RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA

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RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA DE PARASITOLOGIA CLÍNICA
TÉCNICAS DE HOFFMAN, FAUST E RUGAI
A parasitologia é a ciência que estuda os parasitos, seus hospedeiros e as relações existentes entre eles, existe hoje várias técnicas que podem ser empregadas, dentre as mais usadas é o Método de Hoffmann, Pons e Janer ou Lutz, Sedimentação Espontânea. Essa técnica nos possibilita a detecção de ovos e larvas contidos na amostra. A técnica se dá por Sedimentação, e foi desenvolvida para diagnostico das enteroparasitoses. Muito útil nos ensaios preliminares para identificar que grupos de parasitas estão presentes em uma determinada amostra (NEVES,2011).
Outro método importante usado é. Método de Faust. Usado para a pesquisa de cistos e alguns oocistos de protozoários, permitindo, também, o encontro de ovos leves. E também o Método de Baermann-Moraes e método de Rugai. Indicados para a pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis.
 A parasitologia clinica é de extrema importância na realização de exames e diagnósticos fundamentais para investigar, diagnosticar parasitas intestinais e estão na rotina dos Laboratórios de Análises Clinicas. O exame parasitológico de fezes tem como finalidade diagnosticar a presença de diferentes formas parasitárias que são eliminadas nas fezes.
Material utilizado:
· Frasco Borrel
· Água destilada
· Cálice cônico
· Peneira de filtração
· gaze
· “Palito bastão”
· Tubo 10ml
· Lâmina de Microscopia 
· Lamínulas
· Alça Bacteriológica
· Pipetas 
· Lugol
· Proveta 250 mL
· Microscópios com objetivas de 10 e 40 x
· Bastão de vidro.
· Centrifuga de tubos
· Becker vidro
· Sulfato de Zinco
· Amostra de Terra
· H²O²
· Reativo de Mayer 
A coleta deve ser feita corretamente e com muito cuidado para que não ocorra a contaminação, nunca colher diretamente do vaso, ter o cuidado caso use papel higiênico para não contaminar com pedaços de papel, evacuar no penico ou numa folha de papel branco colocada no chão do banheiro seria o ideal. 
O armazenamento deve ser feito em frasco estéril de boca larga, em uma quantidade razoável, aproximadamente 30 a 40ml (meio pote); Coletar um pouco de fezes com uma pazinha (que vem junto do pote) e coloca-la dentro do frasco; Procurar pegar de três parte das fezes a amostra coletada para o exame; Escrever o nome completo no frasco e guardar na geladeira com temperatura de aproximadamente 4°C e transportadas ao laboratório dentro de até 24 horas.
Macroscopia das fezes:
Nesse exame prévio deve-se verificar a consistência das fezes (firme, diarreica ou pastosa), a coloração (acastanhada, amarelada, avermelhada, esverdeada ou embranquecida), se existe estruturas diferentes, e a presença de sangue ou muco.
Maneje o pode com a amostra com cuidado utilizando, Bastão de vidro ou Palito bastão para visualizar com cuidado, sempre evitando o contato direto com a amostra evitando contaminação.
Microscopia das fezes:
Método de Hoffman, Pons e Janer ou de Lutz.
É utilizado para a pesquisa de cistos, oocistos, ovos e larvas. Fundamenta-se na sedimentação espontânea em água, sendo indicado para recuperação de ovos considerados pesados como os de Taenia spp, S. mansoni e ovos inférteis de A. lumbricoides.
Materiais utilizados; Frasco (com a amostra), Cálice cônico, Água destilada, Peneira de filtração, Pipeta Pasteur, Lâmina de Microscopia, lugol, Lamínula, Tubo 10 ml, Gaze e Bastão de vidro.
Procedimento: Pegue a amostra, certifique-se que esteja corretamente identificada e fechada, liquefaça a amostra utilizando água destilada com o uso o bastão no próprio pote, caso não haja a necessidade de fracionar a amostra. Filtre a amostra dissolvida em Gaze sobre o Cálice, termine a filtragem e descarte o residual na Gaze no lixo hospitalar. Deixe a amostra filtrada “descansar” de 2 a 24 horas para realizar a leitura do sedimento que ficara no fundo do Cálice, após o tempo passado, coletar uma gota do sedimento no fundo do Cálice utilizando a pipeta pasteur, pingue na lâmina de microscopia com uma gota de lugol, misture usando uma lamínula e monte a lâmina com cuidado sem formar bolhas para a análise Microscópica.
Método de Faust e cols.
Fundamenta-se em centrífugo-flutuação de cistos, oocistos, ovos leves e larvas em solução de sulfato de zinco, na densidade 1,18g/ml. Para fezes preservadas recomenda-se a densidade de 1,20g/ml. É indicado para a concentração de cistos de protozoários.
Materiais utilizados; Cálice cônico, Becker vidro, Água destilada, Centrifuga de Tubos, alça bacteriológica, lâmina de microscopia, Lamínula, Lugol, Tubo 10 ml, Pipeta Pasteur 10ml, Sulfato de Zinco, Gaze e Bastão de vidro.
