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QUESTÃO 1 • As enzimas de restrição são indispensáveis na análise da estrutura dos cromossomos, no sequenciamento de moléculas de DNA, no isolamento de genes e na criação de moléculas novas de DNA, que podem ser clonadas. Baseado nessas informações, ANALISE as seguintes afirmativas sobre essas enzimas e ASSINALE a alternativa correta: I. Atuam reconhecendo sequências palindrômicas específicas da molécula de DNA e RNA fita simples; II. Cada enzima atua em uma única sequência palindrômica; III. Sua nomenclatura está relacionada aos fungos em que foram encontradas; IV. São chamadas de endonucleases pois cortam entre nucleotídeos em ambas as fitas do DNA. V. As enzimas de restrição reconhecem uma sequência de tamanhos de DNA de 4 a 8 pares de bases. Alternativas I e II, apenas. II e III, apenas. IV e V, apenas. I, II e III, apenas. II, IV e V, apenas. QUESTÃO 2 • O processo de divisão celular, que ocorre em todos os organismos, é descrito como uma sequência de eventos que resultam na duplicação do genoma, denominado replicação do DNA. Em relação ao processo de replicação, ASSINALE a alternativa correta: Alternativas A DNA polimerase é uma enzima que atua na síntese de DNA, mas não é capaz de fazer a autocorreção de nucleotídeos incorretamente emparelhados durante a polimerização. A replicação da molécula de DNA consiste em um processo conservativo, no qual a fita original atua como molde para a síntese da nova fita complementar. A síntese do DNA ocorre em umas das fitas na direção 5'-3', e na outra na direção 3'-5', devido estas serem antiparalelas. O processo de replicação se inicia com a separação das duas fitas do DNA, por meio da ação de enzimas que rompem as pontes de hidrogênio, abrindo os pares de base nitrogenada. A replicação de DNA é dispersiva, porque as duas moléculas de DNA resultantes são misturas de DNA pai e DNA filha. QUESTÃO 3 • O DNA é a molécula mais importante nas células vivas, e contém toda a informação que uma célula precisa para viver e se propagar. Em relação a estrutura da molécula de DNA, ANALISE as seguintes assertivas: I. A pentose presente na molécula de DNA é denominada ribose. II. O DNA apresenta em sua composição quatro tipos de bases nitrogenadas sendo elas: adenina, timina, citosina e uracila. III. A ligação entre os nucleotídeos de uma cadeia de DNA ocorre por pontes de hidrogênio, na qual um grupo fosfato liga pentoses de nucleotídeos distintos. IV. As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas. V. As bases nitrogenadas adenina e timina, e guanina e citosina apresentam complementariedade. É CORRETO o que se afirma em: Alternativas I e II, apenas. II e III, apenas. IV e V, apenas. I, II e V, apenas. II, III e IV, apenas. QUESTÃO 4 • O desenvolvimento e o uso de marcadores moleculares para a detecção e a exploração dos polimorfismos do DNA constituem um dos avanços mais significativos no campo da genética molecular. Isso se deve ao fato de que a utilização de marcadores localizados no DNA fornece um número praticamente ilimitado de informações distribuídas aleatoriamente ao longo do genoma. Com relação aos marcadores moleculares, ANALISE as assertivas a seguir: I. O ISSR é uma técnica baseada em SNPs que envolve a amplificação de fragmentos de DNA presentes em uma distância amplificada entre dois SNPs. II. O polimorfismo de nucleotídeo único é um tipo de marcador que detecta os polimorfismos específicos e as diferenças em uma única posição no genoma. III. O AFLP se baseia na amplificação seletiva por PCR de fragmentos de restrição gerados por enzimas de restrição específicas e ligados a adaptadores oligonucleotídeos. IV. Os polimorfismos RAPD resultam da variação da sequência nos locais de anelamento do primer e/ou da variação de comprimento da sequência-alvo situada entre os locais de ligação do primer. V. Os microssatélites constituem mais um tipo de marcador em que longas sequências que se repetem em um número variável no genoma podem ser amplificadas. É CORRETO o que se afirma em: Alternativas I e II, apenas. II e III, apenas. IV e V, apenas. II, III e IV, apenas. I, IV e V, apenas. QUESTÃO 5 • Por meio da técnica de PCR, é possível detectar se o material genético do vírus (RNA) está sendo expresso no corpo do indivíduo. O protocolo da técnica para a detecção do vírus SARS-CoV-2 foi padronizado logo após o sequenciamento do material genético do vírus, uma vez que seria necessário saber os nucleotídeos contidos no material genético para poder detectá-lo. Baseado nessas informações, ASSINALE a alternativa que contém o tipo de PCR utilizado para a investigação da Covid-19: Alternativas PCR multiplex PCR em tempo real Nested PCR RT-PCR RFLP-PCR QUESTÃO 6 • “Pela primeira vez a Academia Real Sueca de Ciências premiou, conjuntamente, duas cientistas mulheres com o Prêmio Nobel de Química. As pesquisadoras Emmanuelle Charpentier, francesa e diretora do Instituto Max Planck de Biologia de Infecções (Berlim), e Jennifer A. Doudna, americana e professora da Universidade da Califórnia em Berkeley (EUA), receberam o prêmio pelo desenvolvimento da técnica de edição gênica chamada Crispr-Cas 9. O método do Crispr-Cas 9 permite a edição