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como fazer um PCR?


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Mariely S.

Há mais de um mês

Para realizar a reação de PCR , são necessários reagentes específicos para a elaboração de um Mix. Os reagentes são Tampão Buffer, Cloreto de magnésio, dNTPs, primers, a enzima Taq DNA Polimerase e água ultrapura. Além disso, necessita-se do DNA molde que será usado para a replicação. A reação é feita em um equipamento chamado de Termociclador, que tem seu funcionamento baseado na intercalação de ciclos de temperatura cujos quais são necessários para que se abra a fita de DNA e haja o anelamento dos primers e a inserção dos dNTPs nas novas fitas formadas. As três etapas do ciclo são conhecidas como:

1. Desnaturação, onde a temperatura varia de 94 a 96ºC

2. Anelamento, onde a temperatura varia de 55 a 65ºC

3. Extensão, com a temperatura de 72ºC

São realizados diversos ciclos consecutivamente pelo equipamento conforme o tanto de cópias que  a serem produzidas. A cada ciclo, o número de moléculas de DNA duplica na solução.

Para realizar a reação de PCR , são necessários reagentes específicos para a elaboração de um Mix. Os reagentes são Tampão Buffer, Cloreto de magnésio, dNTPs, primers, a enzima Taq DNA Polimerase e água ultrapura. Além disso, necessita-se do DNA molde que será usado para a replicação. A reação é feita em um equipamento chamado de Termociclador, que tem seu funcionamento baseado na intercalação de ciclos de temperatura cujos quais são necessários para que se abra a fita de DNA e haja o anelamento dos primers e a inserção dos dNTPs nas novas fitas formadas. As três etapas do ciclo são conhecidas como:

1. Desnaturação, onde a temperatura varia de 94 a 96ºC

2. Anelamento, onde a temperatura varia de 55 a 65ºC

3. Extensão, com a temperatura de 72ºC

São realizados diversos ciclos consecutivamente pelo equipamento conforme o tanto de cópias que  a serem produzidas. A cada ciclo, o número de moléculas de DNA duplica na solução.

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