Se fosse possível sintetizar in vitro uma molécula proteica

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Se fosse possível sintetizar in vitro uma molécula proteica, nas mesmas condições em que esta síntese ocorre nas células, utilizando-se: ribossomos obtidos de células de rato; RNA-mensageiro de célula de sapo; RNA-transportador de células de coelho e aminoácidos ativados de célula bacteriana, a proteína produzida teria a estrutura primária idêntica à:
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do sapo.
seria uma mistura de todas.
do coelho.
do rato.
da bactéria.
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Os ácidos ribonucleico e desoxirribonucleico (RNA e DNA, respectivamente) fazem parte fundamental do Dogma Central da Biologia Molecular, descrito por Francis Crick em 1956. Ambos resultam da polimerização de unidades chamadas nucleotídeos. Essas duas moléculas, embora sejam parecidas, apresentam uma série de diferenças características. Dentre elas:
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o açúcar de 5 carbonos apresenta um grupamento OH no carbono 2’ no DNA. A Timina não está presente no RNA, mas sim no DNA.
o carbono 2’ da ribose no RNA encontra-se ligado ao resíduo de ácido fosfórico, no DNA é o carbono 1’.
o carbono 1’ da ribose no DNA encontra-se ligado ao resíduo de ácido fosfórico, no ARN é o carbono 1’.
o açúcar de 5 carbonos é a ribose no RNA e desoxirribose no DNA. A Uracila não está presente no RNA, mas sim no DNA.
o açúcar de 5 carbonos (pentose) é a ribose no RNA e desoxirribose no DNA. A Timina não está presente no RNA, mas sim no DNA.
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A “impressão digital do DNA” ou DNA fingerprinting, tem sido muito usada na medicina forense para a identificação de vítimas, criminosos e na confirmação de paternidades. Esse exame baseia-se na identificação de trechos do DNA cujas sequências repetidas de nucleotídeos são exclusivas para cada pessoa e transmitidas de pais para filhos de acordo com herança mendeliana. O resultado do teste, representado a seguir, contém padrões dessas marcas para uma determinada família.
Com base nesse resultado assinale a alternativa, INCORRETA:
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I é filho biológico do casal
III é irmão biológico de I
III não pode ser filho biológico deste casal
I, II e III possuem a mesma mãe
II não é filho deste pai
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O metabolismo celular depende de uma série de reações químicas controladas por enzimas, isto é, proteínas que atuam como catalisadores e que podem sofrer mutações genéticas sendo modificadas ou eliminadas. Assinale a alternativa correta, levando em conta os ácidos nucléicos, a ocorrência de mutações e as consequentes mudanças do ciclo de vida da célula.
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A mutação altera a sequência de aminoácidos do DNA, acarretando alterações na sequência de bases do RNA mensageiro e, consequentemente, na produção das proteínas.
Quando algumas proteínas são alteradas por mutações, suas funções no metabolismo celular passam a ser realizadas pelos aminoácidos.
O DNA é constituído por códons, que determinam a sequência de bases do RNA mensageiro, necessária à formação dos anticódons, responsáveis pela produção das proteínas.
No caso de uma mutação acarretar a transformação de um códon em outro relacionado ao mesmo aminoácido, não haverá alteração na molécula proteica formada, nem no metabolismo celular.
As mutações atuam diretamente sobre as proteínas, provocando a desnaturação dessas moléculas e, consequentemente, a inativação delas.
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Atualmente a PCR é o método de rotina para isolar rapidamente sequências específicas a partir de uma mistura complexa de sequências genômicas ou de cDNAs. Dos materiais ou reagentes abaixo relacionados qual não faz parte de uma reação de PCR?
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Tampão.
RNA de alta qualidade
Desoxirribonucleótideos (dNTPs)
Enzima polimerase.
DNA ou cDNA
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Com a tecnologia do DNA recombinante, foram alcançados inúmeros avanços na saúde, como a produção de biofármacos, vacinas recombinantes e terapias gênicas, trazendo novas possibilidades de tratamento, antes inimagináveis e um melhor entendimento das causas e das doenças. Assinale a opção correta acerca da metodologia do DNA recombinante.
