No imunoensaio ELISA, a marcação da molécula de interesse ocorre através da conjugação de um anticorpo a uma enzima. Esse anticorpo marcado é adicionado à amostra, onde ele se liga ao antígeno ou ao complexo antígeno-anticorpo presente. Após essa ligação, um substrato específico para a enzima é adicionado. A enzima catalisa uma reação com o substrato, resultando em uma mudança de cor na solução, que indica a presença e a quantidade do antígeno ou anticorpo na amostra.