Retículo, Complexo de Golgi e Lisossomos - LAB. DE BIOLOGIA CELULAR - BIO 112

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PRÁTICA 06- RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO, COMPLEXO DE GOLGI E 
LISOSSOMOS 
 
INTRODUÇÃO 
 
 As informações contidas no DNA são expressas por meio da transcrição e 
tradução, na forma de proteínas que atuam em diversos processos metabólicos 
celulares. Em células eucarióticas, se as proteínas são sintetizadas por ribossomos 
livres, elas atuarão no próprio citosol, no núcleo, em mitocôndrias, em cloroplastos 
(células vegetais) ou em peroxissomos. Caso sejam sintetizadas por ribossomos 
aderidos ao retículo endoplasmático, elas serão secretadas (proteínas de 
exportação), atuarão nos lisossomos, no próprio retículo endoplasmático ou no 
complexo de Golgi ou farão parte da estrutura da membrana plasmática. 
 
A. Retículo endoplasmático 
 
 É uma organela formada por uma rede de vesículas achatadas, vesículas 
esféricas e túbulos. O retículo endoplasmático (R.E.) diferencia-se estruturalmente em 
rugoso (ou granular) e liso (ou agranular). No R.E. rugoso a superfície da membrana 
voltada para o citoplasma apresenta-se recoberta por ribossomos. Os ribossomos, 
partículas com 15 a 20 nm de diâmetro, são formados por duas subunidades de 
tamanhos diferentes, constituídas por proteínas associadas a RNA. São nos 
ribossomos que ocorrem a síntese de proteínas. As proteínas sintetizadas por 
ribossomos unidos às membranas do R.E. rugoso são liberadas no lúmen desta 
organela e destinam-se às vias de secreção celular. No interior do R.E., as proteínas 
são dobradas corretamente com o auxílio de chaperonas, que são proteínas residentes 
no R.E. As proteínas são processadas e, então, transportadas ao complexo de Golgi, 
por meio de vesículas de transporte. O R.E. liso não apresenta ribossomos aderidos às 
suas membranas e encontra-se em continuidade com o retículo endoplasmático rugoso. 
As enzimas contidas no R.E. liso catalisam reações da síntese de lipídios e 
participam da desintoxicação celular. 
 
B. Complexo de Golgi 
 
 Formado por um conjunto de sacos achatados ou vesículas, o complexo de 
Golgi é conhecido, também, como aparelho de Golgi. As cisternas que constituem esta 
organela são lisas, ou seja, não possuem ribossomos aderidos às suas membranas e 
dispõem-se estruturalmente em pilhas paralelas, que lembram pilhas de pratos. Cada 
pilha de cisternas apresenta, em geral, uma face convexa e uma face côncava. O 
complexo de Golgi participa do processamento dos produtos de secreção que 
provém do retículo endoplasmático. É sede da síntese de polissacarídeos e da 
glicosilação final de proteínas. Os produtos do complexo de Golgi são liberados pelas 
células, na forma de vesículas e/ou grânulos de secreção. A extrusão desses grânulos 
é feita por um mecanismo denominado exocitose, o qual, também, contribui para a 
renovação da membrana plasmática. Alguns dos produtos processados no 
complexo de Golgi são enzimas lisossômicas, que neste caso são transportadas, via 
vesículas, até compartimentos denominados endossomos, os quais se diferenciam em 
lisossomos. 
 
C. Lisossomos 
 
 São organelas citoplasmáticas, em geral, esféricas, com diâmetro entre 0,2 e 
0,5 µm, delimitadas por uma unidade de membrana e que contêm hidrolases ácidas. 
 
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Essas enzimas apresentam uma atividade ótima em uma faixa de pH compreendida 
entre 3 e 6. Assim, o interior do lisossomo é caracteristicamente ácido em relação 
ao citosol. Essa condição é mantida devido à presença de bombas de prótons situadas 
em sua membrana, que bombeiam ativamente H+ para o seu interior. 
 É nos lisossomos que ocorre a digestão intracelular. O conteúdo enzimático 
dos lisossomos permite a digestão dos mais variados tipos de substratos. As proteases 
digerem proteínas, as nucleases, ácidos nucléicos, as lipases, lipídeos e as 
fosfatases, fosfatos orgânicos. 
 A técnica citoquímica, para a demonstração dos lisossomos, baseia-se na 
evidenciação das enzimas que são características da organela. A atividade da fosfatase 
ácida é a base da técnica de Gomori, para a fosfatase ácida. O material em estudo é 
incubado em meio contendo glicerofosfato de sódio e nitrato de chumbo, em tampão pH 
5,0. A enzima hidrolisa o glicerofosfato, possibilitando a formação de um precipitado 
incolor de fosfato de chumbo. Em seguida, o material é tratado com sulfeto de amônio, 
que transforma o precipitado incolor em um precipitado negro, o sulfeto de chumbo. 
Como os sais de chumbo são eletrodensos, o produto da reação pode ser visto tanto ao 
microscópio de luz como ao microscópio eletrônico. 
 