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É possível unir fragmentos de DNA de diferentes origens, que tenham sido produzidos por clivagem com a mesma enzima de restrição.
Os plasmídios hoje utilizados nessa metodologia são totalmente artificiais, produtos da própria tecnologia do DNA recombinante e oriundos de combinação de fragmentos artificiais de DNA.
A existência de variantes de splicing em certos genes impede sua clonagem seguida de expressão em organismos hospedeiros.
Cosmídios são vetores menores que plasmídios.
As enzimas de restrição utilizadas na metodologia do DNA recombinante foram inicialmente descobertas a partir de fungos.
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A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas. Com relação a essa técnica, assinale a opção correta.
(0.5 Pontos)
Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA.
A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas.
Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada.
A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma.
Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla.
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As endonucleases de restrição são enzimas que reconhecem uma sequência específica de nucleotídeos do DNA e o digerem (cortam) num ponto determinado. O emprego dessas enzimas no diagnóstico de doenças infecciosas, neoplásicas e hereditárias vem crescendo dia a dia, e está preconizado em alguns programas de saúde pública do Governo Federal.
O esquema abaixo mostra a sequência de bases reconhecida pela enzima Dde I, seu ponto de corte (representado pela seta) e dois fragmentos de DNA a serem examinados.
Considerando a especificidade da enzima e os fragmentos em estudo, e sabendo que o fragmento “A” é o normal e o fragmento “S” representa uma mutação, qual a representação do resultado da corrida eletroforética dos fragmentos resultantes da digestão do DNA de um indivíduo normal e de um homozigoto doente?
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Normal = 1 banda; doente = 2 bandas.
Normal = 2 bandas; doente = 2 bandas.
Não é possível diferenciar a mutação nestes fragmentos.
Normal = 1 banda; doente = 1 banda.
Normal = 2 bandas; doente = 1 banda.
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O Southern blot é uma técnica de biologia molecular utilizada para conferir se uma determinada sequência de um ácido nucleico encontra-se ou não presente em uma amostra analisada. Isto é realizado por meio de um realce da eletroforese em gel de agarose. A técnica recebeu esse nome em homenagem ao seu criador, o biólogo britânico Edwin Southern, levando ao batismo de outros métodos blot com trocadilhos ao nome de Southern (significa "do sul", em português), como é o caso de Western blot ("ocidente") e Northern blot ("norte"). O princípio da técnica de southern blot baseia-se:
(0.5 Pontos)
na hibridação de moléculas de RNA, sem a necessidade de marcação de sondas.
na hibridação de moléculas de DNA com sondas (moléculas de DNA ou RNA) marcadas.
no sequenciamento automático de nucleotídeos.
na imunoprecipitação de proteínas ligadas à estrutura do DNA.
no sequenciamento manual de nucleotídeos.
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Em investigações criminais, alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção CORRETA.
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Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida.
A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência.
As etapas utilizadas para realizar aPCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem.
Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação.
Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs).
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Com relação à Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), julgue os itens abaixo e, em seguida, assinale a opção correta. I – A DNA polimerase pode ser direcionada para sintetizar uma região específica do DNA. II – As duas fitas de DNA podem servir como molde para a síntese de uma nova molécula, desde que seja fornecido um oligonucleotídeo iniciador (Primer) para cada fita. III– Na PCR, a região do DNA que deverá ser amplificada é demarcada pelo oligonucleotídeo iniciador e as novas fitas de DNA sintetizadas têm início a partir desse iniciador. IV– O resultado final da PCR é a amplificação de uma região específica do DNA. V – A Taq polimerase, DNA polimerase extraída da bactéria Thermus aquaticus, é uma das limitações da PCR, por ser termossensível, sendo necessário ser adicionada a cada ciclo da reação. Estão certos apenas os itens:
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I, II e IV.
Todas as afirmações acima estão incorretas.
