Biologia Molecular Prova I

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1O PCR produz uma série de cópias de um determinado fragmento de DNA ou cDNA 
de uma maneira bastante rápida e eficiente. No entanto, de acordo com o seu objetivo de 
pesquisa, a PCR qualitativa ou quantitativa se torna mais eficaz para fornecer os 
resultados esperados. De acordo com essas duas técnicas, classifique V para as 
sentenças verdadeiras e F para as falsas: 
 
( ) A PCR qualitativa indica a presença de um fragmento específico de DNA ou 
cDNA em uma amostra, mas não indica quanto do gene está expresso na amostra. 
( ) A qPCR é conhecida como PCR em tempo real (quantitativa) e fornece 
informações precisas relativas à quantidade de expressão de um gene. 
( ) A PCR qualitativa necessita de um termociclador específico capaz de quantificar a 
amplificação dos fragmentos de DNA ao final de cada ciclo em tempo real. 
 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 
A 
F - F - V. 
B 
F - V - F. 
C 
V - F - F. 
D 
V - V - F. 
2A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da 
molécula a ser isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e 
poliacrilamida para a técnica de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir: 
 
I- A poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base 
nitrogenada de diferença. 
II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda presente no gel, 
representa um agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes. 
III- No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se 
movimentar, enquanto fragmentos maiores de DNA podem migrar facilmente no gel de 
agarose. 
 
Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
Somente a sentença I está correta. 
B 
Somente a sentença III está correta. 
C 
Somente a sentença II está correta. 
D 
As sentenças I, II e III estão corretas. 
3A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as 
sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de 
amplificar a molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA: 
A 
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas 
sólidas, nas quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, 
formando uma biblioteca de DNA. 
B 
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o 
DNA a ser sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a 
uma placa de vidro por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca de DNA, 
que será submetida ao PCR. 
C 
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado em 
fragmentos de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada 
novo nucleotídeo adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção 
ocorre em tempo real. 
D 
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA 
de forma portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos 
equipamentos, semelhantes a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada. 
4Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar o 
gene de um organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica possíveis 
mutações, cadeias de transmissão e origem da chegada do vírus a uma região específica. 
De acordo com as técnicas empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V 
para as sentenças verdadeiras e F para as falsas: 
 
( ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizados para o sequenciamento com o 
método de Sanger, em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência com 
eletroforese. 
( ) O pirosequenciamento tem como base a formação de pirofosfato a cada novo 
nucleotídeo adicionado à nova fita. 
( ) O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento 
dos testes de sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de 
sequenciamento de DNA. 
 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 
A 
F - F - V. 
B 
V - V - F. 
C 
V - F - F. 
D 
V - F - V. 
5A técnica de eletroforese consiste na separação de moléculas de DNA, RNA ou 
proteínas em gel de agarose ou poliacrilamida. Essa separação se dá de acordo com o 
tamanho da molécula. Com base no processo de eletroforese em gel, analise as 
sentenças a seguir: 
 
I- Uma corrente elétrica é transmitida através do gel do polo negativo ao polo positivo. 
II- As moléculas de DNA são carregadas negativamente e são carregas por afinidade 
para o polo positivo. 
III- Moléculas menores tendem a migrar com maior dificuldade no gel. Já as moléculas 
maiores, tendem a migrar mais facilmente. 
 
Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
As sentenças I e III estão corretas. 
B 
Somente a sentença III está correta. 
C 
As sentenças I e II estão corretas. 
D 
Somente a sentença II está correta. 
6Com o passar do tempo, as técnicas de sequenciamento ficaram mais sofisticadas e 
automatizadas. Sobre o sequenciamento de segunda geração, analise as sentenças a 
seguir: 
 
I- O Next Generation Sequencing (NGS) não utiliza nucleotídeos terminadores de 
cadeira, permitindo a criação de plataformas mais eficientes e rápidas. 
II- Os métodos de segunda geração compreendem o uso de plataformas portáteis com 
processamento rápido e eficiente, em plataformas do tamanho de um pen drive. 
III- Os métodos de segunda geração compreendem o pirosequenciamento, o 
sequenciamento por síntese, sequenciamento por terminação de cadeia reversível, 
sequenciamento por hibridização e ligação, dentre outros. 
 
Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
As sentenças I e II estão corretas. 
B 
Somente a sentença I está correta. 
C 
Somente a sentença II está correta. 
D 
As sentenças I e III estão corretas. 
7O uso de bibliotecas de DNA ou cDNA permitem a manutenção e replicação do 
material genético em grandes coleções mantidas em colônias de bactérias, nas quais um 
fragmento específico de DNA ou um gene podem ser procurados. Sobre as bibliotecas 
de DNA e cDNA, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas: 
 
I- A bactéria E. coli é a principal célula hospedeira utilizada no processo de clonagem 
em vetores, inclusive na construção de bibliotecas de DNA e cDNA, em que cada 
bactéria irá internalizar apenas um vetor. 
 
PORQUE 
 
II- Assim que o vetor é inserido, em condições adequadas de diluição e meio de cultivo, 
em poucas horas corre a formação de diversos clones dos fragmentos inseridos, sendo 
cada um encontrado em uma colônia diferente de crescimento bacteriano. 
 
Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I. 
B 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I. 
C 
A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. 
D 
As asserções I e II são proposições falsas. 
8Com o desenvolvimento das técnicas de clonagem de DNA, tornou-se possível a 
construção de bibliotecas de DNA e cDNA. Sobre as bibliotecas, assinale a alternativa 
CORRETA: 
A 
As bibliotecas de mRNA são originadas a partir da fragmentação do DNA com enzimas 
de restrição e, posteriormente, da clonagem do DNA. 
B 
As bibliotecas de cDNA contêm somente os éxons de uma molécula de mRNA, que 
posteriormente é convertido em cDNA pela técnica de transcrição reversa. 
C 
Uma biblioteca de DNA contém somente os íntrons de uma molécula de DNA, sendo 
extremamente específico para identificar o conteúdo expresso em uma célula ou tecido. 
D 
A biblioteca de cDNA contém éxons e íntrons, já que são clonados todos os fragmentos 
de DNA, incluindo o não codificante. 
9O sequenciamento Shotgun, o qual é aplicado como estratégia para o sequenciamento 
de grandes sequências de nucleotídeos, especialmente genomas inteiros dos mais 
diversos organismos.Sobre o sequenciamento Shotgun, avalie as asserções a seguir e 
relação proposta entre elas: 
 
I- Devido ao grande volume de informação gerado por esse procedimento, é necessário 
que programas computacionais sofisticados sejam utilizados para a determinação da 
sequência do material em estudo. 
 
PORQUE 
 
II- Na técnica Shotgun, o material clonado é sequenciado diversas vezes, fornecendo 
uma quantidade de dados de cerca de 10 vezes o tamanho do material genético que está 
sendo estudado, assegurando que todos os nucleotídeos presentes no material genético 
sejam detectados e inseridos na sequência final do DNA. 
 
Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I. 
B 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I. 
C 
As asserções I e II são proposições falsas. 
D 
A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. 
10Para detecção do DNA em bibliotecas de DNA, uma membrana é colocada em 
contato com as colônias na placa logo após o crescimento das colônias bacterianas em 
placas de cultivo contendo meio sólido. Algumas células irão se aderir à membrana, 
formando uma impressão das colônias presentes na placa. Em seguida, as células 
aderidas sofrem lise celular, a fim de liberar o DNA, que permanece aderido à 
membrana. Por fim, a membrana é incubada com sondas de hibridização marcadas, 
complementares à porção do gene de interesse, permitindo a visualização da posição 
dos clones que contêm o fragmento de interesse. Sobre a técnica exposta, assinale a 
alternativa CORRETA: 
A 
Southern-blot. 
B 
Hibridização in situ. 
C 
Hibridização em colônia. 
D 
Northen-blot.