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UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA ESCOLA DE MEDICINA VETERINÁRIA E ZOOTECNIA DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA BIOINTERAÇÃO ICS 035 – MICROBIOLOGIA VETERINÁRIA Atividade Complementar – Mycobacterium Após a leitura do artigo “Identificação de Mycobacterium bovis em carcaças de bovinos abatidos no estado da Bahia, Brasil, por métodos bacteriológico e molecular”, responda as seguintes questões: 1) Quais os principais fatores de risco relacionados com a transmissão da tuberculose bovina de acordo com o artigo? Os principais fatores que favorecem a transmissão dessa doença no rebanho são: elevada densidade, permitindo o contato entre os bovinos, principalmente os leiteiros criados em sistemas semi-intensivo e intensivo; presença de um animal portador, manejo, raça, idade e resistência do agente às condições ambientais favoráveis 2) Quais são as consequências econômicas associadas à ocorrência da tuberculose bovina? A importância econômica atribuída à doença bovina está baseada nas perdas diretas resultantes da morte de animais, da redução no ganho de peso, da diminuição na produção de leite e do descarte precoce de animais de alto valor zootécnico. 3) Descreva como foi realizada a coleta e o cultivo das amostras analisadas no artigo. Foram coletadas amostras de lesões sugestivas de tuberculose ou por linfadenites diversas durante a rotina de inspeção das carcaças bovinas. As amostras foram acondicionadas em recipientes contendo solução saturada de borato de sódio Na2B2O7•10H2O, 140g/L) como meio conservante. As amostras foram descontaminadas pelo cloreto de 1-hexadecilpiridinio (HPC) a 1,5% por 30min, inoculadas nos meios de cultura StonebrinkLeslie e Lowenstein-Jensen e incubadas a 37°C por até 90 dias. As colônias observadas no meio de cultura foram coradas pelo método de Ziehl-Neelsen. 4) Ao analisar o método de cultivo microbiológico utilizado, é possível afirmar que M.bovis é uma bactéria pouco exigente a nível nutricional e de rápido crescimento? M. bovis é uma bactéria bastante exigente a nível nutricional. Apresenta crescimento lento, o tempo médio observado para o aparecimento das colônias foi de 34 dias, sendo o mínimo de 22 e o máximo de 63 dias. Geralmente, utiliza-se o meio Stonebrink-Leslie para cultivo. 5) Qual foi o método de coloração utilizado para a visualização das bactérias após o cultivo? Indique por qual motivo não foi utilizada a coloração de Gram. As colônias de bactérias observadas foram coradas pelo método de coloração de Ziehl-Neelsen. A Mycobacterium não é corada por Gram pois possui uma grande quantidade de lipídeos de membrana, dificultando assim a entrada do corante púrpura na célula. Sendo necessário a utilização de uma fonte de calor durante a coloração inicial com a FUCSINA de ZIEHL (carbol-fucsina), para que o corante penetre através da parede celular das micobactérias. Porém, quando coradas vão resistir fortemente à descoloração, mesmo por ácidos fortes diluídos e álcool absoluto. Estas são bactérias ácido-álcool resistentes (BAAR), que são as bactérias dos gêneros Mycobacterium e Nocardia. 6) Qual o outro método diagnóstico foi utilizado além do microbiológico? Qual a vantagem indicada pelos autores do uso desse método em relação ao diagnóstico microbiológico? O método de PCR também foi utilizado para o diagnóstico. Diversos estudos vêm demonstrando a possibilidade de seu uso para o diagnóstico da tuberculose bovina, permitindo maior acurácia e significativa redução do tempo do diagnóstico em relação aos métodos tradicionais de identificação. 7) Quais foram os principais órgãos/tecidos onde foram localizadas lesões sugestivas de tuberculose bovina? As lesões estavam localizadas nos linfonodos da cabeça e do pescoço, assim como nos pulmões e nos linfonodos torácicos, do fígado e do peritônio.