Procedimento: Pegue um Tubo 10 ml, e com a Pipeta Pasteur 10ml pegue 10ml da amostra filtrada da analise anterior para realizar essa técnica, e levar para centrifugar por 1 minuto a 2500rpm, após completar a centrifugação esperar parar completamente a rotação, e coletar o frasco, com ele em mão nota-se que o sedimento mais denso foi para o fundo do tubo, descarte a água suja na água corrente, coloque água destilada no tubo e suspenda novamente o sedimento do fundo do tubo (pode usar a pipeta pasteur para facilitar) e repita o procedimento de centrifugação, descarte a água suja na água corrente e dessa vez, em vez de água, adiciona-se Sulfato de Zinco ( na aula foi utilizado a 33,3% Solução Aquosa), use a pipeta pasteur novamente para pôr no resíduo do tubo (sempre evitando contaminação) e suspenda o sedimento outra vez e repita o procedimento da centrifuga. Dessa vez com a amostra em mãos nota-se um alo na superfície da amostra e é dali que se coleta uma gota com a pipeta pasteur ou a alça bacteriológica (preferencialmente) e pôr sobre a lâmina de microscopia com uma gota de Lugol, misture usando a lamínula (cuidado para não formar bolhas) para a análise Microscópica.
Método de Baermann-Moraes ou método de Rugai, Mattos e Brizola
Os dois métodos se fundamentam no termo hidrotropismo positivo de larvas de nematoides, como as larvas de S. stercoralis e de ancilostomídeos. A temperatura da água deve estar entre 40 e 45°C (Termotropismo). Essa pesquisa pode ser realizada tanto em material fecal quanto em amostra de terra.
Materiais utilizados: Gaze, Amostra de Terra, Amostra fecal, Cálice Cônico, Bastão de vidro, Becker de vidro, água aquecida (45°C), Pipeta Pasteur, Lâmina de Microscopia, Lugol e Lamínula.
Procedimento: Pega-se uma gaze intercale cruzando com outra gaze para que o material não caia com o intuito de formar uma “trouxinha” para facilitar o processo. Usando uma amostra de Terra, ponha a amostra sobre a gaze cruzada e feche formando a trouxinha prenda com uma fita branca e junte com a base superior do Cálice Cônico. Foi feito o mesmo com a amostra fecal utilizando o bastão de vidro posicionando a amostra para analise, sempre observando a Macroscopia. Pegue o Becker com água aquecida (45°C), preencher o Cálice até a água encostar na amostra. É esperado que se houver larvas nas amostras, elas vão sedimentar a partir do Termotropismo, esperar entorno de 1 a 2h para fazer a leitura. Após passado esse tempo, coletar uma gota do sedimento no fundo do Cálice utilizando a pipeta pasteur, pingue na lâmina de microscopia com uma gota de lugol, misture usando uma lamínula e monte a lâmina com cuidado sem formar bolhas para a análise Microscópica.
Método de Meyer, pesquisa do sangue oculto.
O método de Meyer se fundamenta na detecção de sangue oculto nas fezes, por meio da atividade pseudoperoxidase da hemoglobina que ao reagir com um composto incolor converte-o para uma cor avermelhada formando um halo na superfície do tubo de amostra. Para esse procedimento seria importante que o paciente fizesse uma dieta restritiva de 3 dias evitando alimentos de cor vermelha incluindo carne, corantes da mesma cor e medicações a base de ferro, para evitar traços de hemoglobina no intestino ou corante, e posteriormente realizar a coleta.
Materiais utilizados; H²O², Cálice cônico, Água destilada, lâmina de microscopia, Lamínula, Lugol, Tubo 10 ml, Pipeta Pasteur 10ml,Reativo de Mayer, Gaze e Bastão de vidro.
Procedimento: Assim como na técnica de Hoffman, Pegue a amostra fecal, certifique-se que esteja corretamente identificada e fechada, liquefaça a amostra utilizando água destilada com o uso do bastão de vidro no próprio pote, caso não haja a necessidade de fracionar a amostra. Filtre a amostra dissolvida em Gaze sobre o Cálice Cônico, termine a filtragem e descarte o residual na Gaze no lixo hospitalar. Pegue um Tubo 10 ml, e com a Pipeta Pasteur 10ml pegue 5ml da amostra filtrada. Esse procedimento foi realizado com 3 amostras de diferentes pacientes. Foi colocado reativo de Meyer de 0,5 a 1ml com a pipeta pasteur em cada amostra. A reação ocorre após colocar 4 gotas de Peróxido de Hidrogênio (H²O²) (água oxigenada) em cada amostra. O reagente reagira com o reativo, revelando a presença ou não, de sangue oculto na amostra. Aguardou-se por volta de 3 minutos para realizar a visualização.
Foi observado que:
A primeira amostra não formou o halo, indicando negativo a presença de sangue.
A segunda amostra formou-se um halo róseo, concentração mediana, indicando positivo a presença de sangue na amostra.
A terceira amostra formou-se um halo vívido avermelhado, até a amostra mudou para avermelhado, indicando positivo em grande concentração de sangue oculto na amostra.
Conclusão
Com tudo isso, se mostra a importância do Exame Parasitológico de Fezes (EPF) e a correta realização de métodos para que não ocorram possíveis erros no diagnóstico, a vídeo aula foi bem interessante e satisfatória em relação ao aprendizado dos métodos apresentados, que foram: Método de Hoffman, Pons e Janer ou de Lutz, por sedimentação espontânea; Método de Faust e cols, centrífugo-flutuação; Método de Baermann-Moraes ou método de Rugai, Mattos e Brizola, hidrotropismo e Termotropismo; E terminando com o Método de Meyer, pesquisa do sangue oculto.
Referências:
NEVES, D. P.; MELO, A. L.; LINARDI, P. M. Parasitologia humana. 12. 
ed. Rio de Janeiro: Atheneu, 20 11.
BIOMEDICINA PADRÃO. Principais metodologias utilizadas no exame parasitológico de fezes. Disponível em: https://www.biomedicinapadrao.com.br/2015/02/principais-metodologias-utilizadas-no.html. Acesso em: 30 jun. 2021.