POP 19 - Contagem de Leuccitos - Camara de Neubauer

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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO 
Número : 
LAB - POP- 19 
CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: 
DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios 
 
ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI 
 
DATA: 14/06/2017 
Revisão: 
00 
 
 
1 
 
1. AULA PRÁTICA 
 
• Contagem de Leucócitos em Câmara de Neubauer 
 
2. OBJETIVO 
 
• Realizar a contagem global e específica dos leucócitos, representados pela leucometria e 
pelo estudo quantitativo. 
 
3. DISCIPLINA 
 
• Hematologia Clínica 
 
4. MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO 
 
4.1. Amostra 
 
• Sangue total obtido livre de hemólise em tubo de coleta contendo EDTA 
 
4.2. Materiais Utilizados 
 
QUANTIDADE DESCRIÇÃO DA VIDRARIAS E EQUIPAMENTOS 
5 • Tubo de ensaio para coleta à vácuo (EDTA) 
5 • Seringas com agulha (5 mL) 
1 • Garrote para coleta 
1 • Algodão (pacote) 
5 pares • Luvas 
5 • Bandagem de Proteção pós Coleta 
1 • Pipeta de 100µL 
1 • Pipeta de 20µL 
10 • Ponteiras para pipetas de 100µL 
10 • Ponteiras para pipetas de 20µL 
5 • Microscópios 
1 • Câmara de Neubauer 
 
QUANTIDADE REAGENTES/INSUMOS 
1 • Frasco de Álcool 70% 
1 • Líquido de Turck 
 
 
 
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO 
Número : 
LAB - POP- 19 
CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: 
DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios 
 
ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI 
 
DATA: 14/06/2017 
Revisão: 
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OBS: A quantidade material listada abaixo é estimada para apenas um grupo de alunos. A quantidade de 
grupos, por aula, deve ser definida pelo professor no momento do agendamento da aula prática. Sugerido 
03 - 06 alunos por grupo. 
 
4.3. Procedimento Técnico 
 
• Colher 5 mL de sangue por punção venosa (Tubo com EDTA); 
• Pipetar 400µL do líquido diluidor (Turck) em um tubo de ensaio. 
• Com a pipeta transferir 20µL de sangue. Limpar a parede externa da ponteira com auxílio de 
papel absorvente. 
• Transferir os 0,02 ml de sangue para o tubo com o líquido diluidor, lavando com ele o 
interior da ponteira por aspiração e expulsão do líquido. A diluição é de 1:21 
• Agitar suavemente por inversão para uma correta homogeneização. 
• Com uma pipeta preencher os retículos da câmara de contagem, evitando excesso de líquido 
e bolhas de ar sob a lamínula aderida firmemente à câmara. 
• Deixar repousar por dois minutos para sedimentação dos glóbulos. 
• Focalizar a preparação com pequeno aumento no microscópio para localizar o retículo e 
observar a distribuição uniforme dos leucócitos. Observar então, com aumento de 100X ou 
400X, conforme necessidade. 
• Fazer a contagem de todas as hemácias encontradas nos quadros marcados “L” na figura 
relativa ao retículo de Neubauer, ou seja, 4mm². 
• Sistematizar a contagem segundo a figura abaixo. Contar os elementos em negro. 
 
 
 
Cálculo 
 
• Leucócitos por µl de sangue = Lc x 21 x 10 
 
L L 
L L 
4 
Leucócitos/mm³ = ? de leucócitos X 50 
 
 
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO 
Número : 
LAB - POP- 19 
CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: 
DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios 
 
ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI 
 
DATA: 14/06/2017 
Revisão: 
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• Lc = número de leucócitos contados nos 4 quadrantes; 
• 10 = Fator de conversão para mm³ (profundidade) 
• 21 = fator de conversão da diluição; 
• 4 = Fator de conversão para 1 mm³ 
4.4. Valores de Referência 
 
• Adultos: 5.000 a 10.000/mm³ 
• RN: 10.000 a 25.000/mm³ 
• Crianças: Até 1 ano: 6.000 a 18.000/mm³ 
 4 a 7 anos: 6.000 a 15.000/mm³ 
 8 a 12 anos: 4.500 a 13.500/mm³ 
 
5. EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO/ PARAMENTOS 
 
• Luva de Procedimento 
• Jaleco 
• Calçado fechado 
 
6. REFERÊNCIAS 
 
• CARVALHO, William de Freitas. Técnicas Médicas de Hematologia e Imuno-
Hematologia. 8ª Edição, Belo Horizonte: Coopmed Editora, 2008. 
 
• MOURA, Roberto de Almeita, et al. Técnicas de Labortório. 3ª Edição, São Paulo: Editora 
Atheneu, 2008. 
 
7. OBSERVAÇÕES