Diferença entre os tipos de microscópicos óptico e eletrônico quanto ao tipo de imagem, coloração e resolução?

Tipos de microscopia óptica:

1.    Campo Claro

·         Limite de resolução: 200nm

·         Usos - exames de tecidos à fresco, mortos ou preservados

2.            Campo Escuro

·         Resolução igual à microscopia de campo claro

·         Pode ser utilizada no estudo de células vivas

·         Usos - análise de plâncton, bactérias, pequenos cristais, grãos de pólen, etc.

3.            Contraste de Fase

·         Não necessita coloração

·         Anel de fase - aparência de relevo

·         DIC - modalidade de contraste de fase com maior resolução

·         Usos - exames rápidos de cultura de tecidos, esfregaços vaginais, sangue, bactérias, algas, protozoários

4.            Fluorescência

·         Envolve aplicação de técnicas citoquímicas

·         Visualização de células vivas ou mortas

·         Usos - identificar compostos naturalmente fluorescentes (clorofila, elastina, etc.), testes de imunocitoquímica (uso de corantes fluorescentes)

5.            Confocal

·         Semelhante à microscopia de fluorescência, mas utiliza como fonte luminosa o laser - maior resolução

·         Usos - identificar elementos do citoesqueleto, elementos finos da matriz celular

·         Melhor contraste e resolução que a microscopia de luz tradicional

·         Possibilidade de gerar imagens tridimensionais

Tipos de microscopia eletrônica:

•          MET (Microscópio Eletrônico de Transmissão)

o    Feixe de elétrons atravessa a amostra, portanto são necessários cortes ultrafinos. Para que esses cortes sejam feitos, é necessário um processamento da amostra, envolvendo desidratação e o seu emblocamento em resina para que possa ser cortada.

o    O contraste é feito através da aplicação de metal pesado na amostra

o    Utilizado principalmente para o estudo do interior de estruturas

•          MEV (Microscópio Eletrônico de Varredura)

o    Imagens formadas por elétrons refletidos ou emitidos pela superfície da amostra. Para que isso aconteça, a amostras orgânicas devem ser processadas de maneira a refletir os elétrons

o    A amostra é desidratada e passa pelo ponto crítico, onde ocorre a evaporação da água e substituição por CO2. Desta maneira, mesmo que desidratada a amostra não fique deformada. Isso é feito pois a amostra é colocada no vácuo durante o processo de análise no MEV e a água evaporaria.

o    Após o ponto crítico, é necessário que a amostra seja metalizada para que ofereça uma superfície reflexiva

Utilizado para a visualização da superfície das estruturas.

Espero ter ajudado.