Vamos analisar cada uma das sentenças: I- O substrato utilizado na análise é uma substância que tem como objetivo formar um complexo com a enzima e gerar novos produtos que será ligada a um cromógeno e gerar a reação de cor. Verdadeiro, essa descrição está correta, pois o substrato é fundamental para a reação enzimática que resulta na coloração. II- Podemos realizar a leitura do resultado de forma quantitativa ou qualitativa. Verdadeiro, o ELISA pode ser utilizado para obter resultados tanto quantitativos quanto qualitativos, dependendo do tipo de ensaio realizado. III- A lavagem da placa sempre é realizada após os processos de reações a fim de eliminar moléculas, antígenos, anticorpos que não se ligaram na placa. Verdadeiro, a lavagem é uma etapa importante para remover componentes não ligados e aumentar a especificidade do teste. IV- A reação de cor indica teste positivo para todos as metodologias de ELISA. Falso, a reação de cor não indica necessariamente um teste positivo em todas as metodologias de ELISA, pois a interpretação pode variar dependendo do tipo de ensaio e dos controles utilizados. Com base na análise, as sentenças I, II e III estão corretas. Portanto, a alternativa correta é: D) As sentenças I, II e III estão corretas.