Vamos analisar as alternativas sobre PCR em tempo real (qPCR) e suas aplicações: - A) "O diagnóstico de SARS-CoV2 não pode ser feito por PCR quantitativo, pois seu genoma é um RNA de polaridade positiva que não pode ser amplificado de forma segura." Incorreto. O SARS-CoV-2 tem genoma de RNA, mas é possível amplificá-lo após transcrição reversa (RT-qPCR), que é o método padrão para diagnóstico. - B) "A expressão de um gene pode ser quantificada por qPCR, porém seu uso é restrito à pesquisa científica." Incorreto. qPCR é amplamente usado tanto em pesquisa quanto em diagnóstico clínico. - C) "A técnica de TaqMan não pode ser usada na identificação de diferentes alelos, pois sua fluorescência é emitida de forma inespecífica." Incorreto. A técnica TaqMan é específica e pode ser usada para identificar alelos diferentes. - D) "A identificação de organismos fastidiosos por PCR somente é possível após reação de transcrição reversa (RT)." Incorreto. Nem todos os organismos fastidiosos têm RNA como material genético; muitos podem ser detectados diretamente por PCR. - E) "O diagnóstico de SARS-CoV2 é feito por uma reação de transcrição reversa (RT) seguida de PCR quantitativo, pois seu genoma é RNA." Correto. O método padrão para diagnóstico do SARS-CoV-2 é RT-qPCR, que converte RNA em DNA complementar e amplifica quantitativamente. Resposta correta: E