Vista previa del material en texto
Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 1 INTRODUCCION Las infecciones nosocomiales por contaminación de catéteres son un tema de actualidad. Los pacientes hospitalizados en salas generales, en salas de Emergencias o en las Unidades de Cuidados Intensivos suelen estar gravemente afectados por enfermedades de larga duración, como ser diabetes, insuficiencia renal crónica o un proceso infeccioso de evolución crónica. Todos estos procesos mórbidos disminuyen de manera significativa las defensas inmunológicas, es decir que son pacientes inmunocomprometidos. En los hospitales, la infección por catéter es la primera causa de bacteriemia y en las unidades de cuidados intensivos (UCI) supone una tercera parte de las bacteriemias. El indicador actualmente recomendado para estudiar las bacteriemias asociadas a catéter venoso central (CVC) es el número de bacteriemias asociadas a catéteres por 1.000 días de utilización de CVC. El valor estándar que se recomienda para este indicador es de 6 episodios/1.000 días de CVC en pacientes ingresados en UCI. En los ambientes hospitalarios también el personal sanitario es portador de gérmenes, los ambientes húmedos son también reservorio de otros gérmenes. Por tanto existe una alta probabilidad de infecciones nosocomiales por bacterias u otros microorganismos que son parte de la flora normal de la piel o del tubo gastrointestinal y se vuelven patógenos para estos pacientes debilitados y son los llamados gérmenes oportunistas hospitalarios. En este marco conceptual los catéteres urinarios y/o venosos pueden estar contaminados/colonizados por estos gérmenes de diversa procedencia La presente investigación describe los hallazgos bacteriológicos en el cultivo de estos catéteres y el significado principal es disponer de una línea de base para futuros estudios complementarios o ampliatorios en el contexto socioeconómico de los pacientes del Complejo Hospitalario de Miraflores de la ciudad de La Paz y especialmente del Hospital de Clínicas, principal Hospital Público de la misma. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 2 ANTECEDENTES DEL PROBLEMA DE INVESTIGACION El trabajo de investigación se efectuó en el Laboratorio de Bacteriología del Hospital de Clínicas. Este servicio hospitalario depende directamente de la Jefatura de Laboratorio Clínico, de la Dirección del Hospital y del Servicio Departamental de Salud (SEDES). El Laboratorio de Bacteriología es una unidad de referencia que presta cobertura a todos los servicios del Hospital de Clínicas, al Hospital de la Mujer, al Hospital del Niño y también recibe muestras del Instituto Nacional de Tórax. Por tanto el Laboratorio de Bacteriología del Hospital de Clínicas cuenta con personal capacitado, dispone de los implementos necesarios para los estudios bacteriológicos. Además es un servicio formador de recursos humanos. En este Laboratorio la autora de la tesis desempeñó funciones de entrenamiento en Bacteriología como parte de su formación profesional y con los datos de los cultivos de catéteres del año 2006 obtenidos de los registros del servicio, efectuó una pesquiza activa de los estudios durante 2007 y 2008. Estas funciones se desempeñaron bajo la supervisión del personal profesional del Laboratorio de Bacteriología. La propuesta del estudio fue encontrar el porcentaje de positividad de los cultivos bacterianos (frecuencia) asi como identificar los gérmenes bacterianos más frecuentes en los cultivos de catéteres urinarios y venosos, en el Hospital de Clínicas en un periodo de tres años 2006-2008. Estas actividades de cultivo de la punta de los catéteres, consistieron en aplicar con criterio riguroso la técnica estandarizada en el Laboratorio de Bacteriolología. No fue posible obtener referencias escritas de estudios similares en la ciudad de La Paz para establecer un contexto bibliográfico de los antecedentes de investigación. Por este motivo se recurrió a la herramienta metodológica de “Consulta a Expertos”. Por tanto se consultó la experiencia al respecto de profesionales en Microbiología y se llegó a la conclusión que en muchos hospitales existía el problema de infecciones a partir de catéteres contaminados y que se efectuaban pocos estudios bacteriológicos por que las solicitudes de estudio bacteriológico de catéteres no eran la regla. De estas consultas surgió la primera hipótesis de trabajo que fue plantear la probabilidad de una incidencia teórica aproximada de 5 muestras por mes para cultivo de catéteres que representan una cifra estimada anual de 60 estudios. Con este antecedente nos propusimos efectuar un estudio descriptivo sobre el número de catéteres contaminados por bacterías patógenas en el periodo 2006-2008. Como se mencionó anteriormente es posible que los resultados del presente trabajo observacional sirvan para formular una propuesta de investigación explicativa a mayor escala con el fin de conocer mejor el impacto de las infecciones nosocomiales por catéteres. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 3 Con relación al tema de infecciones nosocomiales se consultó un trabajo multicéntrico reciente efectuado en Unidades de Cuidados Intensivos de paises en desarrollo, la mayoría de ellos latinoamericanos, en el cual destaca la importancia de las definiciones (65). Se entiende por sepsis confirmada a cateter venoso central a aquella enfermedad con signos clínicos de sepsis pero ademas hemocultivo positivo para un gérmen patógeno en las 48 horas siguientes a la inserción del cateter. Se define como infección de tracto urinario asociada a sonda Foley a la presencia de fiebre, urgencia de miccionar, molestia suprapúbica y urocultivo positivo con 105 UFC/ml de orina. De esta manera las infecciones nosocomiales por cateter son definitivas si ademas de la contaminación del cateter el hemocultivo y/o urocultivo son positivos. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 4 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Para el planteamiento del problema de investigación se seleccionó la alternativa interrogativa en vez de la opción declarativa. La forma interrogativa planteada como pregunta científica tiene la ventaja de ser simple y directa. Partiendo de la premisa, como se ratificará en el marco teórico, que existe un grupo prevalente de bacterias que contaminan/colonizan los catéteres venosos y urinarios, la formulación del problema de investigación en forma de pregunta fundamental de la investigación se efectuó en los siguientes términos: ¿Cual es la frecuencia de cultivos bacterianos positivos para gérmenes patógenos en catéteres urinarios y venosos identificados mediante cultivo en el Laboratorio de Bacteriología del Hospital de Clinicas de la ciudad de La Paz en el periodo 2006-2008? Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 5 JUSTIFICACION DEL PROBLEMA Con relación al problema planteado se mencionan los siguientes conceptos explicativos de su justificación: Significado. El problema de investigación es significativo porque contribuye al conocimiento de la práctica y la teoría de los estudios bacteriológicos en catéteres en nuestro medio. Es posible que también existan beneficios o discusión para la práctica de la toma de muestra y de la siembra bacteriológica de los catéteres contaminados. Si bien el aporte original estrictamente téorico de la tesis es reducido la identificación bacteriológica tiene importancia con fines asistenciales. Validez. Los datos obtenidos son válidos porque el trabajo de la tesista contó con el apoyo del personal del Laboratorio, quienes tienen capacidad y experiencia. Además el Laboratorio cuenta con los recursos para detectar bacterias patógenas en los catéteres. Fiabilidad. El estudio es fiable porque en el Laboratorio de Bacteriología, los criterios bacteriológicos de diagnóstico están estandarizados y se aplican desde hace bastantetiempo. Además el Laboratorio de Bacteriología cuenta con un sistema de control de calidad que se aplica cada seis meses. Factibilidad. La investigación fue factible porque en el Laboratorio se cuentan con los recursos materiales necesarios. Los horarios y los tiempos de la investigación fueron compatibles con la factibilidad de la investigación porque coinciden con el trabajo asistencial del Laboratorio de Bacteriología. El aporte fundamental que asegura la factibilidad de la investigación es la disponibilidad de instalaciones y equipos del Laboratorio. Trascendencia. Utilidad La obtención de resultados mediante el presente estudio es de trascendencia porque afecta la calidad de atención en los pacientes portadores de catéteres urinarios y venosos. La respuesta al problema planteado es de utilidad por que permite continuar o modificar el tratamiento antibiótico, plantear hemocultivo o Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 6 urocultivo y además permite extremar las medidas de profilaxis o prevención de las infecciones por catéteres contaminados y en el caso de gérmenes oportunistas, el equipo médico deberá replantear el diagnóstico de la enfermedad de base (cáncer, SIDA, diabetes etc). Pertinencia. La presente investigación es pertinente porque puede servir de marco de referencia para la toma de decisiones por el personal y a nivel institucional por los comités de infecciones nosocomiales. Magnitud. Necesidad La investigación es de magnitud relativa porque la muestra no es grande, pero es necesaria considerando la gravedad y el costo de las infecciones nosocomiales causadas por catéteres contaminados. La necesidad del presente estudio se basa en los siguientes parámetros: se requiere conocer la etiología bacteriana en casos de sepsis, de fiebre de origen desconocido, de endocarditis, resistencia a los antibióticos y en su caso relacionarla con el empleo de catéteres más de 72 horas. Además en las actividades asistenciales de las salas hospitalarias consistentes en la inserción de catéteres urinarios y venosos, es importante conocer la etiología bacteriana de la contaminación/colonización de los catéteres. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 7 OBJETIVOS DE LA INVESTIGACION OBJETIVO GENERAL: CONOCER LA FRECUENCIA DE GÉRMENES BACTERIANOS ENCONTRADOS EN EL CULTIVO DE CATÉTERES URINARIOS Y VENOSOS EN EL HOSPITAL DE CLINICAS EN EL PERIODO ENERO 2006 - AGOSTO 2008. OBJETIVOS ESPECIFICOS: • Emplear los registros existentes como base de datos para recolectar información de identificación del paciente, que incluya diagnóstico clínico, tratamiento antibiótico, tipo de catéter y presencia de bacterias en los cultivos. • Describir la presencia de bacterias mediante cultivo primario, tinción, batería bioquímica y cultivo secundario según el germen, en catéteres urinarios y venosos, de acuerdo a la técnica del Laboratorio de Bacteriología. • Verificar el número y el tipo de gérmen en los cultivos positivos de los catéteres venosos y urinarios. • Diferenciar los gérmenes más frecuentes encontrados en cultivo de acuerdo al sitio de inserción de los catéteres. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 8 MARCO TEORICO CONDICIONES SOCIOECONÓMICAS DE LOS PACIENTES Con el fin de explicar en forma aproximada el reducido número de muestras remitidas al Laboratoio de Bacteriología, en el marco de la presente investigación, se estudiaron las principales variables socioeconómicas de los pacientes relacionadas con el acceso tomando como referencia un estudio efectuado en un hospital del complejo de Miraflores (1); en este estudio destacan en resumen las siguientes características de la mayoría de los pacientes que seguramente, con algunas variaciones poco significativas se aplican a los pacientes del Hospital de Clínicas: • Procedencia urbanomarginal. • Mayor acceso del sexo femenino. • Predominio de edad entre 20 y 40 años. • Remuneración mensual promedio de 800.- bolivianos. • Núcleo familiar compuesto promedio por 5 personas. En base a los parámetros descritos de las caracteristicas socioeconómicas de la mayoría de los pacientes, se plantea que la principal limitante para la realización de cultivo de catéteres es el bajo ingreso económico. Respecto al personal de salud de las salas hospitalarias es probable que se solicite identificación bacteriológica de la punta de catéter en casos graves y no como una norma establecida. CATETERES VENOSOS Y URINARIOS Un catéter es, en medicina, un dispositivo que puede ser introducido en un tejido, en las vìas urinarias o en una vena. Los catéteres permiten la inyección de soluciones, fármacos, drenaje de líquidos o bien el acceso de otros instrumentos médicos. El empleo terapéutico más importante de los catéteres venosos es el reemplazo rápido de líquidos en pacientes hipovolémicos y en la administración de medicamentos de urgencia y de grandes moléculas de nutrición parenteral. Los catéteres son tan útiles que permiten perfundir una serie de sustancias terapéuticas como soluciones, antibióticos, anticoagulantes, agentes antineoplásicos cuando las otras vías de administración no son posibles o cuando se requiere que las concentraciones farmacológicas eficaces se alcancen con rapidez y con estabilidad. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 9 También los catéteres se utilizan para la infusión de sustancias diagnósticas como sustancias colorantes o radioactivas, contrastes y radioisótopos. Los catéteres venosos centrales son sondas que se introducen en los grandes vasos venosos del tórax, con fines diagnósticos o terapéuticos. Con fines diagnósticos y de monitoreo se utilizan para medir la presión venosa central, La técnica, las indicaciones y los cuidados del cateterismo venoso central estan completamente estandarizados (2). Los catéteres venosos centrales (CVC) pueden colocarse por dos métodos: Disección venosa o punción venosa percutánea. La disección venosa consiste en identificar y aislar una vena mediante una incisión cutánea y mediante un corte en la vena, introducir un catéter. Existen muchos sitios donde se puede disecar una vena. Los lugares más frecuentes de acceso son: las venas del pliegue del codo (Figura 1). La punción venosa, consiste en introducir una aguja provista de un estuche y a través del interior del estuche introducir un catéter. Figura 1: Sitios de Disección venosa. Fuente: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000483.htm El grosor de los catéteres venosos se miden según la escala French siendo uno de los más utilizados el 7F que tiene 2.3 mm de diámetro (3). http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000483.htm Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 10 La utilización de catéteres venosos centrales de corta duración se ha convertido en una práctica indispensable en el tratamiento de los pacientes hospitalizados, principalmente en aquellos críticamente enfermos ingresados en los servicios de medicina intensiva (4). Ello proporciona notables beneficios, puesto que permite la administración de fármacos intravenosos pero existe el riesgo de complicaciones graves, entre las que destacan la contaminación de los catéteres y la consiguiente infección nosocomial. (5). Como resultado los Laboratorios de Bacteriología reciben un número creciente de catéteres venosos centrales para investigar contaminación de los mismos y explicar la etiología de un número importante de infecciones nosocomiales. Los catéteres venosos centrales deben llegar hasta la desembocadura de la vena cava superior en la aurìcula derecha. Pueden insertarse en una vena cercana a la vena cava como ser la vena subclavia (Figura 2) y tienen una longitud aproximada de 50 centímetros. Pueden insertarse directamente en la vena o llegar a ella por medio de un recorrido subcutáneo (catétertunelizado). Se emplea el término de catéter tunelizado porque para mejor fijación del catéter, una parte de este se encuentra debajo de la piel (túnel subcutáneo). (Figura 2). Figura 2: Cateter venoso central Tunelizado (CVCT). Fuente: Revista Peruana de Obstetricia y Enfermeria 2010. 4(3). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 11 La gran mayoría de catéteres venosos centrales no son tunelizados y se insertan directamente en la vena subclavia (Figura 3). Figura 3: Catéter venoso central insertado directamente en vena subclavia.Fuente:http://lh3.ggpht.com/_XpX.JPG Un catéter venoso central también puede insertarse a través de una vena periférica, de preferencia en la vena basílica o cefálica del pliegue del codo. En este caso y para alcanzar la vena cava superior, el catéter es más largo y mide 70 centímetros siendo del mismo diámetro que el utilizado en la vena subclavia. Este catéter venoso periférico tiene el inconveniente de dificultar los movimientos del paciente. (Figura 4). Figura 4: Cateter venoso periférico. Fuente: Revista Peruana de Obstetricia y Enfermeria 2010. 4(3) Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 12 Los catéteres urinarios se emplean principalmente para drenar orina, en caso de obstrucción urinaria. Después de una correcta asepsia, el catéter urinario se introduce en la uretra. Los catéteres urinarios que se utilizan más comúnmente están compuestos de látex (sondas Foley) (Figura 5) y tienen diferentes números según su grosor siendo los mas utilizados los de 3 o 4 mm de diámetro. Figura 5: Cateter urinario de latex. Fuente http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000483.htm 14-22: Conector a la bolsa urinaria. 12: Catéter. 15: Segmento numerado. 26: orificios laterales. 16: Punta del catéter. 20: Conector para aire Los catéteres urinarios que se utilizan con fines terapéuticos son de mayor consistencia y llevan en el interior una guía metálica. Suelen utilizarse temporalmente y a veces se dejan por tiempos prolongados para drenar orina u otro tipo de sustancias o instilar medicamentos (Figura 6). http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000483.htm Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 13 Figura 6: Catéter urinario para obstrucciones uretrales. Fuente:http:/llh3.gght.com/XpXjRUQmiaQ/JPG Los catéteres urinarios se emplean principalmente para drenar orina, en casos de retención urinaria o incontinencia. Los catéteres urinarios, también llamados sondas vesicales se clasifican según sus características (68): Composición: Existen catéteres de latex, silicona o teflón. Los más adecuados con menores complicaciones son los de teflón, pero son costosos. Por el contrario los catéteres de látex, los más empleados en el medio, producen mayor respuesta inflamatoria del huésped, forman una biopelícula bacteriana extensa y en consecuencia mayor colonización bacteriana. Los catéteres de silicona tienen menores complicaciones que los de látex. Tamaño: Se mide en centímetros. Emplear un catéter de mayor tamaño que el adecuado para el paciente produce daño uretral y mayor contaminación bacteriana. Consistencia: Se clasifican en rígidos, semirígidos y blandos. Estructura: Los catéteres urinarios tienen varios orficios distales. También pueden ser de una sola vía que son útiles para drenaje ocasional de orina; y existen de dos vías, en una de ellas llevan un balon inflable y son útiles para drenaje permanente. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 14 COMPOSICION DE LOS CATETERES Los catéteres estan compuestos de cualquiera de los siguientes materiales de uso compatible en medicina: • Silicona (polímero inodoro e incoloro de silicio, inerte y estable a altas temperaturas) • Polivinilo/Polietileno (cadena larga sintética de unidades de cloruro de vinilo o etileno, que se utiliza como revestimiento plástico). • Poliuretano (polímero del uretano que se obtiene de dibases hidróxilicas con disocianatos, se divide en termoestable y termoplástico) • Teflón (polímero muy resistente, flexible y versátil, tiene propiedad de antiadherencia y soporta altas temperaturas, insoluble a muchos de los disolventes orgánicos, su resistencia se debe a los atómos de fluor). • Látex (material elástico biológico proveniente de resinas gomosas, es insoluble en agua, puede producir reacciones alérgicas) El material preferido del catéter para evitar complicaciones infecciosas es el poliuretano (menor al 30%) y el Teflón en segundo lugar. El polivinilo/polietileno y el poliuretano causan mayor infección. Por otro lado, el polivinilo/polietileno produce complicaciones mecánicas (ruptura, bloqueo, desplazamiento y/o trombosis). Los catéteres de silicona se contaminan menos. La silicona es un material muy inerte con pocas probabilidades de inducir formación de trombos dentro o alrededor del catéter y es de consistencia blanda, lo cual significa menor riesgo de perforar la pared venosa. La desventaja de estos catéteres de silicona radica en que son más costosos. Se emplean cuando se decide que permanecerán largo tiempo. El polietileno/polivinilo (Cavafix ®), tiene mayor contaminación, es menos costoso y se emplea especialmente en los casos en los que se preveé retirar rápidamente. Las bránulas (Braun ®) y los catéteres multilumen son de poliuretano, probablemente por su mayor flexibilidad y resistencia. (Figura 7). Estos catéteres tienen un bajo indice de contaminación. El teflón (PTFE) es un polímero con atómos de fluor en vez de hidrógeno. La virtud principal de este material es que es prácticamente inerte, no reacciona con otras sustancias químicas; esto se debe básicamente a la protección de los átomos de fluor sobre la cadena carbonada. Esta carencia de reactividad hace que su toxicidad sea prácticamente nula; además, tiene muy bajo coeficiente de rozamiento. Otra cualidad característica es su impermeabilidad, manteniendo además sus cualidades en ambientes húmedos. No obstante, un subproducto presente en el teflón, el ácido perfluorooctanoico, resulta, además de contaminante (no es biodegradable), potencialmente cancerígeno para el ser humano. La cualidad más conocida del teflón es la antiadherencia. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 15 Existen nuevos avances tecnológicos en la elaboración de los catéteres. Al respecto se han hecho modificaciones en los materiales de elaboración, con el fin de disminuir la adhesión microbiana en la pared y en la luz del catéter y así limitar la incidencia de contaminación y de infección nosocomial. Entre estas modificaciones hay que destacar la incorporación de anticuerpos monoclonales contra los polímeros de superficie. Además se investiga el resultado que darán catéteres recubiertos con diferentes antibióticos o la incorporación del antibiótico dentro del propio material del catéter (6). Hace bastante tiempo se iniciaron los trabajos para recubrir de antibióticos los catéteres, incluso con dos fármacos (7,8); desde el año 2004 se emplea una técnica de bloqueo con antibióticos (antibiotic lock) que se inyectan en el catéter (9). Figura 7: Catéter venoso de poliuretano de dos y tres vías. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Además influye el tipo de material usado en el catéter que es un factor muy importante, pues las bacterias y los hongos demuestran diferente capacidad de adhesión a diferentes materiales. El cloruro de polivinilo (PVC) del cual estaban construidos muchos catéteres en la década de los ochenta, presenta grandes irregularidades microscópicas que lo convierten en un excelente “nido” para colonias bacterianas y micelios de hongos. En cambio el poliuretano, tiene mayor biocompatibilidad y demuestra tasas de infección significativamente menores que el PCV. Hoy en día, la mayoría de los catéteres disponibles en el mercadoestán construidos de poliuretano. Existen también catéteres de silicona, principalmente aquellos diseñados para uso prolongado, ya sea semimplantables o totalmente implantables. Este material tiene tasas de infección similares a las del poliuretano, pero su costo es mucho mayor. Por otro lado, se han introducido al mercado catéteres de poliuretano recubiertos con sustancias bactericidas como la Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 16 sulfadiazina de plata o la clorhexidina en busca de aumentar su resistencia a la infección. Sin embargo, dos experimentos clínicos, no demostraron superioridad comparándolo con catéteres de poliuretano no recubierto. Su costo es muy alto y ante la falta de evidencia, no representan una ventaja sobre los catéteres de poliuretano (29) CONTAMINACION DE CATETERES VENOSOS Y URINARIOS. Se mencionan con frecuencia los términos de contaminación y colonización de los catéteres. Es importante distinguir el significado de cada uno de estos términos. Se denomina contaminación a la presencia en un cultivo cuantitativo menor a 15 UFC/ml. Cuando el número de UFC/ml es mayor se emplea el término de colonización. Se considera colonización localizada del catéter al crecimiento significativo (>15 UFC) en la punta del catéter, el segmento subcutáneo del mismo o en su interior. La contaminación/colonización bacteriana de un catéter venoso o urinario tiene relación con los siguientes factores: Materiales de elaboración: La composición de los materiales de un catéter influye en el mayor o menor riesgo de contaminación. Los catéteres elaborados con polietileno /polivinilo tienen mayor riesgo que el teflón, los de teflón y los de poliuretano presentan riesgo más alto que los de silicona. En resumen el catéter que se contamina más es el de polietileno/polivinilo, luego los de teflón y los de poliuretano y menos los de silicona. Estructura: En la estructura morfológica del catéter es importante considerar que a mayor diámetro del catéter mayor riesgo de infección. Con el mismo criterio morfológico los catéteres de una luz se contaminan menos que los de tres luces. El sitio de implantación del catéter: Influye de tal manera que la punción subclavia tiene el menor riesgo de contaminación y el riesgo más alto esta en la disección venosa. La incidencia de IRC, según el sitio de inserción, es de menor a mayor; mayor en miembros superiores, subclavia, yugular (por el plegamiento del cuello y la proximidad con secreciones orofaríngeas) y menor en miembros inferiores. Procedimiento programado o de urgencia: El riesgo es mayor si el procedimiento es de urgencia que se efectúa rápidamente para salvar la vida del paciente, a veces sin tener en cuenta rigurosa las técnicas de asepsia. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 17 Condiciones de prestacion de salud: La prevalencia de contaminación de catéter esta en relación inversa con el grado de capacitación del personal sanitario; problemas de infraestructura de los hospitales; cumplimiento de las guías de esterilización e higiene. La duración ó permanencia del catéter: En los catéteres implantados más de 8 días por el mayor número de manipulaciones de las conexiones la contaminación aumenta considerablemente. Si bien en la práctica no hay tiempos recomendados para su retiro. Las condiciones de las prestaciones de salud son de importancia para el riesgo de contaminación. La prevalencia de contaminación por catéter esta en relación con el tipo de atención médica, los problemas de infraestructura de los hospitales, el cumplimiento de las guías de esterilización e higiene y la capacitación y educación del personal sanitario. En nuestro medio, en el Complejo Hospitalario de Miraflores hay un refuerzo importante de medidas que promueven el uso de guantes desechables y el lavado de manos del personal sanitario. La contaminación de los catéteres es capaz de producir infecciones nosocomiales que se denomian infecciones relacionadas con el catéter (IRC). Las infecciones nosocomiales pueden clasificarse en cuatro tipos: • Infecciones del tracto urinario generalmente asociadas con catéteres urinarios • infecciones quirúrgicas o de la herida quirúrgica, • bacteriemias generalmente asociadas a catéteres venosos. • neumonía habitualmente relacionada con el empleo de ventiladores. Son varias las vías de contaminación de los catéteres. La forma mediante la cúal los gérmenes pueden llegar al catéter es multifactorial y compleja. Las formas más importantes son: A través de las soluciones y otros fluidos intravenosos que pueden estar contaminados. Se denomina bacteriemia relacionada al líquido de infusión, identificando el mismo gérmen en el líquido de infusión y en el hemocultivo. Por vía hematógena desde otro foco infeccioso a distancia. Por vecindad desde la piel que rodea la entrada del catéter incorporando gérmenes de la microbiota normal del paciente o del personal de salud. Desde las conexiónes de los catéteres cuando las manipulaciones no cumplen las normas de asepsia. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 18 La colonización establecida en los primeros días de la colocación de un catéter (< 8 días) se debe, en un 80% de los casos, a microorganismos que migran desde la piel hasta la superficie intravascular del catéter, a través del manguito de fibrina intraluminal que se constituye tras su inserción. Al respecto se deberá recordar que la superficie cutánea del ser humano no es aséptica. En realidad, sobre la piel asientan un número elevado de gérmenes que varía con relación a la edad, región corporal, clima, estación anual, limpieza de los vestidos y hábitos de higiene corporal. Los microorganismos de la superficie de la piel, pertenecen a la microbiota normal y por regla general no representan peligro alguno para el organismo humano pero se reportó que muchos de estos microorganismos pueden colonizar diferentes partes de la piel, especialmente cuando hay soluciones de continuidad como ocurre en los sitios de inserción de los catéteres. La mayoría de las infecciones relacionadas con catéteres comienzan como infección local en el sitio de inserción y existe una fuerte correlación entre los microorganismos presentes en la zona de implantación y los gérmenes cultivados en la punta del catéter. Por esta razón será también una buena práctica preventiva y asistencial hacer un estudio bacteriológico de la piel cercana al sitio de inserción de los catéteres, especialmente en presencia de datos de infección cutánea. La infección a nivel del punto de inserción del catéter es la presencia de eritema, dolor, induración o secreción purulenta, limitados a un diámetro máximo de 2 cm a partir del punto de inserción del catéter. La infección del túnel subcutáneo (en catéteres tunelizados) es la presencia de eritema, dolor, induración o secreción purulenta y que afecta más allá de un diámetro de 2 cm, a partir del punto de inserción del catéter, a lo largo del trayecto subcutáneo. El tiempo de permanencia del catéter es un factor de primera importancia para la contaminación. En los catéteres implantados más de 8 días por el mayor número de manipulaciones de las conexiones la contaminación aumenta considerablemente. Es interesante resaltar el papel predominante de las conexiones de los catéteres, es así que se ha reportado que la colonización de los catéteres venosos centrales se produjo principalmente desde el punto de inserción en la piel, pero también el origen de las bacteriemias está en las conexiones. Cabe reiterar que en los cateteres, el riesgo de colonización bacteriana persiste tras su colocación debido a la exposición continua a la microbiota comensal de la barrera que atraviesa la piel y de la microbiota cutánea del personal sanitario que manipula el dispositivo además de los microorganismos que pueden contaminar los líquidos que se infunden a través del catéter. Es aconsejableevitar el desarrollo de la biocapa bacteriana, de la contaminación y colonización en los días sucesivos a la inserción, mediante la retirada precoz de los catéteres vasculares y de la sonda vesical. Esto sugiere que, probablemente, esta medida tan simple puede ser suficiente y por tanto la profilaxis antibiótica para prevenir la contaminación de los catéteres deba restringirse a aquellos procedimientos más agresivos o de mayor duración. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 19 Una vez que el microorganismo alcanza la superficie del catéter, la progresión hasta la formación de una biocapa madura y la aparición de manifestaciones clínicas dependerá de las propiedades de adhesividad del gérmen, del equilibrio entre la virulencia del microorganismo y la actividad de los sistemas defensivos del huésped. En presencia de un cateter hay que destacar que los mecanismos de defensa del huésped (migración leucocitaria o fagocitosis) tienen mayores dificultades para eliminar microorganismos adheridos a una superficie inerte. Por otro lado, el deterioro inmunológico secundario a una neoplasia activa, diabetes mellitus o insuficiencia renal crónica, también se asocia a un mayor riesgo de infección tras la colocación de un catéter. Otra estrategia para prevenir la infección nosocomial por catéteres es la modificación de la estructura de los mismos, utilizando catéteres recubiertos de materiales antisépticos. Generalmente, la contaminación/colonización de cualquier cateter se produce durante la inserción. Este hecho se ha puesto de manifiesto en múltiples trabajos, que demuestran un descenso significativo en la incidencia de infección cuando la inserción de un cateter se realiza bajo medidas estrictas de asepsia, así como por la eficacia, ampliamente demostrada, de la administración de profilaxis antibiótica justo antes de la colocación de un cateter. BACTERIEMIA RELACIONADA CON CATETER (BRC) La infección nosocomial relacionada con catéter vascular (IRC) incluye la colonización/contaminación del catéter, la infección del punto de entrada y la bacteriemia relacionada con el catéter (BRC). El 87% de las bacteriemias primarias ocurren en pacientes portadores de un catéter venoso central (CVC) y el control de la infección constituye un problema para la seguridad del paciente por la necesidad de cultivos y de tratamiento antibiótico muchas con dosis importantes (19). La definición de bacteriemia y sepsis debe ser explícita (20). Se define bacteriemia relacionada a catéter (BRC) al aislamiento de bacterias viables en sangre con cultivo positivo del catéter sin que se identifique otro foco originario. Se define Sepsis por catéter, a la enfermedad que traduce la respuesta inflamatoria del paciente a la colonización de un catéter. La respuesta del paciente puede ser de tipo local o sistémica. La respuesta sistémica, verdadera sepsis o septicemia se manifiesta por dos o más de las condiciones siguientes: Hipertermia o hipotermia. Taquicardia. Taquipnea. Recuento de leucocitos: >12.000 cel/mm3, <4.000 cel/mm3, o más del 10 por ciento de formas inmaduras (bandas). El uso de catéteres venosos o urinarios puede generar consecuencias que muchas veces no se toman en cuenta al colocarlos. Entre ellas tenemos las Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 20 graves complicaciones de bacteriemia, sepsis a punto de partida del catéter o infecciones en el sitio de la inserción. Varios estudios han demostrado que un porcentaje importante de las infecciones nosocomiales son producidas por bacteriemia relacionada con catéteres contaminados. Puede tratarse de catéteres venosos periféricos o centrales. Estas complicaciones se presentan en las UCI y en las salas hospitalarias de cualquier hospital sin importar la complejidad de la atención (21). La infección por catéter se ha de cualificar como definitiva cuando se acompañe de criterios microbiológicos de colonización de la punta del catéter más hemocultivo positivo. Se ha de considerar como probable cuando, en ausencia de cultivos positivos, no se evidencie ningún otro foco y los signos clínicos cedan dentro de las 24 horas posteriores a la retirada del catéter (22). La muestra para hemocultivo requerirá una pequeña cantidad de sangre 3 mililitros extraidos de la luz del catéter venoso central y si el resultado es positivo, el diagnóstico de infección nosocomial relacionada con catéter no tiene dudas; se ha demostrado que la correlación con el germen encontrado en la punta del catéter es muy alta (69). Por el contrario la toma de muestra para hemocultivo a partir de una vena periférica tiene una menor correlación.. Las bacteriemias por catéter se producen porque los microorganismos colonizan el catéter, con bacterias presentes en la luz del catéter (vía intraluminal) o a partir de la pared del catéter (vía extraluminal). La vía extraluminal es la vía más frecuente en catéteres de corta permanencia. Se produce migración de microorganismos de la piel que van a colonizar hasta el segmento intravascular del catéter, en su superficie externa. La vía intraluminal o endoluminal es la vía más frecuente en catéteres de larga permanencia. Se produce por que los microorganismos entran conjuntamente con las soluciones contaminadas (3% de los casos), o como consecuencia de manipulaciones de las conexiones de los equipos de infusión (10-50% de los casos), colonizan la superficie interna y la luz del catéter y pasan a la circulación sanguínea (23). Es interesante la vìa hematógena a distancia. En esta forma de BRC las bacterias pueden adherirse directamente a la punta del catéter después de circular en la sangre desde un foco de bacteriemia distante y posteriormente, aunque desaparezca el foco primitivo, actuar como un nuevo foco de bacteriemia secundario, se da en el 3-10% de los casos. La vía extraluminal se origina en la colonización de la pared del catéter por bacterias de la microbiota cutánea el paciente o del personal de salud. Los microorganismos migran a lo largo de la superficie externa del catéter desde el orificio de entrada en la piel hasta llegar a la punta y a continuación hacia la circulación sanguínea. La cuantificación de las BRC debe expresarse como número de episodios por 1.000 días de catéter y no como número de episodios por 1.000 pacientes Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 21 ingresados o como un porcentaje de catéteres colocados. Con el empleo de esta tasa por 1.000 días de catéter se consigna el grupo de pacientes portadores de estos catéteres durante los días en riesgo de desarrollar una BRC. La tasa de incidencia de episodios de BRC por días de catéter, se ha propuesto como un marcador epidemiológico para un programa de control de infección nosocomial en los hospitales (24). En una población de pacientes con catéteres de corta duración, con una media de utilización de 8 días, la tasa de BRC se situó entre 3 y 10 infecciones por 1.000 días de cateterización. Esta incidencia puede variar según características de los pacientes, la unidad hospitalaria de referencia y el tipo de los catéteres. La BRC tiene relación con el tipo de Unidad hospitalaria. En las unidades de cuidados postoperatorios la cifra es menor, tiene valor intermedio en UCI polivalente y es la mayor en las unidades de quemados probablemente por mayor contaminación a partir de la microbiota cutánea. (25) En un análisis de la magnitud de las bacteriemias relacionadas con catéteres, se determina que el catéter es una causa de primera importancia de las infecciones nosocomiales. La cantidad altísima de pacientes portadores de catéteres explica la importancia de las bacteremias. Como ejemplo en España el 60 % de los pacientes son portadores de un catéter intravascular. La prevalencia de bacteriemia asociada a su uso es de 2,5 a 3,4 episodios/1.000 días de catéter (25). El 5% de estos catéteres se colocan en venas centrales durante periodosprolongados de tiempo con un riesgo elevado de complicaciones infecciosas locales o sistémicas que varían en función del tipo y la composición del catéter. En los EEUU se reporta una cifra similar alrededor del 50% y se calculan unos 150 millones de cateterismos intravasculares anuales y de éstos 5 millones serían cateterismos centrales (CVC) que causan unos 800.000 casos de bacteriemia (26). En las UCI es cada vez más frecuente el empleo de catéteres multilumen. Con el fin de disminuir la bacteriemia por catéter se recomienda limitar el uso de llaves de tres vías y de los catéteres multilumen porque representan un número de puertas de entrada más grande. Las llaves de tres vías, como todas las conexiones, se tienen que tratar asépticamente, mantenerlas siempre cerradas y manipularlas con guantes estériles. En principio, se deberían cambiar dos veces por semana, aprovechando el cambio del equipo de perfusión, y siempre que estén manchadas o tengan restos de sangre (27). En la figura 8 se observan las dificultades en la manipulación de estos catéteres de varias luces. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 22 Figura 8: Catéter venoso con llave de 3 vías. Fuente: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000483.htm Con relación a la etiología de las BRC el 40% de estas bacteriemias se deben a Staphylococcus coagulasa negativos (50-70% Staphylococcus epidermidis), el 10- 15% a S. aureus, Sin embargo, otros cocos grampositivos (Enterococcus spp. y Streptococcus spp.) y bacilos gramnegativos (P. aeruginosa, E. coli o Klebsiella spp.) pueden ser causa de este tipo de infecciones. De hecho, la frecuencia de infecciones por bacilos gramnegativos se ha incrementado en los últimos años (28). El perfil bacteriológico varía según la enfermedad de base: por ejemplo, en una Hospital Oncológico de México DF en las BRC las bacterias más encontradas por orden de frecuencia fueron Enterobacter, Estafilococcus y Cándida (28). Las complicaciones infecciosas son la principal limitación del uso de catéteres venosos especialmente centrales. Para la contaminación de los catéteres es fundamental la formación de una matriz biológica denominada biocapa en el interior y exterior del catéter, comprobándose que es un fenómeno que se presenta con alta frecuencia en los catéteres venosos libres o tunelizados. Los catéteres venosos centrales se insertan por una variedad de razones que incluyen: monitoreo hemodinàmico invasivo; administración de líquidos durante la reanimación, como único sitio de acceso venoso disponible en los pacientes obesos en caso de venas periféricas esclerosadas, administración de fármacos vasoactivos los cuales pueden provocar vasoconstricción y daño del vaso cuando se administran en venas periféricas pequeñas, para alimentación parenteral y para implantar marcapasos. Los sitios de inserción más usados para el cateterismo venoso son la vena yugular externa e interna, la subclavia para la llamada via venosa central. El abordaje a través de la vena subclavia es el sitio preferido para un acceso venoso prolongado. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000483.htm Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 23 Como regla el catéter debe ser cambiado de sitio si aparecen signos de infección local. Asimismo cuando hay sepsis es indispensable extraer el catéter para cultivo semicuantitativo de los 3 cms distales. Aunque algunos estudios sugieren que el riesgo de que se desarrolle una infección asociada con el catéter y una bacteriemia aumentaría después del cuarto día, no se recomiendan los cambios sistemáticos del catéter con fines profilácticos, porque aumentarían la tasa de complicaciones mecánicas graves, como el neumotórax (30) . Los catéteres venosos son causa del 27al 48% de las sepsis. El diagnóstico de certeza solo puede establecerse a partir del hallazgo del microorganismo en el catéter y al mismo tiempo en los hemocultivos o en el drenaje purulento. El uso de catéteres venosos se asocia con un incremento del riesgo de septicemia principalmente por Staphylococcuss coagulasa negativos. Se ha planteado el uso de vancomicina para la profilaxis de estas infecciones antes de la inserción del catéter (31). En un estudio llevado a cabo durante 15 meses se identificaron 150 pacientes con bacteriemia después de inserción de catéteres venosos periféricos y centrales, se encontró S. aureus como microorganismo aislado en primer lugar 33 y 53%. (32). En la experiencia de Rumi y colaboradores (33) los microorganismos más frecuentemente encontrados en la infección por catéter central, catéter periférico y por soluciones intravenosas contamidas se detallan en la Tabla 1. TABLA 1 MICROORGANISMOS EN IRC MICROORGANISMO CATÉTER PERIFÉRICO CATÉTER CENTRAL INFUSIÓN IV CONTAMINADA Staphylococcus aureus ▲ ▲ Staphylococcus coagulasa negativo ▲ ▲ Enterococcus faecalis ▲ Klebsiella sp ▲ ▲ Enterobacter sp ▲ ▲ Pseudomonas aeruginosa ▲ Pseudomonas cepacia ▲ ▲ Pseudomonas acidovorans ▲ Pseudomonas pikettii ▲ Candida sp ▲ ▲ ▲ Fuente: www.eccp.ibarra.org/temario/seccion3/capitulo52.htm Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 24 INFECCIONES URINARIAS OCASIONADAS POR CATETERES. Se define infección urinaria relacionada con catéter, a aquella que se presenta en un paciente portador de una sonda (llamada catéter) colocada principalmente para drenar la orina del paciente. Tener una sonda o catéter dentro de las vías urinarias incrementa la probabilidad de infección urinaria y puede también hacer más difícil el tratamiento de la infección. Las infecciones urinarias asociadas a catéteres son frecuentes, representando aproximadamente el 35% de las infecciones nosocomiales y también pueden ser causa de bacteriemia. Además el 80% de las infecciones urinarias importantes son ocasionadas por el uso de una sonda vesical permanente. Entre el 75 y el 100% de los catéteres a los 15 días presentan colonización bacteriana, y de estos hasta el 21% presentan bacteriuria sintomática (10). La infección urinaria en pacientes con catéter vesical se produce por las siguientes vías de acceso de las bacterias: Perisonda o vía extraluminal. Es la vía más frecuente. Los microorganismos ascienden por el espacio entre la mucosa uretral y la superficie externa del catéter. Vía intraluminal o por migración a través del sistema de drenaje. Durante la inserción del catéter, se arrastran hacia el interior los microorganismos del extremo distal de la uretra. La prevalencia de infección por catéter vesical de látex es de 14 a 20 x 100 pacientes (12). El 70% de las infecciones urinarias relacionadas con catéter vesical ocurren por migración de bacterias del moco periuretral que rodea al catéter (vía extraluminal); este es el mecanismo patogénico principal en pacientes de sexo femenino y se trata generalmente de bacterias gram negativas entéricas. En el sexo masculino la vía extraluminal representa solo el 30%, mientras que el mecanismo patogénico de mayor importancia es el acceso a la uretra de microorganismos provenientes de las manos del personal sanitario durante la inserción del catéter (vía inserción). Cabe destacar que cuando la cateterización se realiza en forma transitoria (un único procedimiento con retirada inmediata) el riesgo de infección urinaria es del 5%, y de 10% en pacientes con catéteres permanentes (mayor de 4 días) (11). La prevalencia de infección urinaria por catéter vesical de látex, esta entre 15 y 20%. En el tracto urinario cateterizado existen dos poblaciones microbianas: las que crecen en el ambiente urinario mismo (crecimiento planctónico) y las que crecen en la superficie del catéter (crecimiento de la biopelícula). Con el fin de disminuir la morbilidad se emplean catéteres urinarios con una capa de sulfadiazina argéntica. En 15% de pacientes en su mayoría mujeres internadas en una Unidad de Cuidados Intensivos se colocaron catéteresurinarios. Se presentaron infecciones http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000521.htm Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 25 urinarias en 14%. Los pacientes que tuvieron más tiempo catéteres desarrollaron con mayor frecuencia infecciones urinarias (11). En los enfermos portadores de catéter urinario se incrementa la prevalencia de infección urinaria asociada más aún si el catéter es de material de látex (12). Las infecciones urinarias suelen definirse según criterios microbiológicos. Existe infección urinaria cuando hay urocultivo positivo con más de 100.000 colonias en la orina del catéter o en el 2º chorro de orina. En estudios de urocultivo en pacientes con catéter vesical los gérmenes más frecuentes fueron: Cándida (17.5%). Enterobacter (5.8%) y E coli (5%) (14). Además se encontraron diferentes especies de Proteus, Klebsiella pneumoniae, Pseudomona aeruginosa, y con menor frecuencia otras enterobacterias habitualmente resistentes a los antibióticos convencionales (18). Por el contrario en pacientes con una primera infección urinaria relacionada con catéter, los gérmenes más habituales suelen ser las enterobacterias, como E. coli (20-30%), otras enterobacterias (50-60%), Pseudomonas aeuroginosa (30-40%) y también se encuentran gérmenes Gram positivos: Enterococos (17). El perfil bacteriológico de los cultivos de catéteres urinarios ha cambiado por la creciente utilización de antibióticos de amplio espectro; anteriormente las bacterias causales más frecuentes eran E. Coli seguida de Pseudomona aeruginosa; a partir de 1990 se ha incrementado la proporción de aislamiento de Cándida, Estreptococos del grupo B y D, Klebsiella pneumoniae y en menor proporción Enterobacter cloacae y Staphylococcus coagulasa negativo. Todas las especies de candida pueden producir infección urinaria. Suelen ser comensales normales de la boca y región perineal. Candida albicans es el patógeno más frecuente, Las diferentes especies de candida se vuelven numerosas en presencia de diabetes o de tratamiento antibiótico prolongado y producen infección de vías urinarias e incluso bacteriemia. De igual manera las especies de Cándida cada vez se aíslan mas como agentes etiológicos de infecciones urinarias en especial en pacientes inmunodeprimidos o sometidos a tratamiento antibiótico intensivo. E. coli sobretodo produce infección de los catéteres urinarios (15). Existen cepas de E. coli denominadas uropatógenas que están en capacidad de invadir y ascender por el tracto urinario. El antígeno capsular más comúnmente asociado a infecciones de vías urinarias es el K1, ya que su presencia reduce la opsonización y la fagocitosis (15). Hasta la década de los ochenta la mayor parte de los aislamientos en cultivo de catéteres urinarios correspondían a E. Coli seguida de Pseudomona aeruginosa; a partir de 1990 se ha incrementado la proporción de aislamiento de Cándida, Estreptococos del grupo B y D, Klebsiella pneumoniae y en menor proporción E. Cloacae y Staphylococcus coagulasa negativo, cambios que se deben en parte a la presión selectiva ejercida por la creciente utilización de antibióticos de amplio espectro. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 26 Proteus mirabilis se adhiere con facilidad por la presencia de fimbrias, pero además es uropatógeno porque disminuye el pH urinario y provoca la aparición de cristales en la orina que son causa de obstrucción y de infección urinaria. Generalmente los microorganismos proceden de la flora fecal endógena del propio paciente, modificada con frecuencia por los antibióticos, o de la flora ambiental exógena transportada por las manos del personal sanitario al manipular el catéter urinario (16), en pacientes que no han sido tratados previamente, los gérmenes más habituales suelen ser las enterobacterias, como E. coli (20-30%), otras enterobacterias (50-60%), Pseudomonas aeuroginosa (30-40%) y los Gram positivos como Enterococos (>70%) y hongos (17) Diferentes especies de Proteus, Klebsiella pneumoniae, Pseudomona aeruginosa, Enterobacter y con menor frecuencia otras enterobacterias constituyen los gram negativos causales más frecuentes de infecciones del tracto urinario por catéter, con frecuencia con resistencia bacteriana a los antibióticos (18). LA BIOCAPA BACTERIANA. Está demostrado mediante microscopia electrónica, que todos los catéteres estudiados estaban cubiertos por una biocapa bacteriana cuya extensión era proporcional al tiempo de duración de inserción del catéter. La formación del biofilm en las superficies interna y externa del catéter fue similar en catéteres implantados menos de 8 días, mientras que esta frecuencia fue de 2/1 comparando superficie interna/externa al observar por microscopia electrónica catéteres de más de 8 días de evolución. Como resumen muy general esta establecido que en la patogénesis de la contaminación del catéter se reconoce a la adherencia bacteriana como el evento primario sirviendo la luz del catéter y sus paredes externas como soporte físico que facilita la proliferación bacteriana. La adherencia bacteriana es la forma de contaminar y permanecer de las bacterias en los catéteres que se explica por el concepto de biocapa, biopelícula, tapiz o biofilm (34). Una vez que el microorganismo alcanza la superficie del catéter, la progresión hasta la formación de una biocapa bacteriana bien desarrollada y hasta la aparición de manifestaciones clínicas depende del equilibrio entre la virulencia del microorganismo y la actividad de los sistemas inmunitarios defensivos del huésped. En presencia de un cateter hay que destacar que los mecanismos iniciales de defensa del huésped (migración leucocitaria o fagocitosis) tienen mayores dificultades para eliminar microorganismos adheridos a una superficie inerte. Si además se trata de un paciente con deterioro inmunológico secundario a una enfermedad debilitante (neoplasia activa, diabetes mellitus o insuficiencia renal crónica), existe mayor riesgo de infección tras la colocación de un catéter. La biocapa bacteriana se forma de acuerdo a la siguiente secuencia (Figura 9): Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 27 • El primer suceso es la adhesión de las bacterias a las paredes del catéter por transporte de masas e intercambio electroestático. • El segundo hecho es la adherencia firme de las bacterias por intercambios hidrofóbicos formándose un receptor de adhesión. • Finalmente se forma la biocapa y los gérmenes tienen todas las condiciones para colonizar. Figura 9: Esquema de biocapa bacteriana y matriz de hidrogel. Fuente: http://images.google.es/imgres imgur La interacción inicial entre la bacteria y la superficie inerte depende de fuerzas físico-químicas (fuerzas de Van der Waals), reacciones hidrofóbicas y polaridad eléctrica. En la superficie bacteriana se encuentran restos cargados de electricidad como residuos hidrofóbicos. Los materiales inertes insertados en el huésped, en este caso un catéter, quedan rápidamente recubiertos por proteínas o glucoproteínas procedentes del mismo huésped. Las bacterias se adhieren sobre el material extraño inerte libre o recubierto con macromoléculas derivadas del huésped. En las bacterias gram negativas, el mecanismo de adherencia está mediado por unas estructuras denominadas fimbrias o pilis. Las fimbrias o pili de las bacterias gram negativas son adhesinas responsables de la adherencia. La adhesina es una proteína localizada en el extremo de la fimbria que se adhiere a un receptor de la célula huésped constituido por regla general por residuos de hidratos de carbono de glucoproteínas o glucolípidos. Ocasionalmente, la propia proteína mayoritaria de la fimbria actúa como adhesina. El ensamblaje de la fimbria en la pared celular es un proceso complejo en el cual intervienen una serie de proteínas auxiliares. Ciertas bacterias gramnegativas poseen proteínas localizadas en la membranahttp://images.google.es/imgres Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 28 externa que tienen un papel importante en la adherencia, se trata de las denominadas adhesinas afimbriadas. En algunas bacterias, la adherencia a la célula huésped se produce en dos pasos. En el primer paso la interacción se realiza mediante la fimbria, y en un segundo paso tiene lugar una unión más intensa en la que, al parecer, intervienen las adhesinas afimbriadas. Las bacterias grampositivas pueden también presentar estructuras parecidas a las fimbrias de las bacterias gramnegativas, sin embargo, estas estructuras no parecen desempeñar un papel importante en la adherencia. Las bacterias gram positivas también forman adhesinas que son proteínas o polisacáridos para el mecanismo de adhesión. En algunas especies de Streptococcus existe una adhesina afimbriada que media la unión de la bacteria a la fibronectina, una glucoproteína presente en la superficie de la célula huésped. Estas proteínas que actúan como adhesinas están ancladas al peptidoglicano. La unión entre la adhesina y su receptor en la célula huésped suele ser bastante específica. Hasta la actualidad se han definido tres tipos principales de interacción adhesina-receptor: • Lectina-hidrato de carbono (ejemplo, la fimbria tipo 1 de E. coli y la célula epitelial de la vejiga urinaria). • Proteína-proteína (ejemplo, proteína F de Streptococcus pyogenes y fibronectina de la célula del epitelio respiratorio). • Hidrofobina-proteína (ejemplo, el ácido lipoteicoico y la fibronectina). Los gérmenes bacterianos muestran diferente grado de afinidad para adherirse a los catéteres. Se ha comparado la adherencia de S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa y E. coli frente a catéteres hechos de teflón, latex, silicona, polietileno y poliuretano. El polivinilo/polietileno es el material en el que los cuatro microorganismos presentaban mayor adherencia, mientras que los Staphylococcus presentaban una menor adherencia sobre los poliuretanos. Se ha propuesto que algunos microorganismos, como los Staphylococcus coagulasa negativa, pueden metabolizar componentes del plástico de los catéteres y utilizarlos como nutrientes. La biocapa es una matriz producida y habitada por bacterias que desarrollan colonias microbianas encerradas en un adhesivo, generalmente polisacárido, tipo de material que se une a la superficie del catéter. Macroscópicamente la biocapa es una estructura en forma de promontorios con aspecto de tallo o champiñón. (35). Al microscopio una biocapa bacteriana es una comunidad de bacterias, formando microcolonias, adheridas a una superficie. Las bacterias están envueltas por una matriz compuesta por moléculas sintetizadas por el propio microorganismo y otras procedentes del huésped, que conforman una estructura tridimensional. Se trata de moléculas de polisacáridos, ADN y proteínas, que constituyen una sustancia Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 29 polimérica con aspecto macroscópico de mucosidad. Según su composición química esta sustancia polimérica extracelular es un hidrogel. Las características de este hidrogel confieren a la mucosidad fluidez y elasticidad suficientes para que ésta soporte los cambios en el efecto de cizalladura que provoca el fluido circundante llámese orina o sangre. Esta sustancia mucosa extracelular con características de hidrogel recibe el nombre de slime (36). La biocapa bacteriana formada en los catéteres produce una cobertura de protección a los gérmenes frente a los mecanismos de defensa del huésped, facilita la colonización de las bacterias y es la razón principal de la bacteriemia. Los antibióticos tienen dificultad en llegar a la biocapa que tiene por tanto un papel primordial en la resistencia a los antibióticos. La biocapa es un ejemplo de vida en comunidad que ofrece a las bacterias, ventajas notables. La proximidad física de otras células favorece las interacciones sinérgicas, incluso entre miembros de especies distintas con las siguientes ventajas: • transferencia horizontal de material genético entre microorganismos. • utilización conjunta de subproductos metabólicos. • mayor tolerancia a los antimicrobianos. • amparo ante los cambios del entorno. • protección frente al sistema inmunitario de un huésped infectado o frente a depredadores. En la figura 10 se muestra la biocapa producida por Staphylococcus aureus al microscopio electrónico. Figura 10: Biofilm. Staphylococcus aureus. Fuente: http://images.google.es/imgres imgur http://images.google.es/imgres Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 30 La infección urinaria asociada a catéter ocurre por que alrededor y en la luz de la sonda urinaria se adhieren a la superficie macromoléculas de la orina pricipalmente proteínas (albúmina, fibrinógeno, fibronectina), moléculas de urea y electrolitos (sodio, potasio, cloro). En forma paralela se forma la biocapa bacteriana. Este proceso dual se inicia dentro de los primeros minutos a horas de haber sido colocado el catéter urinario y depende de las características de la bacteria y de la superficie del catéter, como su carga eléctrica, su hidrofobicidad y la presencia de irregularidades; así como de la composición y pH de la orina. La biopelícula favorece los pasos siguientes que son la adhesión bacteriana y la precipitación. La adherencia se produce en horas en unos sitios de recepción de la biopelìcula constituyendo el glicocalix o película bacteriana, para diferentes tipos de bacterias que colonizan la orina, las que se adhieren en cuestión de horas. Luego empiezan a producir una matriz de glucopolisacaridos. En el proceso de adhesión bacteriana la biopelícula ofrece sitios de recepción que las engloba y recibe el nombre de “glicocalix” o película bacteriana, que le confiere una defensa contra los antibióticos y los mecanismos de defensa del huésped, proceso que se cumple en alrededor de 24 horas. En este proceso, la bacteria se vuelve vegetante e inicia un proceso de crecimiento lento, cambiando el microambiente alrededor del catéter lo que favorece la precipitación de materiales. Cuando las bacterias alcanzan las mucosas deben disponer de mecanismos de adherencia para poder colonizarla. Este aspecto es especialmente importante en sítios como las vías urinarias donde las mucosas están sometidas a un flujo de líquidos que tienden a arrastrar las bacterias no adheridas. En estos sitios, sólo las bacterias con capacidad para fijarse a la superficie permanecerán en ellas. De manera genérica las estructuras bacterianas que median este proceso de adherencia reciben el nombre de adhesinas. (13 ). TECNICA BACTERIOLOGICA PARA CULTIVO DE CATETERES Para diagnosticar una infección relacionada con catéter (IRC) es necesario aislar el microorganismo causal en número significativo en un cultivo de la punta del catéter. La bacteriemia relacionada con catéter (BRC) precisa, además, el aislamiento del mismo microorganismo en hemocultivo o urocultivo según el caso (37). El cultivo cualitatitvo de un catéter consiste en introducir el extremo distal del catéter, cortado asépticamente, en un medio de cultivo líquido. Es una técnica poco específica ya que no cuantifica el número de UFC y por tanto no permite diferenciar una colonización de una contaminación accidental. El cultivo semicuantitativo es el método usado más ampliamente en los servicios de laboratorio. Los pasos del cultivo semicuantitativo, desde el retiro del catéter son: Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 31 Limpiar la piel alrededor del punto de inserción con alcohol de 70º, dejar secar, se retira el catéter teniendo cuidado que no toque la piel. Si hay secreción purulenta se hace una tinción de Gram y un cultivo por separado. En los catéteres cortos, se cortan justo por debajo del nivel de la unión con la superficie cutánea. Los catéteres largos se recogenlos 3-4cm del extremo distal. En catéteres tunelizados: cultivar el segmento intracutáneo. Estos fragmentos se tienen que cultivar dentro de las primeras 2 horas. Para cultivo se hacen rodar sobre la superficie de una placa de agar sangre, cuatro o cinco veces (técnica de Maki). Las placas cultivadas así se mantienen a 37º C durante un mínimo de 72 horas, en aerobiosis. El método de Maki es el más rentable para el cultivo de microorganismos que se desprenden de la superficie externa de la muestra del catéter. La interpretación de los resultados del cultivo semicuantitativo es la siguiente: Cultivo positivo: presencia de 15 o más UFC. El cultivo cuantitativo emplea el método de Cleri que consiste en la inmersión del segmento del catéter en 2 ml de caldo nutritivo y lavar tres veces la luz mediante una aguja y una jeringuilla. Posteriormente, se realiza el recuento del número de bacterias del caldo por siembra de 0,1ml de las diluciones 1:10 y 1:100, sobre placas de agar sangre. El criterio de positividad, y por lo tanto de catéter colonizado se establece con el crecimiento de 1.000 o más UFC por segmento de catéter. También es posible cultivar muestra de las conexiones de los catéteres. Para ello se toma una muestra de la superficie interna de la conexión mediante un hisopo. De esta manera se dispone de información bacteriológica y se evita la retirada del catéter. Se puede también cultivar los gérmenes del punto de inserción del catéter mediante un frotis cutáneo de la zona circundante. Otra técnica es la tinción de diversos segmentos del catéter, basadas en la tinción Gram y en naranja de acridina. Requieren la retirada del catéter. Con la práctica simultánea de hemocultivo periférico, a través del catéter y cultivo de la punta ante la sospecha de infección, se aumenta el poder discriminante de la IRC. Si los hemocultivos tienen el mismo microorganismo que la punta, podemos hablar de IRC con una sensibilidad del 93% y una especificidad del 100%, siendo el hemocultivo a través del catéter, superior al cultivo de la punta (38). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 32 Definición de términos Catéter colonizado: Crecimiento significativo de un patógeno en el cultivo del catéter sin signos clínicos de infección. Infección local: Infección del punto de inserción con signos inflamatorios y exudado purulento, en ausencia de bacteriemia. Sospecha de infección en el punto de inserción: eritema o induración alrededor del punto de inserción en ausencia de supuración purulenta o bacteriemia relacionada. Infección sistémica: Bacteriemia relacionada con catéter, que se entiende por cualquiera de las siguientes: • Crecimiento significativo del mismo patógeno en un cultivo representativo del catéter (punta, segmento subcutáneo, exudado del punto de inserción, conexión o líquido de infusión) y en el hemocultivo por punción venosa percutánea. • Crecimiento del mismo patógeno en un hemocultivo a través de catéter y en el hemocultivo por punción venosa percutánea en una proporción de unidades formadoras de colonias mayor de 4:1 • Sepsis definitiva relacionada con catéter: bacteriemia (hemocultivo positivo) más cultivo positivo de catéter en presencia de sepsis. • Probable sepsis relacionada con catéter: sepsis con hemocultivos negativos, que se soluciona al retirar un catéter colonizado o con infección local. Diagnóstico clínico de la IRC Algunos datos clínicos o microbiológicos pueden indicar que se trata de una BRC, como ser: a) fiebre en ausencia de foco. b) inflamación o supuración en el punto de inserción del catéter o su trayecto. c) presencia de picos de fiebre en relación con la utilización del catéter. d) presencia de bacteriemia o fungemia por un microorganismo causante de IRC, sin foco alternativo. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 33 Diagnóstico microbiológico Existen más de 25 métodos descritos para procesar cultivos bacteriológicos de un catéter, sin embargo no se encontró aún la técnica ideal, sencilla y económica, que permitiera examinar la vía intraluminal y exoluminal sin retirar el catéter y cuyos resultados se obtuvieran rápidamente. Mientras tanto, la técnica de Maki, sigue siendo la más utilizada (70). Técnicas microbiológicas que requieren la retirada del catéter Cultivo cualitativo. Consiste en introducir la punta del catéter cortada asépticamente en un recipiente con medio de cultivo líquido. No debe utilizarse porque no permite la diferenciación entre colonización y contaminación accidental en el momento de la retirada del catéter. Esta técnica genera un alto número de falsos positivos y su interés actual es nulo. En suma es una técnica poco específica ya que no cuantifica el número de UFC/ml y por lo tanto no permite diferenciar una colonización de una contaminación accidental. Cultivo semicuantitativo La técnica de Maki, o cultivo semicuantitativo de la punta del catéter, descrita en 1977, consiste en el rodamiento de los 5 centímetros distales del catéter en una placa de agar. El cultivo semicuantitativo es el método usado más ampliamente en los servicios de laboratorio. Maki observó que los catéteres con menos de 15 unidades formadoras de colonias (UFC) no generaban bacteriemia, a diferencia de los que tenían recuentos mayores. Este punto de corte establecía una especificidad del 76% y permitía reducir el número de falsos positivos respecto al cultivo cualitativo. El valor absoluto de un recuento de 15 UFC ha sido cuestionado, así como su representatividad ante los catéteres multilumen o de Swan-Ganz a raíz del descubrimiento de la vía intraluminal como fuente de la contaminación del catéter, ya que en teoría sólo reconocería la contaminación de la cara exoluminal. Sin embargo, su sensibilidad y especificidad en los catéteres retirados por sospecha siguen siendo aceptables, por lo que, dada su sencillez, es la técnica habitualmente empleada en la práctica clínica cotidiana. Cultivos cuantitativos Cleri describe en 1980 un cultivo cuantitativo que permite valorar la luz intraluminal y la exoluminal, de un segmento del catéter. Es una técnica laboriosa que consiste en introducir el segmento del catéter en 2 militros de caldo de cultivo y el posterior lavado por tres veces de la luz del catéter con una jeringa, para cultivar después 0,1 ml de caldo en diluciones progresivas sobre placas de agar. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 34 El punto de corte se estableció en 1.000 UFC, con una sensibilidad del 100% y una especificidad del 92,5%. Posteriormente, Brun Buison en 1985, presentó un nuevo método que simplifica notablemente el cultivo al introducir el segmento distal del catéter en 1 militro de agua destilada estéril para recuperar posteriormente 0,1 ml, que se cultiva en placa. Con el mismo valor significativo (1.000 UFC), el método presenta una sensibilidad del 97,5% y una especificidad del 88%. Liñares J, en 1985, en un esfuerzo por distinguir la colonización intraluminal de la exoluminal, modificó la técnica de Cleri y tras realizar el lavado de la luz del catéter, cultivó la punta según el método de Maki, con lo que se consigue una sensibilidad del 100%. La importancia de esta técnica radica en la posibilidad de distinguir el mecanismo patogénico por el que se ha colonizado el catéter, lo que ha permitido importantes avances en el planteamiento de la profilaxis de la BRC, aunque, al igual que la técnica de Cleri, está limitada por su laboriosidad. La aplicación de ultrasonidos a la punta del catéter durante 1 minuto en un baño con 10 ml de tripticasa-soja, para después realizar cultivos de diluciones progresivas de 0.1 ml, obtiene una sensibilidad del 93% y una especificidad del 94% estableciendo el punto de corte en 100 UFC. Al igual que la técnica de Cleri et al o de Brun Buisson, el método no permite la diferenciación de las vías intra o exoluminal. Técnicas de diagnóstico rápido.Todas las técnicas previamente descritas necesitan de un período mínimo de 24- 48 Hrs para obtener resultados, por lo que se han descrito técnicas de diagnóstico rápido por tinción del catéter tras su retirada. Tanto la tinción de Gram como la de naranja de acridina de las superficies del catéter han tenido escasa aceptación por cuestiones técnicas. Al exigir la retirada del catéter, su principal beneficio es la rapidez de procesamiento, lo que puede tener implicaciones en el tratamiento empírico. La presencia de más de un microorganismo por 20 campos se considera diagnóstica con una sensibilidad y especificidad del 80%. Sin embargo, su utilidad está limitada a catéteres con paredes finas y transparentes. El estudio bacteriológico de la punta de un catéter urinario o venoso requiere de cultivo bacteriano, empleando como siembra primaria agar sangre y luego medios de cultivo más específicos y según el germen encontrado (37). También es posible cultivar muestras de las conexiones de los catéteres. Para ello se toma una muestra de la superficie interna de la conexión mediante un hisopo. De esta manera se dispone de información bacteriológica y se evita la retirada del catéter. Se puede también cultivar los gérmenes del punto de inserción del catéter mediante un frotis cutáneo de la zona circundante. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 35 Con la práctica simultánea de hemocultivo, a través del catéter y cultivo de la punta ante la sospecha de infección, se aumenta el poder diagnóstico para definir IRC. Si el hemocultivo muestra el mismo microorganismo que la punta del catéter, el diagnóstico de IRC es definitivo con una sensibilidad del 93% y una especificidad del 100%, siendo el hemocultivo a través del catéter, superior al cultivo de la punta (38,66). PERFIL BACTERIOLOGICO DEL ESTUDIO. La contaminación de los catéteres puede originarse en diferentes sitios donde existe flora bacteriana: • Las bacterias de otro paciente o del personal sanitario pueden transmitirse por las manos o por medio de gotitas de saliva. • En el ambiente del hospital también existe flora bacteriana, en los pisos, en las superficies secas, en las conexiones de agua y en la ropa de cama (39). • Otra fuente común de infección son los alimentos que se sirven a los pacientes, sobretodo frutas y verduras crudas. Las bacterias presentes en la flora normal causan infección por transmisión a sitios fuera del hábitat natural. Por ejemplo, las bacterias gramnegativas de la flora normal del aparato digestivo causan a menudo infección urinaria en pacientes sometidos a cateterización vesical. El diagnóstico de las infecciones relacionadas con catéteres (IRC) requiere de tinciones, medios de cultivo, pruebas bioquímicas y para el tratamiento es absolutamente necesaria la práctica de antibiograma para seleccionar los antibióticos mas eficaces (40). En la ciudad de La Paz, existe un reporte de las infecciones nosocomiales en edad pediátrica (41), donde se encontró una tasa de 27 a 31.3 por 100 episodios, las tasas más altas corresponden en ambos casos al servicio de quemados. Las infecciones nosocomiales más frecuentes fueron las de piel y partes blandas, seguidas de las heridas operatorias. Los niños menores de 5 años, inmunocomprometidos, desnutridos, con alteración de la conciencia (sometidos a múltiples procedimientos invasivos), portadores de venoclisis y sistemas urinarios cerrados tuvieron más riesgo de desarrollar infección hospitalaria. Los microorganismos más frecuentemente hallados, en el estudio pediátrico de referencia fueron: P.aeruginosa, S. aureus y E. coli, que presentaron mayor sensibilidad a los aminoglucosidos, quinolonas y cefalosporinas de tercera generación y mayor resistencia a antibióticos beta-lactámicos (41). La descripción de los principales gérmenes bacterianos encontrados en esta investigación es la siguiente: Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 36 Acinetobacter El Acinetobacter es un cocobacilo gram negativo que en los últimos años se constituyó en agente infeccioso emergente causante de infecciones nosocomiales (42). Acinetobacter es oxidasa negativo, no esporulado y aerobio estricto. Se parecen a las neiserias en los frotis, porque predominan las formas en diplococo en los líquidos corporales y en los medios sólidos. Se encuentran también formas en bastoncillos, y ocasionalmente las bacterias son gram positivas (Figura 11). Figura 11: Desarrollo de Acinetobacter baumanni al microscopio electrónico Fuente: http://images.google.es/imgres imgur Acinetobacter crece bien en la mayor parte de los medios que se utilizan para cultivar las muestras de los pacientes. En agar sangre produce colonias mucoides, convexas, elevadas, resplandecientes (Figura 12). http://images.google.es/imgres Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 37 Figura 12: Desarrollo de Acinetobacter en agar sangre. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas Este microorganismo suele ser un comensal, se encuentra ampliamente disperso en la naturaleza, básicamente crece en casi todas las muestras de suelos y agua fresca. Se ha aislado en personas sanas en la piel, faringe y otras localizaciones. Solo produce en ocasiones, infecciones nosocomiales, pero no se ha establecido con claridad su función patógena. En ambientes hospitalarios ha sido aislado de humidificadores, vaporizadores, superficies secas, piel del personal de salud, colchones, cojines y otro equipamiento de cama. Se ha reportado que el 31% del personal de salud es portador de Acinetobacter, factor que contribuye a la transmisión cruzada entre pacientes. La persistencia de las especies de Acinetobacter en las superficies medioambientales hospitalarias es su característica más distintiva entre los patógenos nosocomiales, explicando su mayor patogenicidad entre pacientes hospitalizados. En los pacientes con bacteriemia por Acinetobacter el origen de la infección se encuentra casi siempre en los catéteres intravenosos. La especie Acinetobacter baumanni se reporta como germen causal de infecciones hospitalarias en pacientes debilitados, gravemente enfermos o inmunocomprometidos. El Acinetobacter tiene dos características principales: la facilidad para expandirse y su capacidad para desarrollar resistencia a los antibióticos. La facilidad de diseminación del Acinetobacter dió lugar al aforismo: "Rozas a un enfermo que lo tenga en la piel y, si no te desinfectas las manos de inmediato, lo vas dejando en todo lo que tocas" (44). El mayor peligro de Acinetobacter es su habilidad de generar diversos mecanismos de resistencia a los antibióticos disponibles (43). Se han desarrollado epidemias hospitalarias por Acinetobacter resistente a los antibióticos habituales y que han obligado al uso de nuevos antibióticos. Las cepas Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 38 de Acinetobacter son a menudo resistentes a los agentes antimicrobianos y quizás sea difícil tratar la infección. Deberán efectuarse antibiogramas para seleccionar los mejores antimicrobianos para el tratamiento. Las cepas de Acinetobacter reaccionan más a menudo a gentamicina, amikacina, tobramicina y cefalosporinas más recientes. Las infecciones de la circulación sanguínea por A. baumannii alcanzan el 2% del total de las infecciones adquiridas en hospitales. Los sitios corporales y la colonización por este germen se muestran en la figura 13. Figura 13: Colonización y sitios de infección por Acinetobacter. Fuente: Nature Review. Microbiology. Las medidas de control para infecciones por Acinetobacter consisten en el aislamiento de pacientes, lavado de manos del personal de salud, limpieza general y periódica de los ambientes y cultivos de vigilancia de todos los pacientes de la sala hospitalaria. La mortalidad asociada a bacteriemia por Acinetobacter es alta, alrededor de 52%. Frecuenciade patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 39 Proteus Proteus es un género de bacterias de la familia Enterobacteriaceae. Son bastoncillos gram negativos cortos, facultativamente aeróbios. Se mueven con mucha facilidad por medio de flagelos perítricos, a menos que este fenómeno se inhiba con productos químicos. Tienden a ser organismos pleomórficos, no esporulados ni capsulados. Crecen en medios corrientes con colonias redondeadas, a temperatura corporal de 37ºC y no son demasiado exigentes en requisitos nutricionales. Se desarrollan formando capas diseminadas por virtud de su gran motilidad. Existen variantes inmóviles que forman colonias lisas. (Figura 14). Figura 14: Desarrollo de Proteus spp. Fuente: http://www.soclaemi.org/atlasmicrobiología/proteus_spp.jpg La estructura antigénica está compuesta por antígeno somático O, flagelar H y superficial K. El antígeno flagelar H contribuye a la capacidad invasora de las vías urinarias. Las especies de Proteus no fermentan lactosa por no tener una β galactosidasa, fermentan xilosa, pero algunas son capaces de hacerlo en el test TSI (Triple Sugar Iron). Son oxidasa-negativos, ureasa-positivos y productores de fenilalanina desaminasa. La ureasa hidroliza urea a amoníaco (NH3) y eso hace a la orina más alcalina. Con excepción de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan negativos con la prueba del indol. P. mirabilis puede usar urea y citrato para su desarrollo. Produce sulfuro de hidrógeno y forma películas claras en medios de crecimiento. (Figura 14). http://es.wikipedia.org/wiki/Pleomorfismo http://es.wikipedia.org/wiki/Espora http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A1psula_(microbiolog%C3%ADa) http://www.socalemi.org/atlasmicrobiologia/proteus_ss.JPG http://es.wikipedia.org/wiki/Ant%C3%ADgeno http://es.wikipedia.org/wiki/Flagelo http://es.wikipedia.org/wiki/Lactosa http://es.wikipedia.org/wiki/Oxidasa http://es.wikipedia.org/wiki/Ureasa http://es.wikipedia.org/wiki/Urea http://es.wikipedia.org/wiki/Amon%C3%ADaco http://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_del_indol http://es.wikipedia.org/wiki/Citrato http://es.wikipedia.org/wiki/Sulfuro_de_hidr%C3%B3geno Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 40 Se trata de bacterias ubicuas, residentes del tracto intestinal del hombre y otros animales. Hay tres especies que causan infecciones oportunistas en el hombre: P. vulgaris, P. mirabilis, y P. penneri, ocasionando infecciones urinarias y complicaciones del tracto urinario. Ademas producen enteritis, abscesos hepáticos, meningitis, otitis media y neumonía con o sin empiema. Es un frecuente invasor secundario de quemaduras y heridas. Una muestra de orina alcalina es un posible signo de infección por P. mirabilis; puede diagnosticarse en el laboratorio debido a su característica motilidad y produce un distintivo olor a pescado en descomposición. Al subir la alcalinidad puede formar cristales de estruvita, carbonato de calcio, y/o apatita. Esta bacteria puede encontrarse viable en cálculos y reiniciar una infección post tratamiento antibiótico; al desarrollarse los cálculos, después de un tiempo pueden seguir creciendo más y causar obstrucción urinaria ocasionando falla renal. Todas las especies de Proteus son resistentes a la ampicilina, la excepción es P. mirabilis que es sensible. P. mirabilis es generalmente susceptible a las tetraciclinas. El 10%–20% de las cepas de P. mirabilis son resistentes a las cefalosporinas de 1ª generación y ampicilina. Staphylococcus Los Staphylococcus son bacterias gram positivas muy frecuentes en la naturaleza y en el organismo humano. Se distinguen cerca de 31 especies diferentes, son parte de la familia Micrococcaceae. Clínicamente se dividen en dos grupos: los estafilococos coagulasa positivos (Staphylococcus aureus) y los estafilococos coagulasa negativos (S. epidermidis. S. saprophyticus, S. hominis, etc). (70). Su hallazgo es normal en secreciones nasales y en piel, en 20 a 30 por ciento de adultos sanos; se encuentran menos en la boca, vías respiratorias altas y aparato genitourinario. Por ser saprófitos no son perjudiciales para la salud; sin embargo en presencia de heridas o punciones por catéteres atraviesan las defensas orgánicas y pueden causar infección. Los individuos susceptibles a infecciones estafilocócicas son los recien nacidos, las personas con afecciones pulmonares, diabetes, cáncer, afecciones cutáneas y aquellas cuyos sistemas de defensa estan disminuidos por corticoesteroides o fármacos inmunosupresores (45). Los Staphylococcus pueden infectar cualquier región del organismo. La infección puede ser leve o poner en peligro la vida. Suelen producir abscesos y pueden dar bacteriemia por catéter, osteomielitis o endocarditis. Una infección estafilocócica localizada en cualquier parte del cuerpo puede ocasionar bacteriemia, que suele provenir de algún dispositivo infectado introducido en una vena, por ejemplo, un catéter, que facilita a los estafilococos acceso directo a la circulación sanguínea. La bacteriemia, produce fiebre alta persistente y en ciertos casos shock. El Staphylococcus coagulasa negativo es el agente más común de bacteriemia y sepsis nosocomial asociadas a cateterización venosa y se complica con elevada morbimortalidad (46). http://es.wikipedia.org/wiki/Tracto_intestinal http://es.wikipedia.org/wiki/Infecci%C3%B3n_oportunista http://es.wikipedia.org/wiki/Proteus_vulgaris http://es.wikipedia.org/wiki/Proteus_vulgaris http://es.wikipedia.org/wiki/Proteus_mirabilis http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Proteus_penneri&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Infecci%C3%B3n_urinaria http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Enteritis&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Absceso_hep%C3%A1tico http://es.wikipedia.org/wiki/Absceso_hep%C3%A1tico http://es.wikipedia.org/wiki/Meningitis http://es.wikipedia.org/wiki/Otitis_media http://es.wikipedia.org/wiki/Neumon%C3%ADa http://es.wikipedia.org/wiki/Empiema http://es.wikipedia.org/wiki/Orina http://es.wikipedia.org/wiki/PH http://es.wikipedia.org/wiki/Cristal http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Estruvita&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Carbonato_de_calcio http://es.wikipedia.org/wiki/Apatita http://es.wikipedia.org/wiki/Ampicilina http://es.wikipedia.org/wiki/Tetraciclina http://es.wikipedia.org/wiki/Cefalosporina http://es.wikipedia.org/wiki/Ampicilina Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 41 Para prevenir la contaminación del catéter a través de la piel las medidas de higiene son importantísimas al momento de insertar catéteres. En la serie estudiada se encontró Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis en los catéteres venosos y en los catéteres urinarios solo Staphylococcus epidermidis. Staphylococcus epidermidis Staphylococcus epidermidis es una especie bacteriana del género Staphylococcus. Son miembros de la flora normal de la piel, de las vías respiratorias y gastrointestinales del hombre. No son invasores ni patógenos.Al microscopio son cocos Gram positivos, agrupados. a veces forma colonias grises a blancas (gama sin hemolísis), no producen pigmento hasta varios días después (Figura 15). Figura 15: Desarrollo de Staphylococus epidermidis en agar sangre. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Al microscópio electrónico se observa claramente la forma esferica de las colonias de cerca de 1 micrómetro de diámetro distribuidas en grupos irregulares, tambien se encuentran como cocos aislados, en pares, tetradas o cadenas. (Figura 16). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 42 Figura 16: S. epidermidis al microscópio electrónico. Fuente: htpp:// es.wikipedia.org/Staphylococcus epidermidis. Jpg La especie es catalasa-positiva y coagulasa-negativa. Es sensible a novobiocina; a diferencia de otro organismo coagulasa negativo como S. saprophyticus. El Staphylococcus epidermidis,es un importante patógeno hospitalario con una predilección muy peculiar para contaminar catéteres, a través de la formación de una biocapa (Figura 17). Figura 17: Biocapa de Staphylococcus epidermidis en catéter venoso. Fuente: http://images.google.es/imgres imgur Actualmente, se acepta que S. epidermidis es un patógeno importante asociado con catéteres. La propensión de S. epidermidis a causar este tipo de infecciones depende de su capacidad de adherirse y proliferar sobre superficies inertes formando biocapas (47). En la década de 1980 se observó que S. epidermidis http://es.wikipedia.org/wiki/Archivo:Staphylococcus_epidermidis_01.png http://images.google.es/imgres?imgurl=http://www.elsecretodelasalud.com/Enfermedad/sitebuilder/images/staphylococcus_epidermidis_1_-165x132.jpg&imgrefurl=http://www.elsecretodelasalud.com/Enfermedad/Staphylococcus.html&usg=__7rV1jYeCnnSXOClfmFiKxTrDsL0=&h=132&w=165&sz=11&hl=es&start=20&tbnid=7_jbXd_g4wIJRM:&tbnh=79&tbnw=99&prev=/images%3Fq%3Destafilococo%2Bepidermidis%26gbv%3D2%26hl%3Des http://images.google.es/imgres Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 43 recubría a los catéteres con una sustancia gelatinosa denominada slime. Posteriormente, se demostró que el slime estaba compuesto por N- acetilglucosamina. Hoy en día se conoce que el slime está constituido por dos fracciones polisacáridas, y se denomina polisacárido de adhesión intercelular (PAI). S. epìdermidis posee una capa externa de polisacáridos que se adhiere firmemente al plástico, lo que también contribuye a impedir la penetración de los antibióticos dificultando el tratamiento. En resumen las características destacables del Staphylococcus epidermidis son: Agente de infecciones oportunistas. Ocasiona infecciones nosocomiales. No produce hemolisis. No fermenta manitol. No produce colonias pigmentadas. Es coagulasa negativo. La patogénesis de las infecciones por S. epidermidis relacionadas con biomateriales se efectúa en dos pasos. En primer lugar, un pequeño número de bacterias que colonizan la piel contamina el dispositivo/material durante su implantación (p. ej., inserción de un catéter). En segundo lugar la bacteria se adhiere al biomaterial a través de una combinación de interacciones no específicas (fuerzas de Van der Waals, interacciones hidrofóbicas, etc.), así como interacciones específicas a través de las adhesinas. Staphylococcus aureus El Staphylococcus aureus, se llama así por el color dorado de las colonias que se desarrollan en medio sólido en condiciones aerobias o microaerófilas, crecen con facilidad en la mayor parte de los medios bacteriológicos. Son células esféricas de cerca de un micrometro de diámetro, distribuidas en grupos irregulares. Crecen con rapidez a 37ºC. Las colonias que desarrollan en medios sólidos, son redondas, lisas resplandecientes, de color gris a amarillo dorado intenso (Figura 18). Las colonias individuales tienden a ser bien definidas y lisas. Aunque su nombre (E. dorado) refleja su tendencia de adquirir una pigmentación amarilla, tal fenómeno ocurre solo bajo determinadas condiciones de crecimiento. Por ejemplo, las colonias pequeñas y las colonias que crecen en ambiente anaeróbico no desarrollan dicha pigmentación dorada (70). Ocurren diversos grados de hemólisis por la acción de S. aureus. Es un patógeno de gran importancia para el ser humano y es causante de muchas infecciones graves. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 44 Figura 18: Desarrollo en agar sangre de Stapylococcus aureus. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Son bastante resistentes a cambios ambientales, a la desecación y a incrementos de la temperatura de hasta 50ºC, lo que les permite sobrevivir por largo tiempo en el polvo, suelo, fomites y la ropa. Tales características facilitan su transmisión intrahospitalaria. Es un germen que coloniza con frecuencia los catéteres venosos, causando bacteriemia grave; a menudo resistente a los antibióticos habituales y para el tratamiento se requieren dosis altas de vancomicina. Los pacientes con colonización de un catéter intravascular por Staphylococcus aureus deben ser tratados en forma inmediata con antibióticos dirigidos al germen; esta conducta reduce la incidencia de bacteriemia en 83%. (56) La capacidad patógena de S. aureus es el efecto combinado de los factores y las toxinas extracelulares simultáneamente con las propiedades invasoras de la cepa. Produce intoxicación alimentaria por enterotoxina y bacteriemia. Las cepas invasoras y patógenas tienden a producir coagulasa, pigmento amarillo y hemólisis. El prototipo de la infección estafilocócica es el absceso. Presenta resistencia a los antibióticos, destacando dos procesos: la resistencia a los betalactámicos y el desarrollo de cepas resistentes a la vancomicina. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 45 PSEUDOMONA Pseudomona es un género de bacilos rectos o ligeramente curvados, gram negativos, oxidasa positivos, catalasa positivos, aeróbios estrictos aunque en algunos casos pueden utilizar el nitrato como aceptor de electrones. El catabolismo de los glúcidos se realiza por la ruta de Etner-Doudoroff y el ciclo de los ácidos tricarboxílicos. Algunos miembros del género son psicrófilos, mientras que otros sintetizan sideróforos fluorescentes de color amarillo-verdoso con gran valor taxonómico. Las especies de Pseudomonas no forman gas a partir de glucosa, son hemolíticas (en agar sangre), prueba negativa del indol, rojo de metilo negativo y Voges Proskauer negativo. Es común la presencia de plásmidos y no forman esporas. Los miembros de este género con frecuencia son móviles gracias a uno o más flagelos polares que poseen. Algunas especies sintetizan una cápsula de exopolisacáridos que facilita la adhesión celular, la formación de biopelículas y protege de la fagocitosis, de los anticuerpos o del complemento aumentando así su patogenicidad. La adherencia inicial de Pseudomona aeruginosa está mediada por hidrofobinas y/o adhesinas de superficie tipo lecitinas. Posteriormente se sintetiza ácido poliurónico (alginato) que promueve el aumento y desarrollo de la biocapa. Los pili también están implicados en un tipo particular de movilidad y adherencia bacteriana. La formación de microcolonias tiene lugar mediante un mecanismo de agregación celular que requiere movilidad y no sólo por crecimiento clonal a partir de una célula bacteriana concreta. Las Pseudomonas crecen en medios simples. En caldo nutritivo crecen abundantemente formando un anillo y un sedimento de color verde azulado. En agar simple forman colonias brillantes, confluentes, de borde continuo y a veces ondulado con un centro opaco. El pigmento se difunde en el medio dándole una tonalidad azulverdosa (Figura 19). Este pigmento tiene cualidades bactericidas sobre otras bacterias Gram positivas y Gram negativas. Otras características que tienden a ser asociadas con las especies de Pseudomona incluye la secreción de pioverdina (fluoresceina), un sideróforo fluorescente de color amarillo verdoso. Algunas especies pueden producir otros sideróforos, tales como la piocianina por Pseudomona aeruginosa y tioquinolobactina por Pseudomona fluorescens. http://es.wikipedia.org/wiki/Bacilo http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria_Gram_negativa http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria_Gram_negativa http://es.wikipedia.org/wiki/Oxidasa http://es.wikipedia.org/wiki/Catalasa http://es.wikipedia.org/wiki/Aer%C3%B3bico http://es.wikipedia.org/wiki/Catabolismo http://es.wikipedia.org/wiki/Gl%C3%BAcido http://es.wikipedia.org/wiki/Ruta_de_Etner-Doudoroff http://es.wikipedia.org/wiki/Ciclo_de_los_%C3%A1cidos_tricarbox%C3%ADlicos http://es.wikipedia.org/wiki/Ciclo_de_los_%C3%A1cidos_tricarbox%C3%ADlicos http://es.wikipedia.org/wiki/Psicr%C3%B3filo http://es.wikipedia.org/wiki/Sider%C3%B3foro http://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa http://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_del_indolhttp://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Rojo_de_metileno&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Rojo_de_metileno&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Voges_Proskauer&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Pl%C3%A1smido http://es.wikipedia.org/wiki/Espora http://es.wikipedia.org/wiki/Flagelo http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A1psula_(microbiolog%C3%ADa) http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Exopolisac%C3%A1rido&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Adhesi%C3%B3n_celular http://es.wikipedia.org/wiki/Biopel%C3%ADcula http://es.wikipedia.org/wiki/Fagocitosis http://es.wikipedia.org/wiki/Anticuerpo http://es.wikipedia.org/wiki/Complemento http://es.wikipedia.org/wiki/Patogenicidad http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Fluorescein&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Fluorescencia http://es.wikipedia.org/wiki/Pseudomonas_aeruginosa http://es.wikipedia.org/wiki/Pseudomonas_fluorescens Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 46 Figura 19: Desarrollo de Pseudomona aeruginosa en agar sangre. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. El género Pseudomona tiene una notable capacidad de adherirse a superficies húmedas (p. ej., conductos de agua) formando biocapas, y se diseminan dando lugar a brotes epidémicos en Unidades Hospitalarias (48). En los catéteres venosos centrales se ha encontrado una alta incidencia de Pseudomona aeruginosa (12.82%). La epidemiología de la infección es bastante típica por tratarse un germen que se transmite en ambientes húmedos y en este aspecto tiene importancia la manipulación de catéteres venosos por el personal sanitario. Se trata de un germen nosocomial que produce infecciones oportunistas y bacteriemia severa. Debido a su amplia distribución en la naturaleza, las Pseudomonadaceae fueron observadas en los inicios históricos de la microbiología. Las especies del género Pseudomona son organismos ubicuos, que se encuadran dentro del grupo de las proteobacterias. Se han aislado bacterias de este género tanto en suelos limpios como en suelos contaminados por productos biogénicos y xenobióticos. También son microbiota predominante en la rizoesfera y en la filoesfera de plantas; del mismo modo se han aislado de ambientes acuáticos. El nombre genérico Pseudomona creado para estos organismos estaba definido en términos relativamente vagos en 1894: bacilos gram negativos con flagelo polar. Las pseudomonadaceae eran aisladas de un variado número de nichos ecológicos de modo que un gran número de especies recibían el nombre del género. Nuevas técnicas metodológícas y la aparición de abordajes basados en los estudios de macromoléculas conservadas entre diversos organismos, han reclasificado a muchas especies. Las cepas del género Pseudomona son capaces http://es.wikipedia.org/wiki/Pseudomonadaceae http://es.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9nero_(biolog%C3%ADa) http://es.wikipedia.org/wiki/Proteobacteria http://es.wikipedia.org/wiki/Xenobi%C3%B3tico http://es.wikipedia.org/wiki/Rizosfera http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Filosfera&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/1894 http://es.wikipedia.org/wiki/Flagelo http://es.wikipedia.org/wiki/Nicho_ecol%C3%B3gico http://es.wikipedia.org/wiki/Nicho_ecol%C3%B3gico Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 47 de procesar, integrar y reaccionar a una amplia variedad de condiciones cambiantes en el medio ambiente y muestran una alta capacidad de reacción a señales físico-químicas y biológicas. Se han descrito cepas capaces de adquirir resistencia a metales pesados, disolventes orgánicos y detergentes, lo cual les permite explotar una amplia gama de fuentes de carbono como nutrientes, así como colonizar ambientes y nichos que difícilmente son colonizables por otros microorganismos. Por ello no es sorprendente que se considere a las bacterias del género Pseudomona un paradigma de versatilidad metabólica. La incidencia de Pseudomona aeruginosa se ha incrementado y se la considera un patógeno oportunista emergente con relevancia clínica. Varios estudios epidemiológicos indican que está en aumento la resistencia a antibióticos del germen (49). Los factores de virulencia de la estructura celular incluyen antígenos somáticos O y flagelares H, fimbrias y cápsula de polisacáridos. Producen enzimas extracelulares como elastasas, proteasas y dos hemolisinas: fosfolipasa C (termolábil) y un lipopolisacárido (termoestable). La exotoxina A bloquea la síntesis de proteínas y es responsable de la necrosis tisular. P. aeruginosa es un patógeno oportunista humano, comúnmente afecta a los pacientes inmunodeficientes, con fibrosis quística o SIDA. Las infecciones por el gérmen afectan a muchas partes del cuerpo, en especial causa el 50 % de la pulmonía bacteriana nosocomial. ESCHERICHIA COLI Escherichia coli es un bacilo gramnegativo, anaeróbio facultativo, móvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) (Figura 20), no forma esporas, a veces tienen cápsula, es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa. http://es.wikipedia.org/wiki/Medio_ambiente http://es.wikipedia.org/wiki/Resistencia http://es.wikipedia.org/wiki/Metal_pesado http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Versatilidad_metab%C3%B3lica&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Epidemiolog%C3%ADa http://es.wikipedia.org/wiki/Resistencia_antibi%C3%B3tica http://es.wikipedia.org/wiki/Polisac%C3%A1rido http://es.wikipedia.org/wiki/Enzima http://es.wikipedia.org/wiki/Elastasa http://es.wikipedia.org/wiki/Proteasa http://es.wikipedia.org/wiki/Hemolisina http://es.wikipedia.org/wiki/Fosfolipasa http://es.wikipedia.org/wiki/Lipopolisac%C3%A1rido http://es.wikipedia.org/wiki/S%C3%ADntesis http://es.wikipedia.org/wiki/Necrosis http://es.wikipedia.org/wiki/Pseudomonas_aeruginosa http://es.wikipedia.org/wiki/Fibrosis_qu%C3%ADstica http://es.wikipedia.org/wiki/SIDA http://es.wikipedia.org/wiki/Pulmon%C3%ADa http://es.wikipedia.org/wiki/Nosocomio http://es.wikipedia.org/wiki/Gramnegativo http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Anaer%C3%B3bico_facultativo&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Flagelo http://es.wikipedia.org/wiki/Espora http://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa http://es.wikipedia.org/wiki/Lactosa Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 48 Figura 20: E. coli al microscopio electrónico. Se observan fimbrias y flagelos. Fuente: wikipedia Son catalasa positiva y oxidasa negativa. Posee fimbrias que se identifican como una estructura necesaria para que se produzca la adherencia de E. coli a superficies abióticas. En condiciones de crecimiento estático, las fimbrias permiten una interacción estable entre la bacteria y diversas superficies, incluyendo poliestireno y policarbonato. La adherencia estable es un prerrequisito para la formación de biocapa en estas superficies. La estructura antigénica es muy compleja con 55 antígenos somáticos O termoestables, más de 5 antígenos K termolábiles y más de 21 antígenos H. El antígeno O se encuentra en las unidades repetitivas de lipopolisacáridos de la membrana exterior de la pared celular. El antígeno H es proteína flagelar, el antígeno K es la cápsula de polisacáridos que se encuentra en algunas cepas. En resumen, al microscopio óptico con tinción gram, E. coli, se observa en forma de bacilos rectos cortos y de color rosado como correspònde a un germen gram negativo (Figura 21). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 49 Figura 21: E. coli al microcopio óptico. Fuente: Enciclopedia Wikipedia. En medios sólidos forma colonias lisas, convexas, circulares, no viscosas, de bordes bien definidos. No es exigente nutricionalmente. Crecen sobre peptona (extracto de carne). Son anerobios facultativos, fermentadores de glucosa y de lactosa (Figura 22). Figura 22: E.coli. Lactosa positivo. Fuente: http://www.socalemi.org/atlasmicrobiologia/e_coli/jpghttp://www.socalemi.org/atlasmicrobiologia/e_coli_lac_pos_recuento_intermedio.JPG Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 50 Escherichia coli (E. coli) es quizás el organismo procariote más estudiado, se trata de una bacteria que se encuentra generalmente en los intestinos. Fue descrita por primera vez en 1885 por Theodor von Escherich, bacteriólogo alemán, quién la denominó Bacterium coli. Posteriormente la taxonomía le adjudicó el nombre de Escherichia coli, en honor a su descubridor. Ésta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto del proceso digestivo, además produce vitaminas B y K. Es el principal organismo anaerobio facultativo del sistema digestivo. En individuos sanos, es decir, si la bacteria no adquiere elementos genéticos que codifiquen factores virulentos, actúa como un comensal formando parte de la flora intestinal y ayudando así a la absorción de nutrientes. Escherichia coli causa entre el 70 y el 95% de las infecciones de las vías urinarias. Estas infecciones son especialmente frecuentes en pacientes con sonda vesical debido a la adherencia del microorganismo sobre la superficie de la sonda (50;23). Se ha observado que los genes involucrados en la quimiotaxis y la movilidad flagelar tienen un papel importante en la colonización de la sonda vesical. E, coli es nefropatógena por medio de la producción de una nefrotoxina. Produce además infecciones de las vias biliares y de la cavidad abdominal (peritonitis). En la Figura 23 se muestran las características de E. coli al microscopio electrónico. Figura 23: Microfotografía electrónica de E. Coli. Fuente: Enciclopedia Wikipedia http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria http://es.wikipedia.org/wiki/1885 http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Theodore_von_Escherich&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Vitamina http://es.wikipedia.org/wiki/Vitamina_B http://es.wikipedia.org/wiki/Vitamina_K http://es.wikipedia.org/wiki/Anaerobio_facultativo http://es.wikipedia.org/wiki/Sistema_digestivo http://es.wikipedia.org/wiki/Gen http://es.wikipedia.org/wiki/Comensal http://es.wikipedia.org/wiki/Flora_intestinal http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Absorci%C3%B3n_de_nutrientes&action=edit&redlink=1 Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 51 KLEBSIELLA PNEUMONIAE Klebsiella pneumoniae es la especie de mayor relevancia clínica dentro del género bacteriano Klebsiella, compuesto por bacterias gramnegativas de la familia Enterobacteriaceae, que desempeñan un importante papel como causa de enfermedades infecciosas oportunistas. El género fue llamado así en honor a Edwin Klebs, un microbiólogo alemán de finales del siglo XIX. El bacilo ahora conocido como Klebsiella pneumoniae también fue descrito por Karl Friedländer y durante muchos años se conoció como el «bacilo de Friedländer». Los factores de virulencia de Klebsiella pneumoniae están en las fimbrias y algunas cepas producen una enterotoxina. Sin embargo, las especies de Klebsiella son consideradas de baja virulencia, que aumenta notablemente en pacientes disminuidos en sus defensas. Los microorganismos del género Klebsiella son bacilos inmóviles en forma de bastoncillos. El género Klebsiella está formado por varias especies, entre las que se encuentran K. pneumoniae, K. ozaenae, K. oxytoca, K. planticola y K. terrigena. La capa más externa de Klebsiella está formada por una gran cápsula de polisacáridos que diferencia a estos microorganismos de otros géneros de esta familia. La presencia de cápsula, le confiere la propiedad de producir colonias muy mucosas (Figura 24). Aproximadamente el 60 % de los microorganismos del género Klebsiella aislados en muestras de heces y otras muestras clínicas son K. pneumoniae y dan positivo en la prueba de coliformes termotolerantes. Klebsiella oxytoca también se ha identificado como microorganismo patógeno. La asimilación y la fermentación de la lactosa se puede observar en el medio Kligler, donde son positivos, desprenden gas y en la fermentación acetónica o prueba de Voges Proskauer son positivos. En la prueba de indol, K. pneumoniae es negativa y K. oxytoca es positiva. En la prueba de urea ambas especies dan positivo. Por último, sus condiciones óptimas de cultivo son agar nutritivo a 37 ºC con pH de 7.0. Las colonias son circulares, convexas, grandes y muy mucoides y tienden a entrar en coalescencia tras la incubación prolongada (Figura 24). http://es.wikipedia.org/wiki/Especie http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria_Gram_negativa http://es.wikipedia.org/wiki/Edwin_Klebs http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Karl_Friedl%C3%A4nder&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Medio_Kligler&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Medio_Kligler&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Prueba_de_Voges_Proskauer&action=edit&redlink=1 http://es.wikipedia.org/wiki/Agar-Agar Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 52 Figura 24: Desarrollo de Klebsiella pneumoniae. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas Se trata de un germen que coloniza el tubo gastrointestinal de huéspedes normales y que produce infecciones graves con bacteriemia en alcohólicos y personas debilitadas. El agua y los aerosoles contaminados pueden ser fuentes de estos microorganismos en ambientes hospitalarios (51). Klebsiella spp está presente de forma natural en muchos ambientes acuáticos y puede multiplicarse y alcanzar concentraciones elevadas en aguas ricas en nutrientes, como residuos de fábricas de papel, plantas textiles y factorías procesadoras de caña de azúcar. Estos microorganismos pueden proliferar en sistemas de distribución de agua, y se sabe que colonizan las arandelas de los grifos. Las especies del género Klebsiella se encuentran también en el aparato urogenital y en la mucosa de la nasofaringe del hombre. Klebsiella pneumoniae desarrolla bien en el ambiente y puede cultivarse de la tierra, agua y verduras. De hecho, esta demostrado que las ensaladas crudas pueden transportar al germen. (53) También son excretadas en las heces de animales sanos y se detectan con facilidad en aguas residuales. Klebsiella pneumoniae se encontró en forma significativa en catéteres venosos y urinarios. Se ha detectado Klebsiella en pacientes hospitalizados, estando la transmisión asociada con la manipulación frecuente de los pacientes (por ejemplo en las Unidades de Cuidados Intensivos). Quienes se exponen a un riesgo mayor son las personas con sistemas inmunitarios poco activos, como las personas ancianas o muy jóvenes, los pacientes con quemaduras o heridas extensas, los que están siendo sometidos a tratamientos inmunodepresores o los infectados por VIH. La colonización puede dar lugar a infecciones invasivas. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 53 En raras ocasiones Klebsiella y en particular K. pneumoniae y K. oxytoca, pueden causar infecciones graves, como neumonía destructiva. Causa alrededor del 1% de las neumonías bacterianas, en ocasiones provoca infección del aparato urinario y bacteriemia a partir de lesiones focales en pacientes debilitados que pueden terminar con la vida del mismo (52). Algunas de las complicaciones más frecuentes son el absceso pulmonar y el empiema. El diagnóstico definitivo lo obtenemos a partir del cultivo de muestras obtenidas de las mucosas del tracto respiratorio superior. El tratamiento de elección consiste en la asociación de una cefalosporina de tercera generación (cefotaxima, ceftriaxona) y un aminoglucósido (gentamicina). K. pneumoniae ocupa el segundo lugar después de E. coli como patógeno del tracto urinario. Es común la colonización e infección de catéteres urinarios, venosos y endotraqueales por Klebsiella. CANDIDA Candida es un género de levaduras de forma oval, que produce un pseudomicelio en cultivo. El aspecto deCándida albicans en el frotis es característico, es una levadura gram positiva en gemación, que mide de 2 a 3 por 4 a 6 micrómetros y también como células gram positivas alargadas en gemación semejantes a hifas (pseudohifas) (Figura 25). Figura 25: Frotis de Cándida albicans. Fuente: http:// wikipedia.org/candida _albicans.jpg Al microscopio electrónico C. albicans tiene un aspecto en forma de bastones y algunas colonias tienen forma esférica (Figura 26) http://es.wikipedia.org/wiki/Absceso_pulmonar http://es.wikipedia.org/wiki/Empiema http://es.wikipedia.org/wiki/Cefalosporina http://es.wikipedia.org/wiki/Cefotaxima http://es.wikipedia.org/wiki/Ceftriaxona http://es.wikipedia.org/wiki/Aminogluc%C3%B3sido http://es.wikipedia.org/wiki/Gentamicina http://es.wikipedia.org/wiki/Levadura http://es.wikipedia.org/wiki/Archivo:Candida_albicans.jpg Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 54 Figura 26: C. Albicans al microscopio electrónico. Fuente: http:// wikipedia.org/candida _albicans.jpg El crecimiento de Candida in vitro, en agar de Sabouraud incubado a temperatura ambiente, desarrolla colonías blandas grandes, redondas, color blanco o crema que tienen olor a levadura (albicans en latín significa 'blancuzco') (Figura 27). Figura 27: Cultivo de Cándida albicans en agar. Fuente: Laboratorio Hospital de Clínicas. http://es.wikipedia.org/wiki/Lat%C3%ADn Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 55 Cándida albicans fermenta la glucosa y la maltosa, produciendo ácido y gas, genera ácido de la sacarosa y no desdobla la lactosa. Estas fermentaciones de los carbohidratos junto con las características morfológicas y de las colonias, distinguen a C.albicans de otras especies de Cándida. Cándida es miembro de la flora normal de las mucosas en los aparatos respiratorio, digestivo y genital femenino. En tales lugares puede ganar dominio y relacionarse con otras enfermedades. Algunas veces produce enfermedad general progresiva en enfermos debilitados o con inmunosupresión, especialmente si hay trastornos en la inmunidad mediada por células. Cándida puede producir infección en la sangre, tromboflebitis, endocarditis o infección en los ojos y otros órganos cuando es introducida por vía intravenosa (catéteres, agujas, hiperalimentación, tóxicomanía, etc) Clínicamente, la especie más significativa del género es Candida albicans, causante de numerosas infecciones fúngicas (candidiasis) en humanos, especialmente en pacientes con inmunosupresión y en pacientes diabéticos (54). La colonización del tracto gastrointestinal por C. albicans puede resultar debido a la ingesta de antiácidos. La candiadisis es una enfermedad que se caracteriza por la presencia de placas algodonosas blanquecinas especialmente localizadas en las mucosas (56). La infección más común por Candida Famata es la candidiasis oral por dentaduras postizas, especialmente en ancianos. En UCI de neonatos también puede causar bacteriemia Candida parapsilosis (55) PREVENCION Y PROFILAXIS DE LAS INFECCIONES POR CATETER Las estrategias para la Seguridad del paciente, derfinidas por la OMS, se centran en los siguientes aspectos (67): • Diferenciar medicamentos. • Identificar pacientes. • Comunicar el traspaso de pacientes. • Realizar el procedimiento correcto en el lugar del cuerpo correcto. • Controlar las soluciones concentradas de electrólitos. • Asegurar la precisión de la medicación en las transiciones asistenciales. • Evitar los errores de conexión de catéteres y tubos. • Usar una sola vez los dispositivos de inyección. • Mejorar la higiene de las manos para prevenir las infecciones asociadas a la atención de salud. http://es.