producción de ácidos nucleicos, ATP, CoA, NAD+, FAD. 2. NADPH: Utilizada parala biosíntesis de ácidos grasos, esteroides. - ¿De qué manera se relaciona la Vía de las Pentosas con el estrés oxidativo a nivel celular? La fase oxidativa de la vía de las pentosas transforma la glucosa 6 – fosfato en ribosa 5 – fosfato la cual es utilizada para la producción de NAD+ y FAD coenzimas de naturaleza oxidativa. - ¿Qué relación tiene las Vía de las Pentosas con la producción de hormonas esteroides? La fase no oxidativa de la vía de las pentosas genera un ciclo donde lo único que se produce es NADPH, dado que transporta la ribosa 5 – fosfato obtenida de la fase oxidativa en fructuosa 6 – fosfato, la cual se convierte en glucosa 6 – fosfato para ser convertida nuevamente en ribosa 5 – fosfato y seguir el ciclo. Durante la transformación de glucosa a ribosa se libera NADPH. El NAPH participa en la biosíntesis de hormonas esteroides. GLUCONEOGÉNESIS 15. Respecto a la Gluconeogénesis en el ser humano, responda lo siguiente: - ¿Para qué sirve? Sirve para la producción de glucosa desde precursores no glucosídicos (es decir, no glicógeno). - ¿Dónde ocurre? (tejido/órgano) Ocurre principalmente en el hígado. - ¿Qué moléculas pueden ser utilizadas como precursores (sustratos) de esta vía metabólica? Pueden ser utilizados el lactato, piruvato algunos aminoácidos, intermediarios del ciclo de Krebs y glicerol. Los lípidos y ácidos grasos nunca producirán glucosa. - Mencione dos diferencias con respecto a la Glicólisis 1. Se realiza la producción de glucosa, no de piruvato. El piruvato actúa como precursor. 2. Se utilizan 3 enzimas diferentes a las de la glicólisis en aquellas reacciones reversibles, actuando como “reemplazantes” y realizando la acción contraria. a. Hexoquinasa -> Glucosa 6-fosfatasa b. Fosfofructoquinasa -> Fructosa 1,6 Bifosfatasa c. Piruvato quinasa -> Piruvato carboxilasa y PEP carboxi K - Mencione dos situaciones fisiológicas (o fisiopatológicas), en las cuales la Gluconeogénesis estará activa. Fundamente. 1. Ayuno prolongado: Se activa cuando se agota todo el glicógeno almacenado con el fin de obtener glucosa. 2. Diabetes Mellitus Tipo 1: Existe un déficit de insulina, por lo tanto la glucosa no ingresa a la célula para ser utilizada lo cual es censado por el organismo como una falta de glucosa, por lo tanto aumenta su producción. 3. Diabetes Mellitus Tipo 2: Existe insulina, sin embargo, no realiza su función como debería por lo tanto no ingresa a la célula ser utilizada lo cual es censado por el organismo como una falta de glucosa, por lo tanto aumenta su producción. - Describa como se activa este proceso. Al disminuir los niveles de glucosa se aumenta la producción de glucógeno (hormona hiperglucemiante) que aumenta los niveles de cAMP activando las proteínas quinasas dependientes de cAMP, las cuales activan la fructuosa 2,6 Bifosfatasa que convierte la fructuosa 2,6 bifosfato en fructuosa 6 fosfato, disminuyendo los niveles de fructuosa 2,6 bifosfato, por lo que se activa la gluconeogénesis y se inhibe la glicólisis. - Describa como se inactiva este proceso. Al aumentar los niveles de glucosa se aumenta la producción de insulina (hormona hipoglicemiante) que activa la Fosfofructoquinasa 2 (PFK2) que le agrega un grupo fosfato a la fructosa 6 – fosfato convirtiéndola en fructosa 2,6 – bifosfato. Recordar: La fructosa 2,6 – bifosfato es el mayor regulador alostérico de la glicólisis y la gluconeogénesis. La fructuosa 2,6 – bifosfato activa la glicólisis al activar la Fosfofructoquinasa 1 (PFK1 – Reacción 3 de la glicólisis) e inhibiendo la gluconeogénesis al inhibir la Fructuosa 1,6 Bifosfatasa (reemplazante de la Fosfofructoquinasa).
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