Diagnóstico Virológico

Prévia do material em texto

Fernanda Feitosa – Diagnóstico Virológico 
 
Diagnóstico virológico 
Introdução 
➢ Vírus ➜ microrganismos intracelular 
obrigatório 
➢ Demonstração do vírus ou antígenos virais 
➢ Isolamento e identificação viral 
➢ Pesquisa de anticorpos séricos 
• Como escolher a técnica? 
Demonstração do vírus ou 
antígenos virais 
➢ Possibilita a identificação de vírus em 
diferentes materiais 
• Fezes: rotavírus, calicivírus, astrovírus 
• Fluido vesicular (hepesvírus) 
• Lesões de pele (papilomavírus) 
➢ Coloração especial 
• Utiliza-se ouro, prata 
➢ Produz aumentos de 200.000 a 400.000x 
➢ Classificado em dois tipo: 
• ME de transmissão ou direto 
• ME de varredura 
➢ Reconhecimento de infecções virias mistas 
e para detectar vírus incapazes de 
crescimento in vitro 
➢ Desvantagem ➜ vírus com morfologia 
semelhante podem ser difíceis de ser 
distinguidos 
➢ Usa-se anticorpos antivirais marcados 
com fluorocromos ou enzimas 
➢ Necessidade de uma microscópio com 
fonte de luz especial 
• Finalidade de visualizar o material 
fluorescente 
➢ Pode ser: 
• Direta ➜ pesquisa agente 
• Indireta ➜ pesquisa anticorpos 
Isolamento e identificação 
viral 
➢ Finalidade da técnica 
➢ Vias de inoculação 
• Depende da intenção 
▪ Via oral 
▪ Via intranasal 
▪ Via peritoneal 
➢ Animais utilizados 
➢ Vantagens 
• Baixa concentração viral é necessário 
➢ Desvantagens 
• Vida dos animais 
• Tempo 
➢ Ovo embrionado 
• Ovo com embrião dentro 
➢ Princípio da técnica 
➢ Vantagens 
• Excelente padronização ➜ fácil 
leitura 
• Sensível aos vírus aviário 
➢ Desvantagens 
• Elevado custo dos ovos SPF ➜ sistema 
livre de patógenos 
• Pobre crescimento de vírus humanos e 
de suínos 
➢ Cultura de células 
➢ Pode fazer culturas a partir de tecidos 
humanos, animais e vegetais 
➢ Classificação 
• Cultura primaria 
• Cultura secundaria 
▪ Célula cancerígena 
➢ Linhagem de células 
• As células podem proliferar 
indefinidamente e poderão ser 
Fernanda Feitosa – Diagnóstico Virológico 
 
propagadas com uma linhagem de 
células 
▪ Podem ser preparadas a partir de 
células cancerígenas 
➢ Aplicações 
• Diagnostico virológico ➜ isolamento 
viral 
• Produção de vacinas 
• Avaliação da toxicidade de 
biomateriais 
• Ensaios de fármacos e cosméticos in 
vitro 
➢ Desvantagens 
• Efeitos citopáticos ➜ todas as 
alterações celulares ocasionadas 
pela presença de um vírus 
Pesquisa de anticorpos 
séricos 
➢ Pode ser usado para diagnóstico 
retrospectivo de doenças virais 
➢ Automatizados 
➢ Reagentes para diagnósticos para muitos 
patógenos virais se encontram disponíveis 
no mercado 
➢ Amostras de sangue individuais de animais 
são suficientes 
➢ Como escolher a técnica? 
• Tempo de infecção 
• Valor 
• Tempo que sai o resultado 
• Tipo de amostra clínica disponível 
➢ Desvantagens 
• Reações cruzadas com vírus 
antigenicamente relacionados 
• Animais jovens ➜ interpretação 
incorreta dos resultados devido a 
anticorpos maternos 
Referências Bibliográficas 
➢ Slides professora Thais Chucri 
➢ Livro: Microbiologia Veterinária e 
Doenças Infecciosas, P.J. Quinn