II, IV e V.
I e II.
I, II, III e IV
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Em relação à estrutura dos ácidos nucleicos, considerando-se DNA (ácido desoxirribonucleico) e RNA (ácido ribonucleico), analise as afirmativas abaixo. I. Ligações fosfodiéster ligam os resíduos de nucleotídeos no DNA e no RNA. II. Na dupla-hélice de DNA, duas fitas antiparalelas giram uma sobre a outra, interagindo por meio de ligações de hidrogênio entre as bases das fitas opostas. III. Moléculas de RNA são, em geral, fita simples e podem formar pares de bases intramolecularmente. Assinale a alternativa correta:
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Nenhuma das afirmativas está correta.
Estão corretas apenas as afirmativas II e III.
Estão corretas todas as afirmativas.
Estão corretas apenas as afirmativas I e III.
Estão corretas apenas as afirmativas I e II.
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No que diz respeito à técnica de PCR em tempo real empregada na quantificação do genoma de alguns vírus, assinale a afirmativa correta.
(0.5 Pontos)
É uma técnica utilizada quando não se conhece exatamente qual a melhor temperatura de hibridação para as sondas utilizadas.
A técnica baseia-se na utilização da enzima transcriptase reversa para que seja detectado o acúmulo do produto amplificado
É uma técnica de amplificação em que os iniciadores (ou primers) são adicionados à reação em tempos específicos.
Os produtos da PCR são hibridados a sondas em fitas e os híbridos detectados com streptavidina conjugada à fosfatase alcalina em tempos específicos.
Baseia-se na utilização de sondas marcadas com substâncias fluorescentes e um monitoramento contínuo para que possa ser medido o acúmulo do produto amplificado.
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A síndrome respiratória aguda severa (SARS) é causada por um coronavírus, cujo genoma é de RNA simples-fita e tem cerca de 30.000 bases. Tornou-se necessária a obtenção de uma técnica rápida para diagnóstico, o que pôde ser feito por RT-PCR (Polymerase Chain Reaction com transcriptase reversa). Para isso, pode ser utilizado um dos genes desse vírus, como por exemplo aquele que codifica a glicoproteína S do envelope. O esquema abaixo indica seqüências de regiões desse gene, a partir das quais foram desenhados os iniciadores I e II (16 nucleotídeos indicados pelo tamanho da seta) utilizados na PCR após a reação com a transcriptase reversa.
As sequências corretas desses iniciadores, de modo a garantir a amplificação por PCR, são:
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Iniciador-I 5'-TATTTTGCTGCCACAG-3' e Iniciador-II 5'-ACATACTATGATAAAC-3'
Iniciador-I 5'-CTGTGGCAGCAAAATA-3' e Iniciador-II 5'-ACATACTATGATATTC-3'
Iniciador-I 5'-TATTTTGCTGCCACAG-3' e Iniciador-II 5'-TGTATGATACTATAAG-3'
Iniciador-I 5'-TATTTTGCTGCCACAG-3' e Iniciador-II 5'-GAATATCATAGTATGT-3'
Iniciador-I 5'-TATTTTGCTGCCACAG-3' e Iniciador-II 5'-TGTATGATACTATAAG-3'
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Sobre a composição e estrutura dos ácidos nucleicos avalie se podemos dizer que: I- Os nucleotídeos são compostos por uma molécula de açúcar (pentose), um grupamento fosfato e uma base nitrogenada. II- As purinas são formadas por um único anel enquanto as pirimidinas são formadas por dois anéis heterocíclicos ligados. III- O modelo da estrutura tridimensional da molécula de DNA, proposto por Watson e Crick, consiste em uma dupla hélice, com giro para a direita, onde as fitas são complementares e antiparalelas. IV- As bases nitrogenadas estão voltadas para o interior da molécula de DNA e são responsáveis por manter as duas fitas unidas por meio de pontes de hidrogênio. Está correto o que se afirma em:
(0.5 Pontos)
I, II, III e IV.
I, II e III, apenas.
