A principal diferença entre vertebrados e invertebrados dentro dos cordados é a presença de uma coluna vertebral. Os vertebrados possuem coluna vertebral, enquanto os invertebrados não têm essa estrutura. Analisando as alternativas: a) Os vertebrados não têm notocorda - Incorreto, pois os vertebrados têm notocorda em estágios iniciais de desenvolvimento, que se transforma em coluna vertebral. b) Os vertebrados possuem coluna vertebral, enquanto os invertebrados não - Correto, essa é a principal diferença. c) Os vertebrados vivem em água doce, enquanto os invertebrados vivem no mar - Incorreto, pois ambos podem viver em diferentes ambientes. d) Os vertebrados são menores em tamanho que os invertebrados - Incorreto, pois existem vertebrados muito maiores que invertebrados. Portanto, a alternativa correta é: b) Os vertebrados possuem coluna vertebral, enquanto os invertebrados não.