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9nero_(biolog%C3%ADa) http://es.wikipedia.org/wiki/Candida_albicans http://es.wikipedia.org/wiki/Candidiasis http://es.wikipedia.org/wiki/Humano http://es.wikipedia.org/wiki/Inmunosupresi%C3%B3n http://es.wikipedia.org/wiki/Tracto_gastrointestinal http://es.wikipedia.org/wiki/Candida_albicans http://es.wikipedia.org/wiki/Pr%C3%B3tesis_removible_de_resina http://es.wikipedia.org/wiki/Pr%C3%B3tesis_removible_de_resina Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 56 Entrenamiento de personal Las enfermeras tienen que estar especializadas y entrenadas en colocar y mantener los catéteres venosos y urinarios. Para ello deben disponer de protocolos exhaustivos sobre la inserción y mantenimiento de los catéteres y mantener una formación continua con énfasis en cateterismo venoso central. Este tipo de formación es muy importante para reducir las infecciones relacionadas con los catéteres intravasculares (57). En resumen el entrenamiento para reducir riesgo de contaminación de los catéteres se basará en: higiene de manos y técnica aséptica, detectar signos y sintomas de infeccion, mandar a cultivo la punta de catéter, cuidados en el sitio de inserción, cuidados con los equipos de administración, manejo adecuado de líquidos parenterales y frascos multidosis y efectuar hemocultivos. Existen estudios que demuestran que una estrategia educativa reduce significativamente la incidencia de infecciones relacionadas con los catéteres (58). Lavado de manos La infección cruzada de los pacientes por el personal sanitario con las manos contaminadas es una causa muy importante de infecciones. A pesar de esfuerzos educativos, el personal sanitario incluyendo médicos todavía no se adhiere a los estándares de higiene de las manos que se considera universalmente como el método más importante para el control de las infecciones. Las dificultades para el cumplimiento incluyen pocas facilidades hospitalarias, normas poco prácticas e insuficiente compromiso del personal encargado del control de infecciones. El adecuado lavado de manos solo tiene una adherencia de 40% en el equipo de salud. Para mejorar esta cifra no basta distribuir las normas además hay que hacer posters, circuitos televisivos cerrados en los hospitales, construir más lavamanos y mayor disponibilidad de soluciones de alcohol en gel. Colectivamente estas medidas aumentan la adherencia a la higiene de manos hasta 82%. Destacar que el uso de soluciones antisépticas con alcohol gel con el fin de favorecer el lavado de manos, es una estrategia más práctica que lavarse las manos solamente y ha mejorado la adherencia del personal sanitario a las normas de higiene de las manos, que resulto en una mejor prevención de la transmisión de varios gérmenes. Las guías enfatizan el uso de soluciones antisépticas sin agua y con alcohol para descontaminar las manos antes y después de cualquier contacto con la piel intacta de los pacientes. De cualquier manera y por su menor costo se ha dado énfasis a la prevención de estas infecciones mediante la elaboración de normas y guías para la prevención de estas complicaciones con procedimientos simples como el cuidadoso lavado de las manos o el empleo de soluciones de alcohol gel. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 57 Inserción y mantenimiento de los catéteres En base al conocimiento mencionado de la microbiota es una norma que al momento de la inserción de un catéter deban eliminarse químicamente estos gérmenes, cumpliendo todas las medidas de asepsia establecidas según las normas de higiene y epidemiología, en el entendido que dichos microorganismos pueden ser la causa de graves infecciones a través del empleo de catéteres. La Inserción de un catéter venoso o urinario debe efectuarse con las máximas condiciones de asepsia, incluyendo el empleo de guantes estériles. En caso de CVC empleo obligatorio de gorro y mascarilla en la inserción y manipulación, también mascarilla para el enfermo. Se usarán catéteres provenientes de envases estériles sellados. En caso de necesidad los catéteres serán desinfectados con solución alcohólica de clorhexidina al 2% o soluciones yodadas. Recientes estudios de metaanálisis han demostrado que las solucionesque contienen clorhexidina son superiores a los yodóforos en la prevención de la colonización de los catéteres intravasculares y más importante aún, en la prevención de la BRC. (59) La fijación más adecuada de un catéter venoso es hacer un lazo con hilo de sutura en la piel próxima a la salida del catéter. Los catéteres deben quedar muy bien fijados para impedir la movilización del catéter entorno al punto de inserción. Se evitará la fijación del catéter con material adherente sobretodo directamente sobre el punto de punción y la conexión que va unida al equipo de infusión, porque al retirar esta fijación, queda una superficie impregnada de una sustancia adherente que facilita la colonización. La utilización de pomadas (polimixina, neomicina, bacitracina) en el punto de inserción puede significar un aumento de la infección por Candida spp. Algunos estudios han demostrado la eficacia de la utilización de gel de povidona o de clorhexidina, aplicada bajo el apósito de gasa, en la reducción de la infección asociada al catéter. (60) Es imprescindible comprobar la correcta localización del CVC. Antes de utilizar el sistema es recomendable hacer una radiografía simple de tórax, observar el trayecto del catéter y la ubicación de la punta del catéter a la altura de la vena cava superior. De ser posible usar catéteres de una luz, a menos que un catéter multilumen sea esencial para el manejo del paciente. Minimizar la utilización de vías venosas centrales para la recogida de muestras de sangre, tanto por el riesgo que significa la manipulación, como por los posibles restos de sangre que aumenta el riesgo de obstrucción e infección. Existen en el mercado sistemas de protección de la conexión y también nuevos diseños de conectores que actualmente se están sometiendo a estudios clínicos controlados. En los CVC de corta duración está indicada la profilaxis antibiótica en pacientes considerados de alto riesgo, especialmente immunodeprimidos. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 58 Como norma se hará curación del sitio de punción y cambio de apósitos dos veces por semana o en cualquier momento si los apósitos estan sucios o mojados. Cambio de los equipos de infusión dos veces por semana. Cuando se retire un catéter para cultivo usar guantes estériles y en este caso otra persona retirará el apósito. Se retirará por necesidad un catéter si hay sospecha de bacteriemia o signos de infección local como cultivos superficiales positivos, tromboflebitis o supuración del orificio cutáneo. Es importante conocer la etiopatogenia de la BRC porque se trata de una enfermedad iatrogénica y por tanto la prevención depende del conocimiento preciso de los mecanismos que la producen y de la adopción de las medidas apropiadas. Se dará énfasis en las siguientes medidas preventivas (61): Evitar tiempos prolongados de permanencia del catéter. Extremar las medidas de asepsia al momento de inserción. Supervisar cuidados del catéter y sus conexiones. Vigilar lavado de manos y empleo de soluciones antisépticas en el personal sanitario que manipula los catéteres. Para la inserción de un catéter urinario se deberan seguir las siguientes recomendaciones (68): El pèrsonal a cargo estará entrenado en la colocación de catéteres urinarios. Minucioso lavado de manos antes y después de la inserción. Higiene perineal y del meato urinario con soluciones antisépticas. Si se emplean lubricantes deben ser del tipo descartable unidosis. Técnica rigurosamente aséptica con guantes y campos estériles. El cuidado de la sonda vesical (Foley) consiste en limpieza diaria con agua y jabón de la sonda y de la zona uretral. En caso de sonda permanente, se cambiará cada semana. No es recomendable el uso de ungüentos antibióticos alrededor de la sonda porque no esta demostrada su eficacia. (62) Catéteres modificados Entre las medidas preventivas se dará énfasis a las actividades dirigidas a disminuir o evitar la formación de la biocapa mediante el empleo de desinfectantes. Como agente desinfectante en los catéteres venosos centrales se demostró que el gluconato de clorhexidina es eficaz. También se han utilizado catéteres impregnados en minociclina y rifampicina. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 59 El desarrollo de catéteres recubiertos de antibióticos o que llevan el antibiótico incorporado dentro del propio material del catéter, mejoró sustancialmente el control de las infecciones. Los catéteres recubiertos con antisépticos (clorhexidina o sulfadiazina argéntica) tienen menor incidencia de contaminación (63). Muchos de los trabajos que presentan tasas altas de recurrencia y ausencia de erradicación de la contaminación del catéter no han tenido en cuenta la necesidad de asociar un tratamiento local del catéter al tratamiento general de la bacteriemia. Para lograr el objetivo de un máximo contacto entre el interior del catéter infectado y el antibiótico se puede optar por dos estrategias: La primera consiste en efectuar una perfusión contínua del antibiótico a través del catéter. Este método tiene el inconveniente que facilita el arrastre de microorganismos hacia la circulación sistémica, además de la complejidad que intrínsecamente comporta una perfusión continua. La segunda estrategia es la mencionada anteriormente, que se conoce como técnica del antibiotic lock (64). Consiste en instilar una solución con concentración antibiótica elevada al interior del catéter de forma periódica e intermitente mientras el catéter no está en uso. Esta técnica tiene las ventajas de facilitar una concentración antibiótica local alta sin toxicidades sistémicas, da libertad de movimientos al paciente y puede realizarse fácilmente de forma ambulatoria. El antibiotic lock ha demostrado ser una técnica útil en la esterilización de catéteres infectados en múltiples situaciones clínicas. La solución puede hacerse con suero fisiológico o con heparina. La vancomicina en solución con heparina sódica al 5% no precipita y es el antibiótico más utilizado (66). PRUEBAS BIOQUIMICAS. A continuación se describen los aspectos básicos de cada prueba, de la batería bioquímica empleada habitualmente, en el Laboratorio de Bacteriología del Hospital de Clínicas de la ciudad de La Paz (71). Prueba de la catalasa Comprueba la presencia de la enzima catalasa que se encuentra en la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas que contienen citocromo, la excepción principal es el género Streptococcus. La enzima catalasa convierte el peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua. La liberación de oxígeno se observa por la formación de burbujas. Diferencia Streptococcus (prueba negativa) de Staphylococcus (prueba positiva). (Figura 28). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 60 Figura 28: Prueba de la catalasa en placa. Fuente: http:// quimicoclinico.wordpress.com.org PRUEBA DE LA COAGULASA La prueba permite comprobar la facultad de un organismo de coagular el plasma por acción de la enzima coagulasa; se utiliza de manera específica en la diferenciación de especies pertenecientes al género Staphylococcus. La coagulasa convierte el fibrinógeno en fibrina formando un coágulo visible (Figura 29), que sirve para diferenciar al Staphylococcus aureus (coagulasa positivo) de otras especies del género Staphylococcus. Figura 29: Prueba de la coagulasa. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 61 PRUEBA DE LA NOVOBIOCINA Consiste en someter cultivos de Staphylococcus a la novobiocina, observando la presencia de un halo de inhibición o resistencia alrededor del disco antibiótico. En concentraciones estándar de novobiocina, se inhibe el desarrollo de. Staphylococcus saprophyticus (Figura 30). La prueba es positiva, si el halo de inhibición es menor a 16 milímetros indicando que se trata de Staphylococcussaprophyticus. En cambio la prueba es negativa si el halo es mayor a 16 milímetros, se tratará de otros Staphylococcus. Figura 30: Prueba de la Novobiocina. Fuente: Hardy Diagnostic Laboratorios 2002. PRUEBA DE LA OPTOQUINA La optoquina es un compuesto químico (clorhidrato de etilhidrocupreína), impregnado en discos de papel filtro a una concentración de 5 microgramos que inhibe el crecimiento de Streptococcus pneumoniae. Es completamente soluble en agua y se difunde rápidamente en el medio. Las colonias de Streptococcus pneumoniae alrededor del disco son lisadas debido a cambios de tensión superficial, produciendo una zona de inhibición (Figura 31). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 62 Figura 31: Prueba de la Optoquina. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas PRUEBA DE LA MOTILIDAD La motilidad de muchas bacterias, debido a que poseen flagelos, es puesta en evidencia utilizando agar blando (0.4% de agar o menos). Se realiza empleando el medio de manitol que presenta 3,5 gr/lt de agar. Las bacterias móviles producen enturbamiento (Figura 32). Las Enterobacterias tienen movlidad positiva excepto Klebsiella. Figura 32: Prueba de la Motilidad. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 63 PRUEBA BIOQUIMICA DE TSI La capacidad que tienen las enterobacterias de fermentar: glucosa, sacarosa y/o lactosa, se pone en evidencia por la presencia del indicador rojo fenol; también se evidenciará la capacidad de formar sulfuro de hidrógeno a partir de la reducción del tiosulfato y la producción de gas o no a partir de la fermentación de la glucosa (Figura 33). Figura 33: Prueba de TSI. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas La prueba es muy útil para Enterobacterias, y se utiliza como control a Escherichia coli, que muestra A/A, gas positivo y sulfuro de hidrógeno negativo. La prueba para E. coli se asemeja al tubo del extremo izquierdo de la figura 33. PRUEBA AGAR LISINA HIERRO (LIA) Pone en evidencia la descarboxilación de la lisina o su desaminación, además la producción de ácido sulfhídrico. En las primeras horas se degrada la glucosa que contiene el medio y este se ácidifica; pero al descarboxilarse la lisina se libera CO2, que alcaliniza de nuevo el medio, este queda de color violeta debido al indicador Púrpura de Bronocresol (Figura 34). Por otro lado la desaminación se detecta cuando se forma un complejo rojo vino con el indicador (en el pico). La formación de H2S se detecta a partir de aminoácidos del medio y tiosulfato, siendo la fuente de Fe, sales de hierro presentes también en el medio. Para la lectura, el color violeta es positivo indicando que hubo descarboxilación de lisina y el color amarillo es negativo. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 64 Figura 34: Prueba de la LIA. Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas PRUEBA UREASA Muchos microorganismos poseen la enzima Ureasa que a partir de la Urea producen Amoniaco. La presencia del indicador rojo Fenol nos permite al tornarse rojo/rosado la alcalinización del medio. Los microorganismos altamente productores de ureasa pueden dar positivo a las 3 horas de incubación, algunos requieren hasta 3 días. La lectura sería en caldo urea: color rojo, reacción positiva; amarillo reacción negativa. En agar urea: color rojo en todo el tubo, reacción positiva; color rojo solo en el pico, reacción positiva (productores débiles); color amarillo, reacción negativa (Figura 35). Figura 35: Prueba de la Ureasa. Fuente: http:// quimicoclinico.wordpress.com.org Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 65 PRUEBA CITRATO El citrato de Sodio, es un compuesto orgánico simple encontrado como uno de los metabolitos del ciclo de Krebs. Algunas bacterias pueden utilizarlo como única fuente de carbono. Esta prueba detecta la formación de productos alcalinos. El medio contiene además Fosfato de Amonio, así como la producción de Amonio que alcaliniza el medio. El indicador azul de Bromotimol permite observar la alcalinización (Figura 36). Interpretación: Positivo viraje a azul. Negativo se mantiene verde. Figura 36: Prueba de Citrato. Fuente: http:// quimicoclinico.wordpress.com.org PRUEBA CALDO ROJO DE METILO Pone en evidencia la utilización de la glucosa. Es una prueba cuantitativa para revelar la producción de ácidos (láctico, acético y fórmico) según diferentes vías de fermentación. Por contener el indicador rojo de metilo (Rojo a pH 4.4 – Amarillo a pH 6.0) requiere la presencia de alta cantidad de ácidos para virar de color. Los microorganismos que producen bajas cantidades de ácidos requieren de 48 a 72 horas de incubación para dar positivo. Interpretación: El desarrollo de un color rojo estable en la superficie del medio indica suficiente formación de ácido para acidificar hasta pH 4.4 que indicará que la prueba es positiva. La presencia de color naranja o amarillo negativo (Figura 37). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 66 Fi gura 37: Prueba de Rojo de metilo. Fuente: http:// quimicoclinico.wordpress.com.org PRUEBA DE DESCARBOXILACION DE LA ORNITINA Mide la capacidad enzimática de un microorganismo para descarboxilar un aminoácido para formar una amina con la consiguiente alcalinidad. La descarboxilación es el proceso por el cual las bacterias que poseen enzimas descarboxilasas específicas son capaces de atacar a los aminoácidos en su grupo carboxilo, dando una amina o una diamina y anhídrido carbónico. Las enzimas descarboxilasas son numerosas y cada una es específica para un sustrato determinado. Interpretación: El desarrollo de un color amarillo en el tubo control indica que el microorganismo es viable y que produjo la acidificación del medio por uso de glucosa. El color azul púrpura del tubo que contiene el aminácido indica una reacción positiva debido a la liberación de aminas por acción de la descarboxilasa. PRUEBA DEL INDOL Determina la capacidad de un organismo de desdoblar el indol de la molécula de triptófano. El triptófano es un aminoácido que puede ser oxidado por ciertas bacterias para formar tres metabolitos indólicos principales: indol, escatol e indol acético. Las bacterias con triptofanasa desaminan el triptófano y producen indol formando un aro rojo en la superficie del líquido. Interpretación: positivo, presencia de un anillo de color rojo en la superficie del caldo (Figura 38). Negativo la ausencia de color. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 67 Figura 38: Prueba del Indol. Fuente: Laboratorio del Hospital de Clínicas VOGES-PROSKAUER Determina la vía de fermentación del butanodiol. El desarrollo de un color rojo fucsia indica prueba positiva para Enterobacter aerogenes y la ausencia de color prueba negativa Escherichia coli (Figura 39). Fi gura 39: Prueba de Voges- Proskauer. Fuente: http:// quimicoclinico.wordpress.com.org Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 68 PRUEBA DEL MANITOL Existen bacterias que fermentan al manitol liberando productos ácidos los que son detectados por el indicador rojo de fenol que cambia a color amarillo (Figura 40). Manitol positivo Staphyococcus aureus; Manitol negativo Staphylococcus epidermidis y Proteus. Fi gura 40: Prueba del Manitol. Fuente: http:// quimicoclinico.wordpress.com.org REDUCCION DE NITRATOS Demuestra la capacidad de un microorganismo para reducir el nitrato en nitritos. Para ello se incorpora al medio manitol movilidad 1 gr/lt de potasio. Un cambio de color indica prueba positiva (Figura 41), las enterobacterias son nitrato negativas. Figura 41: Prueba de reducción de nitratos. Fuente: http:// Lab.Micobacterias.com.org Frecuencia de patógenos…….……Patricia Salazar Revollo 69 PRUEBA FENIL ALANINA Aminoacido que por desaminación forma acido fenil piruvico. Agregar cloruro férrico que forma un complejo de color verde con el acido fenil pirúvico (Figura 42). Prueba positiva para Proteus y negativa para Escherichia coli. Fi gura 42: Prueba de Fenil Alanina. Fuente: http:// quimicoclinico.wordpress.com.org PRUEBA DE LA OXIDASA Sirve para determinar la presencia de oxidasa. Los citocromos son proteínas que forman parte de algunas cadenas transportadoras de electrones, propias del metabolismo respiratorio. Determinar la presencia o ausencia de estas proteínas proporcionará información útil para la clasificación de grupos bacterianos. La prueba de citocromo c-oxidasa detecta la presencia de citocromo c en la bacteria. Se basa en la capacidad del colorante dihidrocloruro de tetratametil p- fenilendiamina al 1% de oxidarse al ceder electrones al citocromo c. En su estado reducido es incoloro pero en presencia de la citocromoxidasa del microorganismo y el oxígeno atmosférico se oxida formando el azul de indofenol. Interpretación: Positiva aparición de color rosado a morado e inclusive púrpura intenso. Negativa ausencia de color. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 70 MATERIAL Y METODOS Tipo de estudio El presente estudio es descriptivo, también llamado observacional. Se considera descriptivo porque menciona la frecuencia de catéteres contaminados por bacterias e identifica los gérmenes, sin intentar ninguna explicación de los hallazgos ni plantear ninguna hipótesis. En términos cronológicos es un estudio longitudinal que comienza con una primera fase retrospectiva que comprende el año 2006 y una fase prospectiva durante los años 2007 y 2008. Además describe algunas otras variables como el género, la edad y el diagnóstico clínico de los pacientes. Universo y Muestra En el presente trabajo no fue posible determinar el Universo de estudio entendido como la totalidad de pacientes del Hospital de Clínicas en quienes se implantaron catéteres durante 2006 a 2008, debido a que no se cuenta con esta información. Al no conocer el Universo no se determinaron datos estadísticos de tendencia central y de dispersión de la población, por tanto no fue posible determinar el tamaño de la muestra. Es por ello que se seleccionó como muestra la totalidad de estudios de cultivo de catéteres efectuados en el periodo de tiempo de la investigación y que asciende a un número de 162 cultivos bacterianos de catéteres efectuados entre 2006 y 2008. Los 162 catéteres se dividieron en 25 cultivos de catéteres urinarios y 137 catéteres venosos. CRITERIOS DE INCLUSIÓN Se aplicaron los siguientes criterios de inclusión en el estudio: Catéteres urinarios o venosos retirados y transportados según la técnica recomendada por el laboratorio del hospital. Todos los catéteres estudiados contaban con información completa requerida en el formulario de solicitud de cultivo de catéter. FORMULARIOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS Los datos de identificación y diagnóstico de los pacientes fueron recogidos en un formulario utilizado para este fin en el Laboratorio de Bacteriología del Hospital de Clínicas. Se consignan en el formulario: datos de identificación del paciente, unidad hospitalaria y diagnóstico clínico. (Anexo 1). En una primera fase se hizo un estudio retrospectivo de la gestión 2006 en base a los cuadernos de registro Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 71 del Laboratorio del Hospital de Clínicas. A partir de Marzo 2007 la postulante de la Tesis ya en funciones en el Laboratorio de Bacteriología del Hospital de Clínicas ejecutó la investigación mediante trabajo personalizado de las muestras de catéteres. Por tanto entre Marzo 2007 y Agosto 2008 se efectuó un estudio prospectivo. Métodos e Instrumentos para la recolección de datos. Existen diversas técnicas metodológicas para cultivo bacteriológico de catéteres y utilizar una u otra técnica depende fundamentalmente de los recursos humanos, económicos y de la estructura física del hospital. En el caso del Laboratorio del Hospital de Clínicas se sigue un procedimiento estandarizado que fue la base de la presente investigación y se describe en detalle en este apartado. Los pacientes que entraron en el estudio fueron portadores de un catéter urinario o de catéter venoso central o periférico. El tipo de catéter urinario estudiado fue la punta de una sonda de látex tipo Foley y los catéteres venosos fueron de polivinilio/polietileno y poliuretano. No se incluyeron ningún otro tipo de catéteres. MATERIALES Los materiales utilizados en la investigación fueron: Guantes de latex, gorro y barbijo. Viales de vidrio de 5 mililitros Tubos de ensayo de 5 cm. Hisopos de madera con torunda de algodón. Cajas Petri. Asas bacteriológicas de metal. Solución fisiológica. Reactivos ( baterías bioquímicas, tinciones) Caldos de cultivo. Medios de cultivo. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 72 METODOS Toma de muestra bacteriológica Las muestras fueron recolectadas en viales estériles de vidrio con una capacidad de 5 cc. Para tal efecto se envíaron los viales a los servicios hospitalarios con la instrucción de introducir en los mismos 3 centímetros de la punta del catéter y remisión inmediata de la muestra al Laboratorio. Se indicó que el corte de la punta del catéter y su manipulación se hicieran con las medidas de asepsia, vale decir empleando guantes estériles, barbijo y gorro. Se indicó expresamente desinfectar el instrumental utilizado. El vial con la punta de catéter, estuvo correctamente identificado y se acompañó de la solicitud de referencia, consignando: Nombre y apellido. Edad. Fecha Tipo de catéter. Servicio hospitalario. Diagnostico Observaciones referidas al tratamiento u otras. Siembra y Cultivo Las puntas de catéter fueron sembradas en placas de agar sangre como siembra primaria deslizando y haciendo rodar el catéter con una pinza estéril por todo el medio de cultivo (Técnica de Maki). Después de la siembra se guarda la punta del catéter en caldo cerebro corazón, como medio de enriquecimiento, incubado a 37º C para un eventual repique (resembrado). De acuerdo al germen encontrado se emplearon otros medios de cultivo específicos. En caso de cultivo positivo se hizo un extendido de las colonias encontradas para tinción Gram según técnica convencional y de acuerdo al resultado se definió como bacteria grampositiva o gramnegativa, para aplicar la batería bioquímica correspondiente. A las 48 - 72 horas se reportaron los resultados de los cultivos a los servicios hospitalarios remitentes. Técnica de cultivo de catéteres En el Laboratorio del Hospital de Clínicas se siguió un procedimiento estandarizado (Técnica de Maki) para el cultivo de la punta de catéteres, que fue la base de la presente investigación.Los pacientes incluidos en el estudio llevaban insertado un catéter urinario o venoso. El tipo de catéter urinario estudiado fue una sonda de látex tipo Foley y los catéteres venosos fueron de diverso tipo. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 73 En resumen la metodología empleada fue la siguiente: Recolección de la punta del catéter en viales estériles. Siembra primaria en agar sangre. Enriquecimiento de la muestra en caldo cerebro corazón (CCC.) para eventual repique. Incubación de la siembra primaria 24 horas a 37 ºC. Tinción Gram. Bioquimiotipificación. Repique del cultivo primario en medios específicos, cuando sea necesario. Incubación del repique 24 horas a 37 ºC. Observación y determinación de presencia o ausencia de UFC. Observación microscópica de las colonias. Resiembra en batería bioquímica según el gérmen. Incubación de los tubos de la batería bioquímica durante 24 horas a 37ºC en estufa de laboratorio. Interpretación delos resultados de la batería bioquímica. Realización de antibiograma si corresponde. Reporte de los resultados. Identificación Bacteriológica Como se mencionó, las bacterias se identificaron en los medios de cultivo en función del desarrollo bacteriano y la tinción gram; se aplicó la batería bioquímica específica para cada germen y por norma se efectuó antibiograma cuando el recuento bacteriano en el cultivo fue mayor a 15 UFC. En caso de cultivo positivo para hongos no se efectuó antibiograma. Según el género bacteriano, se realizó identificación mediante batería de pruebas bioquímicas para precisar género y especie, se utilizaron entre otras pruebas las siguientes (Figura 43): Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 74 Figura 43: Batería bioquímica para determinación de género y especie. Fuente: http:// wikipedia.org/candida _albicans.jpg Citrato. Urea. Motilidad-Indol. LIA (Lisine Iron Agar). TSI (triple sugar iron). MR-PV (rojo de metilo-Voger Poskauer). Ornitina. Coagulasa. Manitol salado. Nitritos. Azúcares: glucosa, manitol, lactosa, rafinosa, sacarosa, xilosa Oxidasa. Catalasa. Novobiocina. Optoquina. VARIABLES FUNDAMENTALES Las variables principales a estudiar según el problema y los objetivos fueron: • Cultivo bacteriano de los catéteres. Variable cualitativa. Resultado positivo o negativo. Se determina la presencia o ausencia de gérmenes en los cultivos efectuados. • Bacterias en los catéteres. Variable cualtitativa. Se determina mediante frecuencia (porcentaje) la presencia comparativa de cada uno de los gérmenes encontrados en los cultivos. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 75 Definición de variables fundamentales La variable cultivo bacteriano se define como la mayor o menor posibilidad de encontrar cultivos positivos en los catéteres de la muestra. La variable Bacterias en los catéteres se define como la mayor o menor posibilidad de encontrar determinada frecuencia de gérmenes en el cultivo bacteriano. Operacionalización de las variables fundamentales Para concretar o precisar el significado y alcance de las variables de estudio, la operacionalización de las variables es la siguiente: Variable Concepto Dimensiones Indicadores Cultivo bacteriano de los catéteres Mayor o menor posibilidad de encontrar cultivos positivos Cultivo positivo o Cultivo negativo Número de Unidades formadoras de colonias Bacterias en los catéteres Mayor o menor posibilidad de encontrar determinados gérmenes Clasificar el número de bacterias por especie y género Frecuencia porcentual de las bacterias encontradas. Tabla 2: Operativización de variables. Fuente propia. PROCESAMIENTO Y ANÁLISIS DE LA INFORMACIÓN Para el análisis estadístico se definió como muestra a la cifra de todas las solicitudes de cultivo de catéteres que llegaron al Laboratorio de Bacteriología del Hospital de Clínicas en el periodo 2006-2008. Por tanto la muestra no tiene ningún sesgo de intencionalidad y se trata de una muestra representativa aleatoria de pacientes del Hospital de Clínicas. Las fuentes de datos estadísticos fueron los formularios de solicitud de estudio de cultivo de catéteres (Anexo 1) y de informe de resultados bacteriológico (Anexo 2). Estos formularios son documentos que recogen de forma exhaustiva las características de género, edad y diagnóstico clínico, en el caso del formulario de solicitud. En el formulario de informe de resultados se consignan, en caso de cultivo positivo las características de la tinción gram y el género y especie de la bacteria identificada. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 76 Se establecieron como otras variables cualitativas secundarias el género y el diagnóstico clínico. Como variable cuantitativa se utilizó la edad de los pacientes. Para la tabulación de datos se empleo el programa de software la hoja de cálculo de Microsoft Excel 2007. Las variables cualitativas se analizaron por el método de las frecuencias relativas, proporciones o porcentajes. Para las variables cuantitativas se utilizo el promedio o media aritmética como medida de posición central. Como medida de dispersión de utilizó un desvio estándar para englobar el 68% de las variaciones de la muestra estudiada. Por tratarse de una investigación descriptiva no se emplearon pruebas de inferencia estadística. En resumen se aplicó estadística descriptiva, realizando un análisis univariado de cada uno de los factores de riesgo (edad, género, diagnóstico clínico) y análisis de frecuencias y porcentajes para los gérmenes encontrados. ASPECTOS ETICOS DE LA INVESTIGACION La presente investigación cumplió con los principios éticos cuidando que la información que se registre de los cultivos bacterianos e implicaciones no divulgue la identidad de los pacientes. La autora de la Tesis declara no tener conflicto de intereses relacionados con la investigación. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 77 RESULTADOS RESULTADOS DEMOGRAFICOS Y CLINICOS El análisis demográfico y clínico de los formularios de remisión de 162 muestras (puntas de catéter) permite plantear los siguientes resultados: Genero: 81 muestras correspondíeron a género femenino y 81 a género masculino. Proporcionalidad exacta de 50% que se dió en forma aleatoria. Edad Media: 33.06 años. Desvío estándar (DE) 7.06. Intervalo o rango 16 a 73 años. Diagnósticos clínicos: Los 10 diagnósticos de remisión por orden de frecuencia fueron: sepsis (17.89%), insuficiencia renal crónica (13.30%), coma (8.63%), peritonitis (7.39%), Infección de tracto urinario (7%), neoplasias (6.16%), quemaduras (4.31%), meningitis (4.31%), pancreatitis (4.31%) e hidrocefalia (4.31%). Sensibilidad diagnóstica: (cultivo positivo). Los diagnósticos más frecuentes fueron: sepsis 69%, infección del tracto urinario 66%. Tipos de catéteres: Según el tipo de catéter enviado (Gráfica 1) los mas frecuentes fueron: Catéteres urinarios 25 (15%); Venosos periféricos 63 (39%); Venosos centrales 74 (46%). GRAFICA 1 CATETERES URINARIOS, VENOSOS CENTRALES Y VENOSOS PERIFERICOS ESTUDIADOS EN EL PERIODO 2006 – 2008. LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA. HOSPITAL DE CLINICAS. LA PAZ - BOLIVIA Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Periodo: 2006 - 2008 Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 78 RESULTADOS BACTERIOLOGICOS En toda la serie de catetéres se encontraron 69 (43%) cultivos negativos y 93 (57%) cultivos positivos. (Gráfica 2). GRAFICA 2 TOTAL DE CATETERES ESTUDIADOS EN EL PERIODO 2006 – 2008. LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA. HOSPITAL DE CLINICAS. LA PAZ Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Periodo: 2006-2008 De 25 catéteres urinarios estudiados, 19 dieron cultivo positivo (76%), encontrándose con mayor frecuencia, entre otros, a los siguientes gérmenes: Escherichia coli (26.31%), Cándida spp (26.31%) y Staphylococcus epidermidis (15.78%) (Tabla 3; Gráfica 3). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 79 TABLA 3 GERMENES ENCONTRADOS EN CATETERES URINARIOS 2006- 2008. GERMENES Nro 2006 Nro 2007 Nro 2008 Nro 2009 Totales Escherichia co/i 3 2 5 26.31 Candida ssp 1 2 2 5 26.31 Staphylo Epidermidis 1 1 1 3 15.80 Enterococos * 2 2 10.53 Acinetobacter ** 1 1 2 10.53 Proteus mirabillis 1 1 5.26 S. coagulasa neg 1 1 5.26 Totales 7 8 4 19 100 Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Periodo: 2006 – 2008. GRAFICA 3. GERMENES ENCONTRADOS EN CATETERES URINARIOS. PERIODO 2006 – 2008. LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA. HOSPITAL DE CLINICAS LA PAZ Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Periodo: 2006 – 2008. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 80 De 63 catéteres venosos periféricos se encontraroncultivos positivos en 35 (55%), hallándose diversas especies bacterianas. El gérmen que se encontró con más frecuencia fue Staphylococcus aureus (20%). Le siguieron en orden de frecuencia Staphylococcus epidermidis. (14.28%) y Klebsiella pneumoniae (14.28%), Acinetobacter (8.57%), E. coli (8.57%), Entrobacter (8.57%) y otros gérmenes con una menor presentación. (Tabla 4 y Gráfica 4). TABLA 4 GERMENES ENCONTRADOS EN CATETERES VENOSOS PERIFERICOS GERMENES Nro 2006 Nro 2007 Nro 2008 TOTALES % S. aureus 5 1 1 7 20.00 S. epidermis 1 2 2 5 14.28 Klebsiella 4 1 5 14.28 Acinetobacter 2 1 3 8.57 E. co/i 3 3 8.57 Enterobacter 2 1 3 8.57 S. Viridans 2 2 5.71 K. Ocitoca 1 1 2.86 Aspergillus 1 1 2.86 S. coag. Neg 1 1 2.86 Burkordellia 1 1 2.86 Citrobacter 1 1 2.86 Candida ssp 1 1 2.86 Pseudomona 1 1 2.86 TOTALES 23 3 9 35 100 Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Periodo: 2006 – 2008. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 81 GRAFICA 4 GERMENES ENCONTRADOS EN CATETERES VENOSOS PERIFERICOS. PERIODO 2006 – 2008. LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA. HOSPITAL DE CLINICAS LA PAZ Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Periodo: 2006 – 2008. Del total de catéteres venosos centrales 39 (53%) dieron cultivo positivo; los gérmenes encontrados con mayor frecuencia fueron Staphylococcus epidermidis (25.42 %), Staphylococcus aureus (20.50 %) y Pseudomona aeruginosa (12.80 %). (Tabla 5 y Gráfica 5). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 82 TABLA 5 GÉRMENES ENCONTRADOS EN CATÉTERES VENOSOS CENTRALES GERMENES Nro 2006 Nro 2007 Nro 2008 TOTALES % S. epidermis 4 5 1 10 25.42 S. aureus 1 7 8 20.50 P.aeruginosa 1 4 5 12.80 E. co/i 2 2 5.12 Klebsiella 2 2 5.12 S.coag. neg. 1 1 2 5.12 S. Viridans 2 2 5.12 Acinetobacter 1 1 2.60 E. aerogenes 1 1 2.60 Enterob.. spp 1 1 2.60 S. maltophilia 1 1 2.60 Proteus mirabillis 1 1 2.60 Bacillus subtilis 1 1 2.60 Candida albicans 1 1 2.60 Candida ssp 1 1 2.60 Totales 12 25 2 39 100 Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Periodo: 2006-2008 Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 83 GRAFICA 5 GERMENES ENCONTRADOS EN CATETERES VENOSOS CENTRALES. PERIODO 2006 – 2008. LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA. HOSPITAL DE CLINICAS LA PAZ Fuente: Laboratorio de Bacteriología Hospital de Clínicas. Periodo: 2006 – 2008. En resumen los resultados bacteriológicos relevantes de la presente investigación fueron: Se estudiaron 25 catéteres urinarios (sondas Foley), 63 catéteres venosos periféricos y 74 catéteres venosos centrales. De los 25 catéteres urinarios estudiados dieron cultivo positivo 76% y desarrollaron con mayor frecuencia Escherichia coli, Candida spp y Staphyloccus epidermidis Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 84 De los 63 catéteres venosos periféricos dieron cultivo positivo 55% y desarrollaron con mayor frecuencia Staphyloccus aureus, Staphyloccus epidermidis y Klebsiella pneumoniae. De los 74 catéteres venosos centrales dieron cultivo positivo 53% y desarrollaron con mayor frecuencia Staphyloccus epidermidis, Staphyloccus aureus y Pseudomona aeruginosa. Se encontró mayor contaminación en los catéteres urinarios que en los catéteres venosos. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 85 DISCUSION De acuerdo a un estudio efectuado en el Instituto Nacional de Tórax (1), se demostró que la principal limitante para el acceso de los pacientes a los medios diagnósticos consistía en insuficientes recursos económicos. En el presente estudio se consideró por analogía, que los pacientes del Hospital de Clínicas también tenían una deficitaria condición económica y por tanto se consideró que una cifra reducida de 60 estudios bacteriológicos de catéteres por año, se debía fundamentalmente a bajas condiciones económicas. En la investigación se demostró que el número de resultados positivos en los cultivos de catéteres urinarios y venosos, analizados en conjunto fue, alto. Se encontraron 43% de cultivos negativos y 57% de cultivos positivos. Esta cifra de 57% de cultivos positivos representó más del doble del resultado obtenido en un Hospital Oncológico de México DF mencionado por Gonzáles y col (69). Se planteó como hipótesis explicativa que esta cifra alta de cultivos positivos de catéteres en el Complejo Hospitalario de Miraflores se presentó también en pacientes graves con deficiente estado nutricional e inmunitario y además por defecto en las condiciones de asepsia y probable reutilización de catéteres. Analizando por tipos de catéteres, se encontró que los catéteres urinarios mostraron el mayor porcentaje de contaminación; los resultados de la investigación mostraron 76% de catéteres urinarios con cultivo positivo y en la literatura se mencionaba solamente 20% según Castro y col (68). Esta evidente disparidad de los resultados positivos, se explicó por la severidad de la enfermedad de base y probablemente por insuficiente aplicación de las normas de seguridad del paciente. En los catéteres urinarios con cultivo positivo se encontraron con mayor frecuencia los siguientes gérmenes: Escherichia coli (26.31%), Cándida spp (26.31%) y Staphylococcus epidermidis (15.78%). Encontrar Escherichia coli en los catéteres urinarios era previsible, porque según la revisión de Jhonson indica que E. coli produce sobretodo contaminación de catéteres urinarios con el añadido de la existencia de cepas uropatógenas capaces de invadir y ascender por el tracto urinario. Sin embargo el perfil bacteriológico de los cultivos de catéteres urinarios ha cambiado por la creciente utilización de antibióticos de amplio espectro; anteriormente las bacterias causales más frecuentes eran E. Coli seguida de Pseudomona aeruginosa; a partir de 1990 se ha incrementado la proporción de aislamiento de Cándida, Estreptococos del grupo B y D, Klebsiella pneumoniae y en menor proporción Enterobacter cloacae y Staphylococcus coagulasa negativo, Este diagnóstico bacteriológico emergente también fue encontrado en la serie estudiada, resaltando que son iguales los porcentajes de Candida spp y E.coli. La presencia de Staphyloccoccus epidermidis en los catéteres urinarios seguramente fue ocasionada por contaminación con la microbiota (46). Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 86 Los resultados positivos para cultivo de catéteres venosos periféricos demostraron por orden de presentación Staphylococcus aureus (20%), Staphylococcus epidermidis. (14.28%), Klebsiella pneumoniae (14.28%), Acinetobacter 8.57%, E. coli 8.57%, Enterobacter 8.57% y otros gérmenes en menor proporción. De acuerdo a la comunicación de Marschall y colaboradores (28) el porcentaje de resultados positivos en catéteres venosos periféricos para Staphylococcus aureus fue de 15% en pacientes de salas generales; en consecuencia destacaron nuestros resultados que son ligeramente mayores con relación a este germen. En la misma comunicación de Marschall se determinó que en las bacteriemias relacionadas con catéter estaban en incremento las enterobacterias y gérmenes oportunistas; en la serie estudiada se encontró Klebsiella pneumoniae en un porcentaje significativo. En el presente trabajo de tesis los gérmenes encontrados con mayor porcentaje en catéteres venosos centrales fueron Staphylococcus epidermidis (25.42 %), Staphylococcus aureus (20.50 %) y Pseudomona aeruginosa (12.80 %). El hallazgo de Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus aureus como gérmenes principales en la contaminación de los catéteres venosos centrales confirman que estos gérmenes causan infección local y bacteriemia en presencia de heridas o punciones por catéteres (45). Se encontró Pseudomona aeruginosa en los catéteres venosos centrales en el trabajo de investigación en un porcentaje significativo (12.80%). Laincidencia de Pseudomona aeruginosa se ha incrementado y se le considera un patógeno oportunista emergente con relevancia clínica y resistencia a antibióticos. (49). En la experiencia de Rumi (33) también se encontró Pseudomona en catéteres venosos centrales. La sensibilidad diagnóstica (cultivo positivo en el catéter) y la correlación con los diagnósticos de remisión de las muestras más frecuentes fueron: para diagnóstico de sepsis 69% y para diagnóstico de infección del tracto urinario 66%. Hubiese sido importante con fines epidemiológicos para infección nosocomial, conocer si estos diagnósticos clínicos se acompañaron de hemocultivo o urocultivo. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 87 CONCLUSIONES Se estudió una serie de 162 casos de cultivo bacteriológico de catéteres en adultos jóvenes con una edad media de 33 años. La muestra fue representativa porque es aleatoria y en términos de género fue exactamente proporcional. Las limitaciones del estudio se debieron fundamentalmente a los costos elevados del diagnóstico bacteriológico, fuera del alcance de la mayoría de los pacientes del Hospital de Clínicas. La alta frecuencia de catéteres urinarios y venosos contaminados, también se explicaría por provenir de UCI polivalentes donde no se discriman a los pacientes sépticos. Los diagnósticos que acompañaron a la remisión de la muestra al laboratorio indican la severidad del cuadro clínico de los pacientes destacando en primer lugar el diagnóstico de sepsis en 18% de casos. Como metodología diagnóstica se determinó contaminación o colonización de catéteres mediante la técnica de Maki (70). Los hallazgos bacteriológicos son similares a los encontrados en la literatura revisada. Destaca la presencia de Escherichia coli en los catéteres urinarios, Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis en los catéteres venosos. El hallazgo de Pseudomona y Klebsiella también fue verosímil por tratarse de gérmenes oportunistas en presencia de pacientes debilitados con enfermedades graves. Cabe destacar que los cultivos de las puntas de catéteres, no se acompañaron en ninguno de los casos de hemocultivo ni de urocultivo, lo que disminuyó significativamente la certeza del diagnóstico de infección nosocomial relacionada a catéter, además no se realizó seguimiento para determinar si el diagnóstico final fue IRC. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 88 RECOMENDACIONES En base al presente trabajo planteamos las siguientes recomendaciones, para disminuir la incidencia de infecciones nosocomiales por catéter (IRC): Implementar un programa de prevención de infecciones nosocomiales, especialmente en los servicios de mayor riesgo (UCI, Cirugía, Infectología, Traumatología). Insistir en el cumplimiento de las normas de bioseguridad para el personal sanitario con el fin de prevenir las IRC. Efectuar en forma simultánea cultivo de la punta del catéter, mas urocultivo o hemocultivo seriado, en casos de sospecha de infección nosocomial relacionada a catéter, para la confirmación del patógeno causal, ya que actualmente solo se solicita cultivio de la punta del catéter lo que no nos permite tener la certeza que la infección hubiese sido ocasionada por el catéter o el paciente era portador de alguna infección originaria. Establecer como norma remitir para cultivo las puntas de los catéteres con más de 8 días de uso. Incluir en los formularios de recolección de dados el tipo de catéter y el tiempo de permanencia, que son datos necesarios e importantes para valorar la contaminación de los catéteres. Evitar la reutilización de los catéteres. Disponer de un registro periódicamente actualizado, de todos los pacientes portadores de catéteres en el Hospital de Clínicas, para aplicar los indicadores epidemiológicos internacionales y tener un mejor control de las Infecciones nosocomiales relacionadas a catéter. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 89 CRONOGRAMA El cronograma de actividades se aplicó de acuerdo a los siguientes pasos (Anexo 3): 1. Presentación del perfil de proyecto de tesis a los asesores Octubre 2006. 2. Validación del Formulario de registro de datos Enero 2007. 3. Validación del Formulario de solicitud de cultivo Febrero 2007. 4. Aceptación escrita de los asesores Marzo 2007. 5. Estudio retrospectivo 2006 en base a cuaderno de registro, durante Enero a Marzo de 2007. 6. Ejecución de la investigación mediante trabajo en el laboratorio de Bacteriología entre Abril 2007 y Agosto 2008. 7. Presentación del perfil de proyecto de tesis a los asesores Abril 2008. 8. Presentación del protocolo de tesis a la Facultad Julio de 2008 y aceptación del mismo Septiembre 2008. 9. Designación de tribunal Septiembre 2011. 10.Revisión y aprobación para defensa de la tesis, por el tribunal Marzo 2012. 11.Presentación para defensa Junio 2012. 12.Defensa de la tesis 24 de Septiembre 2012. Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 90 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1.- Salinas M. Caracteristicas socioeconómicas de los pacientes del Instituto Nacional de Tórax. En Jáuregui P. Acceso de los pacientes del INT, Tesis 2005. 2.- Echavarria H. Cateterismo venoso central. En Medicina de Urgencias. Hospital del Valle. Cali Colombia Editorial Interamericana 2011. 3.- Droste C. Tamaño de los catéteres. En Constantes de la Medicina Clínica. VCF. Tercera Edición 1993. Página 8. 4.- M. Delgado, R. Riveron. Cateterismo venoso central. 2009. ISPN: EKUEZEZFYVUHJBMGYK Revista Ciencias.com. 5,- Meguid M.M., Eldar Aa.: The delivery of nutritional support. Cancer 1985; (1)279-89 6.- Meeting about catheters. A study comparing antibiotic catheters with plain catheters. Anaesthesia 1996; 51(11)1018-20. 7.- Rabih O, Darouihe R, Raad I and al. A comparison of two antimicrobial- impregnated central venous catheters. New Eng J Med 1999; 340(1): 1-8. 8.- Darouiche RO, Raad II, Heard SO and al. A comparison of two antimicrobial- impregnated central venous catheters. Catheter Study Group. Crit Care Med. 1998 Aug;26(8):1452-7. 9.- Guaresti G; Della Latta M; Rivas N.Terapia de bloqueo: una nueva modalidad para el tratamiento de infecciones relacionadas con catéteres implantables / Antibiotic-lock therapy: a new approach for the treatment of implantable catheter- related infections Arch Argent Pediatr; 2004 102(3): 211-213 10.- Barrasa I, Vidal C, Aspiroz C. Las infecciones urinarias en los pacientes con sonda vesical no permanente (I). Factores de riesgo, patogenia, etiología y curso clínico. Med Clin (Barc) 1996; 106: 704-. 11.- Apisarnthanarak A, Rutjanavech S, Wichansawakun S and al. Uso inapropiado de catéteres urinarios en un centro de tercer nivel: incidencia, factores de riesgo y resultados. Am J Infect Control 2007; 35(9):594-9) 12.- Tambyah PA. The relationship between pyuria and infection in patients with indwelling urinary catheters. Arch Intern Med. 2000; 160: 673-7. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Darouiche%20RO%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlus http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Raad%20II%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlus http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Heard%20SO%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlus javascript:AL_get(this, 'jour', 'Crit Care Med.'); http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-472145 http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-472145 http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-472145 http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-472145 http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Arch%20Argent%20PediatrFrecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 91 13.- Infección urinaria asociada al uso de catéteres http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/article/000483.htm 14.- Esquivel C, Barbachano E, Avila H y col. Microbiology Profile in Urinary Infection Associated with Uretral Catheter. 2005. Rev Inf Dis 2000: 435 15.- Jhonson J. Virulence factors in Escherichia coli urinary tract infections. Clin Microbiol Rev 1991; 4:80 16.- Head C. Insertion of a urinary catheter. Nurs Older People; 2006; 18(10): 33-6 17.- Hashmi S; Kelly E; Rogers SO; Gates J. Urinary tract infection in surgical patients. Am J Surg; 2003; 186(1): 53-6 18.- Manges A, Jonson J, Forman B and al. Widespread Distribution of Urinary Tract Infections Caused by a Multidrug-Resistant Escherichia coli Clonal Group. N Eng J Med 2001;345(14):1007-1013. 19.- Burke J. Infection control. A problem for patient safety, N Eng J Med 2003;348(7):651-656 20.- Sepúlveda J. Infecciones nosocomiales. Salud Pública Méx vol.41 s.1 Cuernavaca 1999 21.- Tinoco J, Salvador J, Perez M y col. Epidemiología de las infecciones nosocomiales en un hospital de segundo nivel. Salud Pública Mex 1997; 39(1). 22.- Salazar T, Morejón D, Alonso T y cols. Gérmenes nosocomiales mas frecuentes en la unidad de terapia intensiva. Instituto Superior de Medicina Militar: Dr. Luís Díaz Soto. Unidad de Cuidados Intensivos. Ciudad de La Habana 2007 23.- Valles J. Bacteriemias in intensive care: Enferm Infecc Microbiol Clin 1997 Oct;15(Suppl 3):8-13. 24.- Cetil B, Pasman H, Ozcan N and al. Epidemiology and etiology of catéter- related nosocomial infections in a Turkish Hospital. Infez Med 2005; 13(3): 152- 159. 25.- Infecciones nosocomiales intrahospitalarias: lugares más frecuentes de infección. http:// weblogs.madridmasd.org, 26.- Koleff M. SMART approaches for reducing nosocomial infections in the UCI. Chest 2008;134(2):447-456. http://search.bvsalud.org/regional/resources/mdl-17140129 http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Nurs%20Older%20People http://search.bvsalud.org/regional/resources/mdl-12842750 http://search.bvsalud.org/regional/resources/mdl-12842750 http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Am%20J%20Surg Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 92 27.- Molina J, Garza H. Vigilancia de infecciones nosocomiales en un hospital de Cardiología. Salud Pública Mex 1999; vol 41. 28.- Marschall J, Leone C, Jones M and al. Catéter assoiated bloodstream infections in general medical patients outside the intensive care unit. Infect Contrl Hosp Epidemiol 2007;28(8):905-9 29.- Pronovost P, Needham D, Berenholtz S and al. An Intervention to Decrease Catheter-Related Bloodstream Infections in the ICU. New Eng J Med 2006; 355(26):2725-2732 30.- Pujol M, Hornero A, Saballs M and al. Clinical epidemiology and outcomes of peripheral venous catéter related bloodstream infections a a university-affiliated hospital. J Hosp Infect 2007; 177 31.- Crowe M, Ispahani P, Humphreys H, Kelley T, Winter R. Bacteraemia in the adult intensive care unit of a teaching hospital in Nottingham, UK, 1985-1996. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 1998; Jun;17(6):377-84. 32.- Barrios L, Cordero D, Sanchez E. Hemocultivos y sepsis por cateterismo intravascular en los Servicios Críticos de Atención al Grave. Hospital Clinicoquirúrgico "Dr. Salvador Allende" La Habana 2007). 33.- Rumi L, Torralbas J, Albert C. Cuidados y prevención de la infección de catéteres intravasculares.http//www.eccpn.aibarra.org/temario/seccion3/capitulo 52/capitulo52.htm 34.- Harrison J, Raymond J. Turner L and al. Biopelícula bacteriana. Investigación y Ciencia Marzo 2006 35.- Aeschlimann N; Vial P; García P y col. Estudio microscópico de fenómenos biológicos asociados a infecciones por cateteres venosos centrales/ Microscopic study of biological phenomenae associated to infections related to central venous catheters Rev Chilena Infectol; 1996;13(1) 36 Vila j, Soriano a, Mensa j. Bases moleculares de la adherencia microbiana sobre los materiales protésicos. Papel de las biocapas en las infecciones asociadas a los materiales protésicos. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2008;26:48- 55. 37.- Tierney L. Diagnóstico clínico. 3ra. ed. Granada: Servicios de publicaciones de la Universidad de Granada. 1997:40 38.- Zayas I; Romero A; Bouza D. Evaluación de los resultados de cultivos de catéteres en pacientes graves / Evaluation of cultive results of catheters in grave patients. Arch. méd. Camaguey;7(1), ene.-feb. 2003. http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-202651 http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-202651 http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-202651 http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-202651 http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Rev%20Chilena%20Infectol http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis%7Cdatabase_name=TITLES%7Clist_type=title%7Ccat_name=ALL%7Cfrom=1%7Ccount=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Arch.%20m%C3%A9d.%20Camaguey Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 93 39.- Ibáñez C. Infecciones nosocomiales (intrahospitalarias): Microorganismos bacterianos implicados con mayor frecuencia. http//weblogs/madridmasd.org/salud_publica/archive/2008/07/23/97377.asp 40.- Kelli M. Diagnosis and treatment o bacteriemia and intravascular catheter infections. Am J Surg 1996;172(6):13-9 41.- Maury S, Mejía H, Velasco V. Estudio de las infecciones nosocomiales en el Hospital del Niño. Rev Soc Bol Ped 2003;42(2): 93-6 42.- Aguirre G, Mijangos J, Coronado H y col- Bacteriemia por acinetobacter baumanni en pacientes en estado crítico. Gac Méd Mex 2009; 145(1) 43.- Munoz L, Weinstein R. Acinetobacter Infection. N Eng J Med 2008;358(12):1271-1281 44.- Infecciones nosocomiales intrahospitalarias por Acinetobacter. Weblogs.madridsmasd.org/salud publica/archive2008/05/17/92090.aspx. 45.- Ekkelenkamp MB; van der Bruggen T; van de Vijver DA an al. Bacteremic complications of intravascular catheters colonized with Staphylococcus aureus.Clin Infect Dis; 2008; 114-8 46.- Gongora-Rubio F, Pignatari AC, Costa LM, Bortolloto VI, Machado AM, De Góngora DV. Clinical significance, epidemiology and microbiology of coagulase- negative staphylococcal nosocomial bacteriemia at a teaching hospital. Rev Assoc Med Bras 1997; Jan-Mar;43(1):9-14. 47.- Camargo LF, Strabelli TM, Ribeiro FG, Iwahashi ER, Ebaid M, Filho HH. Epidemiologic investigation of an outbreak of coagulase-negative Staphylococcus primary bacteriemia in a newborn intensive care unit. Infect Control Hosp Epidemiol 1995; Oct;16(10):595-6. 48.- Morrison A, Wenzel R. Epidemiology of infections due to Pseidomona aerugionosa. Rev Infec Dis1984; 6:267 49.- Ferrareze M; Leopoldo V; Andrade D y col. Pseudomonas aeruginosa multiresistente em unidade de cuidados intensivos: desafios que procedem? / Multi-resistant pseudomonas aeruginosa among patients from an intensive care unit: persistent challenge? Acta paul. enferm;20(1):7-11, 2007. 50.- Seeramoju P, Tolentino J, Garcia S and al. Predictive factors for the development of central line associated bloodstream infection due to gram negative bacteria in intensive care units patients fater surgery. Infect Control Hosp Epidemiol 2008;29(1):51-56 http://weblogs.madrimasd.org/salud_publica/archive/2008/07/23/97377.aspx http://weblogs.madrimasd.org/salud_publica/archive/2008/07/23/97377.aspx http://weblogs.madrimasd.org/salud_publica/archive/2008/07/23/97377.aspx http://search.bvsalud.org/regional/resources/mdl-18171225 http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Clin%20Infect%20Dis http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Clin%20Infect%20Dis http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis%7Cdatabase_name=TITLES%7Clist_type=title%7Ccat_name=ALL%7Cfrom=1%7Ccount=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Acta%20paul.%20enferm Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 94 51.- Eichhoff T. 1972. Klebsiella pneumoniae infection: a review with reference to the water-borne epidemiologic significance of K. pneumoniae presence in the natural environment. national Council of the Paper Industry for Air and Stream Improvement, Inc. Technical Bulletin no. 254, New York, N.Y. 52,. Martin, W. Yu, and J. A. Washington.. Epidemiological significance of Klebsiella pneumoniae - a 3 month study. Mayo C.in. Proc. 1971 46:785-793. 54.- Joshi N, Caputo G, Weitekamp M and al. Infections in Patients with Diabetes Mellitus N Eng J Med 1999;341(25):1906-1912 53.- Soriano JM, Rico H, Molto JC, Manes J., Assessment of the Microbiological Quality and Wash Treatments of Lettuce Served in University Restaurants. Int J Food Microbiol 2000 Jun 30;58(1-2):123-8, 55.- Silva C; Santos R; Colombo A. Cluster of Candida parapsilosis primary bloodstream infection in a neonatal intensive care unit. Braz J Infect Dis; 2001; 5(1): 32-36. 56.- Meunier F. Candidiasis. Eur J Clin Microbiol Infec Dis. 1989; 8:438 57.- O Grady N, Alexander M, Dellinger E and al. Guidelines for the prevention of intravsacular catheter related infections. Infect Control Hosp Epidemiol 2002;23(12):759-763 58.- Warren D, Zack J, Mayfield J and al. The effect of an education program on the incidence of central venous catheter associated bloodstream infection in a medical ICU. Chest 2004;126(5):1612-1618- 59.- Brito C; Gondim B; Diogo A y col. Etiology and pathogenesis of bloodstream infections associated with the use of long-term central vascular catheter. Braz J Infect Dis; 2007: 11(1): 96-99. 60.- Chirino N. Sepsis Nosocomial. Vigilancia del Cateterismo Intravascular. 2006. Instituto Nacional de Cirugia. La Habana.Código ISPN EEuplkkEZAhiqZIUFP 61.- Saldar N, Kluger D, Maki D. A review of risk factors for catheter-related bloodstream infection caused by percutaneously inserted, noncuffed central venous catheters: implications for preventive strategies. Medicine (Baltimore). 2002 Nov;81(6):466-79. 62.- Kunin CM. Care of the urinary catheter. En: Urinary tract infection: detection, prevention and management. 5th Ed. Philadelphia, Pa: Lippincott Williams & Willkins; 1997:227-79. http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-339418 http://search.bvsalud.org/regional/resources/lil-339418 http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Braz%20J%20Infect%20Dis http://search.bvsalud.org/regional/resources/ado-454688 http://search.bvsalud.org/regional/resources/ado-454688 http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Braz%20J%20Infect%20Dis http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Braz%20J%20Infect%20Dis javascript:AL_get(this, 'jour', 'Medicine (Baltimore).'); Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 95 63.- Veenstra DL, Saint S, Saha S, and al. Efficacy of antiseptic-impregnated central venous catheters in preventing catheter-related bloodstream infection: a meta-analysis. JAMA. 1999 Jan 20;281(3):261-7 64.- Grohskopf LA; Maki DG; Sohn AH and al. Reality check: should we use vancomycin for the prophylaxis of intravascular catheter-associated infections?. Infect Control Hosp Epidemiol; 22(3): 176-9, 2001 65.- Rosenthal V, Maki D, Salomao R y col. Device-Associated Infections in 55 Intensive care Units of 8 Developing Countries. Annals of Internal Medicine. 2006; 582-590. 66.- Yebenesa J, Capdevila J. Infección relacionada con catéteres intravasculares. Servicio de Medicina Interna. Hospital de Mataró. Barcelona. España. 8-5-2002. 67,- The Joint Commission of patients security. WHO 2011, chill@jointcommission.org 68.- Castro G, Duarte M. Infección asociada a catéter vesical en Neonatología. Hospital Garran. México. Aula Médica Ediciones 2007. 69.- Gonzáles L, Bello H. Hemocultivos simultáneos y diagnóstico de sepsis relacionada a catéter. Hospital de Oncología. México. Aula Médica Ediciones 2007. 70.- Damiani E y col. Manual de aislamiento e identificación de Enterococcus y Staphylococcus asociados a infecciones intrahospitalarias. 2007. 1ª Edición. Ministerio de Salud y Deportes. Instituto Nacional de Laboratorios en Salud. La Paz-Bolivia. 71.- Manual de Laboratorio. Bacteriología Clínica. Ministerio de Salud y Previsión Social. Publicación Técnica Número 7. La Paz. 2000, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Veenstra%20DL%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlus http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Saint%20S%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlus http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Saha%20S%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlusjavascript:AL_get(this, 'jour', 'JAMA.'); http://search.bvsalud.org/regional/resources/mdl-11310698 http://search.bvsalud.org/regional/resources/mdl-11310698 http://portal.revistas.bvs.br/transf.php?xsl=xsl/titles.xsl&xml=http://catserver.bireme.br/cgi-bin/wxis1660.exe/?IsisScript=../cgi-bin/catrevistas/catrevistas.xis|database_name=TITLES|list_type=title|cat_name=ALL|from=1|count=50&lang=pt&comefrom=home&home=false&task=show_magazines&request_made_adv_search=false&lang=pt&show_adv_search=false&help_file=/help_pt.htm&connector=ET&search_exp=Infect%20Control%20Hosp%20Epidemiol mailto:chill@jointcommission.org Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 96 Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 97 ANEXO 1 FORMULARIO Nº 1 REGISTRO NUMERO: FECHA DE NACIMIENTO: EDAD: NOMBRE: FECHA: EX. SOL.: MUESTRA: DIAGNOSTICO: Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 98 ANEXO 2 Frecuencia de patógenos…….…… Patricia Salazar Revollo 99 FR E C U E N C IA D E P A T O G E N O S B A C T E R IA N O S E N C A T E T E R E S U R IN A R IO Y V E N O S O S C O M O C A U S A D E IN F E C C IO N E N S E R E S H U M A N O S . O C TU B R E E N E R O FE B R E R OM A R ZO A B R IL E N E R O A G O S TO S E P TI E M A B R IL N O V IE M D IC IE M FE B R E R OM A R ZO M A Y O S E P T 1 2 3 4 5 6 7 8 T R A N S C R IP C IO N D E P R O T O C O LO 9 11 12 A ct iv id ad E S T U D IO R E T R O S P E C T IV O 2 00 6 20 12 20 12 C R O N O G R A M A D E A C T IV ID A D E S V A LI D A C IO N F O R M U LA R IO S O LI C IT U D A C E P T A C IO N A S E S O R E S N º 20 12 20 06 20 07 20 07 20 07 20 07 20 12 P R E S E N T A C IO N D E L P E R F IL V A LI D A C IO N F O R M U LA R IO S D E R E G IS T R O 20 08 20 08 20 08 20 08 20 08 E JE C U C IO N D E L A IN V E S T IG A C IO N V A LI D A C IO N D E F O R M U LA R IO S D E F E N S A D E T E S IS P R E S E N T A C IO N D E P R O T O C O LO R E V IS IO N Y A P R O B A C IO N Figura 27: Cultivo de Cándida albicans en agar. Fuente: Laboratorio Hospital de Clínicas. 8.- Darouiche RO, Raad II, Heard SO and al. A comparison of two antimicrobial- impregnated central venous catheters. Catheter Study Group. Crit Care Med. 1998 9.- Guaresti G; Della Latta M; Rivas N.Terapia de bloqueo: una nueva modalidad related infections Arch Argent Pediatr; 2004 102(3): 211-213 35.- Aeschlimann N; Vial P; García P y col. Estudio microscópico de fenómenos catheters Rev Chilena Infectol; 1996;13(1) 45.- Ekkelenkamp MB; van der Bruggen T; van de Vijver DA an al. Bacteremic complications of intravascular catheters colonized with Staphylococcus aureus.Clin Infect Dis; 2008; 114-8 60.- Chirino N. Sepsis Nosocomial. Vigilancia del Cateterismo Intravascular. 2006. Instituto Nacional de Cirugia. La Habana.Código ISPN EEuplkkEZAhiqZIUFP 63.- Veenstra DL, Saint S, Saha S, and al. Efficacy of antiseptic-impregnated central venous catheters in preventing catheter-related bloodstream infection: a meta-analysis. JAMA. 1999 Jan 20;281(3):261-7 67,- The Joint Commission of patients security. WHO 2011, chill@jointcommission.org