A principal diferença entre as bacterias G+ e G- é a composição da parede celular. Na G(+) a composição é quase que total de peptideoglicano, com acidos tecoicos e lipotecoicos. Na G(-) a parede celular é menos espessa e possui uma membrana externa composta por LPS (lipopolissacarídeos).
É essa diferença que é usada na coloração de gram.
As bactérias contidas no esfregaço podem ser classificadas como Gram-positivas (aproximadamente de cor roxa) ou Gram-negativas (aproximadamente de cor vermelha), isto dependerá da parede celular da bactéria. Se for estruturalmente simples a coloração será positiva, se for estruturalmente complexa a coloração será então negativa.
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