1. OBJETIVOS 
 
- Observar em imagens obtidas na microscopia de luz as regiões basófilas 
citoplasmáticas que correspondem ao retículo endoplasmático. 
- Identificar, nas micrografias eletrônicas, retículo endoplasmático, complexo de Golgi e 
lisossomos, bem como relacionar essas organelas às suas funções na célula. 
 
2. ATIVIDADE PRÁTICA 
 
2.1. Pâncreas de rato corado com azul de toluidina e eosina 
 
 O pâncreas é considerado uma glândula mista por produzir secreções exócrina 
e endócrina. A secreção exócrina é constituída por enzimas que participam do processo 
de digestão dos alimentos, e a endócrina, pelos hormônios insulina e glucagon, que 
participam do metabolismo da glicose. 
 Observando-se imagens de cortes de pâncreas ao microscópio de luz, pode-se 
verificar que este órgão é formado, em grande parte, por células secretoras de enzimas, 
exibem uma intensa basofilia citoplasmática na sua região basal quando submetidas à 
coloração por corantes básicos (por ex.: hematoxilina). 
 Os corantes utilizados para a evidenciação do retículo endoplasmático rugoso 
(hematoxilina, azul de toluidina, etc) possuem caráter básico, ligando-se ao RNA dos 
ribossomos aderidos à face citoplasmática das membranas do retículo. 
 
- Após observação de imagens dos cortes de pâncreas, responda: 
 
a. Qual é a posição ocupada pelo núcleo nas células pancreáticas? 
 
Basal. 
 
b. Por que o citoplasma das células pancreáticas não está uniformemente corado? 
 
Porque parte do citoplasma é basófila e outra acidófila. Grande quantida de RNA 
ribossomal na membrana do retículo. 
 
 
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c. Em que se baseiam as técnicas para a evidenciação do retículo endoplasmático 
rugoso? 
 
Coloração ácido-base. No retículo endoplasmático rugosos o corante interage com RNA 
ribossomal e mensageiro. Interação entre o azul de toluidina/hematoxilina e o RNA. 
 
- Observe as figuras de números 01 a 04 de cortes de pâncreas. Após a observação, 
responda: 
 
a. Qual é a organela indicada pelo número 4 na figura 01? 
 
Retículo Endoplasmático Rugoso 
 
b. O que o grande desenvolvimento dessa organela nos permite inferir quanto à 
atividade metabólica da célula? 
 
Alta atividade metabólica 
 
c. Identifique as organelas ou estruturas indicadas pelos números 1, 2 ou 3 conforme 
relacionados abaixo: 
 
Figura 02, n°1: Retículo Endoplasmático Rugoso Figura 03, n°1: Membrana do retículo 
Figura 03, n°2: Lumém Figura 03, n°3: Ribossomos 
Figura 04, n°1: Ribossomos, poli ribossomos 
 
d. Observe a figura 05, que mostra um plasmócito, célula do sistema de defesa do 
organismo, que produz anticorpos. Qual é a organela que está muito desenvolvida nessa 
célula? Com qual número ela está indicada? 
 
Retículo Endoplasmático – número 7. 
 
e. Observe as figuras de 06 a 08 e dê os nomes das organelas ou estruturas indicadas 
por LP, RA (ou REL) e Mi. 
 
RG- retículo granular, LP- lipídeos, Mi- mitocôndria 
 
- O que indicam a proximidade entre as estruturas LP e a organela RA e a abundância 
dessa organela nesse tipo de célula? 
 
O retículo liso está associado à síntese de lipídeos. 
 
- Cite outra função da organela RA. 
 
 
f. Observe a figura 09, que mostra o complexo de Golgi, e dê os nomes das regiões 
(faces) ou estruturas indicadas pelos seguintes números: 
 
3: Face cis, próxima do retículo 4: Face trans 
 
5: Complexo de golgi 6 e 7: Vesículas de secreção 
 
g. A figura 10 mostra uma célula caliciforme. Nessa célula, qual é a posição ocupadapelo núcleo? Por quê? 
 
 
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O núcleo está deslocado para a base, porque as quantidade de organelas ajuda a 
deslocar o núcleo pra base, mas quem faz isso em maior proporção são as vesículas. 
 
h. Identifique, na figura 11, complexo de Golgi, as regiões (faces) ou estruturas indicadas 
pelos seguintes números: 
 
 1: Vesículas de transporte 2: Face cis 
 
 3: Face trans 4: Complexo de golgi 
 
 5: Vesícula de secreção 
 
2.3. Lisossomos 
 
A figura 12 mostra um macrófago, célula do sistema de defesa do organismo, que realiza 
fagocitose. 
 
a. Observe a figura e cite os números que correspondem às seguintes estruturas ou 
organelas: 
 
- membrana plasmática: 4 
 
- pseudópodes: 5 
 
- vesículas de pinocitose: 6 
 
- retículo endoplasmático rugoso: 9 
 
- complexo de Golgi: 10 
 
- mitocôndrias: 11 
 
- lisossomos: 13, 14 
 
b. Qual é a função celular dos lisossomos? 
 
Digestão intracelular 
 
c. Cite algumas das enzimas contidas nos lisossomos e seus respectivos substratos. 
 
As proteases digerem proteínas, as nucleases, ácidos nucléicos, as lipases, lipídeos 
e as fosfatases, fosfatos orgânicos. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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