I, III e IV, apenas.
II, apenas.
II, III e IV, apenas.
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O ácido desoxirribonucleico (DNA) apresenta características bioquímicas e estruturais próprias. Dentre elas, temos o conteúdo de bases nitrogenadas que obedecem às regras de Chargaff. Essa regra concorda plenamente com a conformação em duas fitas antiparalelas pareadas por pontes de hidrogênio. Considerando que o genoma nuclear humano apresenta em sua composição aproximadamente 21% de citosina, quais são as porcentagens esperadas das outras três bases?
(0.5 Pontos)
18% de Timina, 31% de Adenina e 30% de Uracila.
21% de Uracila, 15% Guanina e 43% de Adenina.
29% de Adenina, 21% de Guanina e 29% de Timina.
29% de Guanina, 21% de Adenina e 29% de Timina.
21% de Adenina, 21% de Timina e 37% de Uracila.
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As afirmativas abaixo se referem ao processo de transcrição: I- O sítio promotor é a região da molécula de DNA que determina o início da transcrição e também, qual das duas fitas do DNA deverá servir de molde para esse processo. II- O primeiro nucleotídeo a ser transcrito recebe a numeração de +1 e os nucleotídeos subsequentes recebem a numeração crescente. Já os nucleotídeos que antecedem o nucleotídeo +1 recebem numeração negativa. III- O promotor situa-se antes do nucleotídeo +1, também é transcrito e depois é removido por uma maquinaria proteica específica. Está correto o que se afirma em:
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I, II, III.
I e III, apenas.
I e II, apenas.
II e III, apenas.
II, apenas.
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Em um acidente, embora os corpos das vítimas fatais ficassem queimados e irreconhecíveis, foi possível preparar, a partir de fragmentos de tecidos, amostras de DNA nuclear e mitocondrial de todos os mortos. Faleceram no acidente dois filhos de uma senhora, cada um de um casamento diferente. Uma das formas possíveis de identificar os despojos dos filhos dessa senhora consiste em verificar se existe homologia do:
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DNA nuclear do marido e do ex-marido da senhora com o DNA mitocondrial das vítimas
DNA mitocondrial da senhora com o DNA mitocondrial das vítimas
DNA nuclear da senhora com o DNA mitocondrial das vítimas
DNA mitocondrial da senhora com o DNA nuclear das vítimas
DNA mitocondrial do marido e do ex-marido da senhora com o DNA mitocondrial das vítimas
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Uma das estratégias utilizadas para selecionar células que contenham o plasmídeo com o gene de interesse é:
(0.5 Pontos)
utilizar exclusivamente leveduras como células hospedeiras.
ferver as células, já que os clones que contêm a molécula de DNA recombinante são mais resistentes à temperatura de 100 ºC por 10 minutos.
promover a imunoprecipitação das células, em que os anticorpos serão compatíveis com a sequência de DNA do gene a ser clonado
marcar o gene de interesse com substância fluorescente, pois será possível perceber a diferença por meio de alteração da cor das células.
utilizar plasmídeos que contenham sequências de genes de resistência a antibióticos
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Os temas associados à Genética provocam impactos pelas perspectivas que abrem em relação à sua aplicabilidade prática e geram polêmicas e sentimentos que extrapolam o campo das ciências biológicas e avançam para a ética, a religião, a economia e a política, entre outras. A engenharia genética deu seus primeiros passos no início da década de 1970, quando o geneticista Paul Berg desenvolveu um método e obteve o DNA recombinante, que é um DNA:(0.5 Pontos)
utilizado como “tesoura biológica” para cortar outras moléculas de DNA com grande precisão em pontos específicos.
que codifica a posição de determinado tipo de aminoácido em uma proteína.
constituído de materiais genéticos oriundos de organismos de mesma espécie, mas que sofreram mutação, portanto com características diferentes.
constituído de materiais genéticos oriundos de organismos de espécies diferentes.
em que as sequências de bases nitrogenadas não têm relação com a síntese protéica.