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Biologia Molecular

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Temos a seguir um gráfico que mostra a curva de amplificação da PCR em tempo real. Ao interpretar o gráfico, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) A amostra C possui maior quantidade de amostra, pois quanto maior o Ct, maior a quantidade de material disponível para iniciar a amplificação do gene de interesse.
( ) A amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma vez que possui menor Ct.
( ) A amostra B ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, apresentando uma quantidade intermediária de amostra, quando comparadas às amostras A e C.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

A V - F - V.
B V - F - F.
C F - V - V.
D V - V - F.
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há 2 anos

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há 2 anos

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ano passado

Vamos analisar cada uma das afirmações sobre a curva de amplificação da PCR em tempo real: ( ) A amostra C possui maior quantidade de amostra, pois quanto maior o Ct, maior a quantidade de material disponível para iniciar a amplificação do gene de interesse. É falsa (F). Na verdade, quanto menor o valor de Ct (ciclo de limiar), maior a quantidade de material inicial, pois isso indica que a amplificação ocorreu mais rapidamente. ( ) A amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma vez que possui menor Ct. É verdadeira (V). Isso está correto, pois um menor valor de Ct indica que a amostra A tinha mais material genético disponível para amplificação. ( ) A amostra B ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, apresentando uma quantidade intermediária de amostra, quando comparadas às amostras A e C. É verdadeira (V). Se a amostra B ultrapassou o limiar após o ciclo 20, isso sugere que ela tem uma quantidade de material entre as amostras A (com menor Ct) e C (com maior Ct). Portanto, a sequência correta é: F - V - V. A alternativa que apresenta essa sequência é a C) F - V - V.

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há 2 anos

Vamos analisar cada afirmação em relação ao gráfico de curva de amplificação da PCR em tempo real: ( ) A amostra C possui maior quantidade de amostra, pois quanto maior o Ct, maior a quantidade de material disponível para iniciar a amplificação do gene de interesse. Falso. Quanto maior o Ct, menor a quantidade de material genético presente na amostra, pois o Ct representa o ciclo em que a fluorescência atinge um nível detectável, indicando a quantidade de material genético inicial. ( ) A amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma vez que possui menor Ct. Verdadeiro. Quanto menor o Ct, maior a quantidade de material genético presente na amostra, pois atinge o nível detectável de fluorescência em menos ciclos de amplificação. ( ) A amostra B ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, apresentando uma quantidade intermediária de amostra, quando comparadas às amostras A e C. Verdadeiro. Se a amostra ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, indica que possui uma quantidade intermediária de material genético em comparação com as amostras A e C. Portanto, a sequência correta é: V - F - V, correspondente à alternativa A.

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Para manter e replicar o material genético em grandes coleções preservadas em colônias de bactérias, em que um fragmento específico de DNA ou gene podem ser buscados, faz-se o uso de bibliotecas de DNA ou cDNA. A respeito desse assunto, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas:
I- No processo de clonagem em vetores e na construção de bibliotecas de DNA e cDNA temos como principal célula hospedeira a bactéria E.coli, onde cada bactéria internalizará um vetor.
PORQUE
II- Em condições ideais de diluição e meio de cultivo, quando o vetor é inserido ocorrerá em poucas horas a formação de clones de seus fragmentos. Assim, cada um pode ser localizado em uma colônia de crescimento bacteriano diferente.

Assinale a alternativa CORRETA:
I- No processo de clonagem em vetores e na construção de bibliotecas de DNA e cDNA temos como principal célula hospedeira a bactéria E.coli, onde cada bactéria internalizará um vetor.
II- Em condições ideais de diluição e meio de cultivo, quando o vetor é inserido ocorrerá em poucas horas a formação de clones de seus fragmentos. Assim, cada um pode ser localizado em uma colônia de crescimento bacteriano diferente.
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições falsas.
C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.

Para obter o sequenciamento de nucleotídeos longos e genomas inteiros, pode-se aplicar o sequenciamento Shotgun. Sobre esse sequenciamento, avalie as asserções a seguir e relação proposta entre elas:
I- Devido ao grande volume de informação gerado por esse procedimento, é necessário que programas computacionais sofisticados sejam utilizados para a determinação da sequência do material em estudo.
PORQUE
II- Na técnica Shotgun, o material clonado é sequenciado diversas vezes, fornecendo uma quantidade de dados de cerca de 10 vezes o tamanho do material genético que está sendo estudado, assegurando que todos os nucleotídeos presentes no material genético sejam detectados e inseridos na sequência final do DNA.

Assinale a alternativa CORRETA:
I- Devido ao grande volume de informação gerado por esse procedimento, é necessário que programas computacionais sofisticados sejam utilizados para a determinação da sequência do material em estudo.
II- Na técnica Shotgun, o material clonado é sequenciado diversas vezes, fornecendo uma quantidade de dados de cerca de 10 vezes o tamanho do material genético que está sendo estudado, assegurando que todos os nucleotídeos presentes no material genético sejam detectados e inseridos na sequência final do DNA.
A As asserções I e II são proposições falsas.
B A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
C As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.

Para obtermos sucesso na técnica do PCR (reação em cadeia da polimerase) é necessário realizar precisamente os seus ciclos. No termociclador são planejados de 20 a 40 ciclos, com o objetivo de gerar milhares de cópias de DNA. Em relação a estes ciclos do PCR associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Desnaturação.
II- Anelamento.
III- Extensão.
( ) Estágio inicial, em que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos de cada uma das fitas simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em cerca de 95º C.
( ) Estágio em que os primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar.
( ) Estágio correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA polimerase específica, denominada como Taq DNA polimerase, em uma temperatura de 72º C.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

A I - II - III.
B III - II - I.
C I - III - II.
D II - I - III.

Muitas bactérias fabricam, de forma natural, endonucleases de restrição. De acordo com essas enzimas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas
( ) As enzimas de restrição não reconhecem sequências específicas, apresentando regiões de clivagem aleatórias de 4 a 8 nucleotídeos.
( ) As enzimas de restrição são utilizadas para fragmentar o DNA em regiões específicas, permitindo a manipulação do DNA.
( ) Cada bactéria produz uma enzima de restrição específica, que pode ser isolada e purificada a partir de colônias dessas bactérias.

A V - V - F.
B F - V - V.
C F - V - F.
D V - F - F.

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