precisa do DNA de microrganismos, plantas e animais, atuando como uma “tesoura” capaz de “cortar” regiões específicas do DNA, regulando a expressão de determinadas proteínas. Dessa forma, a técnica apresenta um importante potencial no desenvolvimento de terapias para doenças genéticas e câncer.” Disponível em: <https://profissaobiotec.com.br/nobel-quimica-crispr/>. Acesso em: 16 abr. 2022. Considerando o funcionamento do sistema CRISPR-Cas 9 AVALIE as asserções a seguir e a relação propostas entre elas: I. A forma como ocorre o reconhecimento da sequência palindrômica no sistema CRISPR- Cas 9 não é a mesma da enzima EcoRI. PORQUE II. A EcoRI é uma enzima de restrição que, embora realize cortes na molécula de DNA assim como o sistema CRISPR-Cas, é extraída da bactéria E. coli, enquanto CRISPR-Cas não pode ser extraído desta espécie de bactéria. A respeito dessas asserções, ASINALE a opção correta: Alternativas As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I. As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I. A asserção I é uma proposição verdadeira e a II é uma proposição falsa. A asserção I é uma proposição falsa e a II é uma proposição verdadeira. As asserções I e II são proposições falsas. QUESTÃO 7 A reação em cadeia da polimerase (PCR) permite que os fragmentos de DNA sejam amplificados um bilhão de vezes em poucas horas e é caracterizada como uma técnica rápida, totalmente automatizada e sem a necessidade de uso de células. Com relação a essa técnica, ANALISE as afirmativas abaixo: I. A enzima Taq-polimerase, que adicionará os nucleotídeos na formação da fita, é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA. II. Os iniciadores (primers) se associam às regiões complementares do DNA de interesse e iniciam o processo de amplificação. III. O DNA conduzido para o processo de PCR percorre três etapas principais: replicação, transcrição e tradução. IV. A técnica de PCR permite detectar e amplificar apenas fragmentos de DNA. V. Na primeira etapa da PCR, o DNA isolado, é submetido a uma desnaturação quando é exposto a uma diminuição da temperatura, resultando na separação de fitas. É CORRETO o que se afirma em: Alternativas I e II, apenas. II e III, apenas. IV e V, apenas. I, II e III, apenas. II, IV e V, apenas. QUESTÃO 8 Para se obter uma molécula de ácido nucleico,é preciso extraí-la do interior da célula, obtendo-a de maneira íntegra e pura. Ao realizar uma extração de DNA, um pesquisador precisa romper as biomembranas celulares e inativar as proteínas que podem danificar o DNA. Com base nessas informações, ASSINALE a alternativa que contém os reagentes que apresentam estas funções, respectivamente: Alternativas SDS e NaCl 5M EDTA e Tris-HCl SDS e EDTA Proteinase K e SDS EDTA e SDS QUESTÃO 9 “Em 2003, o Projeto Genoma Humano fez história ao sequenciar 92% do genoma humano. Mas por quase duas décadas desde então, cientistas lutam para decifrar os 8% restantes. Agora, uma equipe de quase 100 cientistas do Consórcio Tlomere-to-Telomere (T2T) revelou o genoma humano completo – a primeira vez que foi sequenciado em sua totalidade, dizem os pesquisadores. A nova pesquisa introduz 400 milhões de letras ao DNA previamente sequenciado – o valor de um cromossomo inteiro. O genoma completo permitirá aos cientistas analisar como o DNA difere entre as pessoas e se essas variações genéticas desempenham um papel na doença.” Disponível em: <https://www.cnnbrasil.com.br/saude/cientistas-sequenciam-o-genoma- humano-completo-pela-primeira-vez/>. Acesso em: 08 mai. 2022. Considerando as técnicas de sequenciamento de DNA, ANALISE as assertivas abaixo: I. O método de Sanger utiliza o mecanismo de síntese de DNA, os DNA polimerases, uma fita de DNA complementar, um iniciador marcado radioativamente, desoxinucleotídeos trifosfatos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTP’s). II. O pirosequenciamento consiste na incorporação de um nucleotídeo que traduz a emissão de luz a partir de um pirofosfato liberado na reação quando cada nucleotídeo específico é incorporado à molécula de DNA. III. O sequenciamento automatizado de Sanger analisa as fitas de DNA marcadas com qualquer um dos quatros desoxinucleotídeos trifosfatos (dNTPs) marcados com compostos fluorescentes, que são usados para identificar cada uma das posições dos diferentes nucleotídeos na cadeia. É CORRETO o que se afirma em: Alternativas I, apenas. II, apenas. III, apenas. I e II, apenas. I, II e II, apenas. QUESTÃO 10 As técnicas de hibridização são muito utilizadas em biologia molecular, dentre elas podemos citar o Southern, Northern e Western Blot. Para tanto, uma sonda com uma sequência de bases complementares, a qual se ligará ao fragmento da sequência do gene de interesse será utilizada. Em relação a essas técnicas, ASSINALE a alternativa que indica para que elas são utilizadas: Alternativas Identificar proteínas, oligoelementos e DNA, respectivamente. Identificar DNA, proteínas e nucleotídeos, respectivamente. Identificar ácidos nucleicos, RNA e proteínas, respectivamente. Identificar DNA, RNA e proteínas, respectivamente. Identificar polinucleotídeos de aminoácidos, RNA e proteínas, respectivamente.
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